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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè),總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè),總=sectionpages11頁(yè)2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷997考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題,共14分)1、腐乳是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品;具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。某科研機(jī)構(gòu)研究了腐乳生產(chǎn)過(guò)程中不同濃度的食鹽對(duì)腐乳中氨基酸含量的影響。下列敘述正確的是()
A.生產(chǎn)腐乳發(fā)揮主要作用的微生物是酵母菌B.影響腐乳中氨基酸含量的最重要因素是時(shí)間C.氦基酸含量上升是由于蛋白質(zhì)在酶催化下分解D.高濃度食鹽能抑制微生物生長(zhǎng),對(duì)制作腐乳更加有利2、研究發(fā)現(xiàn);因餐廚垃圾水分和有機(jī)物含量豐富;極易腐敗、發(fā)臭,包括大腸桿菌在內(nèi)的細(xì)菌會(huì)大量繁殖,嚴(yán)重影響城市環(huán)境及資源利用。研究人員研究了不同保存方式對(duì)抑菌效果的影響,測(cè)定了各組大腸桿菌數(shù)量隨保存時(shí)間的變化,具體結(jié)果如圖所示(CFU/ml是每毫升檢樣所生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)菌菌落總數(shù))。下列說(shuō)法正確的是()
A.大腸桿菌屬于化能自養(yǎng)型生物,具有核糖體和細(xì)胞壁B.據(jù)圖分析,直接厭氧保存組的保存方式抑菌效果最好C.乳酸菌的代謝產(chǎn)物可對(duì)大腸桿菌起到一定的抑制作用D.餐廚垃圾中大腸桿菌的數(shù)量是通過(guò)平板劃線法測(cè)得的3、下列有關(guān)“分解纖維素的微生物的分離”實(shí)驗(yàn)的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.植物的枝干、葉片能在土壤中完全腐爛,一定有分解纖維素的微生物起作用B.纖維素分解菌往往無(wú)法分解人工合成的化學(xué)纖維C.配置培養(yǎng)基分離土壤中分解纖維素的微生物時(shí),只能以纖維素作為唯一碳源D.纖維素被微生物最終分解成葡萄糖后加以利用4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物克隆的基礎(chǔ),如下圖所示,a、b、c表示現(xiàn)代生物工程技術(shù),①、②、③分別表示其結(jié)果,請(qǐng)據(jù)圖回答,下列說(shuō)法正確的是()
A.a如果是核移植技術(shù),則①體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性B.b如果是體外受精技術(shù),②的產(chǎn)生屬于有性生殖,該技術(shù)為良種家畜快速大量繁殖提供了可能C.c如果是胚胎分割技術(shù),③中個(gè)體的基因型和表型一定相同D.①②③中的受體(代孕母體)均需經(jīng)過(guò)一定的激素處理,以達(dá)到超數(shù)排卵和同期發(fā)情的目的5、將土壤稀釋液涂布于選擇培養(yǎng)基上,若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用,還需要設(shè)置的對(duì)照是()A.未接種的選擇培養(yǎng)基B.未接種的牛肉膏蛋白脈培養(yǎng)基C.相同條件下接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D.相同條件下接種了的選擇培養(yǎng)基6、將正常的干細(xì)胞移植到病人體內(nèi),恢復(fù)病人的造血和免疫功能,已成為治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病的一種重要手段。下列關(guān)于干細(xì)胞的敘述,正確的是()A.成體干細(xì)胞具有組織特異性,能發(fā)育成完整個(gè)體B.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞是病人體內(nèi)自然產(chǎn)生的一類治療性干細(xì)胞C.胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中,只能在體內(nèi)分化成心肌細(xì)胞D.白血病的治療主要利用造血干細(xì)胞,其主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中7、下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn),說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.PCR利用了DNA的熱變性原理,通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制B.PCR的產(chǎn)物一般要通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定C.凝膠中DNA分子的遷移速率只與DNA分子的大小有關(guān)D.為避免外源DNA等因素的污染,PCR實(shí)驗(yàn)中使用的工具也需要滅菌處理評(píng)卷人得分二、多選題(共9題,共18分)8、下列有關(guān)生物技術(shù)安全性和倫理問(wèn)題的做法中,錯(cuò)誤的是()A.對(duì)轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品進(jìn)行標(biāo)注,供消費(fèi)者自主選擇B.為挽救患病的孩子取用嬰兒的造血干細(xì)胞或器官C.在動(dòng)物克隆技術(shù)發(fā)展初期進(jìn)行生殖性克隆人的研究D.全面禁止轉(zhuǎn)基因微生物研究以免用于制造生物武器9、嵌合體是指由兩個(gè)或兩個(gè)以上具有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞系形成的聚合胚胎發(fā)育而成的個(gè)體嵌合體的制備是研究干細(xì)胞體內(nèi)分化能力的有效方法之一,有望在未來(lái)為解決器官移植供體短缺等醫(yī)學(xué)難題開(kāi)辟新的方向。研究人員將小鼠誘導(dǎo)性胚胎干細(xì)胞(ES)注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體。下列相關(guān)敘述正確的是()A.培育嵌合體與克隆動(dòng)物的生物學(xué)原理不相同,前者運(yùn)用的是細(xì)胞的增殖與分化后者是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性B.胚胎干細(xì)胞具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞的潛能C.將胚胎干細(xì)胞注入豬囊胚的滋養(yǎng)層處才能獲得豬—鼠嵌合體D.若培育出“人—獸嵌合體”將會(huì)面臨與克隆人一樣的倫理問(wèn)題10、重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過(guò)寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋;互為模板;經(jīng)過(guò)多次PCR擴(kuò)增。從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴(kuò)增較長(zhǎng)片段的DNA、不同來(lái)源的DNA片段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方而具有廣泛的應(yīng)用前景,下圖表示利用重疊延伸PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過(guò)程。下列敘述正確的是()
A.引物中G+C的含量越高,引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高B.在第一階段由于引物2和引物3發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì),因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中C.引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制,共產(chǎn)生4種雙鏈DNA分子D.在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中,經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA,至少要經(jīng)過(guò)3次復(fù)制11、將單克隆抗體與前體藥物的專一性活化酶藕聯(lián)(簡(jiǎn)稱抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián))是特異性治療腫瘤并減少對(duì)正常細(xì)胞傷害的最新研究方向。堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶,醫(yī)學(xué)研究中利用抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)機(jī)理將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”,通過(guò)活化多柔比星使其對(duì)DNA造成損傷,進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動(dòng),達(dá)到治療腫瘤的目的。下列說(shuō)法正確的是()A.為獲得單克隆抗體應(yīng)首先給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原,得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B.制備單克隆抗體的過(guò)程中至少要經(jīng)過(guò)兩次原理和目的均不同的篩選過(guò)程C.生物導(dǎo)彈綜合利用了堿性磷酸酶的定向制導(dǎo)作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的細(xì)胞12、理垃圾的有效方法之一是用微生物對(duì)其進(jìn)行降解,下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是()
A.圖中培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉為唯一碳源,將菌液接種到培養(yǎng)基應(yīng)使用平板劃線法B.菌落①與②周圍透明圈的大小不同原因可能是兩個(gè)菌群對(duì)碘液分解能力不同C.若菌落①與②分屬細(xì)菌和真菌,則二者結(jié)構(gòu)上最主要區(qū)別是有無(wú)核膜包被的細(xì)胞核D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,為防止造成環(huán)境污染,使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌處理后再倒掉13、在新冠病毒的核酸檢測(cè)過(guò)程中采用的逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT—PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的廣泛應(yīng)用。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增,進(jìn)而獲得檢測(cè)的目的基因S。下列關(guān)于RT-PCR的敘述錯(cuò)誤的是()A.RT-PCR所用的酶包括逆轉(zhuǎn)錄酶和熱穩(wěn)定RNA聚合酶B.RT-PCR所用的兩引物序列不同,兩者間可進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)C.RT-PCR過(guò)程中需添加ATP,反應(yīng)過(guò)程中會(huì)有磷酸鍵斷裂D.至少經(jīng)過(guò)2次循環(huán),方可獲取與目的基因等長(zhǎng)的DNA單鏈14、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán);并以此環(huán)為模板,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列,以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說(shuō)法正確的是()
A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過(guò)與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì),可確定T-DNA的插入位置15、2020年5月22日,在世界權(quán)威醫(yī)學(xué)期刊《柳葉刀》雜志在線刊登了中國(guó)陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的重組腺病毒疫苗I期人體(108位志愿者)試驗(yàn)臨床數(shù)據(jù)結(jié)果:安全、能誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。重組腺病毒疫苗是一種重組的基因工程產(chǎn)品,用不會(huì)使人體致病的腺病毒作為載體,把克隆出來(lái)的編碼新冠病毒S蛋白(介導(dǎo)新冠病毒感染細(xì)胞的成分)基因裝入載體腺病毒,注入人體,進(jìn)入人體細(xì)胞,表達(dá)出S蛋白,刺激人體產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒的免疫應(yīng)答。相關(guān)敘述正確的是()A.重組腺病毒疫苗包括S蛋白基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等B.重組腺病毒疫苗只能使人體產(chǎn)生體液免疫C.重組腺病毒疫苗引發(fā)的體液免疫中有吞噬細(xì)胞、T細(xì)胞的參與D.重組腺病毒疫苗引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多,細(xì)胞周期將變長(zhǎng)16、下列關(guān)于試管嬰兒和克隆猴的敘述,錯(cuò)誤的是()A.受精過(guò)程中,透明帶和卵細(xì)胞膜的反應(yīng)保證了受精卵染色體數(shù)目的正常B.克隆猴的性狀表現(xiàn)與細(xì)胞核供體的一模一樣,體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性C.試管嬰兒的生殖方式屬于無(wú)性生殖,克隆猴的生殖方式屬于有性生殖D.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”在操作上唯一的區(qū)別是前者需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷評(píng)卷人得分三、填空題(共7題,共14分)17、一般包括______、______等技術(shù)18、載體具備的條件:①_____。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。③______。19、重組DNA或重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選______的依據(jù)是______。20、轉(zhuǎn)化的概念:是______進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持______的過(guò)程。21、植物繁殖的新途徑。
微型繁殖:可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。
作物脫毒:采用______組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒(因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______)
人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn):完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,______;方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。
人工種子的結(jié)構(gòu)包括:______、_____和______。22、在我國(guó)市場(chǎng)上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢?一位同學(xué)帶著這樣的問(wèn)題,進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?
對(duì)該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果,有人表示認(rèn)同,有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為:目前我國(guó)市場(chǎng)上根本沒(méi)有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點(diǎn)是什么_____?23、研究表明,轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的大面積種植有效遏制了棉鈴蟲(chóng)害,也顯著地降低了化學(xué)農(nóng)藥的使用量?但是,科研人員也發(fā)現(xiàn),棉田中一種體型很小的盲蝽蟓卻容易爆發(fā)成災(zāi)?有人認(rèn)為這與大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉有關(guān)?我們應(yīng)如何看待這種觀點(diǎn)_____?如果回答問(wèn)題有困難,可以請(qǐng)教老師或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)尋找答案。評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題,共32分)24、轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡(______)A.正確B.錯(cuò)誤25、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力,必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤26、基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動(dòng)植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。(選擇性必修3P87)()A.正確B.錯(cuò)誤27、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。(選擇性必修3P111)()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共32分)28、如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要操作示意圖;請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題:
(1)正確的操作順序是_______________________(用字母和箭頭表示)。
(2)圖中C、E步驟都加入了蒸餾水,但其目的不同,分別是_______________________和_______________________。
(3)為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA,可將其溶解后,滴加________________試劑后沸水浴加熱,如果出現(xiàn)___________________;則證明該絲狀物的主要成分為DNA。
(4)圖中A步驟的目的是_________________________________________。29、某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X;Y和Z);每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。
若要制備雜交瘤細(xì)胞;需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。
回答下列問(wèn)題:
(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠,理由是______________。
(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外,可能還有________,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________________。
(3)雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是_________條。
(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_____________________。30、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病。科研人員對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。
(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變,轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子,最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________;與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性,積累過(guò)多的黏多糖無(wú)法及時(shí)清除,造成人體多系統(tǒng)功能障礙。
(2)抑制性tRNA(sup-tRNA)與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同,但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過(guò)程中,加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________;從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。
(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸;為比較它們的通讀效果,科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。
注:“-”代表未加入。
據(jù)圖分析,實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞,并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析,攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。
(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療,檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量,與不治療的小鼠相比較,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____________,表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。31、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與現(xiàn)代發(fā)酵工程;回答下列問(wèn)題:
(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精(不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響),寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論______。
(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般以天然存在的______發(fā)酵,品質(zhì)不一,現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵,品質(zhì)較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品,在實(shí)際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過(guò)______裝瓶等過(guò)程才能獲得成品酒。
(3)若要測(cè)定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度,取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍,利用25×16的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,觀察并統(tǒng)計(jì)到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個(gè),則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個(gè)。
(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時(shí),操作上的最主要的區(qū)別是______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題,共6分)32、報(bào)告基因是指一類易于檢測(cè)且實(shí)驗(yàn)材料本身不具備的基因。阿爾茨海默?。ˋD)是由淀粉樣前體蛋白(APP)過(guò)量表達(dá)導(dǎo)致的神經(jīng)系統(tǒng)退變性疾?。挥迷鰪?qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)基因作為報(bào)告基因,將ECGFP基因與AIPP基因融合,可方便;經(jīng)濟(jì)、快速地篩選出促進(jìn)人APPmRNA降解的藥物。研究表明,EGFP與APP基因融合后,雖能全部轉(zhuǎn)錄但僅有EGFP蛋白得到表達(dá)。ECFP基因與AP基因融合過(guò)程如圖所示。
(1)APP751;EGFP基因的cDNA是以其mRNA為模板經(jīng)______________過(guò)程形成的;將其儲(chǔ)存于細(xì)菌質(zhì)粒中,屬于構(gòu)建______________。
(2)據(jù)圖分析,Klenow酶的作用是______________。切割pcDNA3.1質(zhì)粒獲得APP751基因時(shí),研究人員沒(méi)有選擇直接用HindⅢ、XbaⅠ同時(shí)切割;而是歷經(jīng)①→②→③的復(fù)雜過(guò)程,原因是_______________。
(3)COS-7是來(lái)源于非洲綠猴生成纖維細(xì)胞,培養(yǎng)這類細(xì)胞時(shí),為保證細(xì)胞生長(zhǎng)和避免污染,應(yīng)分別在合成培養(yǎng)基中添加____________,傳代培養(yǎng)不宜超過(guò)10代,原因是______________。33、世界衛(wèi)生組織定義克隆為“遺傳同一機(jī)體或細(xì)胞系(株)的無(wú)性繁殖”。相對(duì)于植物克?。粍?dòng)物尤其是高等動(dòng)物的克隆比較困難,下圖表示哺乳動(dòng)物克隆的幾種方法的主要步驟,據(jù)圖回答下列問(wèn)題。
(1)方法2獲得的小牛的遺傳物質(zhì)來(lái)源于____________,方法3中得到的胚①、②發(fā)育成的小牛的遺傳物質(zhì)是否完全相同?__________________________。
(2)細(xì)胞B取自囊胚的____________細(xì)胞,具有全能性;細(xì)胞C應(yīng)取自供體3的______細(xì)胞。
(3)細(xì)胞A、B、C在進(jìn)行D過(guò)程之前需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)需要滿足_____。34、人胰島素基因表達(dá)的最初產(chǎn)物是一條肽鏈構(gòu)成的前胰島素原;經(jīng)加工后形成兩條肽鏈(A鏈和B鏈)的有生物活性的胰島素。此后科學(xué)家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的兩種方法:“AB”法是根據(jù)胰島素A;B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段,利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素;“BCA”法是利用人體某細(xì)胞中的mRNA得到胰島素基因,表達(dá)出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段。這兩種方法使用同一種質(zhì)粒作為載體。請(qǐng)據(jù)下圖分析并回答下列問(wèn)題:
(1)由于_________,“AB”法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列?!癇CA”法是利用人體________細(xì)胞中的mRNA,再由mRNA經(jīng)_________得到的胰島素基因,_________(填“AB”;“BCA”或“AB和BCA”)法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動(dòng)子。
(2)如圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過(guò)程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)。為使目的基因與載體正確連接,在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)可添加限制酶_________的識(shí)別序列,PCR引物應(yīng)該添加在識(shí)別序列的_________(填“3’或5’)端。通過(guò)上述方法獲得人的胰島素基因后,需要通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,若計(jì)劃用1個(gè)胰島素基因?yàn)槟0瀚@得m(m大于2)個(gè)胰島素基因,則消耗的引物總量是_________個(gè)。引物序列中的的GC含量越高,對(duì)PCR過(guò)程中的_________步驟〔寫出具體過(guò)程)影響最大,越_________(填“有利于”或“不利于”)目標(biāo)DNA的擴(kuò)增。
(3)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物一般通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定,下列敘述中正確的有____。A.PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶,該酶主要在退火過(guò)程起作用B.待測(cè)樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會(huì)影響DNA在電泳中的遷移速率C.進(jìn)行電泳時(shí),帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)D.瓊脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外燈下被檢測(cè)(4)β-半乳糖苷酶可以分解無(wú)色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落為白色。經(jīng)_________(處理方法)大腸桿菌后,與重組質(zhì)粒混合培養(yǎng)一段時(shí)間,將大腸桿茵接種到添加了_________和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出_________色的菌落即為工程菌種。
(5)科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù),研制出了易吸收、起效快的賴脯胰島素,獲得賴脯胰島素基因的途徑是:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_________→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。參考答案一、選擇題(共7題,共14分)1、C【分析】【分析】
腐乳制作中有多種微生物參與;如青霉;酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。腐乳制作的過(guò)程:1、讓豆腐長(zhǎng)出毛霉;2、加鹽腌制;3、加鹵湯裝瓶;4、密封腌制。操作中要注意控制好食鹽的用量。食鹽用量過(guò)低不足以抑制微生物的生長(zhǎng),可能會(huì)導(dǎo)致豆腐腐乳變質(zhì);食鹽濃度過(guò)高,會(huì)影響腐乳的口味。鹵湯中酒的含量要控制在12%左右。酒精含量過(guò)高,腐乳成熟時(shí)間會(huì)延長(zhǎng);酒精含量過(guò)低,不足以抑制微生物的生長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致腐乳腐敗變質(zhì)。
【詳解】
A;腐乳制作中有多種微生物參與;如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中其主要作用的是毛霉,A錯(cuò)誤;
B;分析圖中曲線圖;可知本題研究探討了腐乳制作過(guò)程中食鹽濃度對(duì)氨基酸含量的影響,在45d左右時(shí),食鹽濃度為5%時(shí)氨基酸的含量最高。影響腐乳中氨基酸含量的最重要因素是食鹽濃度,B錯(cuò)誤;
C;腐乳制作過(guò)程中毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸。氦基酸含量上升是由于蛋白質(zhì)在酶催化下分解;C正確;
D;食鹽濃度不是越高越好;如果濃度過(guò)高會(huì)影響腐乳的風(fēng)味,D錯(cuò)誤。
故選C。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合曲線圖考查腐乳的制作。重點(diǎn)知識(shí)是制作過(guò)程中影響腐乳風(fēng)味和制作效果的因素,比如食鹽用量、酒精用量、腌制時(shí)間等。2、C【分析】【分析】
由圖可知:滅菌+乳酸菌厭氧保存組大腸桿菌數(shù)為0;加入乳酸菌后厭氧保存對(duì)大腸桿菌起到一定的抑制作用;但不如直接厭氧保存組顯著;與自然保存相比,直接厭氧保存可以有效抑制大腸桿菌的生長(zhǎng)增殖。
【詳解】
A;大腸桿菌屬于原核生物;細(xì)胞結(jié)構(gòu)中具有核糖體和細(xì)胞壁,由題干“因餐廚垃圾水分和有機(jī)物含量豐富、極易腐敗、發(fā)臭,包括大腸桿菌在內(nèi)的細(xì)菌會(huì)大量繁殖”,說(shuō)明大腸桿菌的營(yíng)養(yǎng)類型屬于化能異養(yǎng)型生物,A錯(cuò)誤;
B;據(jù)圖分析;與滅菌+乳酸菌厭氧保存組大腸桿菌數(shù)為0效果最好的應(yīng)為滅菌+乳酸菌,即厭氧保存組,B錯(cuò)誤;
C;與自然保存相比;加入乳酸菌后厭氧保存對(duì)大腸桿菌起到一定的抑制作用,大腸桿菌數(shù)量減少,C正確;
D;平板劃線法不能統(tǒng)計(jì)大腸桿菌數(shù)量;D錯(cuò)誤。
故選C。3、C【分析】【分析】
纖維素分解菌的篩選實(shí)驗(yàn)流程為:土壤取樣;選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上、挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。
【詳解】
A;植物的枝干、葉片能在土壤中完全腐爛是能夠分解纖維素的微生物的作用的結(jié)果;A正確;
B;人工合成的化學(xué)纖維的本質(zhì)不是纖維素;故纖維素分解菌往往無(wú)法分解人工合成的化學(xué)纖維,B正確;
C;分離能分解纖維素的細(xì)菌;要以纖維素或植物秸稈為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基,觀察是否有透明圈產(chǎn)生,C錯(cuò)誤;
D;纖維素屬于多糖;在培養(yǎng)基中需要被纖維素分解菌分解為成葡萄糖后加以利用,D正確。
故選C。4、B【分析】【分析】
動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)表面動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性;體外受精包括精子的采集和獲能;卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精;該技術(shù)產(chǎn)生的動(dòng)物稱為試管動(dòng)物;胚胎分割的特點(diǎn):來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì),胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。
【詳解】
A;a如果是核移植技術(shù);則①體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性,A錯(cuò)誤;
B、b如果是體外受精技術(shù);②的產(chǎn)生屬于有性生殖,該過(guò)程可獲得大量的胚胎,因而可為良種家畜快速大量繁殖提供了可能,B正確;
C;胚胎分割技術(shù)所得個(gè)體的基因型完全相同;但表現(xiàn)型不一定完全相同,因?yàn)楸憩F(xiàn)型還受環(huán)境的影響,即c如果是胚胎分割技術(shù),③中個(gè)體的基因型相同,但表型不一定相同,C錯(cuò)誤;
D;①②③過(guò)程中均需要胚胎移植技術(shù);其中的受體均需注射性激素,以達(dá)到同期發(fā)情的目的,為移入的胚胎提供幾乎相同的環(huán)境,D錯(cuò)誤。
故選B。5、C【分析】【分析】
對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除所控因素外其他條件對(duì)與被對(duì)照組實(shí)驗(yàn)完全對(duì)等的實(shí)驗(yàn);判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用,則接種了的選擇培養(yǎng)基為實(shí)驗(yàn)組,而接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基為對(duì)照組。
【詳解】
對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除所控因素外其他條件對(duì)與被對(duì)照組實(shí)驗(yàn)完全對(duì)等的實(shí)驗(yàn);判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用,則接種了的選擇培養(yǎng)基為實(shí)驗(yàn)組,而接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基為對(duì)照組,將菌液稀釋相同的倍數(shù),在相同培養(yǎng)條件下,在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目。因此,應(yīng)設(shè)置相同條件下接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照,C正確;
故選C。6、D【分析】【分析】
一般認(rèn)為;成體干細(xì)胞具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不能發(fā)育成完整個(gè)體。
【詳解】
A;成體干細(xì)胞具有組織特異性;只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不能發(fā)育成完整個(gè)體,A錯(cuò)誤;
B;誘導(dǎo)多能干細(xì)胞由病人自身的體細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)獲得;B錯(cuò)誤;
C;胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中;可以在體外分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元和造血干細(xì)胞等,C錯(cuò)誤;
D;將正常的造血干細(xì)胞移植到病人體內(nèi);恢復(fù)病人的造血和免疫功能,已經(jīng)稱為治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病的一種重要手段,造血干細(xì)胞主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中,D正確。
故選D。7、C【分析】【分析】
DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液;但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對(duì)酶;高溫和洗滌劑的耐受性。
【詳解】
A;PCR技術(shù)利用了DNA的熱變性原理;通過(guò)調(diào)節(jié)該變性-復(fù)性-延伸步驟中不同溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合,A正確;
B;對(duì)PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物;一般需要通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定,凝膠中的DNA分子需要染色,以便使電泳結(jié)果更直觀,B正確;
C;在凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度有關(guān);C錯(cuò)誤;
D;為避免外源DNA等因素的污染;PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進(jìn)行高壓滅菌處理,D正確。
故選C。二、多選題(共9題,共18分)8、B:C:D【分析】【分析】
1;轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題:食物安全(滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害;不能因噎廢食。
2;對(duì)生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題的爭(zhēng)論;中國(guó)政府的態(tài)度:禁止生殖性克隆人,堅(jiān)持四不原則(不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)),不反對(duì)治療性克隆人。
【詳解】
A;2002年;我國(guó)農(nóng)業(yè)部頒布了《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識(shí)管理辦法》,要求對(duì)轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品及其加工品加貼標(biāo)注,供消費(fèi)者自主選擇,A正確;
B;不能用嬰兒的造血干細(xì)胞或器官來(lái)挽救患病的孩子;B錯(cuò)誤;
C;我國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人的研究;C錯(cuò)誤;
D;對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害;不能因噎廢食,D錯(cuò)誤。
故選BCD。9、A:B:D【分析】【分析】
1;胚胎移植的基本程序主要包括:①對(duì)供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體;有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體,供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理,用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)(也叫沖卵)。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。
2;胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ):①動(dòng)物發(fā)情排卵后;同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但供體胚胎的遺傳特性在孕育過(guò)程中不受影響。
【詳解】
A;培育嵌合體的生物學(xué)原理是細(xì)胞的增殖和分化;克隆動(dòng)物的生物學(xué)原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性,兩者的原理不相同,操作方法有差別,A正確;
B;由題干信息“將小鼠誘導(dǎo)性胚胎干細(xì)胞(ES)注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體”可知;胚胎干細(xì)胞分化程度低,具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞的潛能,B正確;
C;滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜、胎盤;內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育為胚胎的各種組織、器官,故應(yīng)將胚胎干細(xì)胞注入豬囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)處才能獲得豬—鼠嵌合體,C錯(cuò)誤;
D;若培育出“人—獸嵌合體”將會(huì)面臨與克隆人一樣的倫理問(wèn)題;是不道德的,D正確。
故選ABD。
【點(diǎn)睛】10、A:B【分析】【分析】
PCR擴(kuò)增運(yùn)用DNA分子復(fù)制的原理;經(jīng)過(guò)變性;復(fù)性、延伸,最終獲得大量DNA的過(guò)程。
【詳解】
A;引物中G+C的含量越高;C和G之間是三個(gè)氫鍵連接,因此引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高,A正確;
B;圖中可知;引物2和引物3分別作用同一段DNA的兩條鏈,會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì),因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中,B正確;
C;引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制;共產(chǎn)生2種雙鏈DNA分子,C錯(cuò)誤;
D;在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中;經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA,至少要經(jīng)過(guò)2次復(fù)制,D錯(cuò)誤。
故選AB。11、A:B【分析】【分析】
單克隆抗體的制備。
(1)制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原;然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。
(2)獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合。②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
(3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。
(4)將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。
(5)提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。
【詳解】
A;單克隆抗體制備過(guò)程中;需要給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原,刺激小鼠產(chǎn)生體液免疫,才能得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,A正確;
B;制備單克隆抗體的過(guò)程中至少要經(jīng)過(guò)兩次原理和目的均不同的篩選過(guò)程;第一次篩選雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,B正確;
C;生物導(dǎo)彈綜合利用了單克隆抗體的定向制導(dǎo)作用和堿性磷酸酶的特異性殺傷能力;C錯(cuò)誤;
D;根據(jù)題干信息“通過(guò)活化多柔比星使其對(duì)DNA造成損傷;進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動(dòng)”,說(shuō)明多柔比星還可以抑制細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過(guò)程,而不增殖的細(xì)胞也具有轉(zhuǎn)錄過(guò)程,D錯(cuò)誤。
故選AB。12、A:B【分析】【分析】
1.微生物接種常用的兩種方法:
①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板;接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)足夠稀釋后;均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后,可形成單菌落。
2.選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分;根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué);物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌,從而提高該菌的篩選率。
【詳解】
A;篩選高效降解淀粉的菌種;則選擇培養(yǎng)基中的碳源應(yīng)為淀粉,根據(jù)圖示可知,圖中菌株采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,目的是使菌落分布較均勻,然后放在相同且適宜條件下培養(yǎng),A錯(cuò)誤;
B;高效降解淀粉的菌種可以產(chǎn)生淀粉酶將培養(yǎng)基中的淀粉水解;因此可以用碘液鑒定培養(yǎng)基中淀粉的分解情況,菌落形成后加入碘液染色,比較菌株菌落周圍透明圈的大小。產(chǎn)生的淀粉酶活性越高,淀粉分解量越多,培養(yǎng)基中篩選菌落周圍透明圈越大,因此圖中菌落①與菌落②周圍透明圈的大小不同,說(shuō)明分泌的淀粉酶活性不同,B錯(cuò)誤;
C;①②分別屬于真菌和細(xì)菌;真菌屬于真核生物,有以核膜為界限的細(xì)胞核,細(xì)菌屬于原核生物,沒(méi)有以核膜為界限的細(xì)胞核,只有擬核,C正確;
D;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后;對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基要滅菌處理后再倒掉,以防止雜菌污染環(huán)境,D正確。
故選AB。13、A:B:C【分析】【分析】
分析題干信息;在RT—PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增,由此可知該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶的催化。DNA解旋過(guò)程不需要解旋酶參與,反應(yīng)過(guò)程中高溫即可解旋。
【詳解】
A;RT-PCR過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶;A錯(cuò)誤;
B;引物之間不能相互配對(duì);否則不能正常發(fā)揮作用,B錯(cuò)誤;
C;RT-PCR過(guò)程中需添加的原料是dNTP;不需添加ATP,反應(yīng)過(guò)程中會(huì)有特殊化學(xué)鍵斷裂,C錯(cuò)誤;
D;至少經(jīng)過(guò)2次循環(huán);方可獲取與目的基因等長(zhǎng)的DNA單鏈,D正確。
故選ABC。14、A:D【分析】【分析】
PCR技術(shù):
1;概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。
2;原理:DNA復(fù)制。
3;前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。
4;條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。
5;過(guò)程:①高溫變性:DNA解旋過(guò)程(PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶;高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi));低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。
【詳解】
A;PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理;A正確;
B;進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶);但不需要解旋酶,B錯(cuò)誤;
C;DNA的兩條鏈反向平行;子鏈從引物的3′端開(kāi)始延伸,則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列,C錯(cuò)誤;
D;通過(guò)與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì);即可確定T-DNA的插入位置,D正確。
故選AD。
【點(diǎn)睛】15、A:C【分析】【分析】
編碼新冠病毒的S蛋白不具有感染性;但可以引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫,腺病毒不會(huì)使人致病,可將克隆出來(lái)的編碼新冠病毒S蛋白(介導(dǎo)新冠病毒感染細(xì)胞的成分)基因裝入載體腺病毒,注入人體,進(jìn)入人體細(xì)胞,表達(dá)出S蛋白,刺激人體產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒的免疫應(yīng)答。
【詳解】
A;基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心;一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因(S蛋白基因)、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等,A正確;
B;由于病毒需要寄生在細(xì)胞內(nèi);且S蛋白是在細(xì)胞內(nèi)合成的,所以重組腺病毒疫苗能使人體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫,B錯(cuò)誤;
C;重組腺病毒疫苗引發(fā)的體液免疫中有吞噬細(xì)胞(處理抗原)、T細(xì)胞(釋放淋巴因子)的參與;C正確;
D;重組腺病毒疫苗引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多;細(xì)胞周期將變短,D錯(cuò)誤。
故選AC。
【點(diǎn)睛】16、B:C:D【分析】【分析】
1;“試管嬰兒”是利用體外授精和胚胎移植的方法;解決不孕夫婦的生育問(wèn)題。
2;設(shè)計(jì)試管嬰兒概念:是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前;根據(jù)人們的需要,將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出,進(jìn)行某些設(shè)計(jì),當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要時(shí),再把胚胎植入母體孕育。
【詳解】
A;透明帶和卵細(xì)胞膜的反應(yīng)可以防止多精入卵;從而保證受精卵染色體數(shù)目的正常,A正確;
B;由于細(xì)胞質(zhì)中也存在基因控制生物性狀;所以克隆猴的性狀不完全與細(xì)胞核供體的相同,B錯(cuò)誤;
C;試管嬰兒技術(shù)與正常的生殖過(guò)程相比僅僅是受精和早期胚胎發(fā)育的場(chǎng)所不同;實(shí)質(zhì)沒(méi)有變化,屬于有性生殖;而克隆猴是將動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞后發(fā)育成的新個(gè)體,屬于無(wú)性生殖的范疇,C錯(cuò)誤;
D;設(shè)計(jì)試管嬰兒與試管嬰兒的主要區(qū)別是前者在胚胎植入前需進(jìn)行遺傳學(xué)診斷;設(shè)計(jì)試管嬰兒有時(shí)除體外受精、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植外還需要借助其它技術(shù),D錯(cuò)誤。
故選BCD。三、填空題(共7題,共14分)17、略
【解析】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體18、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇19、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞標(biāo)記基因是否表達(dá)。20、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】目的基因穩(wěn)定和表達(dá)21、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】莖尖極少或沒(méi)有)胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮;胚狀體和人工胚乳。
(2)22、略
【分析】【詳解】
目前我國(guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品,從原料來(lái)源看,進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品,國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜,故我國(guó)市場(chǎng)上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?!窘馕觥磕壳拔覈?guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品,從原料來(lái)源看,進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品,國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。23、略
【分析】【詳解】
生物之間存在(種間)競(jìng)爭(zhēng)多關(guān)系,該區(qū)域的棉鈴蟲(chóng)與盲蝽蟓之間共同以棉花為食,種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉后,棉鈴蟲(chóng)不能存活,盲蝽蟓的食物等資源充足,故大量繁殖,爆發(fā)成災(zāi)?!窘馕觥吭搮^(qū)域的棉鈴蟲(chóng)與盲蝽蟓之間存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉后,棉鈴蟲(chóng)不能存活,盲蝽蟓大量繁殖四、判斷題(共4題,共32分)24、A【分析】【詳解】
轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡,特別是對(duì)生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過(guò)億萬(wàn)年的演化,各種生物相對(duì)處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是,如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強(qiáng)悍”,那其他物種就會(huì)衰敗以至滅絕,故本題正確。25、A【分析】【詳解】
雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力,必須獲能后才具備受精能力,精子獲能的過(guò)程不是獲得能量的過(guò)程,是獲得受精能力的過(guò)程,可在獲能液或受精液中完成,故正確。26、A【分析】【詳解】
目前,基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動(dòng)植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面,例如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物;將植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)霠颗;ㄖ?,使其呈現(xiàn)自然界沒(méi)有的顏色,提高了觀賞價(jià)值;將外源生長(zhǎng)素基因?qū)膈庺~(yú)體內(nèi),轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)生長(zhǎng)速率加快等,所以正確。27、A【分析】【詳解】
生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。故該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共32分)28、略
【分析】【分析】
1;利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理:①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度;是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的.當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí),DNA的溶解度最低.利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出;②DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液.利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA;②DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
2;利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)步驟是:①制備雞血細(xì)胞液;②提取雞血細(xì)胞和物質(zhì),③細(xì)胞核物質(zhì)中DNA的溶解,④析出含有DNA的粘稠物,⑤過(guò)濾獲取紗布上的粘稠物,⑥D(zhuǎn)NA的再溶解,⑦加冷卻酒精使DNA析出,⑧二苯胺鑒定DNA分子。
【詳解】
(1)DNA的粗提取和鑒定步驟是:加入蒸餾水;破碎細(xì)胞→過(guò)濾,獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定.所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。
(2)C加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破;釋放細(xì)胞核物質(zhì);E步驟甲蒸餾水是降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出。
(3)鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA;可滴加二苯胺試劑,在沸水浴加熱的條件下如果出現(xiàn)藍(lán)色則該絲狀物的主要成分為DNA。
(4)圖中A步驟的目的是獲取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合圖解,考查DNA的粗提取和鑒定,要求考生識(shí)記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實(shí)驗(yàn)中采用的試劑及試劑的作用等,再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題,難度適中?!窘馕觥緾→B→E→D→A使雞血細(xì)胞吸水漲破,釋放出細(xì)胞核物質(zhì)降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出二苯胺藍(lán)色提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA29、略
【分析】【詳解】
本題以雜交瘤細(xì)胞為背景;考查了動(dòng)物細(xì)胞融合;細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。
(1)在第四次免疫后;Y的血清抗體效價(jià)大于16000,所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知,血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí),Y的效價(jià)最大,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。
(2)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí);可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,B細(xì)胞之間的融合,骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%,故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。
(3)由于核膜也具有流動(dòng)性;故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體,骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體,融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。
(4)未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞;不能無(wú)限增殖,所以多次培養(yǎng)后不能存活。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程,意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn),并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖30、略
【分析】【分析】
基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換;增添和缺失;而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上,以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過(guò)程,該過(guò)程還需要tRNA來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。
密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過(guò)程。
基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。
【詳解】
(1)由題干信息可知;黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后,轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變,說(shuō)明其沒(méi)有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失,因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度改變,因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn),導(dǎo)致翻譯提前終止,肽鏈變短,IDUA酶分子量變小,空間結(jié)構(gòu)改變而失活。
(2)由題干可知;抑制性tRNA(sup-tRNA)可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長(zhǎng)蛋白,并且抑制性tRNA(sup-tRNA)與普通tRNA的結(jié)構(gòu);功能相同,據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過(guò)程繼續(xù)。
(3)本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果;需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因,即其不能合成具有正常功能的IDUA酶(防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾),同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA,因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶,可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知,與對(duì)照組(含正常IDUA基因的組)相比,含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長(zhǎng)IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多,說(shuō)明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成,且效果最好。
(4)由以上實(shí)驗(yàn)可知,攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀,進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶,因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療,與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比,治療組小鼠的IDUA酶活性高,組織黏多糖積累量少;同時(shí),利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療,與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比,由于二者都不含有IDUA基因,則其細(xì)胞內(nèi)都沒(méi)有相應(yīng)mRNA,因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無(wú)法發(fā)揮作用,最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異。【解析】(1)替換減少。
(2)識(shí)別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過(guò)程繼續(xù)。
(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成;且效果最好。
(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高,組織黏多糖積累量少;IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異31、略
【分析】【分析】
參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌;其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型,較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無(wú)氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過(guò)程中檢測(cè)發(fā)酵液是否含有酒精,取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩,若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色,則說(shuō)明發(fā)酵液中含有酒精。
【詳解】
(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無(wú)氧呼吸。酵母菌屬于真核生物;其代謝類型是兼性厭氧型,在有氧條件下進(jìn)行大量增殖,在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解為酒精。
橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇(即酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng);變成灰綠色,該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精,因此實(shí)驗(yàn)自變量是是否加入發(fā)酵液,因變量為溶液顏色變化。對(duì)照組中應(yīng)加入酒精作為陽(yáng)性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)遵循等量原則;單一變量原則等,因此實(shí)驗(yàn)思路是:取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A、B,A試管中各加入2ml發(fā)酵液,作為實(shí)驗(yàn)組,B試管中各加入2ml酒精,作為對(duì)照組,兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀,振蕩后觀察試管中顏色變化,AB兩試管都變?yōu)榛揖G色,即可驗(yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精。
(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格滅菌操作;因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?,F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒,需要經(jīng)過(guò)沉淀;過(guò)濾、滅菌、裝瓶等過(guò)程才能獲得成品酒。
(3)25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=1個(gè)中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù),因此該實(shí)驗(yàn)中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。
(4)釀酒利用酵母菌的無(wú)氧呼吸,需要關(guān)閉充氣口,釀醋利用醋酸菌,醋酸菌是需氧型微生物,因此需向充氣孔中充入無(wú)菌空氣?!窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物;在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解為酒精實(shí)驗(yàn)思路:取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A;B,向A試管中各加入2ml發(fā)酵液,向B試管中各加入2ml酒精,向AB兩試管各滴加0.5ml溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液(或酸性重鉻酸鉀),并輕輕震蕩,觀察試管中溶液顏色變化。
(2)混合菌種沉淀;過(guò)濾、滅菌。
(3)2.25×109
(4)釀酒時(shí)需關(guān)閉充氣口,釀醋時(shí)則需向充氣孔中充入無(wú)菌空氣六、綜合題(共3題,共6分)32、略
【分析】【分析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:
(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟;基因表達(dá)載體包括目的基因;啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同;導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:
分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù);
個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定;抗病鑒定、活性鑒定等。
【詳解】
(1)以RNA為模板獲得DNA的過(guò)程稱為逆轉(zhuǎn)錄;將cDNA片段導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存,這樣能獲得部分基因文庫(kù)或cDNA文庫(kù)。
(2)由圖分析可得,①是用限制酶XbaⅠ來(lái)切割;得到兩個(gè)黏性末端,而Klenow酶將XhaⅠ切割獲得的黏性末端催化產(chǎn)生平末端,③是用限制酶HindⅢ切割,得到含黏性末端的目的基因,可與④切割后的C1質(zhì)粒構(gòu)建成基因表達(dá)載體。若直接用HindⅢ;XhaⅠ同時(shí)切割,產(chǎn)物兩端都是黏性末端,而經(jīng)過(guò)①→②→③可使目的基因兩端分別為平末端和黏性末端,才能與被SmaⅠ與HindⅢ打開(kāi)的載體連接。
(3)細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同;例如,需要有糖;氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。將細(xì)胞所需的上述營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基,稱為合成培養(yǎng)基。為保證細(xì)胞生長(zhǎng),應(yīng)在合成培養(yǎng)基中添加血清、血漿等天然成分,為避免污染,應(yīng)在合成培養(yǎng)基中添加抗生素。細(xì)胞在傳至10代后,增減減緩乃至停止,部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能發(fā)生變化,故傳代培養(yǎng)不宜超過(guò)10代。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合圖解,考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)
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