動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用考核試卷

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用考核試卷考生姓名：答題日期：得分：判卷人：

本試卷旨在考核考生對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用的掌握程度，檢驗(yàn)考生對(duì)實(shí)驗(yàn)原理、操作步驟、結(jié)果分析等方面的理解與運(yùn)用。

一、單項(xiàng)選擇題（本題共30小題，每小題0.5分，共15分，在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的）

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的核心步驟是：（）

A.細(xì)胞傳代

B.細(xì)胞分離

C.細(xì)胞凍存

D.細(xì)胞接種

2.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基pH值應(yīng)維持在：（）

A.6.0-6.5

B.6.5-7.0

C.7.0-7.5

D.7.5-8.0

3.下列哪種物質(zhì)不是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的必需成分？（）

A.葡萄糖

B.血清

C.鈣離子

D.氨基酸

4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何防止細(xì)菌污染？（）

A.使用無菌技術(shù)

B.定期更換培養(yǎng)基

C.使用抗生素

D.以上都是

5.細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度是：（）

A.35℃

B.37℃

C.42℃

D.45℃

6.下列哪種細(xì)胞類型不易在體外培養(yǎng)中存活？（）

A.成纖維細(xì)胞

B.神經(jīng)細(xì)胞

C.肌細(xì)胞

D.肝細(xì)胞

7.細(xì)胞傳代過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生污染？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

8.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞分化？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

9.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否死亡？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

10.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于制備單克隆抗體？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

11.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生突變？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

12.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

13.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生凋亡？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

14.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞周期？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

15.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生衰老？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

16.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于制備重組蛋白？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

17.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生癌變？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

18.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞代謝？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

19.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生損傷？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

20.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞遷移？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

21.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生黏附？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

22.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞自噬？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

23.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生凋亡？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

24.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞分化？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

25.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生損傷？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

26.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞自噬？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

27.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生凋亡？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

28.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞分化？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

29.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生損傷？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.以上都是

30.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞自噬？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

二、多選題（本題共20小題，每小題1分，共20分，在每小題給出的選項(xiàng)中，至少有一項(xiàng)是符合題目要求的）

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的培養(yǎng)基成分包括：（）

A.葡萄糖

B.血清

C.鹽類

D.氨基酸

2.以下哪些是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的無菌操作？（）

A.使用無菌器械

B.定期消毒

C.操作前洗手

D.使用酒精燈

3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)？（）

A.溫度

B.pH值

C.培養(yǎng)基成分

D.氧氣供應(yīng)

4.以下哪些細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞轉(zhuǎn)染

5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是：（）

A.研究細(xì)胞生物學(xué)特性

B.制備生物制品

C.體外藥物篩選

D.細(xì)胞工程應(yīng)用

6.以下哪些細(xì)胞類型適合進(jìn)行原代培養(yǎng)？（）

A.成纖維細(xì)胞

B.神經(jīng)細(xì)胞

C.肌細(xì)胞

D.肝細(xì)胞

7.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否發(fā)生污染？（）

A.觀察細(xì)胞形態(tài)

B.觀察細(xì)胞分裂

C.觀察細(xì)胞生長(zhǎng)速度

D.使用顯微鏡觀察

8.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)的常見污染物？（）

A.細(xì)菌

B.真菌

C.霉菌

D.支原體

9.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會(huì)影響細(xì)胞傳代？（）

A.細(xì)胞密度

B.培養(yǎng)基成分

C.溫度

D.pH值

10.以下哪些細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于制備單克隆抗體？（）

A.原代培養(yǎng)

B.二倍體細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞融合

D.細(xì)胞培養(yǎng)

11.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些方法可以防止細(xì)胞污染？（）

A.使用無菌技術(shù)

B.定期更換培養(yǎng)基

C.使用抗生素

D.定期消毒

12.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)的常見用途？（）

A.研究細(xì)胞生物學(xué)特性

B.制備生物制品

C.體外藥物篩選

D.細(xì)胞工程應(yīng)用

13.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些方法可以檢測(cè)細(xì)胞活性？（）

A.MTT法

B.流式細(xì)胞術(shù)

C.乳酸脫氫酶檢測(cè)

D.電子顯微鏡觀察

14.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基？（）

A.RPMI-1640

B.DMEM

C.MEM

D.Ham'sF12

15.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會(huì)影響細(xì)胞凍存？（）

A.凍存速度

B.凍存溫度

C.凍存液成分

D.凍存時(shí)間

16.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的凍存液成分？（）

A.二甲基亞砜（DMSO）

B.葡萄糖

C.血清

D.甘油

17.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會(huì)影響細(xì)胞復(fù)蘇？（）

A.復(fù)蘇速度

B.復(fù)蘇溫度

C.培養(yǎng)基成分

D.pH值

18.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的復(fù)蘇方法？（）

A.逐步復(fù)溫法

B.快速復(fù)溫法

C.冷卻法

D.暖浴法

19.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些方法可以檢測(cè)細(xì)胞增殖？（）

A.計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)

B.MTT法

C.流式細(xì)胞術(shù)

D.乳酸脫氫酶檢測(cè)

20.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的細(xì)胞標(biāo)記技術(shù)？（）

A.綠熒光蛋白（GFP）

B.紅熒光蛋白（RFP）

C.熒光素酶

D.熒光原位雜交（FISH）

三、填空題（本題共25小題，每小題1分，共25分，請(qǐng)將正確答案填到題目空白處）

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基為______。

2.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，維持細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的必要條件是______。

3.細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作中，操作前應(yīng)先______。

4.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的消毒劑是______。

5.細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度一般為______。

6.細(xì)胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的pH值應(yīng)維持在______。

7.細(xì)胞分離常用的方法有______。

8.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞傳代是指______。

9.細(xì)胞凍存常用的方法有______。

10.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的細(xì)胞凍存液成分是______。

11.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞復(fù)蘇的目的是______。

12.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞污染的主要原因有______。

13.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凋亡的典型特征是______。

14.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞衰老的典型特征是______。

15.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞癌變的典型特征是______。

16.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞活性的方法是______。

17.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法有______。

18.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞周期的方法是______。

19.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡的方法是______。

20.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞遷移的方法是______。

21.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞自噬的方法是______。

22.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)的方法是______。

23.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞代謝的方法是______。

24.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞分化的方法是______。

25.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于制備單克隆抗體的技術(shù)是______。

四、判斷題（本題共20小題，每題0.5分，共10分，正確的請(qǐng)?jiān)诖痤}括號(hào)中畫√，錯(cuò)誤的畫×）

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，血清是必需的培養(yǎng)基成分。（）

2.細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度應(yīng)高于人體的正常體溫。（）

3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的pH值應(yīng)隨著細(xì)胞生長(zhǎng)而逐漸降低。（）

4.細(xì)胞分離常用的方法包括酶解法和物理法。（）

5.細(xì)胞傳代是指將培養(yǎng)的細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，接種到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。（）

6.細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞迅速冷卻到-80℃以下。（）

7.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞污染的主要原因是操作者的手部污染。（）

8.細(xì)胞凋亡是細(xì)胞程序性死亡，是細(xì)胞正常發(fā)育過程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。（）

9.細(xì)胞衰老是指細(xì)胞失去正常功能，無法進(jìn)行正常分裂。（）

10.細(xì)胞癌變是指細(xì)胞失去正常生長(zhǎng)調(diào)控，無限制地增殖。（）

11.MTT法是一種檢測(cè)細(xì)胞活性的方法，其原理是基于活細(xì)胞線粒體內(nèi)的脫氫酶活性。（）

12.細(xì)胞培養(yǎng)中，使用抗生素可以預(yù)防細(xì)胞污染。（）

13.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞融合是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。（）

14.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞周期的方法是觀察細(xì)胞分裂相。（）

15.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡的方法是觀察細(xì)胞形態(tài)變化。（）

16.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞遷移的方法是觀察細(xì)胞移動(dòng)距離。（）

17.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞自噬的方法是觀察細(xì)胞內(nèi)自噬泡的形成。（）

18.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)的方法是觀察細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子的變化。（）

19.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)細(xì)胞代謝的方法是觀察細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物的積累。（）

20.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于制備單克隆抗體的技術(shù)是細(xì)胞融合和雜交瘤技術(shù)。（）

五、主觀題（本題共4小題，每題5分，共20分）

1.請(qǐng)簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的步驟，并說明每個(gè)步驟的目的。

2.分析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用，列舉至少三種應(yīng)用實(shí)例。

3.討論動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的污染問題及其預(yù)防措施。

4.結(jié)合實(shí)際，闡述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物制藥領(lǐng)域的應(yīng)用前景。

六、案例題（本題共2小題，每題5分，共10分）

1.案例背景：某實(shí)驗(yàn)室正在進(jìn)行小鼠成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，研究人員發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞出現(xiàn)明顯的形態(tài)變化，細(xì)胞體積增大，細(xì)胞核增大，染色質(zhì)聚集。請(qǐng)分析可能的原因，并提出相應(yīng)的解決措施。

2.案例背景：某制藥公司利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)一種新的生物藥物。在藥物生產(chǎn)過程中，公司發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)了細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、細(xì)胞死亡的現(xiàn)象。請(qǐng)分析可能的原因，并提出相應(yīng)的質(zhì)量控制措施。

標(biāo)準(zhǔn)答案

一、單項(xiàng)選擇題

1.D

2.C

3.C

4.D

5.B

6.B

7.D

8.D

9.A

10.C

11.A

12.A

13.A

14.B

15.D

16.A

17.B

18.C

19.A

20.A

21.A

22.C

23.A

24.B

25.D

26.B

27.A

28.D

29.A

30.C

二、多選題

1.ABCD

2.ABD

3.ABCD

4.ACD

5.ABCD

6.ABD

7.ABD

8.ABD

9.ABCD

10.ABC

11.ABD

12.ABCD

13.ABC

14.ABCD

15.ABCD

16.ABD

17.ABC

18.ABD

19.ABC

20.ABCD

三、填空題

1.RPMI-1640

2.溫度、pH值、氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

3.洗手

4.75%酒精

5.37℃

6.7.2-7.4

7.酶解法和物理法

8.將培養(yǎng)的細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，接種到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)

9.凍存

10.二甲基亞砜（DMSO）、葡萄糖

11.恢復(fù)細(xì)胞活力

12.操作者污染、培養(yǎng)基污染、設(shè)備污染

13.細(xì)胞膜完整性破壞，細(xì)胞器變形，DNA片段化

14.細(xì)胞體積增大，細(xì)