醫(yī)學實驗室技術操作手冊_第1頁
醫(yī)學實驗室技術操作手冊_第2頁
醫(yī)學實驗室技術操作手冊_第3頁
醫(yī)學實驗室技術操作手冊_第4頁
醫(yī)學實驗室技術操作手冊_第5頁
已閱讀5頁,還剩17頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

付費下載

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

醫(yī)學實驗室技術操作手冊TOC\o"1-2"\h\u26293第一章實驗室基本規(guī)范 4272151.1實驗室安全準則 4128151.1.1實驗室工作人員應具備相應的專業(yè)知識和技能,熟悉各類實驗操作規(guī)程。 462361.1.2實驗室應建立健全的安全管理制度,包括實驗操作規(guī)程、應急預案、報告等。 4197711.1.3實驗室應配備必要的安全設施,如防火、防爆、防毒、防腐蝕等設備。 4220061.1.4實驗室工作人員應嚴格遵守實驗操作規(guī)程,不得擅自改變實驗步驟。 5270531.1.5實驗室工作人員應定期參加安全培訓,提高安全意識。 5309791.1.6實驗室應定期進行安全檢查,保證安全設施正常運行。 5120351.2實驗室衛(wèi)生要求 5221901.2.1實驗室應保持整潔,無塵、無污染。 5249881.2.2實驗室工作人員應穿著整潔的工作服,佩戴必要的防護用品。 5241151.2.3實驗室應定期進行清潔和消毒,包括實驗臺、儀器設備、地面等。 5262951.2.4實驗室內(nèi)的廢棄物應分類收集,按照規(guī)定進行處理。 538431.2.5實驗室應建立健全的衛(wèi)生管理制度,保證衛(wèi)生條件達標。 5231721.3實驗室設備管理 5197201.3.1實驗室設備應按照國家相關標準進行選購,保證設備質(zhì)量。 5204361.3.2實驗室設備應定期進行維護和檢修,保證設備正常運行。 5276701.3.3實驗室設備使用前,應進行嚴格檢查,保證設備功能穩(wěn)定。 5200511.3.4實驗室設備使用過程中,應嚴格按照操作規(guī)程進行,避免設備損壞。 5214441.3.5實驗室設備使用后,應及時清潔、歸位,做好設備保養(yǎng)工作。 529181.3.6實驗室設備管理人員應定期對設備進行檢查、維護,保證設備處于良好狀態(tài)。 5264451.3.7實驗室設備報廢、更新時,應按照相關規(guī)定進行報批、處置。 531526第二章標本采集與處理 5310082.1血液標本采集 55312.1.1采集前的準備 541692.1.2采集方法 654842.1.3采集后的處理 6137922.2尿液標本采集 6182662.2.1采集前的準備 6294642.2.2采集方法 6259282.2.3采集后的處理 6114342.3糞便標本采集 6169252.3.1采集前的準備 7119482.3.2采集方法 7213042.3.3采集后的處理 751442.4標本處理與保存 7159652.4.1標本處理 7203642.4.2標本保存 710229第三章實驗室儀器操作 718043.1自動化分析儀操作 7195263.1.1設備準備 7170983.1.2樣本處理 79223.1.3操作步驟 8121003.2顯微鏡操作 842033.2.1設備準備 8300053.2.2樣本處理 8204873.2.3操作步驟 8323023.3生化分析儀器操作 8269623.3.1設備準備 8293913.3.2樣本處理 8129363.3.3操作步驟 8266213.4其他常用儀器操作 936353.4.1離心機操作 967863.4.2光度計操作 9165623.4.3電泳儀操作 921756第四章分子生物學實驗技術 928134.1DNA提取 9148624.2RNA提取 10318864.3PCR實驗操作 10156504.4基因測序技術 1115770第五章免疫學實驗技術 1197985.1ELISA實驗操作 11235465.1.1實驗材料 1186795.1.2實驗步驟 11144525.2免疫熒光技術 1290845.2.1實驗材料 12243955.2.2實驗步驟 12231275.3免疫組化技術 12118325.3.1實驗材料 12128585.3.2實驗步驟 12315435.4流式細胞儀操作 13259575.4.1實驗材料 13191625.4.2實驗步驟 135171第六章微生物學實驗技術 13230276.1細菌培養(yǎng)與分離 13139536.1.1培養(yǎng)基的制備 1376416.1.2細菌接種 1375446.1.3培養(yǎng)條件 14142326.1.4細菌分離 14123976.2真菌培養(yǎng)與分離 14311726.2.1培養(yǎng)基的制備 1497116.2.2真菌接種 14240116.2.3培養(yǎng)條件 14169726.2.4真菌分離 14279016.3病毒檢測 14120346.3.1樣本采集與處理 146696.3.2病毒分離與培養(yǎng) 14232926.3.3病毒檢測方法 14142696.4微生物鑒定 1545006.4.1形態(tài)學鑒定 1537606.4.2生理生化鑒定 1598936.4.3分子生物學鑒定 1525432第七章生化實驗技術 15184897.1蛋白質(zhì)測定 1537407.1.1原理 15190907.1.2實驗方法 15242587.1.3注意事項 15106627.2酶活性測定 15213927.2.1原理 1649287.2.2實驗方法 16174907.2.3注意事項 16100867.3血糖、血脂測定 1618537.3.1血糖測定 16186137.3.1.1原理 16114637.3.1.2實驗方法 16258077.3.1.3注意事項 16140637.3.2血脂測定 1674437.3.2.1原理 16131937.3.2.2實驗方法 17149017.3.2.3注意事項 1766537.4其他生化指標測定 17269897.4.1尿素測定 1741457.4.2肌酐測定 17308137.4.3膽紅素測定 1759887.4.4注意事項 1711481第八章檢驗結果判讀與分析 17269548.1血常規(guī)結果分析 17528.2尿常規(guī)結果分析 18201438.3生化檢驗結果分析 184558.4免疫學檢驗結果分析 1817497第九章實驗室質(zhì)量控制 187059.1室內(nèi)質(zhì)量控制 19102669.1.1控制品的選擇與制備 19321459.1.2控制規(guī)則的設定 19141089.1.3控制頻率的確定 19320899.1.4控制數(shù)據(jù)的記錄與評價 19122789.2室間質(zhì)量控制 19118599.2.1室間質(zhì)評組織與管理 19158889.2.3室間質(zhì)評結果的評價與分析 19179389.3質(zhì)量控制圖的繪制與應用 20167199.3.1質(zhì)量控制圖的類型 20110049.3.2質(zhì)量控制圖的繪制方法 20236059.3.3質(zhì)量控制圖的應用 20154829.4質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析 20173579.4.1數(shù)據(jù)的收集與整理 20270459.4.2數(shù)據(jù)的描述性統(tǒng)計分析 20266459.4.3數(shù)據(jù)的假設檢驗 20293209.4.4數(shù)據(jù)的回歸分析 20216第十章實驗室廢棄物處理與環(huán)保 202051410.1廢棄物分類 201075510.1.1生物廢棄物 212504210.1.2化學廢棄物 212150310.1.3放射性廢棄物 211301510.1.4其他廢棄物 211219310.2廢棄物處理方法 2125710.2.1生物廢棄物處理 211500310.2.2化學廢棄物處理 211377310.2.3放射性廢棄物處理 213088510.2.4其他廢棄物處理 211984210.3實驗室環(huán)保措施 21171110.3.1減量化 211741410.3.2資源化 212479610.3.3無害化 22755110.4相關法律法規(guī)與標準 221461110.4.1法律法規(guī) 22436510.4.2標準 22第一章實驗室基本規(guī)范1.1實驗室安全準則實驗室安全是醫(yī)學實驗室技術操作中的首要任務,為保證實驗室工作人員、患者及環(huán)境的安全,以下準則必須嚴格遵守:1.1.1實驗室工作人員應具備相應的專業(yè)知識和技能,熟悉各類實驗操作規(guī)程。1.1.2實驗室應建立健全的安全管理制度,包括實驗操作規(guī)程、應急預案、報告等。1.1.3實驗室應配備必要的安全設施,如防火、防爆、防毒、防腐蝕等設備。1.1.4實驗室工作人員應嚴格遵守實驗操作規(guī)程,不得擅自改變實驗步驟。1.1.5實驗室工作人員應定期參加安全培訓,提高安全意識。1.1.6實驗室應定期進行安全檢查,保證安全設施正常運行。1.2實驗室衛(wèi)生要求實驗室衛(wèi)生是保證實驗數(shù)據(jù)準確性和工作人員健康的重要條件,以下要求必須嚴格執(zhí)行:1.2.1實驗室應保持整潔,無塵、無污染。1.2.2實驗室工作人員應穿著整潔的工作服,佩戴必要的防護用品。1.2.3實驗室應定期進行清潔和消毒,包括實驗臺、儀器設備、地面等。1.2.4實驗室內(nèi)的廢棄物應分類收集,按照規(guī)定進行處理。1.2.5實驗室應建立健全的衛(wèi)生管理制度,保證衛(wèi)生條件達標。1.3實驗室設備管理實驗室設備是醫(yī)學實驗技術操作的基礎,以下設備管理要求應予以遵循:1.3.1實驗室設備應按照國家相關標準進行選購,保證設備質(zhì)量。1.3.2實驗室設備應定期進行維護和檢修,保證設備正常運行。1.3.3實驗室設備使用前,應進行嚴格檢查,保證設備功能穩(wěn)定。1.3.4實驗室設備使用過程中,應嚴格按照操作規(guī)程進行,避免設備損壞。1.3.5實驗室設備使用后,應及時清潔、歸位,做好設備保養(yǎng)工作。1.3.6實驗室設備管理人員應定期對設備進行檢查、維護,保證設備處于良好狀態(tài)。1.3.7實驗室設備報廢、更新時,應按照相關規(guī)定進行報批、處置。第二章標本采集與處理2.1血液標本采集血液標本采集是醫(yī)學實驗室常規(guī)操作之一,其目的是獲取患者體內(nèi)的血液成分,用于后續(xù)的檢測分析。以下是血液標本采集的注意事項:2.1.1采集前的準備(1)了解患者的基本情況,如年齡、性別、體重等。(2)核對患者身份,保證采集對象正確。(3)向患者解釋采集過程,取得患者配合。(4)準備采集工具,如采血管、消毒棉簽、止血帶等。2.1.2采集方法(1)選擇合適的采集部位,通常為前臂靜脈。(2)消毒采集部位,待消毒劑干燥后進行采集。(3)用止血帶扎緊采集部位,使靜脈充盈。(4)用采血管進行采集,保證采血管內(nèi)無氣泡。(5)采集結束后,用消毒棉簽壓迫止血,并觀察患者狀況。2.1.3采集后的處理(1)將采血管送至實驗室,進行后續(xù)檢測。(2)記錄采集時間、采集部位等信息。(3)對采集部位進行消毒,防止感染。2.2尿液標本采集尿液標本采集是檢測泌尿系統(tǒng)疾病的重要手段,以下是尿液標本采集的注意事項:2.2.1采集前的準備(1)向患者解釋尿液采集的目的和方法。(2)準備采集工具,如尿杯、消毒棉簽等。(3)囑患者清潔外陰部,避免污染尿液。2.2.2采集方法(1)囑患者取站立位,排空尿液。(2)用消毒棉簽清潔尿道口,防止污染。(3)收集尿液于尿杯中,保證尿液無污染。2.2.3采集后的處理(1)將尿杯送至實驗室,進行后續(xù)檢測。(2)記錄采集時間、采集量等信息。(3)對尿杯進行清潔、消毒,防止交叉感染。2.3糞便標本采集糞便標本采集是檢測消化系統(tǒng)疾病的重要手段,以下是糞便標本采集的注意事項:2.3.1采集前的準備(1)向患者解釋糞便采集的目的和方法。(2)準備采集工具,如糞便采集管、消毒棉簽等。(3)囑患者排空腸道,避免糞便干燥。2.3.2采集方法(1)囑患者取左側(cè)臥位,暴露肛門。(2)用消毒棉簽清潔肛門周圍皮膚。(3)將糞便采集管插入肛門,收集糞便。2.3.3采集后的處理(1)將糞便采集管送至實驗室,進行后續(xù)檢測。(2)記錄采集時間、采集量等信息。(3)對采集管進行清潔、消毒,防止交叉感染。2.4標本處理與保存2.4.1標本處理(1)對血液、尿液、糞便等標本進行初步觀察,如顏色、透明度等。(2)根據(jù)檢測項目要求,對標本進行預處理,如離心、過濾等。(3)對預處理后的標本進行分裝,為后續(xù)檢測做好準備。2.4.2標本保存(1)根據(jù)檢測項目要求,選擇合適的保存方法,如冷藏、冷凍等。(2)保證保存環(huán)境的穩(wěn)定性,避免標本受到污染。(3)記錄標本保存時間、保存條件等信息,便于后續(xù)查詢。第三章實驗室儀器操作3.1自動化分析儀操作3.1.1設備準備在進行自動化分析儀操作前,需保證設備已正確安裝,并按照制造商的指導進行校準。檢查儀器是否清潔,各部件是否完好,保證電源、水源和氣源等配套設施齊全。3.1.2樣本處理將待檢測樣本按照自動化分析儀的要求進行預處理,如離心、分裝等。保證樣本標識清晰,避免混淆。3.1.3操作步驟(1)開啟自動化分析儀,進入操作系統(tǒng)。(2)根據(jù)檢測項目選擇合適的測試方法。(3)輸入樣本信息,包括樣本編號、檢測項目等。(4)將處理好的樣本放入儀器指定的位置。(5)按照操作手冊進行儀器設置,如溫度、轉(zhuǎn)速等。(6)啟動檢測程序,等待檢測結果。(7)檢測完成后,取出樣本,對結果進行記錄和分析。3.2顯微鏡操作3.2.1設備準備保證顯微鏡已正確安裝,各部件完好,光源、載物臺、鏡頭等配件齊全。3.2.2樣本處理將待觀察的樣本放置在載玻片上,滴加適量染液,覆蓋蓋玻片。保證樣本均勻分布,避免氣泡。3.2.3操作步驟(1)開啟顯微鏡光源,調(diào)整亮度。(2)將載玻片放在載物臺上,調(diào)整鏡頭,使視野清晰。(3)根據(jù)觀察需求,選擇合適的放大倍數(shù)。(4)調(diào)整細準焦螺旋,使圖像更加清晰。(5)觀察樣本,記錄所需信息。(6)使用完畢后,關閉光源,清理顯微鏡。3.3生化分析儀器操作3.3.1設備準備保證生化分析儀器已正確安裝,各部件完好,電源、水源等配套設施齊全。3.3.2樣本處理將待檢測的生化樣本按照儀器要求進行預處理,如稀釋、加熱等。3.3.3操作步驟(1)開啟生化分析儀器,進入操作系統(tǒng)。(2)根據(jù)檢測項目選擇合適的測試方法。(3)輸入樣本信息,包括樣本編號、檢測項目等。(4)將處理好的樣本放入儀器指定的位置。(5)按照操作手冊進行儀器設置,如溫度、轉(zhuǎn)速等。(6)啟動檢測程序,等待檢測結果。(7)檢測完成后,取出樣本,對結果進行記錄和分析。3.4其他常用儀器操作3.4.1離心機操作(1)保證離心機已正確安裝,各部件完好。(2)將待離心的樣本放入離心管,保證平衡。(3)將離心管放入離心機,調(diào)整轉(zhuǎn)速和時間。(4)開啟離心機,等待離心完成。(5)關閉離心機,取出離心管,觀察結果。3.4.2光度計操作(1)保證光度計已正確安裝,各部件完好。(2)根據(jù)檢測項目選擇合適的波長。(3)將待測樣本放入光度計,調(diào)整儀器參數(shù)。(4)啟動光度計,等待測量結果。(5)關閉光度計,記錄測量數(shù)據(jù)。3.4.3電泳儀操作(1)保證電泳儀已正確安裝,各部件完好。(2)準備電泳槽,加入適量緩沖液。(3)將待檢測的樣本加入電泳槽。(4)連接電源,調(diào)整電壓和時間。(5)開啟電泳儀,等待電泳完成。(6)關閉電泳儀,觀察電泳結果。第四章分子生物學實驗技術4.1DNA提取DNA提取是分子生物學實驗的基礎,其主要目的是從生物樣本中分離出純凈的DNA分子。以下是DNA提取的一般步驟:(1)樣本準備:將生物樣本剪碎或研磨,使其充分破裂。(2)細胞裂解:使用裂解緩沖液和蛋白酶K將細胞膜和核膜破裂,釋放出DNA。(3)蛋白沉淀:加入酚/氯仿/異戊醇混合液,使蛋白質(zhì)沉淀,并與DNA分離。(4)DNA純化:通過乙醇沉淀或使用商業(yè)DNA純化試劑盒,將DNA從溶液中分離出來。(5)DNA溶解:將純化后的DNA溶解在適量TE緩沖液中。4.2RNA提取RNA提取是分子生物學實驗中另一個重要的步驟,其主要目的是從生物樣本中分離出純凈的RNA分子。以下是RNA提取的一般步驟:(1)樣本準備:將生物樣本剪碎或研磨,使其充分破裂。(2)細胞裂解:使用裂解緩沖液將細胞膜和核膜破裂,釋放出RNA。(3)RNA純化:通過加入酚/氯仿/異戊醇混合液,使蛋白質(zhì)和DNA沉淀,并與RNA分離。(4)RNA沉淀:使用乙醇沉淀或商業(yè)RNA純化試劑盒,將RNA從溶液中分離出來。(5)RNA溶解:將純化后的RNA溶解在適量DEPC水中。4.3PCR實驗操作PCR(聚合酶鏈式反應)是一種在體外擴增特定DNA片段的技術。以下是PCR實驗的一般步驟:(1)模板DNA準備:將提取的DNA模板進行稀釋,使其濃度適中。(2)引物設計:根據(jù)目標片段的序列,設計特異性引物。(3)PCR反應體系配置:按照一定比例混合PCR反應緩沖液、dNTPs、引物、模板DNA和Taq酶。(4)PCR擴增:將反應體系置于PCR儀器中,進行變性、退火和延伸的循環(huán)反應。(5)PCR產(chǎn)物檢測:通過瓊脂糖凝膠電泳或?qū)崟r熒光定量PCR等方法,檢測擴增產(chǎn)物。4.4基因測序技術基因測序技術是測定DNA序列的方法,對于研究基因組結構和功能具有重要意義。以下是基因測序技術的一般步驟:(1)DNA模板準備:將提取的DNA進行片段化,并與測序接頭連接。(2)文庫構建:將連接測序接頭的DNA片段進行PCR擴增,構建測序文庫。(3)測序反應:將測序文庫與測序試劑混合,進行測序反應。(4)數(shù)據(jù)收集:使用測序儀器收集測序信號,轉(zhuǎn)換為原始測序數(shù)據(jù)。(5)數(shù)據(jù)分析:對原始測序數(shù)據(jù)進行質(zhì)量控制、拼接和注釋,得到目標基因的序列信息。第五章免疫學實驗技術5.1ELISA實驗操作ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)是一種廣泛應用于免疫學實驗的技術。其基本原理是通過酶標記抗體或抗原,利用酶的催化作用顯色,從而實現(xiàn)對目標物質(zhì)的定量分析。5.1.1實驗材料(1)試劑:抗原、抗體、酶標記抗體、底物顯色液等。(2)儀器:酶標儀、洗板機、移液器等。(3)其他:酶標板、吸水紙、計時器等。5.1.2實驗步驟(1)包被抗原:將抗原稀釋至適當濃度,加入酶標板,室溫放置一定時間使抗原與酶標板結合。(2)封閉:用封閉液將酶標板封閉,以消除非特異性吸附。(3)加入抗體:將抗體稀釋至適當濃度,加入酶標板,室溫孵育一定時間。(4)加入酶標記抗體:將酶標記抗體稀釋至適當濃度,加入酶標板,室溫孵育一定時間。(5)顯色:加入底物顯色液,室溫放置一定時間,觀察顏色變化。(6)終止反應:加入終止液,終止顯色反應。(7)測定吸光度:使用酶標儀測定吸光度,根據(jù)吸光度值計算待測物質(zhì)的含量。5.2免疫熒光技術免疫熒光技術是將熒光素標記的抗體或抗原與待測樣本反應,利用熒光顯微鏡觀察熒光信號,從而實現(xiàn)對目標物質(zhì)的定性或定量分析。5.2.1實驗材料(1)試劑:熒光標記抗體、抗原、熒光顯微鏡用緩沖液等。(2)儀器:熒光顯微鏡、移液器、玻璃片等。(3)其他:蓋玻片、吸水紙、計時器等。5.2.2實驗步驟(1)制備樣本:將待測樣本固定在玻璃片上。(2)加入熒光標記抗體:將熒光標記抗體稀釋至適當濃度,加入樣本,室溫孵育一定時間。(3)洗滌:用緩沖液洗滌玻璃片,去除未結合的抗體。(4)封片:在樣本上滴加熒光顯微鏡用緩沖液,蓋上蓋玻片。(5)觀察熒光信號:將制備好的樣本放在熒光顯微鏡下,觀察熒光信號。5.3免疫組化技術免疫組化技術是將抗體或抗原標記在組織切片上,通過顯色反應觀察目標物質(zhì)在組織中的分布和表達。5.3.1實驗材料(1)試劑:抗體、抗原、顯色劑、固定液等。(2)儀器:顯微鏡、切片機、移液器等。(3)其他:載玻片、蓋玻片、吸水紙、計時器等。5.3.2實驗步驟(1)制備組織切片:將組織固定、脫水、透明、包埋,然后切成薄片。(2)烤片:將切片放在載玻片上,進行烤片處理。(3)抗原修復:根據(jù)需要,對切片進行抗原修復處理。(4)加入抗體:將抗體稀釋至適當濃度,加入切片,室溫孵育一定時間。(5)顯色:加入顯色劑,室溫放置一定時間,觀察顏色變化。(6)復染:用復染劑對切片進行復染,以增強對比度。(7)封片:在切片上滴加封片劑,蓋上蓋玻片。(8)觀察結果:將制備好的切片放在顯微鏡下,觀察目標物質(zhì)的分布和表達。5.4流式細胞儀操作流式細胞儀是一種能夠?qū)蝹€細胞進行快速、高通量分析的技術。其基本原理是利用激光束對細胞進行照射,檢測細胞的散射光和熒光信號,從而實現(xiàn)對細胞的分類、分析和計數(shù)。5.4.1實驗材料(1)試劑:抗體、細胞懸液、熒光染料等。(2)儀器:流式細胞儀、移液器、試管等。(3)其他:冰塊、計時器等。5.4.2實驗步驟(1)制備細胞懸液:將待測細胞懸浮在適當?shù)木彌_液中。(2)加入抗體:將抗體稀釋至適當濃度,加入細胞懸液,室溫孵育一定時間。(3)洗滌:用緩沖液洗滌細胞懸液,去除未結合的抗體。(4)加入熒光染料:根據(jù)實驗需要,加入熒光染料,室溫孵育一定時間。(5)洗滌:用緩沖液洗滌細胞懸液,去除未結合的熒光染料。(6)上機檢測:將制備好的細胞懸液放入流式細胞儀中進行檢測。(7)分析數(shù)據(jù):根據(jù)檢測結果,分析細胞的分類、比例等參數(shù)。第六章微生物學實驗技術6.1細菌培養(yǎng)與分離6.1.1培養(yǎng)基的制備在細菌培養(yǎng)前,首先需要制備適合細菌生長的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基一般由水、碳源、氮源、無機鹽、維生素等組成,可根據(jù)細菌的生理特性添加適量的抗生素、指示劑等。制備好的培養(yǎng)基需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌,以保證無菌。6.1.2細菌接種將待培養(yǎng)的細菌樣本接種到培養(yǎng)基上,接種方法有涂布法、劃線法等。接種過程中需嚴格遵守無菌操作規(guī)程,避免污染。6.1.3培養(yǎng)條件細菌培養(yǎng)一般需在恒溫箱中進行,溫度、濕度、氧氣等條件需根據(jù)不同細菌的生理特性進行調(diào)整。培養(yǎng)時間一般為24小時,但部分細菌可能需要更長時間。6.1.4細菌分離當細菌在培養(yǎng)基上生長后,可通過挑取單個菌落進行分離純化。分離純化過程中,需注意挑選生長良好、形態(tài)一致的菌落。6.2真菌培養(yǎng)與分離6.2.1培養(yǎng)基的制備真菌培養(yǎng)基一般含有葡萄糖、蛋白胨、瓊脂等成分,可根據(jù)不同真菌的生理特性添加適量的抗生素、指示劑等。制備好的培養(yǎng)基同樣需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌。6.2.2真菌接種將待培養(yǎng)的真菌樣本接種到培養(yǎng)基上,接種方法與細菌類似。操作過程中需注意無菌操作,避免污染。6.2.3培養(yǎng)條件真菌培養(yǎng)一般需在恒溫箱中進行,溫度、濕度等條件需根據(jù)不同真菌的生理特性進行調(diào)整。培養(yǎng)時間較長,可能需要數(shù)周甚至數(shù)月。6.2.4真菌分離當真菌在培養(yǎng)基上生長后,可通過挑取單個菌落進行分離純化。分離純化過程中,需注意挑選生長良好、形態(tài)一致的菌落。6.3病毒檢測6.3.1樣本采集與處理病毒檢測的樣本通常為血液、體液、組織等。采集樣本后,需進行適當?shù)奶幚?,如離心、過濾等,以獲取病毒顆粒。6.3.2病毒分離與培養(yǎng)將處理后的樣本接種到適宜的細胞株或?qū)嶒瀯游镏?,進行病毒分離。分離過程中需注意無菌操作,避免污染。6.3.3病毒檢測方法病毒檢測方法包括血清學檢測、分子生物學檢測、免疫學檢測等。具體方法可根據(jù)病毒種類和實驗室條件選擇。6.4微生物鑒定6.4.1形態(tài)學鑒定通過觀察微生物的形態(tài)、結構、大小等特征,對其進行初步鑒定。形態(tài)學鑒定包括光學顯微鏡觀察、電子顯微鏡觀察等。6.4.2生理生化鑒定通過檢測微生物的生理生化特性,如酶活性、代謝產(chǎn)物等,對其進行鑒定。常用的生理生化鑒定方法有菌落計數(shù)、生長曲線、糖發(fā)酵試驗等。6.4.3分子生物學鑒定利用分子生物學技術,如PCR、基因測序等,對微生物的遺傳物質(zhì)進行分析,從而進行精確鑒定。分子生物學鑒定具有高度靈敏度和特異性,已成為微生物鑒定的重要手段。第七章生化實驗技術7.1蛋白質(zhì)測定7.1.1原理蛋白質(zhì)測定通?;诘鞍踪|(zhì)分子中的肽鍵與特定試劑發(fā)生反應,具有特定吸收光譜的化合物,從而實現(xiàn)蛋白質(zhì)含量的定量分析。7.1.2實驗方法(1)Lowry法:以Lowry試劑為顯色劑,通過測定蛋白質(zhì)溶液與試劑反應后的吸光度,計算蛋白質(zhì)含量。(2)Bradford法:以Bradford試劑為顯色劑,通過測定蛋白質(zhì)溶液與試劑反應后的吸光度,計算蛋白質(zhì)含量。(3)BCA法:以BCA試劑為顯色劑,通過測定蛋白質(zhì)溶液與試劑反應后的吸光度,計算蛋白質(zhì)含量。7.1.3注意事項(1)實驗過程中需嚴格控制反應溫度和時間。(2)顯色劑與蛋白質(zhì)的反應需在避光條件下進行。(3)保證實驗器材的清潔,避免污染。7.2酶活性測定7.2.1原理酶活性測定通常通過測定酶催化反應的速度,以單位時間內(nèi)底物的消耗或產(chǎn)物的量表示。7.2.2實驗方法(1)分光光度法:通過測定反應體系中底物或產(chǎn)物的吸光度變化,計算酶活性。(2)熒光法:通過測定反應體系中底物或產(chǎn)物的熒光強度變化,計算酶活性。(3)電化學法:通過測定反應體系中底物或產(chǎn)物的電化學性質(zhì)變化,計算酶活性。7.2.3注意事項(1)實驗過程中需嚴格控制反應溫度、pH值等條件。(2)保證酶的活性穩(wěn)定,避免酶失活。(3)實驗器材需保持清潔,避免交叉污染。7.3血糖、血脂測定7.3.1血糖測定7.3.1.1原理血糖測定通常采用葡萄糖氧化酶法,通過測定葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化為葡萄糖酸的過程中產(chǎn)生的過氧化氫的量,計算血糖含量。7.3.1.2實驗方法采用葡萄糖氧化酶試劑,通過測定反應體系中的吸光度,計算血糖含量。7.3.1.3注意事項(1)實驗過程中需嚴格控制反應溫度和時間。(2)保證葡萄糖氧化酶試劑的活性穩(wěn)定。(3)避免實驗器材污染。7.3.2血脂測定7.3.2.1原理血脂測定通常采用膽固醇酯酶法,通過測定膽固醇酯酶催化膽固醇酯水解為膽固醇和脂肪酸的過程中產(chǎn)生的過氧化氫的量,計算血脂含量。7.3.2.2實驗方法采用膽固醇酯酶試劑,通過測定反應體系中的吸光度,計算血脂含量。7.3.2.3注意事項(1)實驗過程中需嚴格控制反應溫度和時間。(2)保證膽固醇酯酶試劑的活性穩(wěn)定。(3)避免實驗器材污染。7.4其他生化指標測定7.4.1尿素測定采用脲酶法,通過測定脲酶催化尿素水解為氨和二氧化碳的過程中產(chǎn)生的氨的量,計算尿素含量。7.4.2肌酐測定采用肌酐酶法,通過測定肌酐酶催化肌酐水解為肌酸和尿素的過程中產(chǎn)生的肌酸的量,計算肌酐含量。7.4.3膽紅素測定采用重氮化法,通過測定重氮化試劑與膽紅素反應后的吸光度,計算膽紅素含量。7.4.4注意事項(1)實驗過程中需嚴格控制反應溫度和時間。(2)保證試劑的活性穩(wěn)定。(3)避免實驗器材污染。第八章檢驗結果判讀與分析8.1血常規(guī)結果分析血常規(guī)檢驗是臨床醫(yī)學中常用的檢驗項目,主要包括紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、血小板計數(shù)等指標。在分析血常規(guī)結果時,需關注以下幾個方面:(1)紅細胞計數(shù):紅細胞計數(shù)降低可能提示貧血,增多可能提示紅細胞增多癥。(2)白細胞計數(shù):白細胞計數(shù)降低可能提示免疫系統(tǒng)受損,增多可能提示感染、炎癥等疾病。(3)血紅蛋白測定:血紅蛋白降低可能提示貧血,增多可能提示紅細胞增多癥。(4)血小板計數(shù):血小板計數(shù)降低可能提示出血傾向,增多可能提示血栓性疾病。8.2尿常規(guī)結果分析尿常規(guī)檢驗主要包括尿液顏色、透明度、酸堿度、蛋白質(zhì)、紅細胞、白細胞等指標。以下為尿常規(guī)結果分析要點:(1)尿液顏色:尿液顏色異??赡芴崾久撍?、尿路感染等疾病。(2)尿液透明度:尿液混濁可能提示尿路感染、結石等疾病。(3)酸堿度:尿液酸堿度異??赡芴崾灸I臟疾病、代謝性疾病等。(4)蛋白質(zhì):尿蛋白陽性可能提示腎臟疾病、高血壓等疾病。(5)紅細胞:尿紅細胞陽性可能提示尿路感染、結石等疾病。(6)白細胞:尿白細胞陽性可能提示尿路感染。8.3生化檢驗結果分析生化檢驗主要包括血糖、血脂、肝功能、腎功能等指標。以下為生化檢驗結果分析要點:(1)血糖:血糖升高可能提示糖尿病,降低可能提示低血糖癥。(2)血脂:血脂異??赡芴崾靖咧Y、動脈硬化等疾病。(3)肝功能:肝功能異??赡芴崾靖窝?、肝硬化等疾病。(4)腎功能:腎功能異??赡芴崾灸I炎、腎功能衰竭等疾病。8.4免疫學檢驗結果分析免疫學檢驗主要包括免疫球蛋白、補體、自身抗體等指標。以下為免疫學檢驗結果分析要點:(1)免疫球蛋白:免疫球蛋白異??赡芴崾久庖呷毕莶 ⒆陨砻庖咝约膊〉?。(2)補體:補體異??赡芴崾久庖邚秃衔锊?、感染性疾病等。(3)自身抗體:自身抗體陽性可能提示自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關節(jié)炎等。第九章實驗室質(zhì)量控制9.1室內(nèi)質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制是保證醫(yī)學實驗室檢測結果準確性和可靠性的重要環(huán)節(jié)。其主要目的是監(jiān)測和評估實驗室檢測過程的穩(wěn)定性,及時發(fā)覺和糾正可能出現(xiàn)的誤差。9.1.1控制品的選擇與制備控制品是用于室內(nèi)質(zhì)量控制的標準物質(zhì),應選擇與實際檢測樣本性質(zhì)相近的控制品。制備控制品時,應保證其具有良好的均勻性和穩(wěn)定性。9.1.2控制規(guī)則的設定控制規(guī)則是判斷檢測過程是否受控的依據(jù)。應根據(jù)實驗室的具體情況和檢測項目特點,合理設定控制規(guī)則。常見的控制規(guī)則包括:均值控制規(guī)則、標準差控制規(guī)則、極差控制規(guī)則等。9.1.3控制頻率的確定控制頻率是指在一定時間內(nèi)進行室內(nèi)質(zhì)量控制的次數(shù)。應根據(jù)檢測項目的穩(wěn)定性和風險程度,合理確定控制頻率。通常,控制頻率越高,檢測過程的穩(wěn)定性越容易得到保證。9.1.4控制數(shù)據(jù)的記錄與評價實驗室應詳細記錄室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù),包括控制品編號、檢測結果、控制規(guī)則判斷等。根據(jù)控制數(shù)據(jù),評價檢測過程的穩(wěn)定性和準確性,及時采取相應措施。9.2室間質(zhì)量控制室間質(zhì)量控制是指多個實驗室之間進行檢測結果比較和評價的過程。其主要目的是提高醫(yī)學實驗室的整體檢測水平,促進實驗室之間的交流與合作。9.2.1室間質(zhì)評組織與管理室間質(zhì)評組織負責制定室間質(zhì)評計劃、組織室間質(zhì)評活動、收集和分析室間質(zhì)評數(shù)據(jù)。實驗室應積極參與室間質(zhì)評活動,以提高檢測能力。(9).2.2室間質(zhì)評樣本的制備與分發(fā)室間質(zhì)評樣本應具有均勻性、穩(wěn)定性和代表性。制備好的室間質(zhì)評樣本應按照規(guī)定的要求進行分發(fā),保證實驗室在規(guī)定時間內(nèi)收到樣本。9.2.3室間質(zhì)評結果的評價與分析實驗室應按照室間質(zhì)評組織的要求,對室間質(zhì)評結果進行評價和分析。評價內(nèi)容包括:檢測結果的一致性、實驗室間的差異、實驗室自身的變化等。9.3質(zhì)量控制圖的繪制與應用質(zhì)量控制圖是反映實驗室檢測過程穩(wěn)定性的一種圖形工具。通過繪制質(zhì)量控制圖,可以直觀地觀察檢測

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論