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1伴侶動物A型流感病毒主動監(jiān)測技術要求集、樣本庫建立與管理質量、控制及結果分析的基本本標準適用于伴侶動物中A型流感病毒的診斷、檢測GB/T42066-2022急性病毒性感染呼吸道選擇合適規(guī)格拭子,將拭子頭完全伸入采樣對象咽部,拭子24縮略語VTM:病毒載液(VirusTranRNA:核糖核酸(RibonucleicAcPCR:聚合酶鏈式反應(PolymerasecDNA:互補脫氧核糖核酸(complementaryCt值:各反應管內熒光信號達到基線值時所經歷的5.1實時監(jiān)測國內伴侶動物A型流感病毒活動水平和流行趨勢;5.2實時追蹤A型流感病毒變異,及時發(fā)現(xiàn)新型流感病毒,并做出預警;5.3為伴侶動物流感疫情和動物源新型流感病毒向人類——該區(qū)域處于候鳥棲息地或候鳥遷徙路線;——該區(qū)域伴侶動物飼養(yǎng)密度或診療密度較大。6.2.1應監(jiān)測因呼吸道癥狀于寵物醫(yī)院就診病例和全部住院監(jiān)測,其它季節(jié)每兩個月對監(jiān)測點所有伴侶動物進和采樣日期,填寫“監(jiān)測信息表”(見附錄C)。確保監(jiān)測信息表與監(jiān)測對象一一對應3于各監(jiān)測點采集符合6.2要求的伴侶動物咽拭子,若采樣對象有明顯呼吸道癥狀則加采鼻拭子(體型較小無法采集鼻拭子的動物可蘸取鼻涕或不采集)。樣本采集應使用無菌拭子,拭子采集后裝入含況填寫“監(jiān)測信息表”。的cDNA,陰性對照使用RNaseFreeWater。實時熒光PCR49結果報告5A.1.2取出玻璃瓶,倒出去核酸試劑和去核酸酶試劑后用DEPC水洗三次,高壓滅菌A.1.3配置環(huán)境應包含生物安全柜或超凈臺,使用去核酸試劑和去核酸酶試劑擦拭后再用7.5試劑浸泡30min后使用DEPC水洗凈)分液器經高壓滅菌的玻璃瓶置于其中,紫外照射1h。6將新合成的引物瞬時離心后依照說明書用RNaseFreeWater溶解為100μM的儲存液。將新合成的探針瞬時離心后,依照說明書用RNaseFreeWater溶解為100μM的儲存液將配制好的正向引物工作液、反向引物工作液和探針工作液按照體積比1:1:1混合,可選用商品化的“一步法”實時熒光定量PCR試劑盒說明書配制5'-TATTCGTCTCAGGGAGCAAAAG5'-ATATCGTCTCGTATTAGTAGAAACAAGGGTGNA正向引物5'-TATTCCTCTCACCCAGCAAANA反向引物5'-ATATCCTCTCCTATTAGTAGAAACAAGGATTTT將新合成的引物瞬時離心后依照說明書用RNaseFreeWater溶解為100μM的儲存液。7將新合成的探針瞬時離心后,依照說明書用RNaseFreeWater溶解為100μM的儲存液將配制好的正向引物工作液、反向引物工作液和探

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