高中生物2015-2024年10年高考真題專題分類匯編-專題21細(xì)胞工程考點2動物細(xì)胞工程VIP

第第頁專題21細(xì)胞工程考點2動物細(xì)胞工程(2024黑、吉、遼，14，2分)從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，在傳代后的不同時間點檢測細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果如圖。下列敘述正確的是()A.傳代培養(yǎng)時，培養(yǎng)皿需密封防止污染B.選?、俚募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理C.直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)D.細(xì)胞增長進(jìn)入平臺期可能與細(xì)胞密度過大有關(guān)【答案】D傳代培養(yǎng)小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞，應(yīng)該將細(xì)胞置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，A錯誤；細(xì)胞通常在進(jìn)入平臺期之前的指數(shù)增長期進(jìn)行傳代，這樣可以提高細(xì)胞增長速率(該階段細(xì)胞代謝活性及酶活性高而穩(wěn)定，生活力強)并避免延遲期，①太接近延遲期(細(xì)胞數(shù)目少，還處于適應(yīng)環(huán)境階段，未充分活化，不宜選)，故選?、诘募?xì)胞更合理，B錯誤；貼壁生長的細(xì)胞需經(jīng)胰蛋白酶等處理制成細(xì)胞懸液后才能進(jìn)行傳代培養(yǎng)，C錯誤；圖中細(xì)胞增長進(jìn)入平臺期后，細(xì)胞數(shù)目比較穩(wěn)定，可能受到細(xì)胞密度過大、營養(yǎng)物質(zhì)有限等因素的制約，D正確。(2024江西，16，4分)（多選）某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S(含有多個不同的抗原決定基，每一個抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體)。為了建立一種靈敏、高效檢測S蛋白的方法，研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗-S單克隆抗體(如圖)。下列說法正確的是()A.利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長的骨髓瘤細(xì)胞B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B是相同的單克隆抗體C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng)，但不能凍存D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識別S蛋白【答案】BD骨髓瘤細(xì)胞不會發(fā)生貼壁生長現(xiàn)象，不需要用膠原蛋白酶處理使其分散，A錯誤；單克隆抗體A和單克隆抗體B來自同一類型雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲得的單克隆抗體相同，B正確；雜交瘤細(xì)胞可以大量增殖，當(dāng)培養(yǎng)瓶中細(xì)胞密度太大時，可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，也可冷凍保存，C錯誤；制備抗-S單克隆抗體時，注射的抗原為S蛋白，所得的單克隆抗體A和單克隆抗體B都能特異性識別S蛋白，D正確。(2024·浙江1月選考·13，2分)某動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時，需分裝培養(yǎng)，實驗操作過程如圖。下列敘述錯誤的是()A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C.③分裝時需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度D.整個過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行【答案】B②加培養(yǎng)液的目的是沖洗細(xì)胞，便于轉(zhuǎn)移。(2023海南，7，3分)某團(tuán)隊通過多代細(xì)胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細(xì)胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育【答案】A傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞增殖到貼滿瓶壁時會發(fā)生接觸抑制，A錯誤；據(jù)題干“將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細(xì)胞”可知，該過程中發(fā)生了染色體數(shù)目變異，B正確；XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞過程中，細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能發(fā)生了變化，即發(fā)生了細(xì)胞分化，C正確；若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可以通過去除胚胎干細(xì)胞的Y染色體等一系列處理獲得有功能的卵母細(xì)胞，用于繁殖后代，D正確。(2023廣東，3，2分)科學(xué)家采用體外受精技術(shù)獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長角羚羊體內(nèi)，使后者成功妊娠并產(chǎn)仔，該工作有助于恢復(fù)瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過程不涉及的操作是()A.超數(shù)排卵B.精子獲能處理C.細(xì)胞核移植D.胚胎培養(yǎng)【答案】C根據(jù)題干信息，題述過程主要涉及體外受精和胚胎移植技術(shù)，體外受精需要對精子進(jìn)行獲能處理，同時需要對雌性個體使用外源促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理，A、B均有涉及；在進(jìn)行胚胎移植前需要對早期胚胎進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)至桑葚胚或者囊胚階段進(jìn)行胚胎移植，D有涉及；細(xì)胞核移植技術(shù)一般用于克隆動物，題述過程沒有涉及，故選C。(2023北京，12，2分)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關(guān)制備過程的敘述不正確的是()A.需要使用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細(xì)胞【答案】D制備單克隆抗體時，需利用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體，制備過程中，需要對雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞等動物細(xì)胞進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確；單克隆抗體制備過程中，給小鼠注射特定抗原(PTH)，使其發(fā)生免疫反應(yīng)，從而獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，B正確；單克隆抗體制備過程中，利用抗原—抗體結(jié)合的原理進(jìn)行第二次篩選，可獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；篩選出的單個雜交瘤細(xì)胞具有特異性，通常只能分泌一種抗體，D錯誤。(2023遼寧，7，2分)大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞，可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯誤的是()A.懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B.用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C.當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時會影響細(xì)胞的增殖D.培養(yǎng)基pH不會影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量【答案】D流感病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，需用動物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)的動物細(xì)胞具有接觸抑制的特點，懸浮培養(yǎng)可有效避免接觸抑制現(xiàn)象的發(fā)生，A正確；動物細(xì)胞培養(yǎng)液中需加血清，以補充細(xì)胞生長所必需的天然營養(yǎng)成分，B正確；流感病毒為胞內(nèi)寄生，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)病毒達(dá)到一定數(shù)量時，會對細(xì)胞的增殖和代謝產(chǎn)生嚴(yán)重影響，甚至?xí)?dǎo)致細(xì)胞裂解，C正確；病毒的增殖依賴宿主細(xì)胞，而培養(yǎng)基的pH會影響宿主細(xì)胞生長，故培養(yǎng)基pH會通過影響單克隆細(xì)胞的生長影響病毒產(chǎn)量，D錯誤。（2021山東，15，2分）一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B.單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況【答案】.D單抗制備過程中有多次的篩選和鑒定，注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗的純度影響很小，注入小鼠體內(nèi)的抗原純度越高，說明抗原的種類越少，多抗的純度就會越高，A錯誤；單抗制備過程中并不是分離出漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的，而是融合以后進(jìn)行篩選，B錯誤；題干信息“也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗”可說明，非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72的表面有多種抗原決定簇，每種抗原決定簇都能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以利用該小鼠能制備出多種抗p72的單抗，C錯誤；非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72是一種抗原，其表面有多種抗原決定簇，每種抗原決定簇都能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以p72部分結(jié)構(gòu)改變，會導(dǎo)致改變部位刺激產(chǎn)生的單抗失效，但未改變部位刺激產(chǎn)生的抗體仍然能起作用，所以多抗仍有效，D正確。(2022湖北，7，2分)某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能的是()A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性【答案】A來自小鼠胚胎的腦組織神經(jīng)元細(xì)胞分化程度低，生長較快；將培養(yǎng)瓶密封會導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞缺氧而生長緩慢；高溫會使血清含有的促進(jìn)細(xì)胞生長和增殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)失活，而使神經(jīng)元細(xì)胞生長緩慢；人的細(xì)胞外液pH近中性，弱酸性的環(huán)境會導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞生長緩慢，故A項不是導(dǎo)致培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢的原因。(2022湖北，15，2分)納米氧化亞銅是一種納米材料。為了探究納米氧化亞銅對貼壁生長細(xì)胞活性的影響，研究者在培養(yǎng)基中添加一定量的納米氧化亞銅，8小時后觀察到細(xì)胞萎縮，體積變小，細(xì)胞核變大，細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)出現(xiàn)納米氧化亞銅富集現(xiàn)象，培養(yǎng)瓶中大量貼壁細(xì)胞脫落，出現(xiàn)細(xì)胞懸浮。根據(jù)該實驗現(xiàn)象，能得出的正確結(jié)論是()A.納米氧化亞銅改變了細(xì)胞的貼壁生長習(xí)性B.納米氧化亞銅對該細(xì)胞生長有抑制作用C.納米氧化亞銅能通過自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞D.納米氧化亞銅不影響細(xì)胞的新陳代謝【答案】A細(xì)胞貼壁生長會使細(xì)胞由于不斷增殖產(chǎn)生接觸抑制，而納米氧化亞銅會使貼壁細(xì)胞脫落，出現(xiàn)細(xì)胞懸浮，因此納米氧化亞銅改變了細(xì)胞的貼壁生長習(xí)性，A正確；根據(jù)題意可知納米氧化亞銅促進(jìn)了細(xì)胞的衰老，B錯誤；由此題干信息“細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)出現(xiàn)納米氧化亞銅富集現(xiàn)象”，說明納米氧化亞銅能進(jìn)入細(xì)胞，但不能由此推斷是通過自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞的，C錯誤；納米氧化亞銅會促進(jìn)細(xì)胞衰老，即影響了細(xì)胞的新陳代謝，D錯誤。(2022江蘇，14，2分)航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是()A.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動【答案】B動物細(xì)胞培養(yǎng)液中的某些成分(如血清中的蛋白質(zhì))不耐高溫，A錯誤；O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2可維持培養(yǎng)液的pH，培養(yǎng)動物細(xì)胞的氣體環(huán)境為95%空氣和5%CO2，B正確；心肌細(xì)胞高度分化，高度分化的細(xì)胞一般不具有分裂能力，C錯誤；心肌細(xì)胞節(jié)律性收縮，受內(nèi)臟運動神經(jīng)控制，是不隨意的，在神經(jīng)細(xì)胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的作用下跳動，D錯誤。(2022江蘇，19，3分)(多選)如圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過程，在人—鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會以隨機(jī)方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有()A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人—人、人—鼠、鼠—鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上【答案】ACD誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有滅活病毒誘導(dǎo)法，故加入滅活仙臺病毒的作用是促進(jìn)動物細(xì)胞融合，A正確；題述三種融合細(xì)胞為雜種細(xì)胞，都保留了人的部分染色體，即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ細(xì)胞均為人—鼠融合細(xì)胞，B錯誤；根據(jù)題干和題圖可知，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，由三種融合細(xì)胞所保留的人類染色體可知，Ⅱ中特有的染色體為2號染色體，Ⅲ中特有的染色體為17號染色體，Ⅰ、Ⅲ中共有而Ⅱ中沒有的染色體為X染色體，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中共有的染色體為11號染色體，因此芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上，C、D正確。(2022北京，11，2分)將黑色小鼠囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部分細(xì)胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚發(fā)育為黑白相間的小鼠(Mc)。據(jù)此分析，下列敘述錯誤的是()A.獲得Mc的生物技術(shù)屬于核移植B.Mc表皮中有兩種基因型的細(xì)胞C.注射入的細(xì)胞會分化成Mc的多種組織D.將接受注射的囊胚均分為二，可發(fā)育成兩只幼鼠【答案】A核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。故題干所述將黑色小鼠囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部分細(xì)胞注射到白色小鼠囊胚腔中，使之發(fā)育成嵌合鼠不屬于核移植，A錯誤。Mc為黑白相間的小鼠，其表皮中具有黑色和白色兩種基因型的細(xì)胞，B正確。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞將發(fā)育成胎兒的各種組織，C正確；利用胚胎分割技術(shù)將接受注射的囊胚均分為二，可發(fā)育成兩只幼鼠，D正確。(2020天津，1，4分)在克隆哺乳動物過程中，通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的()A.卵原細(xì)胞B.初級卵母細(xì)胞C.次級卵母細(xì)胞D.卵細(xì)胞【答案】CMⅡ時期的次級卵母細(xì)胞里含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，故克隆哺乳動物時常選用去核的MⅡ時期的次級卵母細(xì)胞作為核移植的受體細(xì)胞，C正確。(2020江蘇單科，23，3分)小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞，制備流程如圖所示。下列敘述錯誤的是(多選)()A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)【答案】ABC哺乳動物雄性精液中精子數(shù)量很多，不需要額外注射激素促進(jìn)精子的產(chǎn)生，為獲得更多的囊胚，應(yīng)采用激素注射促進(jìn)雌鼠產(chǎn)生更多的卵細(xì)胞，A錯誤。細(xì)胞a、b都是由同一個受精卵經(jīng)有絲分裂而來的，遺傳物質(zhì)相同，兩者全能性高低不同并不是由遺傳物質(zhì)不同導(dǎo)致的；細(xì)胞a為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，分化程度較低，細(xì)胞全能性較高，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，細(xì)胞b為滋養(yǎng)層細(xì)胞，分化程度較高，細(xì)胞全能性較低，將來發(fā)育成胎膜和胎盤，B錯誤。胰蛋白酶可以催化細(xì)胞之間的蛋白質(zhì)分解，進(jìn)而可獲得分散的胚胎干細(xì)胞，C錯誤。胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞需置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，D正確。(2020浙江7月選考，15，2分)下列關(guān)于病毒的敘述，錯誤的是()A.有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動物細(xì)胞的融合B.適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可提高對新型冠狀病毒的抵御能力C.在某人的分泌物中檢測到新型冠狀病毒，推測該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞D.用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性【答案】C動物細(xì)胞工程中，可利用滅活的病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合，A正確；新型冠狀病毒作為病原體，可激發(fā)機(jī)體特異性免疫，適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量和活性，例如注射免疫活性物質(zhì)，刺激機(jī)體免疫細(xì)胞活化，可提高機(jī)體清除病原體的能力，B正確；病毒為專一性活細(xì)胞內(nèi)寄生生物，只能在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行增殖，C錯誤；高溫高壓滅菌的原理之一是蛋白質(zhì)在高溫條件下變性，其空間結(jié)構(gòu)被破壞，活性徹底喪失，使得病原體失去侵染、繁殖和致病的能力，D正確。(2018江蘇單科，22，3分)如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是(多選)()A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因【答案】BC植物細(xì)胞壁會阻礙細(xì)胞融合，故植物細(xì)胞融合前需先用酶解法除去細(xì)胞壁，A錯誤；細(xì)胞間的融合需在相應(yīng)的誘導(dǎo)處理下才能完成(如電激、聚乙二醇等，動物細(xì)胞還可用滅活病毒誘導(dǎo)融合)，B正確；細(xì)胞融合過程出現(xiàn)了膜的變形，故細(xì)胞融合過程與細(xì)胞膜流動性有關(guān)，C正確；c細(xì)胞中具有a、b細(xì)胞的全部基因，但這些基因不一定能全部表達(dá)，D錯誤。(2017江蘇單科，11，2分)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是()A.H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌B.應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C.鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體【答案】D本題考查免疫調(diào)節(jié)、基因工程及胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容。單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌，A錯誤；應(yīng)選用囊胚期滋養(yǎng)層細(xì)胞做性別鑒定，B錯誤；因要利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥，因此用于胚胎移植的應(yīng)是鑒定后的雌性胚胎，C錯誤；用特定的抗原免疫母?？色@得相應(yīng)的抗體，D正確。知識拓展正確理解生物反應(yīng)器生物反應(yīng)器指用于合成藥物的轉(zhuǎn)基因動物器官。生物反應(yīng)器有乳腺生物反應(yīng)器、膀胱生物反應(yīng)器等。乳腺生物反應(yīng)器要求轉(zhuǎn)基因動物一定為雌性，膀胱生物反應(yīng)器則對轉(zhuǎn)基因動物的性別無要求。(2016江蘇單科，9，2分)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是()A.PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動物，其線粒體DNA來自供卵母體【答案】D植物細(xì)胞融合前需先用酶解法去掉細(xì)胞壁，形成原生質(zhì)體，再用PEG促進(jìn)原生質(zhì)體融合，A錯誤；人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，不用原生質(zhì)體為材料，B錯誤；骨髓瘤細(xì)胞需與經(jīng)免疫處理過的B淋巴細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選培養(yǎng)才能獲得單克隆抗體，C錯誤；動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核取出，移入已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，核移植克隆動物的線粒體DNA來自供卵母體。解題關(guān)鍵仔細(xì)審讀抓“關(guān)鍵詞”及相關(guān)知識的掌握是解題的關(guān)鍵。如A項植物細(xì)胞需要去細(xì)胞壁，不能“直接”融合；B項“人工種子”是用組織培養(yǎng)得到的胚狀體來制備的；C項“免疫處理”處理的不是骨髓瘤細(xì)胞。(2024廣東，17，11分)某些腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1與細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)表面的PD-1結(jié)合能抑制CTL的免疫活性，導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。免疫檢查點療法使用單克隆抗體阻斷PD-L1和PD-1的結(jié)合，可恢復(fù)CTL的活性，用于腫瘤治療。為進(jìn)一步提高療效，研究者以黑色素瘤模型小鼠為材料，開展該療法與化療的聯(lián)合治療研究。部分結(jié)果見圖?；卮鹣铝袉栴}:(1)據(jù)圖分析，療法的治療效果最佳，推測其原因是。

(2)黑色素瘤細(xì)胞能分泌吸引某類細(xì)胞靠近的細(xì)胞因子CXCL1。為使CTL響應(yīng)此信號，可在CTL中導(dǎo)入基因后再將其回輸小鼠體內(nèi)，從而進(jìn)一步提高治療效果。該基因的表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)定位于CTL的(答位置)，且基因?qū)牒蟛挥绊慍TL的能力。

(3)某興趣小組基于現(xiàn)有抗體—藥物偶聯(lián)物的思路提出了兩種藥物設(shè)計方案。方案一:將化療藥物與PD-L1單克隆抗體結(jié)合在一起。方案二:將化療藥物與PD-1單克隆抗體結(jié)合在一起。你認(rèn)為方案(填“一”或“二”)可行，理由是。

【答案】(1)聯(lián)合聯(lián)合療法中活化的細(xì)胞毒性T細(xì)胞(活化的CTL)的數(shù)量最多(2)CXCL1受體表面裂解靶細(xì)胞(3)一可以使化療藥物定向作用于腫瘤細(xì)胞，實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷解析(1)通過圖a分析得出，聯(lián)合療法腫瘤體積最小，根據(jù)圖b分析得出，聯(lián)合療法中活化的CTL數(shù)量最多，且CTL參與細(xì)胞免疫，可以作用于腫瘤細(xì)胞，因此綜合分析得出聯(lián)合療法的治療效果最佳。(2)黑色素瘤細(xì)胞能分泌細(xì)胞因子CXCL1吸引某類細(xì)胞靠近，在CTL中導(dǎo)入CXCL1受體基因，該基因表達(dá)后，表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)定位于CTL的表面，且不影響CTL裂解靶細(xì)胞的能力，這樣可以增大CTL與腫瘤細(xì)胞接近的機(jī)會，從而進(jìn)一步提高治療效果。(3)將PD-L1單克隆抗體與化療藥物結(jié)合在一起，該抗體會與腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1特異性結(jié)合，把藥物定向地帶到靶細(xì)胞所在位置，實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。(2023重慶，16，10分)妊娠與子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的功能密切相關(guān)。某研究小組通過如圖所示的實驗流程獲得了子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞，以期用于妊娠相關(guān)疾病的研究。(1)手術(shù)獲得的皮膚組織需在低溫下運至實驗室，低溫對細(xì)胞中各種蛋白質(zhì)的作用為。

(2)過程①中，誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞時，需提高成纖維細(xì)胞中4個基因的表達(dá)量，可采用技術(shù)將這些基因?qū)朐摷?xì)胞。這4個基因的主要作用為:M基因促進(jìn)增殖，S基因和C基因控制干細(xì)胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。若成纖維細(xì)胞形成腫瘤細(xì)胞，最有可能的原因是基因過量表達(dá)。

(3)培養(yǎng)iPS細(xì)胞時，應(yīng)對所處環(huán)境定期消毒以降低細(xì)胞被污染風(fēng)險?？捎米贤饩€進(jìn)行消毒的是(多選)。

A.培養(yǎng)基B.培養(yǎng)瓶C.細(xì)胞培養(yǎng)室D.CO2培養(yǎng)箱(4)過程②中，iPS細(xì)胞經(jīng)歷的生命歷程為。PCR技術(shù)可用于檢測子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞關(guān)鍵基因的mRNA水平，mRNA需經(jīng)過才能作為PCR擴(kuò)增的模板。

【答案】(1)抑制酶的活性(降低蛋白質(zhì)或酶的活性)，防止蛋白質(zhì)變性(維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，抑制蛋白質(zhì)變性)(2)轉(zhuǎn)基因(顯微注射、病毒介導(dǎo)、基因工程。但是答農(nóng)桿菌介導(dǎo)、侵染，基因槍均不對)M(3)CD(4)增殖分化(分裂分化)逆轉(zhuǎn)錄解析(1)低溫可以抑制酶的活性，防止蛋白質(zhì)變性，皮膚組織在低溫下運至實驗室，可使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)維持正常的結(jié)構(gòu)。(2)將外源基因?qū)雐PS細(xì)胞(動物受體細(xì)胞)內(nèi)，通常采用顯微注射法，腫瘤細(xì)胞能無限增殖，根據(jù)題干“M基因促進(jìn)增殖”推測，可能是M基因過量表達(dá)，造成成纖維細(xì)胞無限增殖形成腫瘤細(xì)胞。(3)根據(jù)無菌技術(shù)要求，對細(xì)胞培養(yǎng)室和CO2培養(yǎng)箱可以采用紫外線進(jìn)行消毒，而對培養(yǎng)基和培養(yǎng)瓶需要進(jìn)行滅菌處理，C、D正確。(4)由圖可知，過程②中，人iPS細(xì)胞形成了體腔上皮，該過程細(xì)胞數(shù)量增加，并且細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，所以該過程發(fā)生了細(xì)胞的分裂分化(或者增殖分化)；PCR是一項根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外適宜條件下，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)，其擴(kuò)增的模板為DNA，若想利用PCR技術(shù)檢測子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞關(guān)鍵基因的mRNA水平，mRNA需經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程形成DNA后，才可作為PCR擴(kuò)增的模板。(2023湖北，22，16分)某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}:(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)(填“需要”或“不需要”)通過原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對細(xì)胞膜的作用是

。

(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基)，該培養(yǎng)基對和生長具有抑制作用。

(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是。

(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是。

【答案】(1)不需要改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，使兩個細(xì)胞接觸處細(xì)胞膜的脂類分子發(fā)生疏散和重組，從而導(dǎo)致細(xì)胞膜相互親和，促進(jìn)融合(2)未融合的親本細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞(3)篩選能分泌抗病毒外殼蛋白A單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)④解析(1)已免疫脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)不需要通過原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量；PEG可以改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，使兩個細(xì)胞接觸處細(xì)胞膜的脂類分子發(fā)生疏散和重組，從而導(dǎo)致細(xì)胞膜相互親和，促進(jìn)融合。(2)誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，會出現(xiàn)雜交瘤細(xì)胞、未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞，后兩種細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不能生長，雜交瘤細(xì)胞可以生長。(3)雜交瘤細(xì)胞有多種，需用抗體陽性檢測篩選出能分泌抗病毒外殼蛋白A單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)DNA連接酶催化磷酸二酯鍵的形成，可催化一個DNA片段3'端的羥基與另一個DNA片段5'端的磷酸基團(tuán)連接起來。[2022福建，21（二）]美西螈具有很強的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下。回答下列問題:(二)抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示:(1)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射和。

(2)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長特點是。

(3)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，根據(jù)抗原—抗體雜交原理，需加入進(jìn)行專一抗體檢測，檢測過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體，原因是。

(4)步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測巨噬細(xì)胞。

【答案】(二)(1)CD14蛋白/CD14抗原分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞(2)能在體外無限增殖(3)CD14蛋白參與形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，有的不能分泌抗CD14抗體(4)小鼠腹水解析(二)(1)步驟①要注射CD14蛋白(CD14抗原)可產(chǎn)生能分泌抗CD14抗體的已免疫的B細(xì)胞；步驟⑤向小鼠注射能分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞。(2)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，其特點是能在體外無限增殖。(3)專一抗體檢測是檢測其中是否含有抗CD14蛋白的抗體，因此用CD14蛋白檢測。由于形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，因此，有些雜交瘤細(xì)胞并不能分泌抗CD14抗體。(4)步驟⑥需從小鼠的腹水中提取抗CD14抗體。(2022海南，20，13分)以我國科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊將OSNL(即4個基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫)導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞(CEFs)，誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)，再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)，然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖?；卮鹣铝袉栴}。(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細(xì)胞懸液，雞胚組織剪碎后需用處理。動物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的需求。

(2)體外獲取OSNL的方法有(答出1種即可)。若要在CEFs中表達(dá)外源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達(dá)載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動子和等。啟動子是識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動。(3)iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是。

(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是

。(5)該實驗流程中用到的生物技術(shù)有(答出2點即可)。

【答案】(1)胰蛋白酶、膠原蛋白酶血清(2)基因文庫法、PCR技術(shù)、人工合成法(任答1種)終止子RNA聚合酶目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)(3)基因的選擇性表達(dá)(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞(iPS)，再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)的技術(shù)；體細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)(5)基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)解析(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)時，動物組織剪碎后需要用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理一段時間，以便獲得單個細(xì)胞。使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動物細(xì)胞時，通常需要添加血清等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的需求。(2)體外獲取目的基因的方法有多種，如基因文庫法、PCR技術(shù)、人工合成法?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子等結(jié)構(gòu)，啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了啟動子才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。(3)iPGCs細(xì)胞是由iPS細(xì)胞增殖、分化而來的，兩者在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能方面不同的根本原因是基因的選擇性表達(dá)。(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)存在明顯的區(qū)別，主要表現(xiàn)在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞(iPS)，再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)的技術(shù)；而體細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。(5)分析題意可知，該實驗流程中用到的生物技術(shù)有基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。(2022遼寧，24，10分)某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中，需要表達(dá)N蛋白胞外段，制備相應(yīng)的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1圖1(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時，選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，目的是。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞，質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”)。

(2)質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。

Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進(jìn)行免疫后，取小鼠脾組織用酶處理，制成細(xì)胞懸液，置于含有混合氣體的中培養(yǎng)，離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。

(4)用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，將其接種到96孔板，進(jìn)行培養(yǎng)。用技術(shù)檢測每孔中的抗體，篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株，經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng)，收集，提取單克隆抗體。

(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合，形成，實現(xiàn)特異性治療。

【答案】(1)便于重組DNA分子的篩選雙分子層中(2)包膜、衣殼、N蛋白胞外段mRNA(3)胰蛋白酶、膠原蛋白CO2培養(yǎng)箱(4)克隆化抗原—抗體雜交細(xì)胞培養(yǎng)液(5)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)解析(1)重組質(zhì)粒中的標(biāo)記基因是用來篩選重組DNA分子的。質(zhì)粒DNA為極性分子，需包在脂質(zhì)體雙分子層中。(2)題述慢病毒由包膜、衣殼、N蛋白胞外段mRNA組成。(3)制備雜交瘤細(xì)胞時，需取已免疫的小鼠脾組織，并用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理，制成細(xì)胞懸液，在含有混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，離心收集B淋巴細(xì)胞，再與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。(4)用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，將其接種到多孔板上進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測每孔中的抗體，篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株，經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng)，從細(xì)胞培養(yǎng)液中提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合，形成抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)，實現(xiàn)特異性治療。(2021湖南，22，15分)M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}:(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的斷開。

(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是。

(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為(答出兩點即可)，功能上具有。

(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動物:以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路

。

【答案】(1)限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)磷酸二酯鍵(2)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害(3)體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯發(fā)育的全能性(4)B提取此克隆動物的肝臟蛋白，作為抗原，與M蛋白的單克隆抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交，若未出現(xiàn)雜交帶，證明M基因已失活解析(1)限制酶識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸間的磷酸二酯鍵斷開。(2)動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要無菌、無毒等適宜環(huán)境，因此動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液及所有培養(yǎng)用具使用前應(yīng)進(jìn)行無菌處理；通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。(3)哺乳動物核移植分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，其中胚胎細(xì)胞核移植較易成功，因為與胚胎細(xì)胞相比，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。胚胎干細(xì)胞簡稱ES細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性。(4)制備單克隆抗體時，應(yīng)將從免疫小鼠中得到的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合并篩選出可大量產(chǎn)生M蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞。為確定克隆動物A中M基因是否失活，可利用抗原—抗體特異性結(jié)合的原理，將制備的M蛋白的單克隆抗體與轉(zhuǎn)基因動物肝臟中提取的蛋白質(zhì)混合，觀察是否產(chǎn)生雜交帶，若未出現(xiàn)雜交帶，說明M基因已失活。(2020課標(biāo)全國Ⅰ，38，15分)為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}:(1)上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是。

(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實驗步驟:。

(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是。

(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有(答出2點即可)。

【答案】(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液(3)選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)解析(1)結(jié)合題干信息分析題圖可推斷，給小鼠甲注射病毒A的目的是讓小鼠甲產(chǎn)生免疫反應(yīng)，以獲得能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實驗步驟:取小鼠甲脾臟，用剪刀剪碎，加入胰蛋白酶處理，使其分散成單個細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液。(3)分析題圖可知，圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種細(xì)胞核的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生存，即由B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞才能生存。圖中篩選2所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，也可以將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)。(2018課標(biāo)全國Ⅲ，38，15分)2018年《細(xì)胞》期刊報道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目(填“減半”“加倍”或“不變”)。

(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是。

(3)在哺乳動物核移植的過程中，若分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目(填“相同”或“不同”)，性染色體組合(填“相同”或“不同”)。

【答案】(1)將動物的一個細(xì)胞核，移入一個已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對容易(3)相同不同解析(1)核移植是指將動物的一個細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，并最終發(fā)育為動物個體?？寺『矬w細(xì)胞的染色體數(shù)等于重組細(xì)胞中的染色體數(shù)，等于供核細(xì)胞中的染色體數(shù)。(2)哺乳動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對容易，而哺乳動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性十分困難，因此，動物體細(xì)胞核移植獲得克隆猴的難度也就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。(3)哺乳動物雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞中常染色體數(shù)目相同，雌性性染色體組成為XX，雄性性染色體組成為XY，因此題中所得的兩個克隆動物體細(xì)胞常染色體數(shù)目相同，性染色體組合不同。(2017課標(biāo)全國Ⅲ，38，15分)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}:(1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA)，則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，原因是。

(2)某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中，在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為，加入了作為合成DNA的原料。

(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實驗:將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對照，培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。①由圖2可知:當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。

②僅根據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若