人教版高中生物選修3全冊每節(jié)知識點(diǎn)總結(jié)及同步練習(xí)

人教版高中生物選修3全冊每節(jié)知識點(diǎn)總結(jié)及同步練習(xí)

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具

分層設(shè)計(jì)助學(xué)助記認(rèn)知更深刻

理一理

來源：主要從原核生物中分離純化

“二二作用：識別雙鏈DNA分子中某種

酸內(nèi)切酶〈----------------------

,,71,特定的核甘酸序列,并切割

（分子手術(shù)刀）

特定部位的磷酸二酯鍵

DNA結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端

重

組（常用種類：E?coZ/DNA連接酶、

技DNA連接酶,T』DNA連接酶

術(shù)（分子縫合針）］作用實(shí)質(zhì)：在兩個(gè)DNA片段之間

的

基

形成磷酸二酯鍵

本

工'常用載體：皿、入噬菌體的衍生物、

具

動(dòng)植物病毒等

載體能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存;

（分子運(yùn)V具有一個(gè)至多個(gè)限制能切割位點(diǎn).

輸車）供外源DNA片段插入其中；

具有標(biāo)記基因.供重組DNA的鑒

〔定和選擇

判一判

1.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均能特異性識別6個(gè)核甘酸序列。（X）

2.DNA連接酶能將目的基因與載體的黏性末端通過形成氫鍵而連接起來。（X）

3.Eco〃DNA連接酶既可連接平末端，又可連接黏性末端。（X）

4.重組DNA分子上的抗性基因可用于檢測目的基因是否表達(dá)。（X）

II

5.—CATG—和一GGATCC—序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同。（J）

6.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)。（義）

7.若用家蠶作為表達(dá)基因A的受體，則不可選用噬菌體作為載體。（J）

8.載體必須具備的條件之一是：具有一個(gè)至多個(gè)限制性酶切點(diǎn)，以便與外源基因連

接。（V）

悟一悟

1.限制前是一類酶而不是i種酶。

2.限制酶不切割自身DNA的原因是該生物中不存在該酶的識別序列或識別序列已被

修飾。

3.獲取目的基因和切割載體時(shí)常使用同種限制酶，其目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。

也可用不同的限制酶切割，但必須能產(chǎn)生相同的黏性末端。不同限制酶切出的黏性末端

II

未必不同，如GATC和GGATCC序列不同，但經(jīng)限制酶處理后形成的黏性末端相同。

4.限制酶作用于磷酸二酯鍵，而不是氫鍵。獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切目的基

因的兩端、共產(chǎn)生4個(gè)黏性末端或平末端。

5.DNA連接酶是將DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口連接起來，因此DNA連接酶不需要模

板。若為黏性末端，則兩個(gè)DNA片段要具有互補(bǔ)的黏性末端才能通過DNA連接酶連接起

來；若為平末端，則堿基相同且兩條鏈序列相反才可用DNA連接酶連接。

6.質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力

的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，它是基因工程中最常用的載體,其上的基因?qū)儆诩?xì)胞質(zhì)基因。

7.一般來說，天然質(zhì)粒往往不能滿足載體必須具備的全部條件，目前真正被用作載

體的質(zhì)粒都是經(jīng)過人工改造的。

感悟體會(huì)：

練一練

“2019.遼寧會(huì)考］將單個(gè)的脫氧核甘酸連接成DNA分子的主要的酶是（）

A.DNA連接酶B.DNA酶

C.DNA解旋酶D.DNA聚合酶

解析：DNA連接酶被用于將兩DNA黏性末端間的磷酸二酯鍵連接起來，常用于基因

工程，A錯(cuò)誤；DNA酶可以水解DNA,斷開脫氧核昔酸之間的磷酸二酯鍵，B錯(cuò)誤；DNA

解旋酶用于DNA的復(fù)制，其作用是將DNA雙鏈間的氫鍵斷開，C錯(cuò)誤；DNA復(fù)制時(shí)，需

要DNA聚合酶等酶,DNA聚合酶的作用是將單個(gè)的脫氧核甘酸連接成DNA分子,D正確。

答案：D

2.［2019?河南會(huì)考］下列哪項(xiàng)不屬于基因工程的基本工具（）

A.DNA連接酶B.運(yùn)載體

C.DNA聚合酶D.限制性核酸內(nèi)切酶

解析：DNA連接酶能夠?qū)⑾拗泼盖懈畹哪┒诉M(jìn)行連接，是基因工程的“針線”，A

不符合題意；運(yùn)載體是基因工程的操作工具之一，B不符合題意；DNA聚合酶在復(fù)制過程

中可催化合成DNA分子,C符合題意；限制性核酸內(nèi)切酶能特異性識別特定的核甘酸系列，

并在特定的核昔酸序列處切割質(zhì)粒和目的基因，是基因工程中剪切目的基因的工具，稱為基

因工程的“剪刀”，D不符合題意。

答案：C

3.［2019?湖南會(huì)考］基因工程的基本工具——基因的“針線”是指（）

A.DNA連接酶B.蛋白酶

C.限制性核酸內(nèi)切酶D.運(yùn)載體

解析：DNA連接酶是基因工程的針線，A正確；蛋白酶不是基因工程的工具酶，B

錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的剪刀，C錯(cuò)誤；運(yùn)載體是基因工程中運(yùn)輸目的基因的

工具，D錯(cuò)誤。

答案：A

4.［2019?江蘇會(huì)考］下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，正確的是（）

A.是細(xì)菌等細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的環(huán)狀DNA

B.是細(xì)菌細(xì)胞中廣泛存在的細(xì)胞器

C.攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，只能停留在該細(xì)胞內(nèi)獨(dú)立復(fù)制

D.在進(jìn)行基因工程操作中，被用作載體的質(zhì)粒都是天然質(zhì)粒

解析：質(zhì)粒是雙鏈環(huán)狀DNA分子，能自主復(fù)制，主要存在于細(xì)菌等原核細(xì)胞的細(xì)胞

質(zhì)中，故A正確；質(zhì)粒不是細(xì)胞器，故B錯(cuò)誤；質(zhì)粒攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，可與

受體細(xì)胞的DNA整合，并隨著受體DNA的復(fù)制而復(fù)制，故C錯(cuò)誤；作為基因工程的運(yùn)載

體，要具有限制酶的切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因等條件，而天然的質(zhì)粒不會(huì)同時(shí)具有這些條件，需

要經(jīng)過人工改造后才能用作基因工程的運(yùn)載體，故D錯(cuò)誤。

答案：A

I二測洛彈題組呈現(xiàn)對點(diǎn)自測訓(xùn)練更精準(zhǔn)

考點(diǎn)一限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”

“2019?河北高二期末］基因工程操作過程中，DNA的“手術(shù)刀”指的是（）

A.DNA酶B.DNA聚合酶

C.限制酶D.解旋酶

解析：DNA酶可催化DNA水解，不是基因工程的基本工具，A錯(cuò)誤；DNA聚合酶

可催化DNA的合成，不是基因工程的基本工具，B錯(cuò)誤；限制酶是DNA的“手術(shù)刀”，C

正確；解旋酶可催化DNA的雙鏈打開，不是基因工程的基本工具，D錯(cuò)誤。

答案：C

2.［2019?陜西高一期末］在基因工程的操作過程中，利用限制性內(nèi)切醐（限制性核酸內(nèi)

切酶）進(jìn)行（）

A.DNA的連接B.DNA的剪切

C.DNA的水解D.DNA的解旋

解析：限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中特

定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，即限制性內(nèi)切酶進(jìn)行的是DNA的剪切。

答案：B

考點(diǎn)二DNA連接酶——“分子縫合針”

4.［2019.河北高二期末］下列關(guān)于DNA連接酶的說法，正確的是（）

A.作用于DNA的氫鍵

B.都是從原核生物中分離出來的

C.都能連接平末端

D.都能連接黏性末端

解析：DNA連接酶作用于DNA分子中的磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；DNA連接酶既可以

從原核生物中分離得到，也可以從病毒中分離得到，B錯(cuò)誤；EcHiDNA連接酶只能連接黏

性端，不能連接平末端，C錯(cuò)誤；DNA連接酶和T&DNA連接酶都能連接黏性末端，

D正確。

答案：D

5.［2019.陜西高二期中］下列有關(guān)DNA連接酶的敘述，正確的是（）

①催化具有相同黏性末端的DNA片段之間進(jìn)行連接

②催化具有不同黏性末端的DNA片段之間進(jìn)行連接

③催化兩個(gè)黏性末端互補(bǔ)堿基間氫鍵的形成

④催化脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵的形成

A.①④B.③④

C.①②D.②③

解析：DNA連接酶分為E-coliDNA連接酶和T&DNA連接酶，這二者都能連接黏性

末端，此外T&DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低；DNA連接酶

將斷開的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶可以催化具

有相同的黏性末端的DNA片段之間進(jìn)行連接，①正確、②錯(cuò)誤；DNA連接酶催化脫氧核

糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵的形成，而兩個(gè)黏性末端互補(bǔ)堿基間氫鍵的形成不需要DNA連

接酶的催化，③錯(cuò)誤、④正確。因此，正確的是①④。

答案：A

考點(diǎn)三基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”

6.［2019?河北高二期末］下列有關(guān)基因工程中的載體的說法，錯(cuò)誤的是（）

A.某些動(dòng)物病毒也可作為載體

B.單鏈RNA也可作為目的基因的載體

C.應(yīng)具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)

D.具有特殊的標(biāo)記基因

解析：常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、入噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒，A正確；單鏈RNA

不能作為基因的載體，B錯(cuò)誤；基因工程的運(yùn)載體必須要有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，便于與

目的基因連接形成重組DNA分子，C正確；基因工程的運(yùn)載體必須具有特殊的標(biāo)記基因，

以便檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，D正確。

答案：B

7.[2019.黑龍江哈爾濱三中高二期中]下列哪項(xiàng)不是基因工程中經(jīng)常使用的載體（）

A.細(xì)菌質(zhì)粒B.入噬菌體的衍生物

C.動(dòng)植物病毒D.細(xì)菌擬核區(qū)的DNA

解析：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、X噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒；質(zhì)粒是一種裸露的、

結(jié)構(gòu)簡單,獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。綜上所

述，A、B、C不符合題意，D符合題意。

答案：D

8.[2019?陜西渭南市尚德中學(xué)高二期中]質(zhì)粒作為基因工程的載體，下列說法正確的

是（）

A.質(zhì)粒只有一個(gè)限制酶切割位點(diǎn)

B.質(zhì)粒上有特殊的標(biāo)記基因

C.質(zhì)粒不能在受體細(xì)胞中自我復(fù)制

D.質(zhì)粒上不含堿基T

解析：質(zhì)粒作為載體應(yīng)該含有一個(gè)到多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，A錯(cuò)誤；質(zhì)粒上應(yīng)該具

有標(biāo)記基因，用于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，B正確；質(zhì)粒作為載體必須能在受體細(xì)

胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，C錯(cuò)誤；質(zhì)粒的本質(zhì)是雙鏈DNA,含有堿基A、T,G、C,D錯(cuò)誤。

答案：B

9.[2019?東北育才學(xué)校高二期中]質(zhì)粒是細(xì)菌中的有機(jī)分子，下列對其描述，正確的

是（）

A.質(zhì)粒完全水解后最多可產(chǎn)生4種化合物

B.質(zhì)粒能夠自主復(fù)制

C.質(zhì)粒中含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

D.質(zhì)粒是基因工程的工具醐

答案：B

解析：質(zhì)粒是一種具有自主復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，不含游離的磷酸

基團(tuán)，完全水解后最多可產(chǎn)生6種化合物：脫氧核糖、磷酸、4種含氮的堿基，A、C錯(cuò)誤，

B正確；質(zhì)粒是基因工程的工具——載體，而不是工具酶，D錯(cuò)誤。

課時(shí)測評難易適中應(yīng)考更高效

基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)

一、選擇題（每小題5分，共60分）

1.[2019.廣東實(shí)驗(yàn)中學(xué)高一期末]實(shí)施基因工程的最終目的是（）

A.定向改造生物的遺傳性狀

B.對DNA分子進(jìn)行重組

C.提取完整的DNA分子

D.將目的基因提取出來

解析：基因工程的核心技術(shù)是DNA重組技術(shù)，即利用供體生物的遺傳物質(zhì)，或人工

合成的基因，經(jīng)過體外切割后與適當(dāng)?shù)妮d體連接起來，形成重組DNA分子，然后將重組

DNA分子導(dǎo)入到受體細(xì)胞或受體生物構(gòu)建轉(zhuǎn)基因生物，該種生物就可以按人類事先設(shè)計(jì)好

的藍(lán)圖表現(xiàn)出另外一種生物的某種性狀，因此基因工程的最終目的是定向地改造生物的遺傳

性狀，A正確。

答案:A

2"2019?河北高二期末]以下經(jīng)限制能切割形成的片段中，能通過DNA連接醐與片段

-G

一CTTAA連接起來的是（）

AATTC--CTGCA

A.B.

—G

解析：根據(jù)題干信息分析，已知一個(gè)黏性末端為一CTTAA,其露出來的堿基序列是

—TTAA—,而DNA連接酶連接的另一個(gè)黏性末端的堿基序列應(yīng)該與之發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，

AATTC

則另一個(gè)黏性末端露出來的對應(yīng)的堿基序列應(yīng)該是一AATT—,即G,A正確；

__（、

—CTGCA

-G露出來的堿基序列不能與—CTTAA之間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，B錯(cuò)誤；

—G—AC—G5

一CTTAA為黏性末端，而一TG為平末端，c錯(cuò)誤；一CTTAA為黏性末端，而'CG

為平末端，D錯(cuò)誤。

答案：A

3.[2019.福建省泉州市泉港區(qū)第一中學(xué)高二期末]下列關(guān)于限制酶的說法，正確的是

（）

A.限制酶廣泛存在于真核生物中，其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)

B.不同的限制酶切割DNA后都會(huì)形成黏性末端

C.一種限制酶只能識別一種特定的核昔酸序列

D.限制酶識別的序列均由6個(gè)核甘酸組成

解析：限制酶主要存在于原核生物中，其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；不同的限制酶

切割DNA后會(huì)形成黏性末端或平末端，B錯(cuò)誤；一種限制酶只能識別一種特定的核甘酸序

列，且在特定的位點(diǎn)打開磷酸二酯鍵，C正確；切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均能特異性地

識別核甘酸序列，但識別的核昔酸序列不一定是6個(gè)核甘酸，D錯(cuò)誤。

答案:C

4.[2019?北京四中高二期中]下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，正確的是（）

A.細(xì)菌質(zhì)粒和真核細(xì)胞DNA的基本結(jié)構(gòu)單位不同

B.細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過程是在細(xì)胞外獨(dú)立進(jìn)行的

C.質(zhì)粒是原核細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成的場所

D.質(zhì)粒是能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子

解析：細(xì)菌質(zhì)粒和真核細(xì)胞DNA的基本結(jié)構(gòu)單位相同，都是脫氧核甘酸，A錯(cuò)誤；

有的質(zhì)粒可以整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上，如Ti質(zhì)粒的T-DNA,B錯(cuò)誤；原核細(xì)胞

中蛋白質(zhì)合成的場所是核糖體，C錯(cuò)誤；質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA

分子，D正確。

答案：D

5.[2019.北京四中高二期中I下列有關(guān)DNA連接酶的表述，正確的是（）

A.促進(jìn)脫氧核糖核甘酸之間形成氫鍵

B.促進(jìn)脫氧核糖核甘酸之間形成磷酸二酯鍵

C.只能連接具有黏性末端的DNA片段

D.能連接經(jīng)各種限制酶作用后的不同來源的DNA片段

解析：DNA連接酶能連接兩個(gè)脫氧核甘酸片段，形成磷酸二酯鍵，使脫氧核糖核普

酸之間形成磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤、B正確；Eco〃DNA連接酶、TdDNA連接酶，這二者都

能連接黏性末端，此外T“DNA連接酶還可以連接平末端，C錯(cuò)誤；DNA連接酶能催化相同

黏性末端的DNA片段之間的連接，也能連接平末端，D錯(cuò)誤。

答案：B

6.[2019?吉林高二期末]下圖表示限制酶切割某DNA的過程，從圖中可知，該限制酶

能識別的堿基序列及切點(diǎn)是（）

AATT

—-

---

TTAA

CTTAA

A.CTTAAG,切點(diǎn)在C和T之間

B.CTTAAG,切點(diǎn)在G和A之間

C.GAATTC,切點(diǎn)在G和A之間

D.CTTAAC,切點(diǎn)在C和T之間

解析：依圖可知，該限制酶切割的位點(diǎn)為GA之間，結(jié)合所形成的黏性末端可知該限

制酶所能識別的堿基序列為GAATTC,綜上所述，C正確，A、B、D錯(cuò)誤。

答案：C

7.[2019?福建高二期末]下列關(guān)于DNA連接酶的敘述，正確的是（）

A.將單個(gè)核甘酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵

B.將斷開的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵

C.連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵

D.只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來

解析：DNA連接酶能連接兩個(gè)DNA片段，而不是將單個(gè)核昔酸連接到已有的DNA

鏈上，A錯(cuò)誤；DNA連接酶可將斷開的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二

酯鍵,B正確；兩個(gè)DNA鏈中的氫鍵的形成不需要酶的作用,C錯(cuò)誤;DNA連接酶包括Ecoli

DNA連接酶和T&DNA連接酶，其中T4DNA連接酶既能連接黏性末端，也能連接平末端,

只不過連接平末端的效率較低，D錯(cuò)誤。

答案：B

8.[2019.山東微山縣第二中學(xué)高二月考|下圖是兩種限制酶識別并切割的DNA分子的

特定核甘酸序列。下列有關(guān)說法，正確的是（）

BamHIBg/H

Ij

-GGATCC——AGATCT—

-CCTAGG——TCTAGA-

ft

A.二者的識別序列相同，切出的黏性末端相同

B.二者的識別序列相同，切出的黏性末端不同

C.二者的識別序列不同，切出的黏性末端相同

D.二者的識別序列不同，切出的黏性末端不同

解析：限制酶Ba”7Hl的識別序列為一GGATCC—,切出的黏性末端是一GATC-；

限制晦Bg/H的識別序列為一AGATCT—,切出的黏性末端是一GATC—,可見二者的識別

序列不同，切出的黏性末端相同，C正確。

答案：C

9.[2019?山東微山縣第二中學(xué)高二月考]限制酶切割口附時(shí)（）

A.專一識別特定的核甘酸序列

B.切斷的是堿基對之間的氫鍵

C.任意切割，沒有特定的核甘酸序列

D.識別多種核甘酸序列，但切口只有一個(gè)

解析：限制酶能專一識別特定的核甘酸序列，A正確；限制酶使每一條鏈中特定部位

的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，B錯(cuò)誤；限制酶要識別雙鏈DNA分子的某種特定核

甘酸序列，不能任意切割，C錯(cuò)誤；限制酶切割時(shí)，能識別特定的核甘酸序列，并在特定位

點(diǎn)進(jìn)行切割，D錯(cuò)誤。

答案：A

10.［2019.陜西渭南市尚德中學(xué)高二期中］下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的說法，正確的

是（）

A.主要來自真核生物

B.識別序列只含6個(gè)核甘酸

C.能識別DNA上特定的核甘酸序列

D.切割產(chǎn)生的均為黏性末端

解析：限制性核酸內(nèi)切酶主要存在于原核生物中，A錯(cuò)誤；大多數(shù)限制酶識別的序列

是6個(gè)核甘酸組成的，也有少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個(gè)核甘酸組成，B錯(cuò)誤；限

制酶能識別雙鏈DNA分子的某種特定的核普酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核普

酸之間的磷酸二酯鍵斷開，C正確；限制晦切割產(chǎn)生的DNA片段末端可以是黏性末端或平

末端，D錯(cuò)誤。

答案：C

11.［2019?陜西省黃陵縣中學(xué)高二期中］質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，它的主要

特點(diǎn)是（）

①能自主復(fù)制②不能自主復(fù)制③結(jié)構(gòu)很小④蛋白質(zhì)⑤環(huán)狀RNA⑥環(huán)狀

DNA⑦能“友好”地“借居”

A.①③⑤⑦B.①④⑥

C.①③⑥⑦D.②③⑥⑦

解析：①質(zhì)粒必須能自主復(fù)制，以保證能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制，①正確、②

錯(cuò)誤；③質(zhì)粒為小型環(huán)狀DNA,其結(jié)構(gòu)很小，③正確；④質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是DNA,不是蛋

白質(zhì)，④錯(cuò)誤；⑤質(zhì)粒為小型環(huán)狀DNA,⑤錯(cuò)誤、⑥正確；⑦質(zhì)粒必須能“友好”地“借

居”，以便于目的基因的穩(wěn)定存在和復(fù)制，⑦正確。

答案：C

12.［2019.福建廈門一中高二月考］已知一雙鏈DNA分子，用限制酶I切割得到長度

為120kb（kb：千堿基對）的片段；用限制酶II切割得到40kb和80kb的兩個(gè)片段；同時(shí)用

限制酶I和限制酶II切割時(shí),得到10kb、80kb和30kb的3個(gè)片段。據(jù)此分析該雙鏈DNA

分子結(jié)構(gòu)及酶切位點(diǎn)情況為（）

解析：該DNA分子為環(huán)狀DNA,用限制酶I切割得到長度為120kb片段，用限制

酶I［切割得到40kb和80kb兩個(gè)片段，則說明該DNA上限制酶I有1個(gè)酶切位點(diǎn)，限制

酶U有兩個(gè)酶切位點(diǎn)；同時(shí)用限制酶I和限制酶II切割時(shí)，得至U10kb、80kb和30kb共3

個(gè)片段，則說明限制酶I的酶切位點(diǎn)位于限制酶II切割后的40kb片段中，選項(xiàng)中只有D符

合，故D正確。

答案：D

二、非選擇題（40分）

13.（16分）［2019?吉林市第五十五中學(xué)高二月考］根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列

問題。

（1）限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有：和

(2)質(zhì)粒用EcoRI切割后產(chǎn)生的片段如下：

AATTC.......G

G.......CTTAA

為使載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，還可用另一

種限制性內(nèi)切酶切割，該醵必須具有的特點(diǎn)是

(3)實(shí)際操作中，往往用EcoR1和另一種限制性內(nèi)切醵同時(shí)分別切割質(zhì)粒和外源DNA

分子，其優(yōu)點(diǎn)在于可防止。

(4)按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即DNA連接

酶和DNA連接酶。

(5)基因工程中除質(zhì)粒外，和________也可作為載體。

解析：(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生兩種類型的末端，即黏性末端和平末端。

(2)根據(jù)題意分析，質(zhì)?？梢杂肊coRI切割，也可以用另一種限制酶切割，說明該酶切割產(chǎn)

生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同。(3)根據(jù)題意分析，用不同的限制酶同時(shí)分

別切割質(zhì)粒和外源DNA分子，可以防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，進(jìn)

而使得目的基因準(zhǔn)確插入質(zhì)粒。(4)基因工程使用的DNA連接酶按來源分，可分為Ecoli

DNA連接酶和T4DNA連接酶。(5)基因工程常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和A.噬菌體

的衍生物。

答案：(1)黏性末端平末端

(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同

(3)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化

(4)E-coliT4

(5)動(dòng)植物病毒入噬菌體的衍生物

14.(16分)[2019?全國高二課時(shí)練習(xí)]為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長度的線性

DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分離，計(jì)算相對大?。蝗?/p>

后再用另一種酶對單酶水解片段進(jìn)行降解，分析片段大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

第一步產(chǎn)物產(chǎn)物

第二步水解

水解(單位bp)(單位bp)

3500將第一步水解產(chǎn)15002000

已知第一

A的切割1000物分離后，分別1000

線性DNA

用B隨切割

序列共有500500

將第一步水解產(chǎn)

5000bp(bp20005001500

為堿基對)B的切割物分離后，分別

3000用A酶切割20001000

經(jīng)A的和B

200015001000500

酶同時(shí)切割

⑴該實(shí)驗(yàn)中體現(xiàn)出限制酶的作用特點(diǎn)是

(2)由實(shí)驗(yàn)可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為個(gè)和

一個(gè)。

(3)根據(jù)表中數(shù)據(jù)，請?jiān)谙聢D中用箭頭標(biāo)出相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn)。

10002000300040005000

(4)已知BamHI與Bg/II的識別序列及切割位點(diǎn)如下圖所示，用這兩種酶和DNA連

接酶對一段含有數(shù)個(gè)BamHI和Bg/H識別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，

AGATCC

若干次循環(huán)后1T('TAGG和序列明顯增多，該過程中DNA連接酶催化

____________鍵的形成。

BaiMIBglII

j^AGATCT^：：^GGATCC^;

；—TCTAGA—;：—CCTAGG—：

解析：(1)該實(shí)險(xiǎn)中體現(xiàn)出限制酶的作用特點(diǎn)是酶的專一性。(2)A酶切割后形成3段，

所以有2個(gè)識別位點(diǎn)，B酶切割后形成2段，所以有1個(gè)切割位點(diǎn)。(3)由于酶B只有一個(gè)

限制酶切位點(diǎn)，即在2000和3000之間，可以先標(biāo)注出；又由于酶A可以將2000的這段切

成500和1500的片段，結(jié)合酶A單獨(dú)切割又可以標(biāo)注其切割位點(diǎn)，同理標(biāo)出另一個(gè)切割位

點(diǎn)，答案如下圖：

BBS

|1000200030004COO5000

A酶ASS

(4)已知BamWI與Bg/U的識別序列及切割位點(diǎn)如圖所示。用這兩種酶和DNA連接

酶對一段含有數(shù)個(gè)BamHI和Bg/H識別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，若

-AGATCC--GGATCT

干循環(huán)后和一TCTAGG—和一CCTAGA—序列明顯增多。DNA連接酶催化形成的是

磷酸二酯鍵。

答案：(1)一種限制酶只能識別一種特定的核甘酸序列，且在特定的位點(diǎn)切割

(2)21

(3)

B前

|1000200030004CD05000

A酶A酶

(4)磷酸二酯

1.2基因工程的基本操作程序

分層設(shè)計(jì)助學(xué)助記認(rèn)知更深刻

理一理

基因

目的

庫

組文

［基因

文庫

基因

部分

文庫1

基因

）

文庫

DNA

I（c

取j

的獲

基因

目的

獲取

庫中

因文

基［從基

增

技術(shù)擴(kuò)

PCR

因方法|

合成

工|人工

程

的

基（目的

組成

構(gòu)建

體的

達(dá)載

因表

本〈基

過程

操I構(gòu)建

作

細(xì)胞

植物

程［導(dǎo)入

胞

物細(xì)

入動(dòng)

胞J導(dǎo)

體細(xì)