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學必求其心得,業(yè)必貴于專精學必求其心得,業(yè)必貴于專精學必求其心得,業(yè)必貴于專精生物大神養(yǎng)成系列2關(guān)鍵詞:基因工程與蛋白質(zhì)工程1、綠色熒光蛋白GFP能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,據(jù)圖回答:(1)圖中通過過程①②形成重組質(zhì)粒,需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒.限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC-。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點,在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點.①請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后形成黏性末端的過程.(只寫出切割后形成的部分即可)。②在DNA連接酶的作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來?,理由是。(2)過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多的方法是_____________________。(3)獲得轉(zhuǎn)基因豬的關(guān)鍵步驟是(填序號),GFP基因的作用是作為.抑制小豬抗原表達的基因要插入到啟動子和之間。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬,可以解決的醫(yī)學難題是可以避免。(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白,黃色熒光蛋白等,采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是:(用數(shù)字表示)。①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)④表達出藍色熒光蛋白。(5)如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導入植物細胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細胞,通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的上.(6)假設(shè)以大腸桿菌質(zhì)粒作為運載體,并以同一種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割運載體與目的基因,將切割后的運載體與目的基因片段混合,并加入DNA連接酶.連接產(chǎn)物至少有種環(huán)狀DNA分子,它們分別是、、.2、多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細胞壁破損。成熟的番茄果實中,PG合成顯著增加,能使果實變紅變軟,但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達,可延長果實保質(zhì)期。科學家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上,導入番茄細胞中,得到轉(zhuǎn)基因番茄,具體操作流程如圖.據(jù)圖回答下列問題:(1)若已獲取PG的mRNA,可通過獲取PG基因。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中的目的是.(2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用含有的培養(yǎng)基進行篩選,理由是。之后,還需將其置于質(zhì)量分數(shù)為25%的蔗糖溶液中,觀察細胞現(xiàn)象來鑒別細胞壁是否再生。(3)由于導入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA,且能與互補結(jié)合,因此可抑制PG基因的正常表達。若,則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。1、(1)①②可以連接因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互補的)(2)顯微注射技術(shù)(3)②作為標記基因終止子器官移植時發(fā)生免疫排斥反應(4)②①③④2、(1)逆轉(zhuǎn)錄法
大量復制目的基因(或克
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