《組織學(xué)與胚胎學(xué)》課件01緒論

第一章緒論1發(fā)展簡(jiǎn)史2研究?jī)?nèi)容與意義1

內(nèi)容提要

研究技術(shù)3

學(xué)習(xí)方法

4一、研究?jī)?nèi)容與意義（一）組織學(xué)（histology）1.定義研究正常人體細(xì)微結(jié)構(gòu)及相關(guān)機(jī)能的科學(xué)。

2.組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容細(xì)胞組織器官系統(tǒng)

細(xì)胞（cell）：生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。組織(tissue）:由細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)組成。分為四種:上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織器官（organ）：不同的組織按一定比例、數(shù)量及方式組合成器官。系統(tǒng)（system）：若干功能相關(guān)的器官構(gòu)成系統(tǒng)。（二）胚胎學(xué)（embryology）1.定義：研究人體發(fā)生、發(fā)育過程及其機(jī)制的一門科學(xué)。研究?jī)?nèi)容生殖細(xì)胞發(fā)生受精胚胎發(fā)育胚胎與母體關(guān)系先天性畸形2.胚胎學(xué)的研究?jī)?nèi)容受精卵胚胎兒（2-8周）（9-38周）（三）意義基礎(chǔ)課程、必修課程組織學(xué)：認(rèn)識(shí)人體結(jié)構(gòu)的入門課，以解剖學(xué)為基礎(chǔ)，為后續(xù)的醫(yī)學(xué)課程打基礎(chǔ)，尤其與病理學(xué)關(guān)系密切；胚胎學(xué)：為后續(xù)課程打基礎(chǔ)，尤其與婦產(chǎn)科學(xué)、兒科學(xué)關(guān)系密切。二、組織學(xué)與胚胎學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史細(xì)胞水平亞細(xì)胞水平分子水平Hooke—cell（1665）Bichat—tissue（1801）Mayer—histology（1819）Schleiden&Schwann—細(xì)胞學(xué)說MaxKnolls&ErnstRuska—電鏡

三、組織學(xué)與胚胎學(xué)研究方法顯微鏡樣品制備光學(xué)顯微鏡電子顯微鏡：透射電鏡、掃描電鏡熒光、激光掃描共聚焦顯微鏡（一）顯微鏡1.光學(xué)顯微鏡分辨率：0.2μm意義：細(xì)胞水平光鏡結(jié)構(gòu)顯微結(jié)構(gòu)

2.電子顯微鏡技術(shù)根據(jù)分辨率、放大倍數(shù)、功能不同分為兩類：透射電子顯微鏡（transmissionelectronmicroscope，TEM）掃描電子顯微鏡（scanningelectronmicroscope，SEM）透射電子顯微鏡分辨率為0.2nm計(jì)量單位：1mm(毫米)＝103μm(微米)

1μm(微米)＝103nm(納米)超微結(jié)構(gòu)（ultrastructure）電子密度高：樣本結(jié)合了重金屬鹽的部位，產(chǎn)生電子吸收或電子散射，在熒光屏上成的像較暗，圖像較黑。電子密度低：樣本不結(jié)合或少結(jié)合重金屬鹽的部位，產(chǎn)生透射電子，熒光屏上成的像較亮或淺。電子密度中等：介于兩者之間。透射電子顯微鏡（TEM)分辨率：0.2nm意義：細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)（亞細(xì)胞水平）電鏡結(jié)構(gòu)超微結(jié)構(gòu)透射電鏡照片觀察內(nèi)部結(jié)構(gòu)電子密度高染色較深的部位電子密度低染色較淺的部位掃描電子顯微鏡技術(shù)氣管黏膜表面的纖毛巨噬細(xì)胞吞噬作用掃描電子顯微鏡照片觀察組織細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)掃描電鏡：偽彩色透射電鏡：內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡：外部形貌3.特殊顯微鏡熒光顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡ABCDEF

4.激光掃描共聚焦顯微鏡

激光掃描共聚焦顯微鏡是用激光作掃描光源，逐點(diǎn)、逐行、逐面快速掃描成像。激光束的波長(zhǎng)較短，光束很細(xì)，分辨力大約是普通光學(xué)顯微鏡的3倍。觀察細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞內(nèi)生化成分的定量分析、光密度統(tǒng)計(jì)、細(xì)胞形態(tài)的測(cè)量、三維重建等。

激光掃描共聚焦顯微鏡（微管呈綠色、微絲紅色、核藍(lán)色）（二）常用技術(shù)1.光鏡標(biāo)本制備取材固定脫水包埋切片染色貼片封固石蠟切片火棉膠包埋樹脂包埋冰凍切片直接迅速冷凍HE染色

蘇木精hematoxylin

伊紅eosin嗜堿性結(jié)構(gòu)：細(xì)胞核粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)游離核糖體等嗜酸性結(jié)構(gòu)：細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)溶酶體、線粒體膠原纖維等特殊染色方法

HE染色法以外的所有染色法，稱為特殊染色方法，通常是為了顯示某些用HE染色法顯示不出的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)。如：蘇丹法——顯示脂肪鍍銀法——顯示神經(jīng)細(xì)胞、嗜銀顆粒鐵蘇木素法——顯示心肌閏盤馬氏三色法——顯示胰島細(xì)胞甲苯胺藍(lán)法——顯示糖胺多糖硝酸銀染色如果某結(jié)構(gòu)能將銀離子還原成銀原子，并吸附銀原子而使自身顯示棕黑色，該結(jié)構(gòu)則具有嗜銀性（argyrophilic）。HE染色的中等動(dòng)靜脈彈性染色的中等動(dòng)靜脈硝酸銀染色運(yùn)動(dòng)終板，氯化金染色心肌，Hemalum染色甲苯胺藍(lán)(藍(lán)色染料)將肥大細(xì)胞的顆粒染為紫紅色如果某結(jié)構(gòu)顯示的顏色和染料本身的顏色不同，改變了染料本身的顏色，該結(jié)構(gòu)具有異染性（metachromasia）。異染性(Metachromasia)冰凍切片機(jī)Wholemount鋪片：疏松結(jié)締組織Smear涂片：血細(xì)胞、分離細(xì)胞或脫落細(xì)胞Groundsection磨片：牙和骨等堅(jiān)硬組織應(yīng)用化學(xué)、物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)或分子生物學(xué)等的原理和技術(shù)，結(jié)合組織學(xué)技術(shù)而產(chǎn)生的技術(shù)，能夠?qū)M織細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分進(jìn)行定位、定性研究。1.一般組織化學(xué)術(shù)利用化學(xué)試劑與組織細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)，在局部形成有色沉淀物或重金屬鹽沉淀，通過顯微鏡進(jìn)行觀察。（三）其他組織學(xué)技術(shù)過碘酸希夫反應(yīng)(PAS反應(yīng))

顯示細(xì)胞內(nèi)黏多糖或多糖成分的一種方法。多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀PAS反應(yīng),肝細(xì)胞內(nèi)的糖原顆粒2.酶組織化學(xué)是將組織切片在某種酶底物中溫育，而后檢出反應(yīng)產(chǎn)物，它再和某種捕捉劑結(jié)合形成沉淀，即可知酶的存在。ATP酶組織化學(xué)顯示膽小管3.免疫組織化學(xué)根據(jù)免疫學(xué)原理，用標(biāo)記的特異性抗體（或抗原）對(duì)組織內(nèi)的抗原（或抗體）的分布進(jìn)行定位定性研究的方法。4.原位雜交技術(shù)核酸分子雜交技術(shù)。是檢測(cè)基因（DNA片段）有無，及在轉(zhuǎn)錄水平上檢測(cè)基因的活性。是一種特異性的核酸組織化學(xué)術(shù)。IGF-1mRNAintheOvaryofRats5.組織或細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)將活組織（細(xì)胞）在體外培養(yǎng)的技術(shù)。條件：營(yíng)養(yǎng)、O2和CO2的比例、滲透壓、pH值、溫度和濕度。優(yōu)點(diǎn)：可人為控制條件，研究不同條件對(duì)細(xì)胞的分裂、分化、結(jié)構(gòu)和功能等的影響。（四）組織學(xué)與胚胎學(xué)的展望1.試管嬰兒的新進(jìn)展世界上第一例：1987年7月25日在英國(guó)，我國(guó)第一例：1988年。截止到2002年全球>100萬，成功率20%。第一代：誘發(fā)排卵，人工授精，體外培養(yǎng)，胚胎移植第二代：?jiǎn)尉语@微注射授精，控制性別。第三代：著床前遺傳診斷，避免遺傳病孩出生。三親試管嬰兒：兩個(gè)母親（年老媽媽的卵細(xì)胞核，年輕媽媽的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)），一個(gè)父親。2.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：三要素：目的基因、載體系統(tǒng)、受體動(dòng)物應(yīng)用：珍稀動(dòng)物、改良品種、分子藥廠等。3.克隆羊Dolly的誕生及其意義1997年2月，英國(guó)，Dolly誕生，無性繁殖。說明：成年哺乳動(dòng)物體細(xì)胞也具有“全能性”克隆人？嚴(yán)格禁止！4.人胚干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀及前景1981年：小鼠胚胎干細(xì)胞分離培養(yǎng)成功1998年：建立人胚干細(xì)胞系1999