《血小板功能》課件2

血小板功能血小板是止血和凝血過(guò)程中的關(guān)鍵細(xì)胞成分目錄1血小板概述定義、形態(tài)特征、參考值、生成過(guò)程、壽命2血小板結(jié)構(gòu)膜系統(tǒng)、細(xì)胞骨架、顆粒、線粒體3生理功能與調(diào)節(jié)粘附、聚集、釋放反應(yīng)、促凝血、功能調(diào)節(jié)功能異常、檢測(cè)及臨床應(yīng)用第一部分：血小板概述基本特征無(wú)核細(xì)胞片段源自骨髓巨核細(xì)胞直徑2-4μm主要功能止血凝血血管完整性維持臨床意義出血性疾病血栓性疾病炎癥反應(yīng)血小板的定義起源由骨髓巨核細(xì)胞胞質(zhì)斷裂形成的無(wú)核細(xì)胞片段形態(tài)圓盤狀結(jié)構(gòu)，無(wú)細(xì)胞核功能參與止血、凝血、炎癥等過(guò)程血小板的形態(tài)特征大小直徑2-4μm形狀靜息時(shí)呈圓盤狀染色性瑞氏染色呈紫藍(lán)色活化后偽足伸展、形態(tài)不規(guī)則血小板的正常參考值100-300正常范圍×10^9/L150平均值×10^9/L<100血小板減少×10^9/L>400血小板增多×10^9/L血小板的生成過(guò)程造血干細(xì)胞多能干細(xì)胞分化巨核細(xì)胞祖細(xì)胞特化前體細(xì)胞巨核細(xì)胞細(xì)胞核多倍體化血小板釋放胞質(zhì)斷裂成血小板血小板的壽命產(chǎn)生骨髓巨核細(xì)胞釋放循環(huán)血液中循環(huán)約10天清除主要在脾臟清除平衡生成與清除動(dòng)態(tài)平衡第二部分：血小板的結(jié)構(gòu)1膜系統(tǒng)細(xì)胞膜與開(kāi)放管道系統(tǒng)2細(xì)胞骨架微管與微絲系統(tǒng)3功能顆粒α顆粒、致密顆粒4線粒體提供能量代謝支持血小板的膜系統(tǒng)細(xì)胞膜磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)富含糖蛋白受體負(fù)責(zé)信號(hào)傳導(dǎo)開(kāi)放管道系統(tǒng)與細(xì)胞外環(huán)境相通增加表面積促進(jìn)物質(zhì)交換致密小管系統(tǒng)源自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存參與活化過(guò)程血小板的細(xì)胞骨架周邊微管帶維持盤狀形態(tài)肌動(dòng)蛋白網(wǎng)絡(luò)提供結(jié)構(gòu)支持收縮蛋白系統(tǒng)參與形態(tài)變化及收縮連接蛋白整合細(xì)胞骨架與膜結(jié)構(gòu)血小板的顆粒α顆粒含凝血因子、生長(zhǎng)因子數(shù)量多，約50-80個(gè)致密顆粒含ADP、血清素、鈣離子數(shù)量少，約3-8個(gè)溶酶體含水解酶參與消化降解過(guò)氧化物酶體含催化酶參與代謝過(guò)程血小板的線粒體能量產(chǎn)生通過(guò)氧化磷酸化產(chǎn)生ATP，為血小板活化提供能量鈣儲(chǔ)存儲(chǔ)存并釋放鈣離子，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣濃度凋亡調(diào)控參與血小板壽命調(diào)控，釋放凋亡信號(hào)分子代謝中心參與多種代謝過(guò)程，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定第三部分：血小板的生理功能血小板的主要功能概述血管損傷識(shí)別識(shí)別暴露的血管下基質(zhì)初級(jí)止血形成血小板血栓凝血促進(jìn)提供磷脂表面，加速凝血過(guò)程血栓穩(wěn)定收縮血栓，增強(qiáng)穩(wěn)定性修復(fù)參與釋放生長(zhǎng)因子，促進(jìn)傷口愈合血小板粘附功能血小板聚集功能GPIIb-IIIa介導(dǎo)血小板之間通過(guò)纖維蛋白原橋接聚集誘導(dǎo)劑ADP、血栓素A2、腎上腺素、膠原等聚集程度可逆性聚集與不可逆性聚集血小板釋放反應(yīng)1活化信號(hào)凝血酶、膠原等刺激鈣動(dòng)員細(xì)胞內(nèi)鈣濃度升高3顆粒融合與細(xì)胞膜或開(kāi)放管道系統(tǒng)融合內(nèi)容物釋放釋放ADP、凝血因子等生物活性物質(zhì)血小板促進(jìn)凝血功能磷脂暴露活化后磷脂酰絲氨酸外翻凝血因子結(jié)合提供結(jié)合位點(diǎn)復(fù)合物形成tenase和prothrombinase復(fù)合物凝血放大加速凝血酶生成血小板收縮功能收縮信號(hào)凝血酶刺激2鈣離子升高鈣離子從儲(chǔ)存庫(kù)釋放3肌球蛋白活化肌球蛋白輕鏈磷酸化肌動(dòng)蛋白滑動(dòng)產(chǎn)生收縮力5血凝塊收縮血凝塊體積減小，穩(wěn)定性增強(qiáng)血小板維持血管完整性的功能維持機(jī)制主要作用物質(zhì)作用靶點(diǎn)物理性填塞血小板本身微血管漏點(diǎn)內(nèi)皮支持PDGF、VEGF內(nèi)皮細(xì)胞基底膜穩(wěn)定TGF-β、FGF血管基底膜緊密連接維持S1P、ANG-1內(nèi)皮細(xì)胞連接第四部分：血小板功能的調(diào)節(jié)促進(jìn)因素凝血酶、膠原、ADP、血栓素A2抑制因素前列環(huán)素、一氧化氮、ADPase平衡調(diào)節(jié)促進(jìn)與抑制因素動(dòng)態(tài)平衡信號(hào)通路G蛋白、環(huán)核苷酸、鈣信號(hào)促進(jìn)血小板功能的因素抑制血小板功能的因素前列環(huán)素(PGI2)內(nèi)皮細(xì)胞合成激活腺苷酸環(huán)化酶提高cAMP水平一氧化氮(NO)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶提高cGMP水平內(nèi)皮ADPase降解ADP減弱聚集信號(hào)調(diào)節(jié)血小板反應(yīng)性TXA2和PGI2的平衡作用血栓素A2(TXA2)血小板合成促進(jìn)血小板聚集血管收縮作用通過(guò)TP受體作用平衡意義維持正常止血功能防止血栓形成動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)血小板活性阿司匹林作用靶點(diǎn)前列環(huán)素(PGI2)內(nèi)皮細(xì)胞合成抑制血小板聚集血管舒張作用通過(guò)IP受體作用第五部分：血小板功能異常數(shù)量減少血小板減少癥功能異常血小板功能缺陷功能亢進(jìn)高凝狀態(tài)調(diào)節(jié)失衡介質(zhì)平衡失調(diào)血小板功能異常的分類先天性基因突變導(dǎo)致獲得性疾病或藥物相關(guān)數(shù)量異常過(guò)多或過(guò)少質(zhì)量異常功能缺陷血小板減少癥概述<100診斷標(biāo)準(zhǔn)×10^9/L<50出血風(fēng)險(xiǎn)增加×10^9/L<20嚴(yán)重出血風(fēng)險(xiǎn)×10^9/L<10危及生命風(fēng)險(xiǎn)×10^9/L血小板減少癥的原因藥物相關(guān)肝素、奎尼丁等免疫介導(dǎo)ITP、SLE等感染相關(guān)病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)骨髓疾病再生障礙性貧血、白血病5消耗增加DIC、TTP等血小板減少癥的癥狀皮膚出血瘀點(diǎn)、瘀斑黏膜出血鼻出血、牙齦出血重要器官出血消化道、泌尿道、顱內(nèi)出血血小板功能異常性疾病血小板無(wú)力癥血管性假血友病存儲(chǔ)池缺陷釋放缺陷其他功能異常血小板無(wú)力癥分子病理GPIIb-IIIa整合素缺陷常染色體隱性遺傳血小板不能聚集臨床特點(diǎn)出生后即有出血表現(xiàn)皮膚黏膜出血手術(shù)后出血難止實(shí)驗(yàn)室檢查血小板計(jì)數(shù)正常出血時(shí)間延長(zhǎng)聚集功能異常血管性假血友病分子病因vWF基因突變功能異常vWF質(zhì)或量異常3臨床表現(xiàn)皮膚黏膜出血，經(jīng)期過(guò)多診斷檢查vWF抗原、活性及多聚體分析第六部分：血小板功能檢測(cè)數(shù)量檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)、血小板容積2形態(tài)檢測(cè)血涂片形態(tài)學(xué)檢查功能檢測(cè)出血時(shí)間、聚集功能、釋放反應(yīng)4分子檢測(cè)流式細(xì)胞術(shù)、基因檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)樣本采集EDTA抗凝全血阻抗法根據(jù)細(xì)胞體積大小計(jì)數(shù)2光學(xué)法散射光信號(hào)分析熒光法特異性標(biāo)記計(jì)數(shù)血小板形態(tài)檢查出血時(shí)間測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)切口模板切口法吸濾紙不接觸傷口記錄時(shí)間從切口到出血停止正常值2-9分鐘血小板聚集功能檢測(cè)時(shí)間(分鐘)ADP誘導(dǎo)聚集率(%)膠原誘導(dǎo)聚集率(%)腎上腺素誘導(dǎo)聚集率(%)血小板釋放功能檢測(cè)ATP釋放測(cè)定熒光素酶法實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)釋放定量評(píng)估5-HT釋放測(cè)定放射性同位素標(biāo)記ELISA法檢測(cè)反映致密顆粒功能β-血小板球蛋白α顆粒標(biāo)志物ELISA法檢測(cè)反映α顆粒釋放功能流式細(xì)胞術(shù)在血小板功能檢測(cè)中的應(yīng)用檢測(cè)指標(biāo)表面受體表達(dá)活化標(biāo)志物信號(hào)分子微粒體釋放技術(shù)特點(diǎn)高靈敏度可檢測(cè)亞群需少量樣本多參數(shù)分析臨床應(yīng)用血小板功能異常診斷抗血小板藥物監(jiān)測(cè)血栓前狀態(tài)評(píng)估存儲(chǔ)血小板質(zhì)量評(píng)價(jià)第七部分：血小板在臨床中的應(yīng)用血小板制備單采或混合血小板輸注指征預(yù)防性或治療性輸注輸注方案劑量、頻率和方法效果評(píng)估計(jì)數(shù)增長(zhǎng)和止血功能并發(fā)癥管理輸注反應(yīng)、耐受性問(wèn)題血小板輸注的適應(yīng)癥預(yù)防性輸注血小板計(jì)數(shù)<10×10^9/L的穩(wěn)定患者圍手術(shù)期血小板計(jì)數(shù)<50×10^9/L且需手術(shù)活動(dòng)性出血血小板減少或功能異常伴出血特殊情況大量輸血、體外循環(huán)后、DIC血小板輸注的劑量計(jì)算輸注類型常用劑量預(yù)期升高成人標(biāo)準(zhǔn)劑量1個(gè)治療單位30-50×10^9/L兒童劑量10-15ml/kg50-100×10^9/L大劑量2個(gè)治療單位60-100×10^9/L計(jì)算公式預(yù)期升高=(輸注血小板數(shù)×回收率)/血容量血小板輸注的方法ABO相容優(yōu)先選擇ABO相同血小板白細(xì)胞過(guò)濾減少發(fā)熱反應(yīng)和同種免疫輸注速度開(kāi)始緩慢，無(wú)反應(yīng)可加快監(jiān)測(cè)生命體征、輸注反應(yīng)、效果評(píng)估血小板輸注無(wú)效的判斷輸注后時(shí)間(小時(shí))血小板計(jì)數(shù)(×10^9/L)不同類型的血小板制劑單采血小板從單個(gè)供者采集體積約200-300ml混合血小板多個(gè)全血分離制備4-6單位混合洗滌血小板去除血漿成分減少輸注反應(yīng)輻照血小板的應(yīng)用輻照目的滅活殘留淋巴細(xì)胞預(yù)防作用防止移植物抗宿主病適用人群免疫缺陷患者、新生兒4對(duì)血小板影響功能輕微受損，保質(zhì)期縮短血小板在止血治療中的作用損傷識(shí)別識(shí)別暴露的膠原粘附聚集形成血小板栓促進(jìn)凝血提供凝血因子活化平臺(tái)凝塊穩(wěn)定收縮凝塊，增強(qiáng)穩(wěn)定性血小板在促進(jìn)傷口愈合中的作用生長(zhǎng)因子釋放PDGF、TGF-β等1細(xì)胞招募吸引炎癥和修復(fù)細(xì)胞2基質(zhì)形成促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成血管生成促進(jìn)新血管形成4第八部分：血小板與疾病心血管疾病動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死2血栓性疾病靜脈血栓、栓塞3炎癥性疾病自身免疫病、慢性炎癥腫瘤相關(guān)腫瘤轉(zhuǎn)移、血栓并發(fā)癥血小板與心血管疾病粥樣硬化粘附于內(nèi)皮損傷處釋放促炎因子促進(jìn)脂質(zhì)積累加速斑塊形成心肌梗死斑塊破裂后血小板聚集形成閉塞性血栓導(dǎo)致下游缺血心肌組織壞死抗血小板治療阿司匹林P2Y12抑制劑GPIIb/IIIa抑制劑減少心血管事件血小板與血栓形成血小板與炎癥反應(yīng)血小板活化表達(dá)黏附分子與白細(xì)胞互作形成血小板-白細(xì)胞復(fù)合物釋放炎癥介質(zhì)趨化因子、細(xì)胞因子放大炎癥反應(yīng)募集更多炎癥細(xì)胞血小板與腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞保護(hù)屏蔽免疫攻擊形成保護(hù)性包被促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活促進(jìn)粘附橋接腫瘤與內(nèi)皮增強(qiáng)血管外滲透促進(jìn)轉(zhuǎn)移灶形成促進(jìn)生長(zhǎng)釋放生長(zhǎng)因子激活腫瘤細(xì)胞信號(hào)促進(jìn)血管生成第九部分：血小板研究的新進(jìn)展基因組學(xué)全基因組關(guān)聯(lián)研究蛋白質(zhì)組學(xué)血小板蛋白質(zhì)譜分析轉(zhuǎn)錄組學(xué)miRNA與基因表達(dá)調(diào)控血小板功能的基因調(diào)控基因調(diào)控功能相關(guān)疾病ITGA2B/ITGB3血小板聚集血小板無(wú)力癥GP1BA/GP9血小板粘附Bernard-Soulier綜合征TBXA2R血栓素信號(hào)出血傾向P2RY12ADP信號(hào)抗血小板藥物靶點(diǎn)血小板與免疫功能病原體識(shí)別表達(dá)Toll樣受體直接捕獲病原體1中性粒細(xì)胞互作形成NET增強(qiáng)殺菌能力2淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)激活T細(xì)胞調(diào)節(jié)抗體產(chǎn)生3分泌炎癥因子IL-1βCD40L4血小板衍生生物活性物質(zhì)的研究生長(zhǎng)因子PDGF、TGF-β、VEGF、EGF等促進(jìn)組織修復(fù)趨化因子PF4、RANTES等調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞遷移微粒體含多種