《血小板功能評估》課件

血小板功能評估目錄血小板基礎(chǔ)知識血小板功能評估的重要性血小板功能檢測方法臨床應(yīng)用血小板基礎(chǔ)知識血小板定義血液中無核細胞碎片生成過程巨核細胞分裂形成主要功能促進血凝、修復(fù)血管血小板的定義細胞碎片血液中的無核細胞片段微小尺寸直徑約2-4微米盤狀結(jié)構(gòu)無核小盤狀形態(tài)血小板的生成過程1骨髓中巨核細胞形成多倍體細胞在骨髓中成熟2巨核細胞分裂胞質(zhì)碎片形成血小板3進入血液循環(huán)新生血小板釋放入血流4壽命血液中存活7-10天血小板的正常值150,000最低正常值每微升血液中最少血小板數(shù)450,000最高正常值每微升血液中最多血小板數(shù)10天平均壽命血小板在血液中循環(huán)時間血小板的主要功能促進血液凝固形成血小板栓，啟動凝血瀑布修復(fù)血管損傷黏附聚集在損傷部位參與炎癥反應(yīng)釋放炎癥因子血小板功能評估的重要性指導(dǎo)臨床治療評估藥物療效診斷出血疾病監(jiān)測疾病進展血栓性疾病的危害心血管疾病惡性腫瘤腦卒中呼吸系統(tǒng)疾病其他疾病血小板在血栓形成中的作用血小板粘附血小板黏附于受損血管內(nèi)皮下血小板活化形態(tài)變化，釋放顆粒物質(zhì)血小板聚集更多血小板黏附于已活化血小板血栓形成凝血因子激活，形成穩(wěn)定血栓血小板功能評估的臨床意義診斷出血性疾病鑒別先天性和獲得性血小板功能障礙評估急性出血患者指導(dǎo)輸血治療策略制定監(jiān)測抗血小板藥物效果識別藥物抵抗現(xiàn)象圍手術(shù)期風(fēng)險評估預(yù)測出血和血栓風(fēng)險血小板功能檢測方法概述血小板功能檢測方法分類粘附功能檢測評估血小板與基質(zhì)蛋白結(jié)合能力聚集功能檢測測量血小板之間聚集能力釋放功能檢測檢測血小板顆粒釋放情況活化標志物檢測檢測活化后表面蛋白表達光學(xué)法血小板聚集率檢測（LTA）檢測原理通過透光度變化測量血小板聚集聚集劑誘導(dǎo)血小板聚集增加透光率常用誘導(dǎo)劑二磷酸腺苷(ADP)膠原蛋白腎上腺素花生四烯酸LTA原理采集血漿制備富血小板血漿加入誘導(dǎo)劑促使血小板聚集測量透光度聚集導(dǎo)致透光率增加LTA優(yōu)缺點優(yōu)點金標準方法可檢測多種聚集劑反應(yīng)臨床經(jīng)驗豐富缺點樣本處理復(fù)雜時間要求嚴格結(jié)果重復(fù)性差需大量血樣電阻抗法血小板聚集檢測檢測原理測量全血中血小板聚集引起電阻變化優(yōu)勢使用全血樣本，避免離心處理應(yīng)用監(jiān)測抗血小板藥物療效局限受血細胞比容影響較大電阻抗法原理全血樣本使用未經(jīng)處理的全血電極浸入電極置于血液中加入誘導(dǎo)劑促使血小板聚集于電極電阻增加聚集導(dǎo)致電阻升高電阻抗法代表儀器Multiplate?analyzer五通道同時檢測，結(jié)果可視化顯示Plateletworks便攜式設(shè)計，適合床旁檢測ROTEMplatelet可同時評估凝血和血小板功能血小板功能分析儀（PFA-100/PFA-200）全血樣本僅需800μL檸檬酸鈉抗凝全血快速檢測5-8分鐘完成單次檢測多種試劑盒針對不同抗血小板藥物PFA-100/200原理樣本加入全血樣本加入檢測盒高剪切力血液通過微小孔道產(chǎn)生高剪切力血小板堵塞活化血小板聚集堵塞孔徑閉塞時間記錄從開始到完全堵塞時間PFA-100/200應(yīng)用評估阿司匹林效果特異性檢測環(huán)氧合酶抑制篩查血小板功能異常vonWillebrand病快速篩查兒科應(yīng)用優(yōu)勢所需血量少，適合兒童檢測圍手術(shù)期監(jiān)測預(yù)測出血風(fēng)險血栓彈力圖（TEG）TEG原理血樣放入杯中全血與活化劑混合杯體旋轉(zhuǎn)杯體做微小旋轉(zhuǎn)運動凝血形成血凝塊連接探針與杯壁記錄曲線繪制血凝過程彈力變化曲線TEG血小板功能相關(guān)參數(shù)參數(shù)含義正常值K值血凝塊形成時間1-3分鐘Angle角血凝塊生成率53-72度MA值最大寬度值50-70mmLY30纖溶指數(shù)<3%流式細胞儀檢測檢測對象血小板膜糖蛋白受體活化標志物表達血小板微粒血小板-白細胞聚集體優(yōu)勢高靈敏度樣本量小多參數(shù)同時分析可檢測單個血小板流式細胞儀原理樣本染色熒光標記特異性抗體染色血小板流動系統(tǒng)液流使細胞依次通過激光束熒光檢測檢測每個細胞散射光和熒光信號數(shù)據(jù)分析計算陽性細胞百分比或熒光強度流式細胞儀優(yōu)勢生理條件檢測接近體內(nèi)環(huán)境微量樣本僅需少量全血多參數(shù)分析同時檢測多種標志物高靈敏度檢測單個血小板狀態(tài)血小板參數(shù)檢測常見血小板參數(shù)血小板計數(shù)(PLT)單位血液中血小板總數(shù)平均血小板體積(MPV)血小板平均大小血小板分布寬度(PDW)血小板大小變異度未成熟血小板比例(IPF)新生血小板百分比血小板參數(shù)臨床意義參數(shù)升高降低PLT血小板增多癥血小板減少癥MPV血小板活化骨髓衰竭PDW骨髓增生異?；熀驣PF骨髓恢復(fù)期骨髓抑制VerifyNow系統(tǒng)快速檢測5分鐘內(nèi)出結(jié)果全血樣本無需樣本預(yù)處理藥物特異性針對不同抗血小板藥物有專用試劑盒床旁檢測可在手術(shù)室、急診室使用VerifyNow原理全血加入血樣自動吸入檢測盒纖維蛋白原微粒包被特異性激動劑的微粒血小板聚集活化血小板與微粒結(jié)合光透過率變化聚集程度反映藥物抑制效果VerifyNow優(yōu)勢操作簡便全自動化操作，無需專業(yè)培訓(xùn)結(jié)果標準化數(shù)字化結(jié)果，易于解讀床旁即時檢測無需實驗室支持藥物特異性強針對阿司匹林、P2Y12抑制劑及GPIIb/IIIa抑制劑尿11-脫氫-血栓烷B2檢測花生四烯酸血小板膜磷脂釋放環(huán)氧合酶-1受阿司匹林抑制血栓素A2促血小板聚集311-脫氫-血栓烷B2尿液中穩(wěn)定代謝產(chǎn)物11-脫氫-血栓烷B2意義生物標志物特點血栓素A2穩(wěn)定代謝產(chǎn)物半衰期長達45分鐘在尿液中穩(wěn)定存在反映全身血小板活化程度臨床意義評估阿司匹林抵抗預(yù)測心血管事件風(fēng)險監(jiān)測血小板活化狀態(tài)非侵入性檢測方法檢測方法ELISA方法特異性強，批量檢測液相色譜-質(zhì)譜法精準定量，靈敏度高免疫熒光法快速檢測，操作簡便血小板功能檢測的臨床應(yīng)用出血性疾病診斷2抗血小板藥物監(jiān)測圍手術(shù)期評估危重癥患者管理出血性疾病診斷遺傳性疾病先天性血小板功能障礙獲得性疾病藥物、疾病導(dǎo)致功能異常兒童出血傾向不明原因出血篩查術(shù)后異常出血排除血小板功能障礙遺傳性血小板功能異常疾病Bernard-Soulier綜合征Glanzmann血小板無力癥血小板貯存池缺陷灰色血小板綜合征其他遺傳性疾病獲得性血小板功能異常病因類型具體疾病功能異常特點全身性疾病尿毒癥粘附聚集功能下降肝臟疾病肝功能衰竭多因素功能障礙血液系統(tǒng)疾病骨髓增生異常血小板產(chǎn)生缺陷藥物相關(guān)非甾體抗炎藥COX-1抑制抗血小板藥物療效監(jiān)測阿司匹林抵抗5-60%抵抗發(fā)生率根據(jù)檢測方法不同而異10-20%臨床事件風(fēng)險增加與正常人相比3種抵抗機制藥代動力學(xué)、藥效學(xué)和患者依從性氯吡格雷抵抗發(fā)生率約4%-30%患者存在與基因多態(tài)性密切相關(guān)風(fēng)險因素CYP2C19基因多態(tài)性藥物相互作用糖尿病年齡>75歲抗血小板藥物療效評估方法LTA檢測金標準，但操作復(fù)雜VerifyNow檢測床旁快速檢測，最為便捷TEG血小板圖全面評估，但設(shè)備昂貴尿11-脫氫-血栓烷B2非侵入性，但僅適用于阿司匹林圍手術(shù)期血小板功能評估1術(shù)前評估識別出血風(fēng)險，指導(dǎo)停藥時機2術(shù)中監(jiān)測指導(dǎo)輸血治療3術(shù)后監(jiān)測評估恢復(fù)情況，預(yù)防并發(fā)癥術(shù)前評估停藥決策評估繼續(xù)用藥的血栓風(fēng)險與停藥的出血風(fēng)險停藥時間根據(jù)藥物作用機制和半衰期確定橋接治療必要時使用短效抗血小板藥物個體化策略考慮患者基礎(chǔ)疾病、手術(shù)類型等因素術(shù)中監(jiān)測危重癥患者血小板功能評估膿毒癥炎癥介質(zhì)導(dǎo)致功能異常創(chuàng)傷創(chuàng)傷導(dǎo)致凝血功能障礙ECMO支持機械循環(huán)導(dǎo)致血小板激活消耗顱腦損傷腦組織因子釋放影響凝血膿毒癥患者血小板活化細菌毒素和炎癥因子直接激活功能障礙血小板耗竭和功能紊亂DIC風(fēng)險彌散性血管內(nèi)凝血風(fēng)險增加預(yù)后相關(guān)功能異常程度與死亡率相關(guān)創(chuàng)傷患者組織損傷釋放組織因子激活凝血低溫降低血小板功能酸中毒抑制凝血酶生成血液稀釋輸液導(dǎo)致血小板稀釋4血小板功能檢測結(jié)果解讀臨床決策結(jié)合病史癥狀考慮檢測局限性建立參考范圍結(jié)果影響因素患者因素年齡、性別、種族樣本采集因素采集方式、抗凝劑選擇樣本處理因素溫度、時間、離心條件技術(shù)因素操作人員經(jīng)驗、儀器校準結(jié)果判讀注意事項結(jié)合臨床癥狀避免孤立解讀實驗室結(jié)果考慮方法局限性了解各檢測方法適用范圍動態(tài)監(jiān)測單次結(jié)果意義有限個體化判讀考慮患者特異性因素血小板功能檢測的局限性方法學(xué)局限性缺乏統(tǒng)一標準難模擬體內(nèi)環(huán)境忽略血管內(nèi)皮作用結(jié)果重復(fù)性差臨床應(yīng)用局限性成本較高操作復(fù)雜結(jié)果解釋需專業(yè)知識難以標準化方法學(xué)局限性標準化不足缺乏統(tǒng)一參考范圍和操作規(guī)范體外環(huán)境難