植物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（出版本）3（植物學(xué)）

植物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

姚發(fā)興陳國慶主編

2008年2月

目錄

緒論...............................................................................1

第一部分植物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)

一、顯微鏡........................................................................3

二、臨時(shí)裝片法....................................................................8

三、徒手切片法....................................................................8

四、簡單的顯微化學(xué)測定............................................................9

五、滑走切片法...................................................................10

六、組織離析法...................................................................10

七、壓片法........................................................................11

八、涂布法........................................................................II

九、永久性玻片標(biāo)本的制作.........................................................12

十、生物繪圖的要求與方法.........................................................13

十一、實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備與保存.......................................................15

十二、浸制標(biāo)本的制作.............................................................15

十三、種子植物標(biāo)本的采集、制作和保存............................................16

十四、葉脈標(biāo)本的制作.............................................................17

第二部分植物形態(tài)解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的構(gòu)造和使用.......................................................18

實(shí)驗(yàn)二植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與代謝產(chǎn)物...............................................19

實(shí)驗(yàn)三植物細(xì)胞的有絲分裂和分生組織............................................24

實(shí)驗(yàn)四植物的成熟組織...........................................................26

實(shí)驗(yàn)五根的形態(tài)與結(jié)構(gòu)...........................................................32

實(shí)驗(yàn)六莖的形態(tài)與結(jié)構(gòu)...........................................................37

實(shí)驗(yàn)七葉的結(jié)構(gòu).................................................................43

實(shí)驗(yàn)八花的形態(tài)結(jié)構(gòu)、花藥和胚囊的發(fā)育..........................................47

實(shí)驗(yàn)九胚的發(fā)育、種子的形成和結(jié)構(gòu)..............................................52

實(shí)驗(yàn)十果實(shí)的結(jié)構(gòu)與類型........................................................56

第三部分植物系統(tǒng)分類學(xué)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)十一原核藻類(ProkaryoticAlgae)...................................................................................60

實(shí)驗(yàn)十二真核藻類(EukaryoticAlgae).....................................................................................61

實(shí)驗(yàn)十三真菌門(Eumycophyta).....................................................................................................64

實(shí)驗(yàn)十四地衣門(Lichens)、苔群植物門(Bryophyta)..........................................................66

實(shí)驗(yàn)十五蕨類植物門(Pteridophyta)...........................................................................................68

實(shí)驗(yàn)十六裸子植物門(Gymnospermae)......................................................................................71

實(shí)驗(yàn)十七木蘭亞綱(Magnoliidae)、金縷梅亞綱(Hamamelidae).........................................73

實(shí)驗(yàn)十八石竹亞綱(Caryophyllidae)、五梗果亞綱(Dilleniidae).........................................75

實(shí)驗(yàn)十九薔薇亞綱(Rosidae).......................................................................................................77

實(shí)驗(yàn)二十菊亞綱(Asteridae)......................................................................................................81

實(shí)驗(yàn)二H—單子葉植物綱(Monocotyledoneae)..........................................................................83

第四部分野外實(shí)習(xí)

第四部分野外實(shí)習(xí)...............................................................85

一、抱子植物野外實(shí)習(xí).............................................................85

二、種子植物分類學(xué)野外實(shí)習(xí).......................................................90

附錄............................................................................112

一、實(shí)驗(yàn)藥劑的配制方法..........................................................112

二、參考文獻(xiàn)....................................................................114

2

-1.2-—1-

刖5

隨著生命科學(xué)的發(fā)展，植物學(xué)被作為主干基礎(chǔ)課列入了高等院校生命科學(xué)

各專業(yè)的教學(xué)計(jì)劃中，并且實(shí)驗(yàn)課單獨(dú)作為一門課程開出。在傳統(tǒng)學(xué)科學(xué)時(shí)普

遍減少、實(shí)驗(yàn)課時(shí)壓縮的背景下，為了提高教學(xué)水平，編寫反映出本學(xué)科更具

科學(xué)性、系統(tǒng)性、基礎(chǔ)性和實(shí)用性的實(shí)驗(yàn)教材，是擺在每個(gè)高校植物學(xué)教師面

前的一項(xiàng)艱巨而又緊迫的任務(wù)。根據(jù)教學(xué)大綱的要求和課程設(shè)置，同時(shí)根據(jù)本

校實(shí)驗(yàn)教學(xué)條件、實(shí)驗(yàn)植物取材條件，在參閱相關(guān)文獻(xiàn)，學(xué)習(xí)兄弟院校的教學(xué)

經(jīng)驗(yàn)和資料的基礎(chǔ)上，我們編寫了本實(shí)驗(yàn)講義。教材建設(shè)是一項(xiàng)長期的工作，

由于編者水平有限，講義中錯(cuò)漏之處在所難免，敬請有關(guān)專家、同行不吝賜教,

提出寶貴意見，以便修訂。

本書為我校生命科學(xué)學(xué)院生物科學(xué)專業(yè)植物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書，同時(shí)可供其他

相關(guān)專業(yè)學(xué)生參考。書中引用了其他作者部分內(nèi)容，在此致以誠摯的謝意。

編者2008.2

3

緒論

一、實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的與意義

植物學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物科學(xué)專業(yè)學(xué)生首先要學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)類專業(yè)必修課。學(xué)生應(yīng)掌握植物學(xué)（一）實(shí)驗(yàn)的基本

理論、基本知識(shí)以及研究植物的一些基本方法和基本技能，如：普通光學(xué)顯微鏡的正確使用、植物制片、

徒手切片、顯微結(jié)構(gòu)觀察和記錄、生物繪圖等；并能綜合運(yùn)用這些基本知識(shí)、方法和技能，去研究植物各

種器官的結(jié)構(gòu)、器官之間的聯(lián)系以及植物個(gè)體發(fā)育過程中器官的形態(tài)建成過程。

在植物學(xué)（二）的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，學(xué)生應(yīng)掌握植物界各大類群的主要特征，了解它們在植物界中的地位

和演化規(guī)律，識(shí)別一些常見的與人類生產(chǎn)生活密切相關(guān)的抱子植物，并了解其形態(tài)結(jié)構(gòu)、生活習(xí)性、發(fā)育

過程。掌握種子植物分類演化方面重點(diǎn)科、屬、種的主要特征，熟悉植物檢索表的使用和編制，識(shí)別校園

植物，并能進(jìn)行植物標(biāo)本的采集、壓制和制作。

通過實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生加深對植物學(xué)（一）、植物學(xué)（二）課程理論知識(shí)的理解，建立結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)

的觀點(diǎn)、植物與環(huán)境相統(tǒng)一的觀點(diǎn)、系統(tǒng)與演化的觀點(diǎn)；提高實(shí)驗(yàn)意識(shí)，培養(yǎng)科學(xué)興趣和探索精神，學(xué)會(huì)

采集、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料和進(jìn)行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。理論聯(lián)系實(shí)際，調(diào)查校園或某一地區(qū)的植物資源，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新

精神和實(shí)踐能力。

二、實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行程序和要求

1.預(yù)習(xí)學(xué)生在課前應(yīng)認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)以及教材有關(guān)章節(jié)，必須對該次實(shí)驗(yàn)的目的要求、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、基

本原理和操作方法有一定的了解。

2.講解教師對該實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的安排及注意事項(xiàng)進(jìn)行講解，讓學(xué)生有充分的時(shí)間按實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)的要求進(jìn)行獨(dú)立

操作與觀察。

3.獨(dú)立操作與觀察除個(gè)別實(shí)驗(yàn)分組進(jìn)行外，一般由學(xué)生個(gè)人獨(dú)立進(jìn)行操作和觀察。在實(shí)驗(yàn)中要按實(shí)驗(yàn)指

導(dǎo)認(rèn)真操作，仔細(xì)觀察，作好記錄。

4.示教每次的實(shí)驗(yàn)都備有示教內(nèi)容，其目的是幫助學(xué)生了解某些實(shí)驗(yàn)中的難點(diǎn)，擴(kuò)大在實(shí)驗(yàn)課有限時(shí)間

內(nèi)獲得更多感性知識(shí)的機(jī)會(huì)。

5.作業(yè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告必須強(qiáng)調(diào)科學(xué)性，實(shí)事求是地記錄、分析、綜合。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)呈交。學(xué)生應(yīng)認(rèn)真閱讀

教師批改后的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，不斷提高實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。

6.小結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，由師生共同小結(jié)本次實(shí)驗(yàn)的主要收獲及今后應(yīng)注意的問題。

三、實(shí)驗(yàn)規(guī)則和注意事項(xiàng)

1.實(shí)驗(yàn)課應(yīng)遵守時(shí)間。

2.實(shí)驗(yàn)前必須認(rèn)真閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，明確本次實(shí)驗(yàn)的目的要求、實(shí)驗(yàn)原理和注意事項(xiàng)，熟悉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、方

法和步驟。

3.上實(shí)驗(yàn)課時(shí)必須攜帶實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙及繪圖文具等，按規(guī)定座位入坐。

4.實(shí)驗(yàn)前，要認(rèn)真檢查所用儀器、藥品是否完好、齊備，如有缺損應(yīng)及時(shí)向教師報(bào)告，自己不得隨意調(diào)

換標(biāo)本、儀器等。沒有得到教師的允許，不能動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室其它非本次實(shí)驗(yàn)所用的儀器設(shè)備。

5.實(shí)驗(yàn)時(shí)要遵守紀(jì)律。有問題舉手提問，嚴(yán)禁彼此談笑喧嘩，不準(zhǔn)在實(shí)驗(yàn)室吃食和會(huì)客。

6.實(shí)驗(yàn)時(shí)要遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程，嚴(yán)格按照教師的安排和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)的要求進(jìn)行。使用顯微鏡檢查非永久片

時(shí)，要特別小心。防止染料或試劑沾污鏡頭和鏡臺(tái)，不要用高級(jí)顯微鏡觀察非永久片。操作要正規(guī)，觀察

要認(rèn)真仔細(xì)，及時(shí)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

7.要愛護(hù)儀器、標(biāo)本和器材設(shè)備，注意節(jié)約實(shí)驗(yàn)材料、藥品和水電。如有損壞器材應(yīng)立即報(bào)告，并主動(dòng)

登記、說明情況。凡是有化學(xué)藥品的試劑和溶液瓶上，必須貼上標(biāo)簽，注明名稱、成份、濃度、配制日期。

8.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，所有液體廢物、酸類、染料等，應(yīng)倒在廢物缸內(nèi)，不能倒在水槽中。

認(rèn)真清理好儀器、藥品及其他用品，放回原處。值日生要負(fù)責(zé)清掃地面，收拾實(shí)驗(yàn)用品，處理垃圾，關(guān)好

水、電、門窗后再離開。

2

第一部分植物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)

一、顯微鏡

在一般的教學(xué)及科研工作中，廣為應(yīng)用的是光學(xué)顯微鏡，其中的復(fù)式顯微鏡，是研究植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)、

組織特征和器官構(gòu)造的常用重要工具。因此，為了正確操作、妥善保管和維護(hù)顯微鏡，每個(gè)學(xué)生都必須了

解和掌握復(fù)式顯微鏡的結(jié)構(gòu)、使用和維護(hù)方法。

（-）顯微鏡的類型

1.光學(xué)顯微鏡

利用可見光作光源，用玻璃透鏡作為成像系統(tǒng)的顯微鏡稱為光學(xué)顯微鏡，可分為單式和復(fù)式顯微鏡兩

類。單式顯微鏡結(jié)構(gòu)簡單，由一個(gè)透鏡組成，如放大鏡，放大倍數(shù)在10倍以下。構(gòu)造稍復(fù)雜的單式顯微

鏡為解剖顯微鏡，也稱體視顯微鏡，是由幾個(gè)透鏡組成的，其放大倍數(shù)在200倍以下。放大鏡和解剖顯微

鏡放大的物像都是與實(shí)物方向一致的虛像，即直立的虛像。復(fù)式顯微鏡結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，至少由兩組以上透

鏡組成，放大倍數(shù)較高，其有效放大倍數(shù)可達(dá)1250倍，最高分辨力為0.2um。除一般實(shí)驗(yàn)使用的普通顯

微鏡外，還有供研究用的暗視野顯微鏡、相差顯微鏡和熒光顯微鏡等。

2.電子顯微鏡

使用電子束作光源，以特殊的電極和磁極作透鏡來代替玻璃透鏡的一類顯微鏡。電子顯微鏡能分辨相

距0.2nm左右的物體，放大倍數(shù)可達(dá)80~120萬倍，其分辨力比光鏡大1000倍，是了解超微結(jié)構(gòu)的重要

精密儀器。

（-）復(fù)式顯微鏡的結(jié)構(gòu)

復(fù)式顯微鏡有單筒目鏡和雙筒目鏡（圖1-1）兩種類型。這兩種顯微鏡的基本構(gòu)造相同，都是山光學(xué)

部分和機(jī)械部分組成。

1.機(jī)械部分

⑴鏡座顯微鏡的底座，支持整個(gè)鏡體，使顯微鏡放置平穩(wěn)。

⑵鏡柱鏡座上面直立的短柱，支持鏡體上部的各部分。

⑶鏡臂彎曲如臂，連接鏡柱和目鏡筒，為取、放顯微鏡時(shí)執(zhí)手的部位。

（4）鏡筒顯微鏡上部圓形中空的長筒，其上端放置目鏡，下端連接物鏡轉(zhuǎn)換器，鏡筒的長度一般是160mm,

有的是170mm。鏡筒的作用是保護(hù)成像的光路和亮度。

⑸物鏡轉(zhuǎn)換器接于鏡筒下端的圓盤，盤上有3?4個(gè)螺旋圓孔，為安裝物鏡的部位。當(dāng)旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器

時(shí)，物鏡即可固定在使用的位置上。

（6）載物臺(tái)放置玻片標(biāo)本的平臺(tái)，中央有一圓孔，以通過光線。載物臺(tái)上裝有玻片推動(dòng)器，當(dāng)裝片用標(biāo)

本片夾固定好后，調(diào)節(jié)縱、橫向移動(dòng)手輪，裝片能向前后、左右移動(dòng)。

⑺調(diào)焦裝置為了得到清晰的物像，必須利用調(diào)焦裝置調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本之間的距離，使其與物鏡的工作

距離相等，這種操作稱為調(diào)焦。調(diào)焦裝置位于鏡柱兩側(cè)，有兩對齒輪，大的一對叫粗調(diào)焦螺旋，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)可

使載物臺(tái)上下升降，轉(zhuǎn)動(dòng)一圈升降10mm。小的一對為細(xì)調(diào)焦螺旋，旋轉(zhuǎn)一圈可使載物臺(tái)升降0.1mm。

（8）聚光器調(diào)節(jié)螺旋位于鏡柱的左側(cè)，旋轉(zhuǎn)它可使聚光器（或聚光鏡）上、下移動(dòng)，借以調(diào)節(jié)光線。

3

圖1一1雙目復(fù)式顯微鏡的構(gòu)造

1目鏡2止緊螺釘3物鏡轉(zhuǎn)換器4物鏡5載物臺(tái)6聚光器7聚光器調(diào)節(jié)螺旋8調(diào)焦

螺旋9鏡座10亮度調(diào)節(jié)開關(guān)

插入圖片：賀學(xué)禮P3

2.光學(xué)部分

山成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成。前者包括物鏡和目鏡，后者包括電光源和聚光器。

（1）物鏡是決定顯微鏡質(zhì)量的最重要部件，安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上。每臺(tái)顯微鏡一般有3?4個(gè)放大倍數(shù)不

同的物鏡，即低倍物鏡（4X和10X）、高倍物鏡（40X）和油鏡（100X）,鏡檢時(shí)可根據(jù)需要選擇。物鏡

可將被檢物體作第一次放大，其上一般標(biāo)有放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑（N.A）,即鏡口率。

顯微鏡的工作距離是指物鏡最下面透鏡的表面與蓋玻片（厚度為0.17?0.18mm）上表面之間的距離。

物鏡的放大倍數(shù)越高，它的工作距離越?。ū?T）。一般油鏡的工作距離僅為0.2mm,所以使用時(shí)要倍加

注意。

表1-1不同放大倍數(shù)物鏡的數(shù)值孔徑和工作距離

物鏡倍數(shù)10X20X40X100X

數(shù)值孔徑（N.A）0.250.500.651.25

工作距離（mm）6.52.00.60.2

⑵目鏡安裝在鏡筒上端，也叫接目鏡，通常由兩個(gè)透鏡組成。它的作用是將物鏡所成的像進(jìn)一步放大。

目鏡上刻有放大倍數(shù)，常用的目鏡有5X、10X、16X等，可根據(jù)需要選擇使用。

⑶光源早期的顯微鏡使用反光鏡將光線反射到聚光器上…現(xiàn)在生產(chǎn)的新型顯微鏡多采用電光源，為6V

10W的碘鴇燈。

⑷聚光器裝在載物臺(tái)下，由聚光鏡（幾個(gè)凸透鏡）和虹彩光圈（可變光欄）等組成，它可將平行光線

4

匯聚成束，集中在一點(diǎn)，以增強(qiáng)被檢物體的照明。使用高倍鏡時(shí)，視野范圍小，需上升聚光器，使用低倍

鏡時(shí)則相反。

⑸虹彩光圈裝在聚光器內(nèi)，撥動(dòng)光欄調(diào)節(jié)桿，可使光圈擴(kuò)大或縮小，借以調(diào)節(jié)通光量。

（三）顯微鏡的成像原理

顯微鏡的目鏡和物鏡各由若干個(gè)透鏡組成，但可看成是一個(gè)凸透鏡。根據(jù)凸透鏡的成像原理，來自電

光源（或反光鏡）的平行光線向上進(jìn)入聚光器，通過聚光器的光線會(huì)聚成束，穿過生物制片（制片要薄，

一般為8?lOum）,進(jìn)入物鏡，然后在目鏡的焦點(diǎn)平面形成了一個(gè)經(jīng)過第一次放大的倒置的實(shí)像，這一實(shí)

像經(jīng)過目鏡的二次放大，最后進(jìn)入人的視野成像。因此，當(dāng)我們觀察實(shí)驗(yàn)標(biāo)本時(shí)，所看到的最后的物像，

是經(jīng)過二次放大的、方向相反的倒置的虛像。

從成像的原理看，物鏡在成像過程中起主要作用。因此，物鏡質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度，

目鏡只不過是放大物鏡所成的像，而不能增加成像的清晰度。

（四）使用顯微鏡的主要方法和步驟

1.取鏡和放置

按固定編號(hào)從鏡盒（柜）中取出顯微鏡。取鏡時(shí)應(yīng)右手握住鏡臂，左手平托鏡座，保持鏡體直立，防

止目鏡從鏡筒中滑出。放鏡時(shí)動(dòng)作要輕，一般應(yīng)放在座位的左側(cè)，距桌邊約5?6cm處，以便觀察和防止

顯微鏡掉落。

2.對光

旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，先把低倍物鏡轉(zhuǎn)到中央，對準(zhǔn)載物價(jià)上的通光孔，然后用左眼或雙眼從目鏡向下注

視，同時(shí)用手轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使鏡面向著光源，此時(shí)在鏡筒內(nèi)就可以看到一個(gè)圓形的明亮視野。如果使用電

光源，應(yīng)接通電源，打開顯微鏡開關(guān)，調(diào)節(jié)電位器手柄（亮度調(diào)節(jié)開關(guān)），使光亮合適并充滿整個(gè)視場。

此外，還可利用聚光器或虹彩光圈調(diào)節(jié)光強(qiáng)度，使視野內(nèi)的光線既均勻明亮又不刺眼。

3.雙目鏡筒間距的調(diào)節(jié)

用雙筒目鏡觀察時(shí)，有時(shí)會(huì)看到重像，有時(shí)只能用一個(gè)目鏡觀察，這是由于雙筒目鏡間距與觀察者的

瞳孔距不一致造成的。調(diào)節(jié)雙目鏡筒間距時(shí)，用10X物鏡觀察，先水平方向向外拉動(dòng)目鏡筒，使兩目鏡的

中心距離與觀察者的瞳孔距一致，然后調(diào)節(jié)目鏡筒刻度值，使之和刻度盤示值相同。

如果使用轉(zhuǎn)軸雙目顯微鏡，則直接轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡筒，使兩目鏡的中心距離與觀察者的瞳孔距一致。以右眼

觀察到清晰的物像為準(zhǔn)，調(diào)節(jié)左眼目鏡筒的視度圈，使之左右成像清晰一致。

4.低倍物鏡的使用

觀察任何標(biāo)本，都必須先用低倍鏡，因?yàn)榈捅剁R視野范圍大，容易發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定要觀察的部位。

（1）放置切片轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦螺旋，使載物臺(tái)降至最低位置，向外撥動(dòng)標(biāo)本片夾手柄，將玻片標(biāo)本放在載

物臺(tái)匕用標(biāo)本片夾固定，旋轉(zhuǎn)縱、橫向移動(dòng)手輪，使玻片標(biāo)本正對通光孔的中心。

（2）調(diào)整焦點(diǎn)將10X物鏡轉(zhuǎn)入光路，通過目鏡?邊觀察標(biāo)本，一邊旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦螺旋，使載物臺(tái)緩慢上

升，直到看清物像為止，再稍微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)焦螺旋，使物像更加清晰。有的顯微鏡帶有4X物鏡，使用時(shí)其

焦距與10X和40X物鏡不同，因此當(dāng)由4X物鏡轉(zhuǎn)換為10X物鏡觀察制片時(shí)，需要重新聚焦。

（3）觀察焦點(diǎn)調(diào)好后，可根據(jù)需要移動(dòng)玻片，把要觀察的部分移到視野正中心，找到物像后，還可根

5

據(jù)材料的厚薄、顏色、成像的反差強(qiáng)弱是否合適等再進(jìn)行調(diào)節(jié)。如果視野太亮，可降低聚光器或縮小光圈

或減小亮度（亮度開關(guān)），反之則升高聚光器或開大光圈或提高亮度。

5.高倍物鏡的使用

在觀察較小的物體或微細(xì)結(jié)構(gòu)時(shí)，可以使用40X高倍物鏡。

（1）選好目標(biāo)由于高倍物鏡只能把低倍視野中心的一小部分加以放大，因此，使用高倍物鏡前，應(yīng)先

在低倍鏡下選好目標(biāo)，將其移至視野中央，然后轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，移開低倍鏡，小心換上高倍鏡。

（2）調(diào)整焦點(diǎn)正常情況下，當(dāng)換上高倍物鏡后，只要略微調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋（禁用粗調(diào)焦螺旋），就可

獲得清晰的物像。

（3）調(diào)節(jié)亮度換用高倍物鏡后，視野變小變暗，所以需要通過升高聚光器或開大光圈來調(diào)節(jié)視野亮度。

6.顯微鏡使用后的整理

觀察結(jié)束后，調(diào)節(jié)亮度開關(guān)（電位器手柄）回到最小值，關(guān)掉電源，拔下插頭。旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦螺旋，使

載物臺(tái)下降到最低位置，取下玻片，擦凈鏡體，罩上防塵罩，然后右手握住鏡臂，左手平托鏡座，按號(hào)放

回鏡箱（柜）中。

（五）放大率、鏡口率和視野寬度

L放大率的計(jì)算

顯微鏡的總放大率是由目鏡和物鏡原有放大倍數(shù)的乘積來表示的，例如目鏡為10X,物鏡為40X,

則顯微鏡的總放大率=10X40=400倍。如果目鏡的放大倍數(shù)過大，得到的放大虛像會(huì)很不清晰，所以一般

目鏡不宜過大。

2.鏡口率（數(shù)值孔徑）

被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的分辨率并不完全取決于放大倍數(shù)，而主要是由鏡口率決定的。N.A表示鏡口率，

在物鏡鏡頭上常標(biāo)有N.A數(shù)值，N.A的值越大，分辨能力越高。所謂分辨率是指分辨被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的

能力，即判別標(biāo)本兩點(diǎn)之間最短距離的本領(lǐng)。因此，鏡口率越大，物鏡的價(jià)值越大，它是衡量顯微鏡質(zhì)量

的最主要依據(jù)。高級(jí)物鏡只有和優(yōu)良的聚光器配合使用，才能充分發(fā)揮顯微鏡的能力，因?yàn)槲镧R分辨率受

聚光器鏡口率影響。物鏡有效鏡口率的計(jì)算公式如下：

物鏡的有效鏡口率=（物鏡鏡口率+聚光器鏡口率）/2

例如，鏡口率為0.65的物鏡,與鏡口率為0.45的聚光器配合使用，則物鏡的有效鏡口率就降低為0.55。

因此，在使用時(shí)要注意調(diào)節(jié)，使兩者鏡口率相等。

3.視野寬度

目鏡光欄所圍繞的圓即視野寬度。視野寬度越大，觀察破片標(biāo)本的面積就越大，則顯微鏡放大倍數(shù)越

小。所以，視野寬度與放大率成反比。因此從低倍物鏡轉(zhuǎn)換到高倍物鏡時(shí)，必須先把標(biāo)本移到視野正中央,

否則標(biāo)本的影像就會(huì)落到縮小的視野外面。

（六）解剖顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法

1.解剖顯微鏡的結(jié)構(gòu)

解剖顯微鏡的機(jī)械部分由底盤、載物臺(tái)、鏡柱、鏡臂、調(diào)焦手輪、物鏡變倍調(diào)節(jié)手輪等組成（圖1-2）:

光學(xué)部分由變倍物鏡、半五角棱鏡、直角棱鏡和目鏡組成。被觀察物體經(jīng)變倍物鏡第一次放大后，成像于

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視場光欄處，再由目鏡作第二次放大，半五角棱鏡可使光軸偏轉(zhuǎn)45°（便于觀察），直角棱鏡則使物像正

轉(zhuǎn)，使目鏡焦平面上觀察到與物體方位一致的正像，這有利于在解剖鏡下的實(shí)際操作。直角棱鏡組可轉(zhuǎn)動(dòng),

以便調(diào)節(jié)瞳孔間距離，變焦系統(tǒng)為機(jī)械補(bǔ)償式結(jié)構(gòu)，通過物鏡變倍手輪旋轉(zhuǎn)，可選擇物鏡的放大倍率，并

能獲得穩(wěn)定的像面。

2.解剖顯微鏡的操作步驟

1.接通電源，根據(jù)需要選擇透射或反射照明系統(tǒng)。

2.將被觀察物體放在載物臺(tái)中心位置，并用片夾壓穩(wěn)。

3.扳動(dòng)左右目鏡筒，使之與觀察者雙眼瞳距致。把物鏡調(diào)節(jié)到最低倍率（0.7X）,然后慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)焦

手輪，先使右目鏡看清物像，再調(diào)節(jié)左目鏡視度圈，即可得到與右目鏡同樣清晰的物像。

4.根據(jù)需要，可通過變倍調(diào)節(jié)手輪調(diào)節(jié)放大倍率。

賀學(xué)禮解剖顯微鏡的構(gòu)造P7

圖1-2解剖顯微鏡的構(gòu)造

1棱鏡照殼2目鏡3物鏡4壓簧片5載物臺(tái)6物鏡變倍調(diào)焦螺旋7調(diào)焦螺旋8反射照明

器9底盤10雙向開關(guān)

（七）使用顯微鏡的注意事項(xiàng)

L使用顯微鏡時(shí);必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

2.取鏡、放鏡動(dòng)作要輕，防止震動(dòng)，以免造成光學(xué)系統(tǒng)光軸的偏斜而影響觀察。

3.不得自行拆開顯微鏡零件，不要把目鏡從鏡筒中取出，否則會(huì)使灰塵落入鏡筒內(nèi)，不易清除。

4.用高倍物鏡觀察標(biāo)本時(shí)，必須先在低倍物鏡下看清物像并將其移至視野中心，換匕高倍物鏡后，只能調(diào)

節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋。

5.任何旋鈕轉(zhuǎn)動(dòng)有困難時(shí)，絕不能用力過大，而應(yīng)查明原因，排除障礙。如果自己不能解決時(shí)，要向指導(dǎo)

教師說明，幫助解決。

6.用雙筒目鏡的光學(xué)顯微鏡觀察時(shí)，必須睜開雙眼，切勿緊閉一眼。

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7.標(biāo)本必須加蓋蓋玻片，制作帶水或藥液的玻片標(biāo)本時(shí)，必須兩面擦干再放載物臺(tái)上觀察。

8.保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭上，否則容易磨損鏡頭。防止試劑或溶液玷污顯微鏡，特別

是高倍物鏡很容易被染料或試劑玷污，如被玷污時(shí)，應(yīng)立即用擦鏡紙擦拭干凈。顯微鏡用過后，應(yīng)用清潔

棉布輕輕擦拭（不包括物鏡和目鏡鏡頭）。

9.要保護(hù)物鏡、目鏡和聚光器中的透鏡。光學(xué)玻璃比一-般玻璃的硬度小，易于損傷。擦拭光學(xué)透鏡時(shí)，只

能用專用的擦鏡紙，將擦鏡紙折疊為幾折（不少于四折），從一個(gè)方向輕輕擦拭鏡頭，每擦一次，擦鏡紙

就要折疊一次。然后繞著物鏡或目鏡的軸旋轉(zhuǎn)地輕輕擦拭。

二、臨時(shí)裝片法

臨時(shí)裝片法是用少量的新鮮植物材料?，放在載玻片上的水滴中，蓋上蓋玻片，做成臨時(shí)裝片進(jìn)行顯微

鏡觀察。具體操作方法如下（圖1—3）：

1.擦凈載玻片和蓋玻片用左手的拇指和食指夾住載玻片的邊緣，右手將紗布包住載玻片的上下兩面，反

復(fù)輕輕地擦拭。擦蓋玻片時(shí)，應(yīng)十分小心。先把紗布鋪在右手掌上，用左手拇指和食指夾住蓋玻片的邊緣,

將其放在紗布上，然后用右手拇指和食指從上下兩面隔著紗布，慢慢地輕擦。

2.載玻片上滴水用滴管在潔凈載玻片的中央滴一滴清水，挑選小而薄的材料，放在載玻片上的水滴中，

用解剖針或鐐子將材料展開。

3.加蓋玻片右手持鑲子，輕輕夾住蓋玻片，讓蓋玻片邊緣與材料左邊水滴的邊緣接觸，然后慢慢放下蓋

玻片。這樣，蓋玻片下的空氣被水?dāng)D掉，可以避免產(chǎn)生氣泡。如果水分過多，則材料和蓋玻片容易浮動(dòng)，

影響觀察，可用吸水紙吸去多余水分。

如果所做的臨時(shí)切片需要染色，可在蓋玻片一側(cè)加一滴染色劑，另一側(cè)用吸水紙吸水，使染色劑擴(kuò)散。

也可在加蓋玻片前加染色劑。

三、徒手切片法

徒手切片法，狹義上是指用刀把新鮮材料切成薄片的方法。廣義來講，只要不經(jīng)過任何處理而直接用

刀或徒手切片器切新鮮材料，統(tǒng)稱徒手切片法。

（一）材料的選擇

一般應(yīng)選取發(fā)育正常、有代表性、軟硬適度和便于手指夾持的材料，軟而薄的材料（有些葉片），可

用硬泡沫塑料（包裝用的聚苯乙烯）、胡蘿卜根或馬鈴薯塊莖等，夾住材料一起切片。有些葉片可卷成筒

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狀再切。

（-）徒手切片的方法和步驟

1.切片前，在小培養(yǎng)皿中盛以清水，準(zhǔn)備毛筆、滴管、刀片和植物材料。

2.用解剖刀或硬刀片將植物材料截成適當(dāng)?shù)亩螇K，斷面一般以不超過3?5mm）小段長度約2?3cm為宜。

3.切片時(shí)，用左手拇指、食指和中指夾住材料，拇指略低于食指，且材料要稍突出在手指之上，以免刀口

割傷手指，右手執(zhí)刀片，平放在左手的食指上，刀口向內(nèi)，以均勻的動(dòng)作，自左前方向右后方連續(xù)拉切。

注意是手臂用力而非手腕用力，材料要一次切下，整個(gè)切片過程中應(yīng)用清水濕潤材料和刀片;使之滑潤。

切下許多薄片后，用濕毛筆將它們移入盛水的培養(yǎng)皿中（圖1—4）。

圖1一4徒手切片法力口圖：葉創(chuàng)興P22

4.從培養(yǎng)皿中挑選薄的切片，放在載玻片上，制成臨時(shí)裝片觀察。

5.簡單染色根據(jù)需要和觀察目的不同，選擇不同的染劑進(jìn)行染色。

（1）0.1%番紅水溶液染細(xì)胞核和木質(zhì)化、栓質(zhì)化的細(xì)胞壁，用以區(qū)分細(xì)胞核與質(zhì)，木質(zhì)部與韌皮部。

（2）釘紅（1：10000）水溶液染胞間層，顯示厚角組織的特點(diǎn)。

（3）0.25%硫堇水溶液染細(xì)胞核和核仁，區(qū)分含木質(zhì)素和纖維素的細(xì)胞壁，但要用KNaHCOs水溶液封片。

四、簡單的顯微化學(xué)測定

顯微化學(xué)方法是應(yīng)用化學(xué)藥劑處理植物的組織細(xì)胞，使其中某些微量的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化，從而產(chǎn)生

特殊的顏色反應(yīng)，并通過顯微鏡來鑒定這些物質(zhì)的性質(zhì)及分布狀態(tài)的方法。

1.淀粉的鑒定淀粉是植物體中主要的貯藏物質(zhì)，不同植物淀粉粒的形狀不同，用稀釋的碘-碘化鉀溶液

與淀粉作用，呈特殊的藍(lán)色反應(yīng)。所以常用碘液（見實(shí)驗(yàn)藥劑配制）測定淀粉的存在，注意使用時(shí)濃度不

宜過高，否則難以看清淀粉粒輪紋及臍點(diǎn)。

2.蛋白質(zhì)（糊粉粒）的鑒定糊粉粒是植物細(xì)胞中貯藏蛋白質(zhì)的主要形式。測定蛋白質(zhì)常用的方法也是用

碘-碘化鉀溶液，當(dāng)?shù)庖号c蛋白質(zhì)作用時(shí)，呈黃色反應(yīng)。

3.脂肪和油滴的鑒定測定脂肪的方法是利用蘇丹ni的酒精溶液或蘇丹w的丙酮溶液（見實(shí)驗(yàn)藥劑配制）,

染色后，呈橘紅色。但這不是專一的反應(yīng)，蘇丹HI、蘇丹IV均能使樹脂、揮發(fā)油、角質(zhì)和栓質(zhì)染色。在鑒

定過程中，可稍加熱以促進(jìn)反應(yīng)。

4.木質(zhì)素的測定用鹽酸和間苯三酚先后處理材料，是細(xì)胞壁木質(zhì)素成分的鑒別方法，根據(jù)顏色反應(yīng)的深

淺能顯示細(xì)胞壁中木質(zhì)化的程度。

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取新鮮植物材料的切片放在載玻片上，加40%鹽酸1?2滴，3?5min后，再加5%間苯三酚的酒精溶液

(見實(shí)驗(yàn)藥劑配制)，即發(fā)生櫻紅色或紫紅色的反應(yīng)。導(dǎo)管、纖維和石細(xì)胞含豐富的木質(zhì)素，所以顏色反應(yīng)

典型。

五、滑走切片法

滑走切片法是用滑走切片機(jī)對植物材料直接進(jìn)行切片的方法，它適合于對一些較硬的材料，如木本莖、

根和枝條等的切片。

(-)材料處理

1.固定與排氣植物材料一般要用F.A.A.固定液固定兩天，因材料中常含有空氣，固定時(shí)往往漂浮，影響

藥液的滲入，所以可用抽氣機(jī)或簡易抽氣方法除去材料內(nèi)部的氣體。也可用水煮法，即先將材料煮沸20?

30min,取Hl投入冷水中30~40min后再煮沸，反復(fù)多次。

2.軟化滑走切片的材料比較堅(jiān)硬，必須設(shè)法將其軟化。

(1)水煮法水煮既可以排除氣體，還可以軟化材料，木材一般要直接煮3?5h。

(2)甘油-酒精法將已排除空氣的材料，浸入比例為1：1的純甘油和70%酒精的軟化劑中，軟化時(shí)間視

不同材料而定，一至數(shù)周不等。

(3)氫氟酸法材料先煮2?3h,間歇反復(fù)進(jìn)行，或者連續(xù)煮沸24h,冷卻后放入市.售氫氟酸(37%?40%)

與水各半的混合液中。盛裝氫氟酸必須用特制蠟質(zhì)或塑料容器。軟化操作最好在通風(fēng)櫥內(nèi)，-個(gè)月左右可

以軟化完全。要檢查材料是否軟化合適，必須先用流水充分洗滌后才可進(jìn)行切割，并且要帶上橡皮手套。

(二)切片方法

1.把材料固定在夾物部的軟木塞中，材料上端應(yīng)露出軟木塞外0.5cm。利用厚度調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)好切片的厚度。

2.將夾刀部推到頂端，放松刀片夾螺旋，使切片刀平面向下，斜面向上，固定在刀架上。

3.把夾刀部拉向夾物裝置，使刀口接近材料，調(diào)節(jié)升降器，使材料切面稍接觸刀刃。

4.右手用均勻的力量拉動(dòng)夾刀部，切片刀沿著滑行軌道由前端向后移動(dòng)，經(jīng)過材料時(shí)就切下一塊，并粘在

刀口上。此忖用毛筆蘸水把切片取下放入有水的培養(yǎng)皿中，每切?片，都需用毛筆蘸水濕潤刀口和材料。

然后推回夾刀部，轉(zhuǎn)動(dòng)厚度推進(jìn)器，再拉動(dòng)刀架。如此來回推拉，便可獲得許多厚度均勻的完整切片。

切片結(jié)束后，注意清理切片刀和切片機(jī)，以免生銹或布滿灰塵。

六、組織離析法

離析法的原理是用一些化學(xué)藥品配成離析液，使胞間層溶解，從而獲得分散的、單個(gè)的完整細(xì)胞，以

便觀察不同組織的細(xì)胞形態(tài)和特征。

(-)硬組織離析法

1.杰弗賴(Jeffrey)離析法即硝酸-鋸酸法。取枝條等硬組織，用刀切成1?2cm的小塊或小條，投入

試管中，加水煮沸數(shù)min,排除材料中的空氣，直至材料沉入管底。然后加入杰弗賴離析液(10%硝酸與

10%格酸等量混合)，置于35匕溫箱中2?3d。在離析過程中，離析液由紅黃色漸變?yōu)榫G色，以至黑綠色,

離析作用逐漸減弱。如果材料仍未松軟，可以更換離析液。離析完畢，倒去離析液，用水沖洗4~5次，

每次5?lOmin,最后保存于70%酒精中備用。

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2.舒爾澤（Schultze）法即濃硝酸法。將堅(jiān)硬的木材劈成碎塊，投入盛有濃硝酸（市售濃硝酸加1份蒸

儲(chǔ)水配制成）的試管中，材料需完全浸沒在硝酸溶液中，再加入少量氯化鉀晶體，在酒精燈上加熱以至沸

騰，直至材料變白為止。倒去離析液，清水沖洗4?5次，最后保存于70%酒精中。

（二）軟組織離析法

1.鹽酸法將植物莖段沿縱軸切成若干小片，浸入95%酒精和鹽酸（4：1）的混合液中1?2d,經(jīng)水洗，

換4?5次，移入10%氨水10?15min,再水洗，分離后的材料保存于70%酒精中。

2.氨水離析法將剛發(fā)芽的蠶豆或其它植物幼根，縱切成薄片，在濃氨水中浸泡24h,再移入10%氫氧化

鈉的50%酒精溶液中浸24h,然后用水清洗。為了清楚地觀察分生細(xì)胞形態(tài)，制片時(shí)可進(jìn)行染色。

染色方法：用1%碘液滴在材料上，然后再加一滴66.5%硫酸，材料變成深藍(lán)色。

染液配制：①取1.5g碘化鉀溶于100ml的蒸儲(chǔ)水中，全部溶解后，再加入Ig碘。②7份濃硫酸加上

3份蒸儲(chǔ)水。配制時(shí)將濃硫酸緩慢加入蒸饋水中，并用玻棒不斷攪動(dòng)。

七、壓片法

壓片法是將植物的幼嫩器官如根尖、莖尖和幼葉壓碎在載玻片上的一種非切片制片法。這種方法比較

簡便，在觀察植物細(xì)胞的有絲分裂、植物細(xì)胞遺傳學(xué)等方面的研究中應(yīng)用非常普遍。

壓片法的基本步驟：取材一前處理一水解離析、固定染色一壓片。

制作植物根尖細(xì)胞有絲分裂的壓片，可取洋蔥或大蒜的鱗莖為實(shí)驗(yàn)材料-，方法如下：

1.根尖的培養(yǎng)將洋蔥或3-5蒜瓣（竹托穿好）架在燒杯口上，杯中盛滿清水，使洋蔥頭或蒜瓣的下部

浸入水中，置溫暖處，注意每天換水，3?5d后即可長出嫩根。

2.材料的固定和離析用等量的濃鹽酸和95%酒精配成固定離析液。當(dāng)洋蔥或蒜瓣嫩根長到2?5cm時(shí)一，即

可進(jìn)行固定和離析細(xì)胞的處理。取根時(shí)間一般在上午10?11點(diǎn)，剪下根端的3mm左右，立即投入上述固

定離析液中，經(jīng)5?20min,取出放入清水中漂洗lOmin左右即可制片。也可經(jīng)過30樂50%酒精后將其保

存在70%酒精中。

3.壓片的制作取經(jīng)過處理的根尖一個(gè)，放在潔凈的載玻片上，用鎰子壓裂根尖，加2滴改良苯酚品紅液

（見實(shí)驗(yàn)藥劑的配制方法）染色，放置幾分鐘后蓋上蓋玻片，為壓薄材料，可用鉛筆的橡皮頭在蓋片上輕

輕敲打。吸去多余的藥液后，即可鏡檢。如果染色效果不明顯，可將載玻片置酒精燈上微微加熱，以促進(jìn)

染色。

除用改良苯酚品紅液染色外，還可用醫(yī)用紫藥水滴染（1滴紫藥水加5滴水稀釋），使用方便，效果很

好，能獲得染色清晰的染色體。

八、涂布法

涂布法是將花粉和花粉母細(xì)胞等疏松組織，均勻地涂布在載玻片上的一種制片法，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于花

粉粒的發(fā)育、染色體計(jì)數(shù)等的教學(xué)和科研中。方法步驟如下：

（-）取材與固定

制作花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂全過程的玻片標(biāo)本，必須采集幼嫩的呈綠色的花藥（淺綠色而透明者太嫩，

黃綠色或黃色者則已過時(shí)）。不同植物的花期不同，采集的時(shí)間也不一樣。大蔥的花期較長，掌握大蔥開

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花的時(shí)間規(guī)律，采集花序長度在1.5?3cm的幼嫩花序，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，取大蔥花蕾長度在3?4mm的花藥材料，

均可用于實(shí)驗(yàn)觀察。山于植物減數(shù)分裂也有晝夜的節(jié)律性，所以一般在清晨6?7時(shí)和下午4?5時(shí)取材為

宜。

一般說來，小型花朵采集后，可將小花甚至整個(gè)花序固定于卡諾固定液中（見實(shí)驗(yàn)藥劑配制），大型

花朵可以只固定雄蕊的花藥，經(jīng)過2?24h后，逐級(jí)換入95%酒精和85蛤酉精浸洗，再轉(zhuǎn)入70%酒精中保存。

（二）染色與涂布

取已經(jīng)固定好的材料轉(zhuǎn)入50%酒精，經(jīng)蒸儲(chǔ)水清洗后，取出個(gè)花藥放在干凈的載玻片上，加?滴改

良苯酚品紅液，切去花藥的一端，并用小鏡子夾著花藥，將其切面放在載玻片上涂抹，再加一滴45%醋酸

使之軟化與分色，蓋上蓋玻片，用橡皮頭輕壓蓋片，使花粉母細(xì)胞均勻散開，即可觀察。

（三）永久封片的制作

選擇染色清晰而分散又好的涂片標(biāo)本，放干凈處或加蓋的大培養(yǎng)皿中4?6h后，再用下列方法制成永

久封片。

制作過程：準(zhǔn)備5套（編號(hào)①?⑤）直徑約12cm的培養(yǎng)皿，每套培養(yǎng)皿中放一根短玻棒，按順序倒

入①50%乙醇一②95%乙醇f③100%乙醇一④1/2無水乙醇+1/2叔丁醇一⑤叔丁醇。將蓋玻片朝下放入①

培養(yǎng)皿中，一端擱在玻棒上，使蓋玻片自然脫落，然后將蓋玻片或載玻片（看材料粘在哪個(gè)玻片上）依次

移入②?⑤，順序脫水、透明各2?3min,最后用濾紙吸去多余的叔丁醇，滴上加拿大樹膠封片。

九、永久性玻片標(biāo)本的制作

植物材料除了制成臨時(shí)裝片進(jìn)行觀察外，還可以根據(jù)需要制作成永久性玻片標(biāo)本。

（一）簡易制作

在顯微鏡下挑選合適的徒手切片、滑行切片、離析材料以及表皮組織等，按下列步驟操作。

1.固定在盛有F.A.A.或F.P.A.固定液的染色皿中，將材料固定處理30min?24h,使其盡可能地保持原

有結(jié)構(gòu)和狀態(tài)。

2.染色任選下列種染色液（見實(shí)驗(yàn)藥劑配制），對材料進(jìn)行染色。

（1）0.5%?現(xiàn)番紅的50畀酒精，染色2?24h至材料染成深紅色，再用50%酒精洗去多余的浮色，如果顏

色太深，可用50%酸酒分色幾秒鐘，再用50%酒精浸洗。

（2）代氏蘇木精液染色1?3h,取出材料用清水浸洗多次直至呈藍(lán)色，再移入30%和50%酒精中。

3.脫水70%和85%酒精分別浸泡標(biāo)本各1?3min,逐步減少標(biāo)本中的水分。

4.復(fù)染有些材料需要復(fù)染，用0.1%固綠的95%酒精復(fù)染10?30s,注意晃動(dòng)染色皿，促使染色均勻。

5.再脫水用無水乙醇（純酒精）浸洗兩次，每次1?2min。

6.透明材料在無水乙醇和二甲苯各半的混合液中浸泡1?2min,然后移入純二甲苯中3?5min。

7.封固用有二甲苯標(biāo)記的專用毛筆（切忌有水），將鏡檢合格的材料轉(zhuǎn)到載玻片的中央，立即加?滴加

拿大樹膠，封上蓋玻片。在載玻片的右側(cè)貼上標(biāo)簽，平置瓷盤中，放在30?40°C恒溫箱中烘干。

（-）石蠟切片法

以營養(yǎng)器官為例，簡介其操作過程如下：

1.取材與分割應(yīng)該選擇新鮮、老嫩適宜的有代表性的材料，切割成3?5mm長的小段（塊）。

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2.固定與排氣將切割好的材料，投入盛有F.A.A.或F.P.A.固定液的瓶中，固定液的用量，一般最少為

所固定材料總體積的20倍。蓋好瓶塞，用注射器針頭抽去組織中的空氣，或?qū)⒀b有材料和固定液的玻璃

瓶放在過濾瓶中進(jìn)行抽氣，使固定劑迅速浸入材料。固定24h后即可轉(zhuǎn)入下一步驟或長期保存。

3.沖洗與脫水用50%或70%酒精浸泡即沖洗，其濃度應(yīng)與固定液相近，然后逐漸用高濃度的酒精替換，

即脫水：一70%酒精一85%酒精一95%酒精一無水乙靜。每次處理約1?3h。

4.透明用1/2二甲苯利1/2無水乙醇混合液處理2?3h,此時(shí)可加入少許番紅干粉，使材料著色，便于

包埋在石蠟中后容易看見材料。再轉(zhuǎn)入純二甲苯中，每次1?2h,共處理兩次。

5.浸蠟將已透明的材料和二甲苯一起倒入小杯中，然后輕輕地逐步倒入已熔化的石蠟，放置在35?37tt

的熔蠟箱中逐漸升溫至50°C,使石蠟飽和為止，約需1?2d。

6.包埋將浸蠟材料的小杯轉(zhuǎn)移到50?60°C的恒溫包埋箱中，倒掉含有二甲苯的石蠟（可回收利用），換

用已熔化的新鮮純蠟，使留在組織內(nèi)的二甲苯全部被石蠟替代。然后將材料和石蠟一起倒入小紙盒中，根

據(jù)需要把材料按一定間距調(diào)整好位置，使之凝固（夏天可放入涼水盆中），形成蠟塊。

7.修塊準(zhǔn)備一些長方形硬木塊，將木塊一端先浸漬融化的廢蠟，然后將包埋好的蠟塊粘在木塊上（注意

材料的方向），冷凝后用單面刀片將材料四周多余的蠟修去，再用燒熱的解剖針燙平蠟塊與木塊的接合處,

使其連接牢固。

8.切片石蠟切片法一般使用旋轉(zhuǎn)切片機(jī)。切片時(shí)，裝上切片刀，再把蠟塊-木塊夾在固著裝置上，調(diào)整

固著裝置，使材料的切面與切片刀口平行。調(diào)整厚度標(biāo)志，使所指刻度正適合需要厚度（一般8?14pm）,

然后右手不停轉(zhuǎn)動(dòng)切片機(jī)，左手拿毛筆輕輕托住蠟帶，便可得到連續(xù)切片。

9.粘片在干凈的載玻片上，用玻棒取一滴明膠粘貼劑（見實(shí)驗(yàn)藥劑配制），使之涂勻，再在其上加幾滴

蒸鐳水。取鏡檢合格的蠟片，以光亮的一面朝下，平放于水面上，將載玻片置于35?45°C的燙板上，使蠟

片展平，用解剖針把材料擺好位置，去掉多余水分，置烘箱中4h以上。

10.染色制片高等植物根、莖、葉組織切片，常用番紅-固綠二重染色法，結(jié)果木質(zhì)化的細(xì)胞壁及細(xì)胞核

染成紅色，而具纖維素的細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)染成綠色。染色步驟如下：

（1）去蠟將粘有蠟片的載玻片放入純二甲苯中，使石蠟完全溶解，需lOmin左右。

（2）1/2二甲苯和1/2無水乙醇的混合液中過渡，約2min。

（3）下降至水一無水乙醇一95%酒精一85%酒精一70%酒精一50%酒精-3096酒精一蒸儲(chǔ)水。

（4）番紅染色0.5%?1%番紅水液中染色2?24h。

（5）自來水洗去多余的染液，必要時(shí)用酸酒分色。

（6）脫水f30%酒精一50%酒精f70%酒精，每步處理時(shí)間約30s。

余下步驟：一固綠復(fù)染一再脫水一透明一封固，基本同前面“簡易制作”。

十、生物繪圖的要求與方法

生物繪圖是形象描述生物（器官、組織或細(xì)胞）的外部形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)的一種重要的科學(xué)記錄方法。

它比文字記錄生動(dòng)具體，可以幫助我們理解植物的結(jié)構(gòu)和特征，是學(xué)習(xí)植物學(xué)必須掌握的技能技巧。

1.科學(xué)性和準(zhǔn)確性仔細(xì)觀察標(biāo)本或切片，認(rèn)真學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，正確理解各部特征，選擇典型部位，才能

在繪圖時(shí)保證形態(tài)結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確性，并說明某一科學(xué)問題O

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2.合理布局根據(jù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)要求繪圖的數(shù)量和內(nèi)容，在繪圖紙上安排好各圖的位置，并留出書寫圖題與注

字的地方。

3.先繪草圖用HB鉛筆輕輕勾畫出圖形的輪廓，便于修改。

4.再繪物像用2H至3H硬鉛筆，描出與物體相吻合的線條。線條要一筆勾出，粗細(xì)均勻，光滑清晰，接

頭處無分叉和痕跡。

5.結(jié)構(gòu)的表示細(xì)胞壁用平行的雙線畫出，細(xì)胞質(zhì)、核用不同疏密的小點(diǎn)表示。一般用圓點(diǎn)襯陰，表示明

暗和顏色的深淺。點(diǎn)圓整齊，大小均勻，并根據(jù)明暗需要掌握點(diǎn)的疏密變化，不可用涂抹表示陰面。

6.使用鉛筆繪圖及注字只能用鉛筆，不要用其它筆如鋼筆或圓珠筆。

7.保持整潔用正楷書寫圖注，并用平行線引向圖的右側(cè)，整齊一致。

8.注明圖題在圖的下方，寫出圖題、所用植物材料的名稱和部位。并注明放大倍數(shù)，如10義40。

加圖：汪小凡P14繪圖實(shí)例

細(xì)胞壁

細(xì)胞核

一細(xì)胞質(zhì)

-液泡

2

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細(xì)胞壁

細(xì)胞核

細(xì)胞質(zhì)

液泡

洋蔥雌葉表皮細(xì)胞圍30X10）

十一、實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備與保存

1.風(fēng)干標(biāo)本用于形態(tài)觀察，如干果和各類種子、枝條和根系等，收集后貯存在玻璃瓶或帶有玻璃面的紙

盒中。有些莖、葉和花，可以壓制成臘葉標(biāo)本。

2.浸制材料用于解剖觀察，各種花、果材料，應(yīng)隨采隨泡。一般用甲醛配制成5%福爾馬林溶液直接浸泡

材料，或用5（?或60%酒精浸漬。為防止材料變脆，可加入少量的甘油。

3.生活材料是最直觀、效果最好的實(shí)驗(yàn)材料，除野生植物、111園種植外，還可建造溫室進(jìn)行專門栽培。

十二、浸制標(biāo)本的制作

浸制標(biāo)本是將新鮮的植物材料，浸制保存在化學(xué)藥品配制的溶液里，使其保持原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)，可以

作為示范標(biāo)本或陳列標(biāo)本。浸制標(biāo)本分防腐性浸漬和保色浸漬兩種。

1.普通浸制（防腐）標(biāo)本的制作浸制液常用70%酒精或3%?5%的福爾馬林溶液，若浸制液濃度過大，容

易使標(biāo)本皺縮變黑，而濃度過低時(shí)，則防腐效果不好。標(biāo)本材料以新鮮無病、果實(shí)八分熟為宜，將材料洗

凈后再浸入藥液內(nèi)。

2.綠色標(biāo)本的浸制方法保綠原理：葉綠體中主要含有葉綠素，葉綠素在酸的作用下可以失去鎂離子

（Mg"）,變成黑褐色的“去鎂葉綠素”，也叫植物黑素。此時(shí)若用金屬銅離子（Ci?*）來取代鎂，則葉綠素

又可恢復(fù)綠色，這種綠色比原來的含鎂葉綠素穩(wěn)定，可以保存較長時(shí)間。

方法：在100ml的醋酸溶液（濃度50%）中，緩慢加入醋酸銅粉末10?20g,并用玻棒攪動(dòng)。以此為

原液，加水稀釋3?4倍，然后加熱至70?80°C,將洗凈標(biāo)本投入其中。注意不停地翻動(dòng)標(biāo)本，使之受熱

均勻，并全部接觸藥液。開始時(shí)，標(biāo)本原有綠色逐漸褪去，但經(jīng)過10?20min后，綠色又恢復(fù)，此時(shí)應(yīng)停

止加熱，取出標(biāo)本，用水漂洗干凈，再放