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河北省石家莊市晉州市第一中學(xué)2025屆高考臨考沖刺生物試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效;在草稿紙、試卷上答題無(wú)效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.下列有關(guān)細(xì)胞分裂、分化、衰老和凋亡的敘述,錯(cuò)誤的是()A.造血干細(xì)胞在骨髓中可增殖、分化為B細(xì)胞或T細(xì)胞B.脫毒苗的培育過(guò)程中包含細(xì)胞分裂、分化、衰老和凋亡C.細(xì)胞凋亡有助于機(jī)體維持自身的穩(wěn)定D.細(xì)胞衰老發(fā)生在生物體的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中2.絕大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),下列關(guān)于這類酶的敘述中錯(cuò)誤的是()A.需要核酸作為合成時(shí)的模板 B.保存時(shí)需要低溫和適宜的pHC.在高溫時(shí)其結(jié)構(gòu)會(huì)變得松散 D.向該類酶溶液中加入一定量食鹽會(huì)使酶失活3.中國(guó)科學(xué)家成功誘導(dǎo)人成纖維細(xì)胞重編程為hiHep細(xì)胞,hiHep細(xì)胞具有肝細(xì)胞的許多功能,包括分泌血清白蛋白、積累糖原、代謝藥物等。下列相關(guān)敘述中正確的是()A.人成纖維細(xì)胞與hiHep細(xì)胞的核酸有所不同B.衰老的肝細(xì)胞中細(xì)胞核體積變小C.hiHep細(xì)胞通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸將血清白蛋白運(yùn)出細(xì)胞D.該項(xiàng)成果可以說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性4.某動(dòng)物細(xì)胞中位于常染色體上的基因A、B、C分別對(duì)a、b、c為顯性?,F(xiàn)用基因型為AABBCC的個(gè)體與aabbcc的個(gè)體雜交得到F1,對(duì)F1進(jìn)行測(cè)交,結(jié)果為aabbcc∶AaBbCc∶aaBbCc∶Aabbcc=1∶1∶1∶1,則F1體細(xì)胞中三對(duì)基因在染色體上的位置是()A. B. C. D.5.已知牽牛花的花色受三對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(A和a、B和b、C和c)控制,其途徑如圖所示,其中藍(lán)色和紅色混合后顯紫色,藍(lán)色和黃色混合形成綠色?,F(xiàn)有某紫花植株自交子代出現(xiàn)白花、黃花。據(jù)此判斷下列敘述錯(cuò)誤的是()A.自然種群中紅花植株的基因型有4種B.用于自交的紫花植株的基因型為AaBbCcC.自交子代中綠花植株和紅花植株的比例可能不同D.自交子代出現(xiàn)的黃花植株的比例為3/646.某高等植物細(xì)胞呼吸過(guò)程中主要物質(zhì)變化如圖,①~③為相關(guān)生理過(guò)程。下列敘述正確的是()A.若該植物為玉米,則③只發(fā)生在玉米胚細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中B.該植物②過(guò)程產(chǎn)生ATP的場(chǎng)所是線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜C.等量的葡萄糖在有氧呼吸和無(wú)氧呼吸過(guò)程中產(chǎn)生丙酮酸的量不同D.只給根部細(xì)胞提供同位素標(biāo)記的H218O,在O2和CO2中能同時(shí)檢測(cè)到18O二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用,而且對(duì)人體沒(méi)有影響。我國(guó)科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥,做了相關(guān)研究。(1)研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒,得到重組質(zhì)粒,再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中,獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。(2)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低,研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好,因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物(引物B和C中都替換了一個(gè)堿基),并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增,以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點(diǎn)的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物?請(qǐng)?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”,若不選用該引物則劃“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌,提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì),用_________方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物,判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性,研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長(zhǎng)滿了植物病菌的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,比較_________的大小,以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。(4)作為微生物農(nóng)藥,使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌,其優(yōu)點(diǎn)是_________。8.(10分)2018年7月,某生物公司的百白破疫苗檢驗(yàn)不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價(jià)疫苗和簡(jiǎn)化計(jì)劃免疫程序,科學(xué)家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四聯(lián)疫苗,經(jīng)各項(xiàng)檢測(cè)均通過(guò)rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳桿菌、白喉?xiàng)U菌和破傷風(fēng)桿菌的四種類毒素。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:(1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因,可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)____________,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段,獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列__________________(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小,且序列已知,獲得目的基因可采用__________,然后通過(guò)____________大量擴(kuò)增,此技術(shù)的前提是已知一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物。(3)把目的基因?qū)荏w細(xì)胞時(shí),科學(xué)家采用了改造后的腺病毒作為載體,寫出你認(rèn)為科學(xué)家選它的理由________________________________________________。(寫出2點(diǎn))(4)研究發(fā)現(xiàn),如果將白喉?xiàng)U菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?,免疫效果更好,?qǐng)寫出此種技術(shù)的基本流程____________________________________。(5)實(shí)驗(yàn)證明,一定時(shí)間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好,其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的_________數(shù)量增多,當(dāng)同種抗原再次侵入人體時(shí)二次免疫的特點(diǎn)是____________,免疫預(yù)防作用更強(qiáng)。9.(10分)調(diào)定點(diǎn)理論認(rèn)為人的體溫調(diào)節(jié)類似于恒溫器的調(diào)節(jié)機(jī)制,正常人的體溫調(diào)定點(diǎn)為37℃。病理情況下(某些因素如細(xì)菌、病毒感染等),致熱源能使調(diào)定點(diǎn)上調(diào)(如達(dá)到39℃),體溫升高達(dá)到新的超正常水平(39℃)。若致熱因素不能消除,產(chǎn)熱和散熱就在新的體溫水平上保持平衡,導(dǎo)致長(zhǎng)時(shí)間高燒不退。分析回答下列問(wèn)題:(1)人體體溫調(diào)節(jié)的中樞位于________________,在體溫調(diào)節(jié)過(guò)程中,起主要作用的調(diào)節(jié)方式是________________。(2)當(dāng)病毒侵入人體后,機(jī)體內(nèi)需要借助________________產(chǎn)生的抗體將其凝集并抑制其繁殖;若機(jī)體不能及時(shí)清除病毒,則體溫調(diào)定點(diǎn)會(huì)上調(diào),大腦皮層產(chǎn)生________________(填冷覺(jué)或熱覺(jué)),人體皮膚內(nèi)可能發(fā)生的變化是________________________________(答出兩點(diǎn)即可),導(dǎo)致長(zhǎng)時(shí)間高燒不退。(3)有人認(rèn)為導(dǎo)致機(jī)體中暑時(shí)體溫升高的原因類似于病理情況下高燒不退的原因。你是否贊同這種說(shuō)法?________________,請(qǐng)說(shuō)明理由:_____________________________。10.(10分)為提高小麥的抗旱性,有人將大麥的抗旱基因(HVA)導(dǎo)入小麥細(xì)胞(體細(xì)胞中含有21對(duì)染色體),篩選出HVA基因成功整合到染色體上的小麥細(xì)胞,并用植物組織培養(yǎng)的方法培育成高抗旱性T0植株(假定HVA基因都能正常表達(dá))。小麥?zhǔn)莾尚曰?,其中的雄蕊和雌蕊同時(shí)成熟。(1)某T0植株是由含一個(gè)HVA基因的小麥細(xì)胞培養(yǎng)成的,該植株產(chǎn)生的配子中,含有HVA基因的配子所占比例為________%,該個(gè)體的細(xì)胞在________分裂過(guò)程中,由同源染色體形成四分體,________是由染色體攜帶著從體細(xì)胞傳到配子的。在下面細(xì)胞中畫出T0植株某細(xì)胞四分體時(shí)期的圖像(用兩個(gè)四分體來(lái)表示,標(biāo)出HVA基因)_______(2)假如每對(duì)同源染色體上只能整合一個(gè)HVA基因,鑒定植物細(xì)胞中整合了多少個(gè)HVA基因的最簡(jiǎn)單的方法是________,如果用整合了HVA基因的某植株的花粉給沒(méi)有整合HVA基因的植株授粉,子代中抗旱植株︰不抗旱植株=15︰1,說(shuō)明此植株的體細(xì)胞中整合了________個(gè)HVA基因。11.(15分)血漿中的部分成分經(jīng)過(guò)腎小球的濾過(guò)作用(形成原尿)和腎小管的重吸收作用后最終成為尿液,圖示血糖濃度與單位時(shí)間血糖的濾過(guò)量和腎小管重吸收葡萄糖量的關(guān)系,回答下列問(wèn)題:(1)健康人血糖值能維持在圖示中N點(diǎn)左右,這主要是______________激素的調(diào)節(jié)作用所致。(2)據(jù)圖,腎小管重吸收葡萄糖的速率最大約為______________mg/min,限制該最大值的因素是______________。(3)血糖濃度超過(guò)T點(diǎn)后,尿液中開始出現(xiàn)葡萄糖,據(jù)圖分析其原因是___________。(4)腎小管還能通過(guò)______________運(yùn)輸對(duì)水分子進(jìn)行重吸收。與健康人相比,糖尿病人腎小管對(duì)水的重吸收更______________,從而排尿較多。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、A【解析】
1、細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中,由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代,在形態(tài),結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì):基因的選擇性表達(dá)。2、細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞編程序死亡的過(guò)程。細(xì)胞凋亡是生物體正常的生命歷程,對(duì)生物體是有利的,而且細(xì)胞凋亡貫穿于整個(gè)生命歷程。3、衰老細(xì)胞的特征:(1)細(xì)胞內(nèi)水分減少,細(xì)胞萎縮,體積變小,但細(xì)胞核體積增大,染色質(zhì)固縮,染色加深;(2)細(xì)胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運(yùn)輸功能降低;(3)細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累積;(4)有些酶的活性降低;(5)呼吸速度減慢,新陳代謝減慢。4、癌細(xì)胞的主要特征:(1)無(wú)限增殖;(2)形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變;(3)細(xì)胞表面發(fā)生變化,細(xì)胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少,易轉(zhuǎn)移?!驹斀狻緼、T細(xì)胞是在胸腺里分化成熟的,A錯(cuò)誤;B、脫毒苗的培育過(guò)程中包含細(xì)胞分裂、分化、衰老和凋亡,B正確;C、細(xì)胞凋亡有助于機(jī)體維持自身的穩(wěn)定,C正確;D、細(xì)胞衰老發(fā)生在生物體的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,D正確。故選A。2、D【解析】
絕大多數(shù)的酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),少部分酶的本質(zhì)為RNA。酶的合成都需要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄過(guò)程,轉(zhuǎn)錄需要DNA為模板,合成相應(yīng)的mRNA。當(dāng)酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞的時(shí)候會(huì)失去活性,一般高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等環(huán)境會(huì)使酶變性失活。【詳解】A、蛋白質(zhì)的合成需要mRNA作為直接模板,mRNA的合成需要DNA作為模板,A正確;B、酶在低溫和適宜pH下保存,既不會(huì)被微生物分解,又不會(huì)破壞空間結(jié)構(gòu),B正確;C、酶在高溫時(shí)空間結(jié)構(gòu)被破壞,結(jié)構(gòu)會(huì)變得松散,C正確;D、食鹽可以使溶液中蛋白質(zhì)沉淀,即發(fā)生鹽析,但不會(huì)使蛋白質(zhì)變性失活,D錯(cuò)誤;故選D。3、A【解析】
1、干細(xì)胞:在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中,通常把那些具有自我復(fù)制能力,并能在一定條件下分化形成一種以上類型的細(xì)胞的多潛能細(xì)胞稱為干細(xì)胞。2、細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中,由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代,在形態(tài),結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì):基因的選擇性表達(dá)。3、衰老細(xì)胞的特征:(1)細(xì)胞內(nèi)水分減少,細(xì)胞萎縮,體積變小,但細(xì)胞核體積增大,染色質(zhì)固縮,染色加深;(2)細(xì)胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運(yùn)輸功能降低;(3)細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累積;(4)有些酶的活性降低;(5)呼吸速度減慢,新陳代謝減慢?!驹斀狻緼、同一個(gè)體的人成纖維細(xì)胞與hiHep細(xì)胞的核DNA完全相同,但由于基因的選擇性表達(dá),兩種細(xì)胞內(nèi)的RNA有所不同,A正確;B、衰老的肝細(xì)胞中細(xì)胞核體積變大,B錯(cuò)誤;C、血清白蛋白為大分子物質(zhì),所以hiHep細(xì)胞通過(guò)胞吐方式將血清白蛋白運(yùn)出細(xì)胞外,C錯(cuò)誤;D、人成纖維細(xì)胞重編程為hiHep細(xì)胞時(shí)并沒(méi)有形成完整的個(gè)體,因此并未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,D錯(cuò)誤。故選A?!军c(diǎn)睛】本題以“hiHep細(xì)胞”為素材,考查細(xì)胞分化、干細(xì)胞的研究和應(yīng)用等知識(shí),要求考生識(shí)記細(xì)胞分化的概念,掌握細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì);識(shí)記干細(xì)胞的相關(guān)應(yīng)用,能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。4、A【解析】
現(xiàn)用基因型為AABBCC的個(gè)體與aabbcc的個(gè)體雜交得到F1,F(xiàn)1的基因型為AaBbCc,對(duì)F1進(jìn)行測(cè)交,即AaBbCc與aabbcc雜交,那么測(cè)交結(jié)果應(yīng)該有八種情形,但現(xiàn)在只有4種,說(shuō)明有兩個(gè)基因位于同一染色體上。本題可以四幅圖中基因逐項(xiàng)分析,考慮產(chǎn)生配子的種類,或根據(jù)四種后代的基因型確定F1產(chǎn)生的配子種類,進(jìn)而判斷連鎖的基因?!驹斀狻坑捎赼abbcc只能產(chǎn)生一種abc類型的配子,而測(cè)交子代基因型的種類及比例為aabbcc:AaBbCc:aaBbCc:Aabbcc=1:1:1:1,說(shuō)明AaBbCc產(chǎn)生了abc、ABC、aBC、Abc的4種配子,說(shuō)明B和C基因、b和c基因連鎖,即對(duì)應(yīng)圖中A。故選A。5、C【解析】
據(jù)圖分析,白色牽?;ɑ蛑胁缓蠥、C,基因型可能為aabbcc或aaB_cc,藍(lán)色牽?;ɑ蛐蜑閍a__C_、黃色牽?;ɑ蛐蜑锳_bbcc、紅色牽?;ɑ蛐蜑锳_B_cc,則紫花牽?;ǖ幕蛐蜑锳_B_C_,綠色牽牛花基因型為A_bbC_?!驹斀狻緼、根據(jù)題圖分析,紅色必須同時(shí)含有A、B,且沒(méi)有C,基因型為AABBcc、AaBBcc、AABbcc、AaBbcc,A正確;B、某紫花植株A_B_C_自交子代出現(xiàn)了白花(aabbcc或aaB_cc)和黃花(A_bbcc),說(shuō)明該紫花植株基因型為AaBbCc,B正確;C、AaBbCc自交,子代綠花(A_bbC_)的比例為3/4×1/4×3/4=9/64,紅花(A_B_cc)的比例為3/4×3/4×1/4=9/64,C錯(cuò)誤;D、AaBbCc自交,子代黃花植株(A_bbcc)的比例為3/4×1/4×1/4=3/64,D正確。故選C。6、B【解析】
高等植物的細(xì)胞呼吸可以分為有氧呼吸和無(wú)氧呼吸兩類,有氧呼吸分為三個(gè)階段,分別為葡萄糖在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)分解為丙酮酸和[H],丙酮酸在線粒體基質(zhì)分解為二氧化碳和[H],氧氣和[H]在線粒體內(nèi)膜上生成水三個(gè)過(guò)程。而無(wú)氧呼吸是在沒(méi)有氧氣的條件下,第一階段產(chǎn)生的丙酮酸在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)被分解為酒精和二氧化碳?!驹斀狻緼、玉米的胚細(xì)胞進(jìn)行無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物為乳酸,不是酒精和二氧化碳,A錯(cuò)誤;B、②過(guò)程主要是指有氧呼吸的第二階段和第三階段,場(chǎng)所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜,都會(huì)產(chǎn)生ATP,B正確;C、有氧呼吸第一階段和無(wú)氧呼吸第一階段反應(yīng)完全相同,會(huì)產(chǎn)生等量的丙酮酸,C錯(cuò)誤;D、根部細(xì)胞沒(méi)有葉綠體,不會(huì)進(jìn)行光合作用,所以給根部細(xì)胞提供同位素標(biāo)記的H218O,只能在CO2中先檢測(cè)到18O,D錯(cuò)誤;故選B。二、綜合題:本大題共4小題7、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒(pET質(zhì)粒)抗原-抗體雜交抑菌圈對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全;不會(huì)造成基因污染;有效成分純度較高【解析】
(一)基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來(lái)源:主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:①相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別:E?coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵.DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲取1、目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復(fù)制(2)過(guò)程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2、組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的尾端。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái).常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1、轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù).此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用Ca2+處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。3、重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá)1、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原——抗體雜交。4、有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?!驹斀狻浚?)在基因工程中,利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒,得到重組質(zhì)粒;大腸桿菌作為受體細(xì)胞,需要用氯化鈣處理,以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。(2)①根據(jù)題意和圖示分析,經(jīng)過(guò)4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因,這是一種定點(diǎn)的基因突變技術(shù)。②與研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好,因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物(引物B和C中都替換了一個(gè)堿基),因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示:引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照原則,若要比較新蛋白A的表達(dá)效率是否提高,則需設(shè)置三組實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)變量的處理分別為:僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒,僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對(duì)照(僅含空質(zhì)粒,以排除空質(zhì)??赡墚a(chǎn)生的影響)。因此,將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒(pET質(zhì)粒)分別導(dǎo)入大腸桿菌,提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì),用抗原——抗體雜交方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物,判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。由于蛋白A(或新蛋白A)具有抗菌作用,所以為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性,研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長(zhǎng)滿了植物病菌的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,比較抑菌圈的大小,以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。(4)作為微生物農(nóng)藥,使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌,是因?yàn)榈鞍譇基因的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全;不會(huì)造成基因污染;有效成分純度較高?!军c(diǎn)睛】本題主要考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí),考生需要理解和記憶相關(guān)知識(shí),并學(xué)會(huì)應(yīng)用所學(xué)知識(shí)正確答題。8、mRNA不同化學(xué)方法人工合成(人工化學(xué)合成)PCR技術(shù)能自主復(fù)制有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列記憶細(xì)胞短時(shí)間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細(xì)胞【解析】
目的基因可以直接分離,也可以用人工的方法合成,目前常用方法有:①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲??;②人工合成(反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法);③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。人工合成法只能合成已知序列片段,而且片段越長(zhǎng),合成難度越大;基因組文庫(kù)中獲取的目的基因是這種生物的所有基因,包含啟動(dòng)子,終止子以及內(nèi)含子等;cDNA文庫(kù)獲取的目的基因是mRNA反轉(zhuǎn)錄來(lái)的,是這種生物的部分基因,不含啟動(dòng)子,終止子以及內(nèi)含子,因此對(duì)真核細(xì)胞來(lái)說(shuō),從基因組DNA文庫(kù)獲得的基因與從cDNA文庫(kù)獲得的不同。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求,蛋白質(zhì)工程的基本途徑:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)。注射疫苗目的是促使機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng),產(chǎn)生抗體和記憶細(xì)胞,多次注射的目的是增多機(jī)體內(nèi)的記憶細(xì)胞的數(shù)量,導(dǎo)致應(yīng)答效果顯著增強(qiáng)?!驹斀狻?1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因,可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段,獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小,且序列已知,獲得目的基因可采用化學(xué)方法人工合成(人工化學(xué)合成),然后通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增。(3)改造后的腺病毒有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因,且能自主復(fù)制,因此可作為載體將目的基因?qū)荏w細(xì)胞。(4)將白喉?xiàng)U菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼崂玫氖堑鞍踪|(zhì)工程原理,基本流程是:從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。(5)實(shí)驗(yàn)證明,一定時(shí)間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好,其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多,當(dāng)同種抗原再次侵入人體時(shí)會(huì)引發(fā)二次免疫,二次免疫的特點(diǎn)是短時(shí)間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細(xì)胞,免疫預(yù)防作用更強(qiáng)?!军c(diǎn)睛】本題結(jié)合免疫,以基因工程乙肝-百白破四聯(lián)疫苗的產(chǎn)生為背景,考查基因工程中目的基因獲取的方法、基因表達(dá)載體構(gòu)建和蛋白質(zhì)工程等內(nèi)容,難度不大。9、下丘腦神經(jīng)調(diào)節(jié)漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)冷覺(jué)皮膚毛細(xì)血管收縮,血流量減少;立毛肌收縮;汗腺分泌活動(dòng)減弱不贊同中暑時(shí)體溫升高是由體溫調(diào)節(jié)功能失調(diào)引起的,而高燒不退是由機(jī)體的調(diào)定點(diǎn)上調(diào)導(dǎo)致的,其本身體溫調(diào)節(jié)功能正?!窘馕觥?/p>
1、寒冷環(huán)境→皮膚冷覺(jué)感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→增加產(chǎn)熱(骨骼肌戰(zhàn)栗、立毛肌收縮、甲狀腺激素等分泌增加),減少散熱(毛細(xì)血管收縮、汗腺分泌減少)→體溫維持相對(duì)恒定。2、炎熱環(huán)境→皮膚溫覺(jué)感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→增加散熱(毛細(xì)血管舒張、汗腺分泌增加)→體溫維持相對(duì)恒定?!驹斀狻浚?)人體體溫調(diào)節(jié)的中樞在下丘腦;調(diào)節(jié)機(jī)制是神經(jīng)一體液調(diào)節(jié),其中最主要的是神經(jīng)調(diào)節(jié);(2)當(dāng)病毒作為抗原侵入機(jī)體時(shí),B細(xì)胞接受抗原刺激增殖分化為記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞),漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌抗體;體溫調(diào)節(jié)的調(diào)定點(diǎn)上調(diào)過(guò)程中即形成高燒過(guò)程,產(chǎn)熱大于散熱,體溫低于調(diào)定點(diǎn),冷覺(jué)感受器興奮,大腦皮層產(chǎn)生冷覺(jué);引起汗腺分泌活動(dòng)減弱,皮膚毛細(xì)血管收縮,血流量減少,立毛肌收縮;(3)不贊同;中暑時(shí)體溫升高是由體溫調(diào)節(jié)功能失調(diào)引起的,而病理性發(fā)燒是由機(jī)體的調(diào)定點(diǎn)上調(diào)導(dǎo)致的,其本身體溫調(diào)節(jié)正常?!军c(diǎn)睛】本題以體溫調(diào)節(jié)“調(diào)定點(diǎn)”為情境,考查神經(jīng)調(diào)節(jié)、體溫調(diào)節(jié)和免疫調(diào)節(jié)等知識(shí)。需要學(xué)生不拘泥于原有的調(diào)節(jié)機(jī)制,思考在調(diào)定點(diǎn)的環(huán)境下,高燒過(guò)程中人體的狀態(tài)變化,在做題的過(guò)程中可以類比物理中參照物的變化來(lái)思考。10、50減數(shù)核(HVA)基因自交4【解析】
減數(shù)分裂時(shí)同源染色體分開,非同源染色體自由組合,減數(shù)分裂結(jié)果DNA和染色體數(shù)目減半.【詳解】(1)一個(gè)HVA基因在1對(duì)同源染色體中的1條染色體上,故減數(shù)分裂形成配子,該基
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