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文檔簡介
1、植物組織培養(yǎng)的原理是?課前提問:2、植物組織培養(yǎng)的過程?3、植物細胞培養(yǎng)的概念是?動物細胞培養(yǎng)動物細胞核移植動物細胞融合動物細胞工程技術動物細胞工程動物細胞工程的基礎地位第1課時
動物細胞培養(yǎng)12了解動物細胞培養(yǎng)的基本概念學習目標能準確說出動物細胞培養(yǎng)的主要步驟和條件3理解動物細胞培養(yǎng)的應用及其在生物技術中的重要性一、動物細胞培養(yǎng)概念:
從動物體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然后在適當?shù)呐囵B(yǎng)條件下,讓這些細胞生長和增殖的技術。動物體組織單個細胞細胞生長和增殖取出分散適宜條件二、動物細胞培養(yǎng)的條件1、營養(yǎng)(液體培養(yǎng)基)+合成培養(yǎng)基血清等天然成分二、動物細胞培養(yǎng)的條件2、無菌、無毒的環(huán)境定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝物,防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。①培養(yǎng)液、培養(yǎng)用具:滅菌處理;②在無菌環(huán)境下進行操作;二、動物細胞培養(yǎng)的條件3、適宜的溫度、pH和滲透壓二、動物細胞培養(yǎng)的條件95%空氣
+
5%CO2的CO2培養(yǎng)箱CO2培養(yǎng)箱維持培養(yǎng)液的pH
O2:細胞代謝所必需
(有氧呼吸)培養(yǎng)皿松蓋培養(yǎng)瓶4、適宜的氣體環(huán)境1.什么是細胞貼壁、接觸抑制,原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)?2.為什么動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞?可用什么方法?3.為什么要進行分瓶培養(yǎng)?怎么處理?閱讀教材P44-45“動物細胞培養(yǎng)的過程”,思考下列問題:三、動物細胞培養(yǎng)的過程三、動物細胞培養(yǎng)的過程第一步:取動物組織并剪碎第二步:分散成單個細胞并制成細胞懸液第三步:轉入特定培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)第四步:分裝,進行傳代培養(yǎng)原因是:幼齡動物細胞的分化程度低,細胞增殖能力更強,
更容易培養(yǎng)。
三、動物細胞培養(yǎng)的過程動物組織?第一步:取動物組織并剪碎幼齡?老齡?2、方法是?1、分散成單個細胞原因是?二、動物細胞培養(yǎng)的過程第二步:分散成單個細胞并制成細胞懸液需要注意?胃蛋白酶?時間和濃度(1)懸浮生長類:體外培養(yǎng)細胞類型:二、動物細胞培養(yǎng)的過程(2)貼壁生長類:(大多數(shù))懸浮生長類貼壁生長類體外培養(yǎng)的動物細胞,一段時間后細胞通常會停止分裂增殖①會因細胞密度過大
②有害代謝物積累③培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏①會因細胞密度過大
②有害代謝物積累③培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏④接觸抑制現(xiàn)象剛開始鋪展貼壁生長貼壁生長并進行有絲分裂單層相互接觸出現(xiàn)接觸抑制思考:接觸抑制現(xiàn)象與細胞膜哪種成分有關?體現(xiàn)了細胞膜的什么功能?與細胞膜上的糖蛋白有關;
體現(xiàn)了進行細胞間信息交流的功能接觸抑制二、動物細胞培養(yǎng)的過程思考“細胞增殖到互相接觸的時候,細胞膜識別了這種信息,就會使細胞停止分裂繁殖,出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象”。試結合上述解釋,舉例說明哪種細胞無接觸抑制現(xiàn)象,并闡述原因。癌細胞;癌細胞的細胞膜上糖蛋白等物質減少單層細胞多層細胞懸浮生長類貼壁生長類體外培養(yǎng)的動物細胞,一段時間后細胞通常會停止分裂增殖①會因細胞密度過大
②有害代謝物積累③培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏①會因細胞密度過大
②有害代謝物積累③培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質④接觸抑制現(xiàn)象故需
傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng):指分瓶之前,動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):分瓶后的細胞培養(yǎng)。二、動物細胞培養(yǎng)的過程第三步:轉入特定培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)第四步:分裝,進行傳代培養(yǎng)①懸浮生長類:直接用離心法收集。②貼壁生長類:重新用胰蛋白酶等處理,使之分散成單個細胞,然后再用離心法收集。再進行分瓶培養(yǎng)收集細胞的方法二、動物細胞培養(yǎng)的過程第四步:分裝,進行傳代培養(yǎng)1.什么是細胞貼壁、接觸抑制,原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)?2.為什么動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞?可用什么方法?3.為什么要進行分瓶培養(yǎng)?怎么處理?三、動物細胞培養(yǎng)的過程歸納總結:植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)過程培養(yǎng)結果培養(yǎng)目的相同點獲得細胞或細胞產(chǎn)物常用固體培養(yǎng)基完整植株動物血清常用液體培養(yǎng)基細胞增殖植物細胞的全能性獲得大量細胞快速繁殖等植物激素①培養(yǎng)過程中細胞都進行有絲分裂,不涉及減數(shù)分裂;②均需無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件。原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)脫分化、再分化動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的概念和原理動物細胞培養(yǎng)的條件動物細胞培養(yǎng)的過程原理:細胞的增殖在適當?shù)呐囵B(yǎng)條件下,讓這些細胞生長和增殖的技術(1)營養(yǎng)條件(2)無菌、無毒的環(huán)境(3)溫度、pH和滲透壓(4)氣體環(huán)境取動物組織單個細胞細胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)課堂小結
現(xiàn)學現(xiàn)用1、在將動物組織塊分散成單個細胞時,可以使用胰蛋白酶。由此判斷以下推測不合理的是()
A.動物細胞之間可能依靠蛋白質相互聯(lián)系
B.處理時一定要注意處理時間、加酶量
C.胰蛋白酶一定不會對動物細胞造成損傷
D.動物細胞培養(yǎng)液的pH應與胰蛋白作用的適宜pH基本一致c2、
一般來說,動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③只使用合成培養(yǎng)基④溫度與動物的體溫相近⑤因在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),故不需要O2
⑥多數(shù)動物細胞培養(yǎng)在7.2~7.4的pH環(huán)境
A.①②④⑤⑥B.①②③④C.①②③⑤⑥D.①②④⑥D
現(xiàn)學現(xiàn)用3.關于動物細胞培養(yǎng)的條件,下列敘述正確的是()
A.動物細胞培養(yǎng)基中加入血清的主要目的是補充細胞所需的未知成分
B.動物細胞培養(yǎng)可以在液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中進行
C.動物細胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒環(huán)境中進行,該條件只受環(huán)境因素的影響
D.動物細胞培養(yǎng)無需考慮滲透壓問題4.航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細胞跳動的視頻。下列相關敘述正確的是(
)A.培養(yǎng)心肌細胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌B.培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C.心肌細胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂無限增殖D.心肌細胞在神經(jīng)細胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動AB
現(xiàn)學現(xiàn)用5.某研究小組準備對某種動物的肝細胞進行動物細胞培養(yǎng),下列有關說
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