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文檔簡介
山東省七校聯(lián)合體2025屆高考生物五模試卷考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2.請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列有關(guān)敘述中,錯誤的是()A.減數(shù)分裂聯(lián)會時期的交叉互換實現(xiàn)了同源染色體上等位基因的重組B.色盲患者男性多于女性,但男性群體中色盲的基因頻率等于女性群體C.由基因突變導致的疾病有時可以通過光學顯微鏡觀察進而確診D.生物經(jīng)過長期的自然選擇,一種基因的頻率可能降為零2.下列關(guān)于生態(tài)系統(tǒng)自我調(diào)節(jié)能力的敘述中,正確的是A.生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)各營養(yǎng)級生物的種類越多,自我調(diào)節(jié)能力越弱B.向生態(tài)系統(tǒng)大量引入外來物種,可增加該系統(tǒng)的穩(wěn)定性C.負反饋調(diào)節(jié)在生態(tài)系統(tǒng)中最常見,使生態(tài)系統(tǒng)保持穩(wěn)定D.正反饋的結(jié)果是加速最初所發(fā)生的變化,使生態(tài)系統(tǒng)保持穩(wěn)定3.無胸腺裸鼠(簡稱裸鼠)是由于基因突變導致的先天性胸腺缺陷突變小鼠,已成為生物醫(yī)學研究的重要實驗動物。下列敘述正確的是()A.T細胞的形成與成熟均需要抗原的刺激B.裸鼠通常死于病原體感染或惡性腫瘤C.裸鼠喪失了細胞免疫但保留了體液免疫D.正常情況下裸鼠對器官移植的排斥作用會增強4.下列關(guān)于生物大分子的敘述,錯誤的是A.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、葉綠體、細胞核中均含有生物大分子B.轉(zhuǎn)錄、翻譯、光合作用都可以產(chǎn)生生物大分子C.生物大分子中均含有C、H、O、N元素D.合成生物大分子的過程中可以產(chǎn)生水5.研究生長素(IAA)對燕麥胚芽鞘生長的影響,結(jié)果如圖。下列說法錯誤的是()A.蔗糖可以延長IAA對胚芽鞘切段作用時間B.生長素能夠促進胚芽鞘切段伸長生長C.結(jié)果說明蔗糖為胚芽鞘切段生長提供能量D.綜合兩圖結(jié)果說明蔗糖與KCl的作用相同6.圖是某同學繪制的單克隆抗體制備過程及原理圖,其中抗原決定簇是指抗原表面或內(nèi)部能決定抗原性的基團,骨髓瘤細胞是一種營養(yǎng)缺陷型細胞。有關(guān)敘述錯誤的是()A.動物免疫的原理是一種抗原誘導形成一種漿細胞B.選用營養(yǎng)缺陷型骨髓瘤細胞有利于篩選雜交瘤細胞C.細胞融合也可能發(fā)生在不同類型淋巴細胞之間D.a(chǎn)融合雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)的原理是細胞增殖7.在狐貍的群體中,控制狐貍皮毛顏色的基因包括BA(猩紅色)、B(藍色)、b(白色),它們位于同源染色體的相同位點,顯隱性關(guān)系為BA>B>b。研究還發(fā)現(xiàn),皮毛為猩紅色的雜合體中,有的具有白色斑點,有的具有藍色斑點,且猩紅色帶斑點這一特點僅表現(xiàn)在雌性個體中,其他顏色雌雄個體都有,下列有關(guān)分析錯誤的是()A.控制狐貍皮毛顏色的基因位于X染色體B.控制皮毛顏色的表現(xiàn)型有5種C.控制皮毛顏色的基因型有6種D.選白雌狐和藍雄狐驗證上述基因位于性染色體8.(10分)科學家把等量的小白鼠敗血癥病毒(一種RNA病毒)顆粒分別加入甲、乙兩支試管,其中甲試管中含有帶放射性標記的脫氧核糖核苷三磷酸緩沖溶液,乙試管中含有帶放射性標記的核糖核苷三磷酸緩沖溶液。一段時間后,甲試管中能檢測到含有放射性的核酸,乙試管中不能檢測到含有放射性的核酸。下列敘述正確的是()A.甲試管中可以檢測到子代病毒B.該病毒顆粒中不含有與DNA合成有關(guān)的酶C.乙試管中無放射性核酸的合成是因為缺少RNA酶D.加入RNA酶,甲試管中放射性核酸明顯減少二、非選擇題9.(10分)請回答下列有關(guān)神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)的問題:(1)神經(jīng)調(diào)節(jié)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧。在反射弧中,對傳入的信息進行分析和綜合的結(jié)構(gòu)是____________。(2)神經(jīng)細胞具有產(chǎn)生興奮并傳導興奮的作用。在神經(jīng)纖維上,由于____________的跨膜運輸導致動作電位的產(chǎn)生;產(chǎn)生的興奮在神經(jīng)纖維上以____________的形式進行傳導,在神經(jīng)元之間以___________的形式進行傳遞。(3)神經(jīng)細胞還具有分泌功能:①下丘腦的神經(jīng)細胞能分泌_____________,實現(xiàn)神經(jīng)元之間的興奮傳遞。②下丘腦的某些神經(jīng)細胞能分泌促甲狀腺激素釋放激素,作用于_______________;另一方面,甲狀腺分泌的甲狀腺激素達到一定濃度時也能作用于該器官,這體現(xiàn)了兩種激素之間具有____________(填“拮抗”或“協(xié)同”)作用。③下丘腦的另一些神經(jīng)細胞能夠分泌抗利尿激素,作用于____________,促進______________的重吸收。10.(14分)光合作用是發(fā)生在高等植物、藻類和光合細菌中的重要化學反應(yīng)。請回答下列問題:(1)高等植物、藻類和光合細菌進行光合作用的實質(zhì)是____________。(2)光合作用暗反應(yīng)過程中,RuBP羧化酶(R酶)催化CO2與RuBP(C5)結(jié)合,生成2分子C3,C3接受光反應(yīng)產(chǎn)生的________被還原。(3)將衣藻置于密閉玻璃容器中,每2h測一次容器中CO2濃度的相對值(假設(shè)細胞呼吸強度恒定)。測定0h與12h時容器中CO2濃度的相對值相同,則與0h相比,12h時衣藻細胞內(nèi)有機物的含量________(填增加或減少或不變),理由是____________。(4)CCCP(一種化學物質(zhì))能抑制海水稻的光合作用。為探究CCCP、缺鎂兩種因素對海水稻光合作用的影響及其相互關(guān)系,需設(shè)定________組實驗。11.(14分)菊花很美,但其害蟲較多,利用基因工程培育抗蟲菊花是害蟲防治的有效手段。胰蛋白酶抑制劑能干擾昆蟲的代謝,引起昆蟲死亡,但對人體無害??茖W家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因(Pin﹣Ⅱ)通過農(nóng)桿菌導入菊花細胞,培育成了抗蟲菊花。圖1表示含目的基因的DNA分子,圖2表示質(zhì)粒,圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Neor表示新霉素抗性基因,復制原點是質(zhì)粒DNA復制的起點,使其能在受體細胞中存在和遺傳。箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點。請回答下列有關(guān)問題:(1)上述基因工程中,受體細胞是______________,屬于__________(填“動物”“植物”或“微生物”)基因工程。(2)為使目的基因與質(zhì)粒高效重組,最好選用_______________(限制酶)作用于含目的基因的DNA和質(zhì)粒,然后在___________的作用下形成重組質(zhì)粒。(3)用農(nóng)桿菌感染時,應(yīng)優(yōu)先選用菊花___________(填“受傷的”或“完好的”)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng),選用這種葉片的理由是_________________________________。成功導入重組質(zhì)粒的細胞會表現(xiàn)為______________________________。(4)用轉(zhuǎn)基因菊花葉片喂養(yǎng)某種菊花害蟲,發(fā)現(xiàn)害蟲死亡率顯著增加。試從分子水平寫出轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因菊花的葉片細胞的不同點:___________________________________。12.近日,25年來最嚴重的蝗災(zāi)正在東非蔓延,對東非國的糧食安全和經(jīng)濟發(fā)展都構(gòu)成了前所未有的威脅,而造成本次蝗災(zāi)的罪魁禍首就是沙漠蝗蟲。如圖為東非某草原蝗災(zāi)期間的部分食物網(wǎng)示意圖(分解者與無機環(huán)境未畫出),據(jù)此回答下列問題。(1)此食物網(wǎng)包含了_______條食物鏈,其中狼位于第_____營養(yǎng)級。(2)此食物網(wǎng)中,牧雞與蛙的關(guān)系屬于__________。(3)目前,控制沙漠蝗群和蝗蝻帶的主要方法是,主要使用汽車和空中噴霧器以小劑量(稱為超低量(ULV)配方)施用有機磷化學品,此方法屬于______防治,這種防治方法具有快速、高效、使用方便等優(yōu)點,但不建議頻繁使用,為什么?__________(至少2點)(4)相比于殺蟲劑治蝗,中國的“牧雞治蝗”有效又環(huán)保,此種治蝗方法屬于________防治。(5)若牧雞的食物40%來自沙漠蝗蟲,40%來自蜘蛛,其余來自蛙,那么牧雞要增加20g體重,最多消耗草和水稻多少克?________
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
1、基因重組有自由組合和交叉互換兩類.前者發(fā)生在減數(shù)第一次分裂的后期(非同源染色體的自由組合),后者發(fā)生在減數(shù)第一次分裂的四分體(同源染色體的非姐妹染色單體的交叉互換)。2、色盲是X染色體上的隱性遺傳病。3、基因突變是由于堿基對的增添、缺失和替換導致DNA分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變?!驹斀狻緼、減數(shù)分裂聯(lián)會時期的交叉互換實現(xiàn)了同源染色體上非等位基因的重組,A錯誤;B、男性色盲患者多于女性患者,原因是伴X隱性遺傳方式,但人群中男性群體中色盲的基因頻率與女性群體中色盲的基因頻率相當,B正確;C、鐮刀形貧血癥是基因突變引發(fā)的疾病,可以通過顯微鏡觀察紅細胞的形態(tài)進行確診,C正確;D、生物經(jīng)過長期的自然選擇,不斷淘汰部分基因,所以可能使某種基因的頻率降為零,D正確。故選A。2、C【解析】
生態(tài)系統(tǒng)具有一定的自我調(diào)節(jié)能力,而這種能力受生態(tài)系統(tǒng)中生物的種類和數(shù)量所限制,生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分越多,營養(yǎng)結(jié)構(gòu)就越復雜,生態(tài)系統(tǒng)的自動調(diào)節(jié)能力就越強,其抵抗力穩(wěn)定性就越強,相反的其恢復力穩(wěn)定性就越弱。【詳解】A、生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)各營養(yǎng)級生物的種類越多,自我調(diào)節(jié)能力越強,A錯誤;B、外來物種的引入不一定能提高生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài),如部分外來物種會破壞當?shù)氐纳鷳B(tài)系統(tǒng),B錯誤。C、生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的維持是依賴負反饋作用,C正確;D、正反饋的結(jié)果加速最初發(fā)生的變化,常使生態(tài)系統(tǒng)遠離穩(wěn)態(tài),D錯誤。故選C?!军c睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的相關(guān)知識,理解正反饋和負反饋的含義和帶來的結(jié)果。3、B【解析】
根據(jù)題意分析可知:缺少胸腺的鼠,造血干細胞將不能正常發(fā)育成T細胞,T細胞在體液免疫中能識別和呈遞抗原,但少部分的抗原可以直接刺激B淋巴細胞,因此缺少T細胞,體液免疫功能降低。在細胞免疫中,T細胞增殖分化形成效應(yīng)T細胞和記憶細胞,因此缺少T細胞,細胞免疫喪失?!驹斀狻緼、T淋巴細胞起源于骨髓中的淋巴干細胞,一部分淋巴干細胞在發(fā)育過程中先進入胸腺,在此分化增殖,發(fā)育成熟,T細胞的形成與成熟不需要抗原刺激,A錯誤;B、裸鼠先天胸腺缺陷,不能形成T細胞,由于T細胞既參與細胞免疫又參與體液免疫,所以裸鼠的免疫能力幾乎全部喪失,通常死于病原體感染或惡性腫瘤,B正確;C、由于T細胞參與細胞免疫和大部分的體液免疫,所以裸鼠無細胞免疫,體液免疫能力也降低,C錯誤;D、由于對器官移植的排斥作用靠的是T細胞參與的細胞免疫,而裸鼠不能形成T細胞,所以正常情況下,裸鼠對移植的器官幾乎沒有排斥作用,D錯誤。故選B。4、C【解析】
細胞內(nèi)的生物大分子包括多糖、蛋白質(zhì)和核酸,多糖的基本組成單位是葡萄糖,蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸,核酸的基本組成單位是核苷酸,葡萄糖、氨基酸、核苷酸等單體都以碳鏈為骨架?!驹斀狻緼.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、葉綠體、細胞核中均含有蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)屬于生物大分子,A正確;B.轉(zhuǎn)錄可產(chǎn)生RNA,翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì),光合作用可合成淀粉,三者都可以產(chǎn)生生物大分子,B正確;C.糖類、蛋白質(zhì)和核酸共有的元素為C、H、O,故生物大分子中均含有的元素是C、H、O,C錯誤;D.氨基酸、葡萄糖以及核苷酸在合成蛋白質(zhì)、多糖以及核酸的過程中均產(chǎn)生水,D正確?!军c睛】本題考查了生物大分子的有關(guān)知識,要求學生能夠識記生物大分子的種類和元素組成,識記轉(zhuǎn)錄、翻譯、光合作用的產(chǎn)物,明確單體在合成多聚體的過程中產(chǎn)生水。5、C【解析】
據(jù)圖分析可知:兩圖中,燕麥胚芽鞘生長長度增加的百分比中:IAA+蔗糖組=IAA+KCl組>IAA組>蔗糖組=KCl組,蔗糖與KCl組的變化曲線相似,推測可能具有相同的效應(yīng)。【詳解】A、圖中IAA+蔗糖組燕麥胚芽鞘生長長度增加的百分比大于IAA組,推測蔗糖可以延長IAA對胚芽鞘切段作用時間,A正確;B、生長素能夠促進胚芽鞘切段伸長生長,B正確;C、圖示結(jié)果只能說明蔗糖與燕麥胚芽鞘生長長度增加的百分比的關(guān)系,不能說明蔗糖為胚芽鞘切段生長提供能量,C錯誤;D、綜合兩圖結(jié)果可知:燕麥胚芽鞘生長長度增加的百分比中:IAA+蔗糖組=IAA+KCl組,蔗糖組=KCl組,說明蔗糖與KCl的作用相同,D正確。故選C。6、A【解析】
單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!驹斀狻緼、據(jù)圖可知,一種抗原上可有多種抗原決定簇,不同的抗原決定簇可誘導不同的漿細胞產(chǎn)生,A錯誤;B、骨髓瘤細胞可以無限增殖,選用營養(yǎng)缺陷型骨髓瘤細胞可利用其特點篩選雜交瘤細胞,B正確;C、細胞融合的類型有淋巴細胞-淋巴細胞型、淋巴細胞-骨髓瘤型及骨髓瘤-骨髓瘤型多種類型,C正確;D、融合雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)的原理是細胞增殖,可得到大量的同種雜交瘤細胞,D正確。故選A。【點睛】解答此題要求考生能夠識記識記單克隆抗體制備的流程以及雜交瘤細胞的特點,并能結(jié)合題圖分析作答。7、C【解析】
猩紅色帶斑點這一性狀僅表現(xiàn)在雌性雜合個體中,雌性個體含有兩條X染色體,雄性個體只含有一條X染色體,相關(guān)顏色基因在雌性個體中成對存在,在雄性個體中成單存在,在雌性個體中才可能含有兩個不同的基因,由此推知,相關(guān)顏色基因位于X染色體上?!驹斀狻緼、通過分析可知,控制狐貍皮毛顏色的基因位于X染色體,A正確;BC、控制皮毛顏色的基因位于X染色體上,雌性個體的基因型有XBAX-(3種基因型,且表現(xiàn)型根據(jù)題意有3種)、XBX-(2種基因型,且表現(xiàn)為藍色)、XbXb(表現(xiàn)為白色)共6種,雄性個體的基因型有XBAY(猩紅色)、XBY(藍色)和XbY(白色)3種,共9種基因型,表現(xiàn)型為5種,B正確,C錯誤;D、通過隱雌顯雄組合,故選白雌狐和藍雄狐驗證上述基因位于性染色體,D正確。故選C。8、D【解析】
病毒是沒有細胞結(jié)構(gòu)的生物。病毒分為DNA病毒、RNA病毒和朊病毒(蛋白質(zhì))。RNA病毒的成分為RNA和蛋白質(zhì),遺傳物質(zhì)為RNA。RNA病毒有自我復制和逆轉(zhuǎn)錄兩種復制方式。逆轉(zhuǎn)錄方式是以RNA為模板合成DNA的過程,即RNA指導下的DNA合成。甲試管中含有帶放射性標記的脫氧核糖核苷三磷酸緩沖溶液,能檢測到含有放射性的核酸,說明甲試管中發(fā)生了逆轉(zhuǎn)錄。乙試管中含有帶放射性標記的核糖核苷三磷酸緩沖溶液,乙試管中不能檢測到含有放射性的核酸,說明乙試管不能合成核酸。兩試管對比也可以說明該病毒是逆轉(zhuǎn)錄病毒,而不是自我復制型病毒?!驹斀狻緼、病毒由RNA和蛋白質(zhì)組成,甲試管中只有帶放射性標記的脫氧核糖核苷三磷酸緩沖溶液,發(fā)生了逆轉(zhuǎn)錄,不能合成RNA和蛋白質(zhì),不能檢測到子代病毒,A錯誤;B、甲試管檢測到核酸,說明該病毒能合成DNA,所以該病毒顆粒中含有與DNA合成有關(guān)的酶,B錯誤;C、該病毒是逆轉(zhuǎn)錄型的RNA病毒,乙試管中無放射性核酸的合成是因為缺少脫氧核苷酸的原料,C錯誤;D、加入RNA酶,可以降解RNA(逆轉(zhuǎn)錄的模板),因此甲試管中放射性核酸明顯減少,D正確。故選D。【點睛】本題為結(jié)合一定的基礎(chǔ)知識點進行分析的試題,應(yīng)注意提高邏輯分析能力。二、非選擇題9、神經(jīng)中樞Na+電信號(神經(jīng)沖動或局部電流)化學信號神經(jīng)遞質(zhì)垂體拮抗腎小管和集合管水【解析】
本題考查神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié),考查對興奮產(chǎn)生、傳導、傳遞機理、激素作用、激素分泌調(diào)節(jié)機制的理解。根據(jù)所學的相關(guān)知識即可解答?!驹斀狻浚?)在反射弧中,神經(jīng)中樞對傳入的信息進行分析和綜合。(2)在神經(jīng)纖維上,由于鈉離子內(nèi)流導致動作電位的產(chǎn)生;產(chǎn)生的興奮在神經(jīng)纖維上以電信號(神經(jīng)沖動或局部電流)的形式進行傳導,在神經(jīng)元之間以神經(jīng)遞質(zhì)這一化學信號的形式進行傳遞。(3)①下丘腦的神經(jīng)細胞能分泌神經(jīng)遞質(zhì),實現(xiàn)神經(jīng)元之間的興奮傳遞。②下丘腦的某些神經(jīng)細胞分泌促甲狀腺激素釋放激素,作用于垂體,促進垂體分泌促甲狀腺激素;甲狀腺分泌的甲狀腺激素達到一定濃度時也能作用垂體,抑制垂體分泌,體現(xiàn)了兩種激素之間具有拮抗作用。③下丘腦的另一些神經(jīng)細胞能夠分泌抗利尿激素,作用于腎小管和集合管,促進水的重吸收。【點睛】熟悉下丘腦在甲狀腺激素的分泌中、在興奮的產(chǎn)生、傳導與傳遞中、作為滲透壓感受器以及作為體溫調(diào)節(jié)中樞和水鹽平衡調(diào)節(jié)中樞等功能是分析解答本題的關(guān)鍵。10、將無機物合成有機物,將光能轉(zhuǎn)變成化學能,貯存在有機物中NADPH不變0h與12h的密閉容器內(nèi)CO2濃度相同,說明這12h內(nèi)光合作用消耗的CO2(制造的有機物)的總量等于呼吸作用產(chǎn)生的CO2(消耗的有機物)的總量,導致有機物含量不變四【解析】
光合作用是綠色植物通過葉綠體,利用光能,把二氧化碳和水轉(zhuǎn)化成儲存著能量的有機物,并釋放出氧氣的過程。光合作用包括光反應(yīng)階段(水的光解和ATP的合成)和暗反應(yīng)階段(CO2的固定和C3還原)。結(jié)合光合作用過程和細胞呼吸過程答題?!驹斀狻浚?)光合作用的實質(zhì)是將無機物合成有機物,將光能轉(zhuǎn)變成化學能,貯存在有機物中。(2)C3接受光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP的能量并被NADPH還原,形成糖類和C5。(3)測定0h與12h時容器中CO2濃度的相對值相同,說明12h內(nèi)光合作用消耗的CO2的總量等于呼吸作用產(chǎn)生的CO2的總量,即光合作用制造的有機物等于呼吸作用消耗的有機物,所有12h時衣藻細胞內(nèi)有機物的含量不變。(4)探究CCCP、缺鎂兩種因素對海水稻光合作用的影響及其相互關(guān)系,需設(shè)定四組實驗,分別是完全培養(yǎng)液、缺鎂培養(yǎng)液、完全培養(yǎng)液加CCCP、缺鎂培養(yǎng)液加CCCP?!军c睛】答題關(guān)鍵在于建立光合作用和細胞呼吸知識的內(nèi)在聯(lián)系,難點是實驗分組的設(shè)計。11、菊花細胞植物EcoRI和PstIDNA連接酶受傷的葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質(zhì),可吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞不抗氨芐青霉素,抗新霉素比較轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因兩種菊花的葉片細胞,轉(zhuǎn)基因菊花細胞中含有胰蛋白酶抑制劑基因、胰蛋白酶抑制劑的mRNA、胰蛋白酶抑制劑【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成;(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等;(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法;(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)該基因工程需要將胰蛋白酶抑制劑基因?qū)刖栈毎?,使菊花具有抗蟲性,所以受體細胞是菊花細胞,屬于植物基因工程。(2)目的基因的兩端含有EcoRI、TthIIII、PstI三種限制酶的酶切位點,為了避免目的基因自身環(huán)化,不能只用EcoRI這一種限制酶進行切割,若用EcoRI和TthIIII切割目的基因,相應(yīng)的在對質(zhì)粒進行切割時會將復制原點切去,因此、為使目的基因與質(zhì)粒高效重組,最好選用EcoRI和PstI作用于含目的基因的DNA和質(zhì)粒,然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒。(3)用農(nóng)桿菌感染時,應(yīng)優(yōu)先選用菊花受傷的葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),選用這種葉片的理由是葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質(zhì),可吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞;重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中用EcoRI和PstI進行切割,PstI會破壞氨芐青霉素抗性基因,因此質(zhì)粒上保留完整的標記基因是新霉素抗性基因,據(jù)此可知成功導入重組
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