實驗室生物安全標準操作規(guī)程

實驗室生物安全標準操作規(guī)程

HYEY-PGC-2016

（第三版）

2016年1月11日發(fā)布2016年1月20日實施

懷遠縣第二人民醫(yī)院

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC-2016------------1修訂表

第1頁共I頁

修訂表第3版第0次修訂

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

規(guī)程號修訂次序修訂內(nèi)容批準日期

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（S0P）HYEY-PGC-2016目錄

第1頁共1頁

目錄第3版第0次修訂

2016年1月11日發(fā)布/I月20c

HYEY-PGC0I-2016實驗室人員進出實驗室

HYEY-PGC02-2016實驗室檢測樣品采集

1IYEY-PGC03-2016實驗室檢測樣品包裝和運送

HYEY-PGC04-2016實驗室檢測樣品接收

HYEY-PGC05-2016樣品檢測操作規(guī)程

HYEY-PGC06-2016電氣設備操作規(guī)程

HYEY-PGC07-2016實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程

HYEY-PGC08-2016無菌間使用標準操作規(guī)程

HYEY-PGC09-2016實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程

HYEY-EGCW-2016實驗室消毒標準操作程序

11YEY-PGC11-2016實驗室意外事故處理

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC01-2016

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檢驗科實驗室人員進出實驗室第3版第0次修訂

201年1月11日發(fā)布/I月20日實施

制定檢驗科實驗室人員進出的標準操作程序，保障實驗室生物安全。

2適用范圍

適用于檢驗科實驗室人員進出程序。

3職責

實驗室工作人員執(zhí)行本程序的規(guī)定。實驗室負責人負責監(jiān)督執(zhí)行。

4規(guī)程要求

4.1進入程序

實驗室人員需將外衣掛入（避免將外衣與工作服混放），穿上工作服，按要求戴手套、口罩等防

護用品方可進入實驗室。

4.2退出程序

工作結束后，實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先用0.5%新潔

爾滅對手進行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定區(qū)域脫下工作服，必要時進行紫外消毒。實驗室人

員退出實驗室后，必須將實驗室入口門關好，方可離開實驗室。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）IIYEYPGC0220161目的

第1頁共4頁為保

第版第次修訂

實驗室檢測樣品采集30障檢測實

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

驗的順利

進行，規(guī)范采樣程序，防止病原微生物在實驗室采樣過程中產(chǎn)生污染。

2適用范圍

適用于實驗室內(nèi)采集、處理動物樣品。

3職責

3.1采集檢測樣品的工作人員在采莫過程中應當防止病原擴散，并對樣本的來源、采集過程和處理

方法等作詳細記錄。

3.2檢驗人員必須嚴格按照本操作規(guī)程操作，不可擅自做出超出本規(guī)程的操作，所有實驗人員對所

從事的工作負相應的責任。

4過程要求

4.1工作條件

4.1.1具有采集、處理樣品所需要的生物安全防護設備；

4.1.2具有掌握相關專業(yè)知識和操作技能的工作人員；

4.1.3具有有效的防止病原擴散的措施；

4.1.4具有保證檢測樣品質量的技術方法和手段。

4.2實驗材料

準備滅菌的解剖器械（剪刀、銀子、手術刀、大刀、斧頭等）、滅菌試管、平皿或自封袋、載

玻片、棉簽、營養(yǎng)肉湯、30%,50%甘油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS（病毒保存液）、50%甘油磷

酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP管、記號筆、簽字筆、防護服、無粉

乳膠手套、防護口罩、鉛筆、空白標簽紙、膠布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消

毒藥品、采樣單等。

4.3活畜樣品的采集

4.3.1血清樣品的采集

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-20164.3.1.1采

第2頁共4頁

血方法

實驗室檢測樣品采集第3版第0次修訂

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施對采

血部位的

皮膚先剃（拔）毛，碘酊消毒，75%的酒精消毒，待干燥后采血。采血方法推行生豬站立式前腔靜

脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血，采血過程嚴格無菌。

4.3.1.2采血數(shù)量

單一病種抗體監(jiān)測的每頭（只）采集2?3mL全血，多病種抗體檢測的每頭（只）采集5?10mL

全血。

4.3.1.3全血保存

采集好的全血轉入盛血試管，斜面存放，室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱，送實驗室。

從全血采出到血清分出的時間不超過Who

4.3.1.4血清分離

凝固全血在室溫2?4h后，有血清析出時，用無菌針剝離血凝塊，然后放入4℃冰箱4?8h后，

待大厘血清析出時，吸出血清。必要時經(jīng)離心機3000rpm、30min離心，吸出血清。分離的血清，

一般不加防腐劑。血清若在1?2周內(nèi)即可檢驗，可放在4℃冰笛內(nèi)保存；如果保存時間較長，應

放在-20℃?-80℃冰箱內(nèi)保存。運送血清時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運送。

4.3.2全血樣品的采集

仝血采集后應直接注入盛有抗凝劑的試管中，立即搖動，充分混合“也可將全血液注入盛有玻

璃珠的滅菌瓶中，立即連續(xù)振蕩脫纖維蛋白。

4.4活禽樣品的采集

咽喉拭子的采集：將棉簽插入喉頭口及上顆裂處來回刮3?5次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的

采集：將棉簽插入取泄殖腔轉2?3圈并沾取少量糞便，再將咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有

。8?1.0磯加有抗生素PBS的EP管中,加蓋，編號。

4.5病死（屠宰）畜禽樣品的采集

4.5.1解剖前檢查

急性

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-2016

第3頁共4頁死亡的牛、

第版第次修訂

實驗室檢測樣品采集30羊、豬、馬

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

等動物，解

剖之前應作臨床檢查，疑似炭疽病的應采血、鏡檢，排除炭疽病時.,方可解剖。動物死亡后應在

6h內(nèi)進行剖檢。解剖人員要做好自我防護工作。

4.5.2肝、脾、腎、淋巴結、肺和七、馬心臟樣品的采集

在肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取2?3cm3的小方塊，分別置于滅

菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟，置于自封袋中。細菌分離樣品的采集可用燒紅的刀片

燙烙臟器表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的鉗金耳伸入孔內(nèi)，取少量組織或液體，作涂片鏡檢

或劃線接種于適宜的培養(yǎng)基上。

4.5.3腦、脊髓樣品的采集

取腦、脊髓2?3cm，浸入50%甘油鹽水中或將整個頭部（豬、牛、馬除外）割下，用消毒紗布

包裹，置于不漏水的容器中。

4.5.4腸、腸內(nèi)容物及糞便樣品的采集

腸樣品的采集：選擇病變最嚴重的部分，將其中的內(nèi)容物棄去，用滅菌的生理鹽水輕輕沖洗后,

置于試管中。腸內(nèi)容物樣品的采集：燒烙腸壁表面，用吸管扎穿腸壁，從腸腔內(nèi)吸取腸內(nèi)容物，放

入盛有30%甘油鹽水中或者直接將昔有糞便的腸管兩端結扎，從兩端剪斷。糞便樣品的采集：用棉

簽插到直腸黏膜表面采集糞便，然后將拭子放入盛有30%甘油鹽水中。

4.5.5液體病料樣品的采集

采集膽汁、膿、粘液、關節(jié)液、水泡液等樣品時，用藥物或燙烙法消毒采樣部位，用滅菌吸管

（毛細吸管、注射器）經(jīng)消毒部位插入，吸取內(nèi)部液體，然后將病料注入滅菌試管中，加蓋。也可

用接種環(huán)經(jīng)消毒部位插入，提取病科直接接種在培養(yǎng)基上。

4.5.6胎兒樣品的采集

取流產(chǎn)后的整個胎兒，裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。

4.5.7皮膚樣品的采集

用清水清洗病變皮膚后，取病變皮膚3?5g放入滅菌小瓶中，加適量50%甘油磷

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（S0P）HYEY-PGC03-2016

第4頁共4頁

實驗室檢測樣品興集第3版第0次修訂

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

酸鹽緩沖液（pH7.4）,加蓋密封。

4.5.8死（屠宰）禽樣品的采集

死（屠宰）禽樣品的采集除按上述方法采集，也可將整個死禽裝入不透水塑料薄膜袋或自封袋

中或其他容器內(nèi)。

4.6組織樣品采集完后的無害化處理

活畜禽、病死畜禽組織樣品采奠完后，應做好樣品外包裝和環(huán)境消毒以及病死畜禽及其產(chǎn)品的

無害化處理。

4.7樣品編號、抽樣單填寫

4.7.1樣品編號

每頭動物的不同部位的組織樣品應單獨包裝。包裝好后，在樣品袋或平皿外貼上標簽，標簽注

明樣品名、樣品編號、采樣日期等。采集好不同部位的樣品后，同?動物的樣品集中包裝。

4.7.2采樣單填寫

可根據(jù)具體要求填寫。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-20161目的

第1頁共2頁維護

實驗室檢測樣品包裝和運送第3版笫0次修訂

檢測樣品

2016年1月11H發(fā)布/I月20日實施

的質量，防

止病原的泄漏和擴散，保障樣品檢測的順利開展。

2適用范圍

適用于檢測樣品的包裝和運送。

3職責

3.1操作者必須嚴格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，所有實驗人員對所從事的

工作負相應的責任。

3.2實驗室負責人負有對樣品包裝、運輸?shù)谋O(jiān)督和管理職責，并監(jiān)督檢查相關工作人員的安全工作

程序和行為.

4過程要求

擬運輸?shù)臉悠?，要求嚴密包裝，外表加以消毒，編號、登記后，貼.上“生物危險”標識，并嚴

防標識脫落。樣品必須經(jīng)三層包裝。

4.1樣品的包裝

4.1.1內(nèi)包裝

4.1.2外包裝

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）IIYEY-PGC03-20164.1.3包裝

第2頁共2頁要求

實驗室檢測樣品包裝和運送第3版笫0次修訂

在輔

2016年1月11日發(fā)布/I月20三

助包裝周

圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑，或者按照規(guī)定將冷凍劑放在由一個或者多個完整包裝件組成

的合成包裝件中，內(nèi)部要有支撐物，干冰或者干冰消耗掉以后，仍可以把輔助包裝固定在原位置上。

如果使用冰，包裝必須不透水；如果使用干冰，外包裝必須能排出二氧化碳氣體；如果使用冷凍劑,

主容器和輔助包裝必須保持良好的性能，在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運輸中的溫度和壓力。

主容器必須是火焰封口的玻璃安液或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在輔助包裝周圍還必須放

置冰、干冰或者其他冷凍劑。

實瞼室生物安全標準操作規(guī)程(SOP)HYEY-PGC04-20161目的

第1頁共1頁規(guī)范接收

實驗室檢測樣品接收第3版笫0次修訂

檢測樣品，

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

保證生物

安全。

2適用范圍

適用于送檢樣品的交接管理。

3職責

專人負責接收樣品和接樣的生物安全。

4過程要求

4.1檢測樣品由專人接收，在接收送檢樣品時應作好樣品登記，填寫《樣品接收登記表》，并對樣

品進行符合性檢查，檢查包括：

(1)樣品包裝、標志及外觀是否完好；

(2)對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數(shù)量、性狀等信息；

(3)樣品是否損壞、污染或已過有效期。

4.2接樣人進行樣品登記、保存后，報告實驗室負責人安排檢測工作。

4.3檢驗后的剩余樣品，由樣品保管人負責留存。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程(SOP)HYEY-PGC05-20161目的

第1頁共1頁為規(guī)

樣品檢測操作規(guī)程第3版第0次修訂

范樣品的

2016年1月11日發(fā)布/I月20=

檢測，特制

定本規(guī)程。

2適用范圍

適用不同待檢樣品的檢測。

3職責

3.1實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行樣品的檢測。

3.2實驗室負貢人負貢監(jiān)督實驗室工作人員樣品的檢測工作。

4過程要求

樣品的檢測方法應采用《作業(yè)指導書-檢測標準》(GTCADC-ZYBZ-2016)規(guī)定的方法。

5.相關文件

《作業(yè)指導書-檢測標準》(GTCADC-ZYBZ-2016)

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC06-20161目的

第1頁共1頁

為規(guī)范

電氣設備操作規(guī)程第3版第0次修訂

實驗室電氣

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

設備的使用

和維護，特制定本規(guī)程。

2適用范圍

適用于電氣設備的操作和維護。

3職責

實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行使用電氣設備。

4過程要求

4.1實驗室工作人員必須熟悉儀器的性能、用途、使用方法，嚴珞按照說明書使用，遵守儀器操作

規(guī)程。

4.2儀器使用過程中發(fā)生故障必須立即停止使用，并報告實驗室負責人，及時查找原因，盡快排除,

并登記。

4.3使用完畢必須對使用過的儀器設備按相關要求去除污染，以減少污染風險。

5相關文件

《作業(yè)指導書-儀器設備操作規(guī)程》（GTCADC-ZYGC-2016）

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）IIYEY-PGC07-20161目的

第1頁共2頁規(guī)范

實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程第3版第0次修訂實驗室消

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

毒劑配制，

保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。

2.適用范圍

適用于檢驗科實驗室常用消毒劑的配制。

3.職責

實驗室工作人員負責常用消毒劑的配制。

4.過程要求

4.1消毒劑配制

4.1.1配制前，實驗室工作人員應洗凈配制容器及量具，自然晾干。按試劑配制的配方和配質量量

取所需藥品。按配制要求的先后順序加入藥品，攪拌均勻配制試劑。

4.3配制過程產(chǎn)熱的試劑待自然冷卻后分裝，并將填寫好品名、濃度、配制時間、有效期的標簽貼

于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表1。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC07-2016表1常用

第2頁共2頁消毒劑種

實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程第3版第0次修訂類和配制

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

消毒劑名稱用途配制方法備注

手消毒，儀器表面消量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器中，

0.2%新潔爾滅

毒等加入2400mL純化水攪拌混勻。

稱取20gNa0H固體，緩慢加入純化水定容到強堿pH值大

2%NaOH溶液原位消毒

1000mL?于13

75%乙醇手表面消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到1000mL。

紀制好的過

氯乙酸需室

冰醋酸：H2O2：濃1*30,按體積比

溫放置48h后

140.0：60.0：2.1配制。根據(jù)需要量分別量取

使用。超過

15%?18%過氧乙酸實驗室薰蒸消毒所需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制

20%的過氧乙

容器中攪拌均勻。使用時可加入催化劑高鈦酸

酸會發(fā)生爆

鉀或加熱。

炸。一周內(nèi)用

完。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC08-20161目的

第1頁共2頁確保

無菌間使用標準操作規(guī)程第3版第0次修訂

無菌室環(huán)

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

境的無菌

狀態(tài)。

2適用范圍

適用于無菌間空氣微生物監(jiān)測.

3職責

實驗室工作人員負責實驗室空氣微生物監(jiān)測和實施。

4過程要求

4.1實驗室工作人員在進無菌間之前，應先用2%石碳酸或來蘇爾對手進行浸泡消毒。

4.2緩沖間在每次使用前，應先打開紫外燈，紫外照射30min；工作人員在進入無菌室前，必須于

緩沖間內(nèi)更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。檢驗用的有關器材（待檢品除外），搬入無菌室

前必須分別進行滅菌消毒。

4.3將無菌間和生物安全柜的紫外燈打開照射30min后，才能進行工作。

4.4實驗完畢后，用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面，打開生物安全柜內(nèi)紫外燈，照射

30min0同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并打開，照射30min。

4.5工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。

4.6適時應對無菌間進行熏蒸消毒。

4.7每月應對無菌間進行一次無菌檢查記錄

4.7.1營養(yǎng)瓊脂平板的制備

按營養(yǎng)瓊脂說明書配制營養(yǎng)瓊脂，12（TC15min高壓滅菌后，冷卻到5（TC左右傾倒于9cm的平

板。待瓊脂凝固后，放37t48h培養(yǎng)，無菌生長，方可以使用。

4.7.2沉降菌數(shù)測定

先打開無菌室內(nèi)紫外燈照射30min后，將備妥的營養(yǎng)瓊脂平板5個。以無菌方式移入操作間，置四

個角落和中央各1個，開蓋，暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37七培笄箱內(nèi)倒置培養(yǎng)48h,取出檢查“

分別數(shù)出5個平板的生長菌落數(shù)并得出5個平板的平均菌落數(shù)。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC08-2016無菌室

第2頁共2頁

內(nèi)的潔凈級

無菌間使用標準操作規(guī)程第3版第0次修訂

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施別應達到

10000汲,

即在進行沉降菌數(shù)測定時，平均菌落數(shù)應小于或等于3個0.5h）。如所測得的平均菌落

數(shù)小于3個，則證明該無菌室無菌程度符合要求，否則該無菌室的無菌程度不符合要求，需要對無

菌間進行徹底消毒，直至重復檢查符合要求為止。

實檢室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC09-20161目的

第1頁共2頁制定

實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程第3版第0次修訂

實驗室廢

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

棄物安全

處理操作規(guī)程，保障實驗室生物安全。

2適用范圍

適用于實驗室廢棄物的處理。

3職責

3.1實驗室工作人員嚴格遵守本規(guī)程，并對所從事的工作負有生物安全責任。

3.2實驗室負賁人負有監(jiān)督和管理員任。

4過程要求

4.1實驗室工作人員做好個人防護。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。

4.2實驗室廢棄物使用防滲專用包裝容器（袋）或者防銳器穿透密閉容器收集，及時進行無害化處

理，并做好實驗室廢棄物處理記錄。

4.3廢棄物分類處理

4.3.1感染性廢棄物處理

培養(yǎng)基、標本和菌（毒）種保存液、血液、血清、臨床標本等感染性廢棄物須進行壓力蒸汽滅

菌。用過的一次性實驗用品（包括手套、口罩、帽子等）及試管、吸管、移液器吸頭等感染性廢棄

物可進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24ho

4.3.2損傷性廢棄物處理

針頭、縫合針、解剖刀、手術刀、備皮刀、手術鋸，試驗玻片、玻璃試管、玻璃安甑等能夠刺

傷或割傷人體的廢棄的實驗利（銳）器等損傷性廢棄物需放入符合要求的利器盒里，容器裝滿3/4

后封蓋，進行高壓蒸汽滅菌處理。

4.3.3藥物性廢棄物處理

過期、淘汰、變質或者被污染的診斷試劑可采用壓力蒸汽滅菌處理。

4.3.4病理性廢棄物處理

動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器（袋）包裝好（外包裝進行徹底

的消毒處理），按要求進行焚燒、深埋或送往無害化處理場處理。做好廢棄物處

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC09-2016理記錄。

第2頁共2頁4.3.5化學

實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程第3版第0次修訂

品廢棄按

2016年1月11日發(fā)布/I月20日實施

組分收集

后，倒入專用化學廢棄物收集桶內(nèi)，集中處理。

實驗室生物安全標準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC10-20161目的

第1頁共1頁保護實

實驗室消毒標準操作規(guī)程第3版第0次修訂

驗室的生物

2016年1月11日發(fā)布/I月20E

安全，防止病

原逃逸。

2適用范圍

實驗室日常清潔，實臉過程中產(chǎn)生的污染廢棄物、使用過的防護裝備