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東南大學醫(yī)學院2019級細胞工程期末考試題一.名詞解釋Cytotechnology(細胞工程):是指以生物細胞或組織為研究對象,按照人們的意愿進行工程學操作,從而改變生物性狀,以獲得生物產(chǎn)品,為人類生產(chǎn)和生活服務的科學。embryonicstemcell,ES(胚胎干細胞):是指胚胎或原始生殖細胞經(jīng)體外抑制分化培養(yǎng)后,篩選出的具有發(fā)育全能性的細胞。stocksolution(母液):為了避免每次配制時都要徇各種化學藥品,常常把培養(yǎng)基中必需的一些化學藥品,以10倍、50倍或100倍量,配制成一種濃縮液,這種濃縮液稱為母液。Complex/nonsyntheticmedium(天然培養(yǎng)基):是指一些利用動植物或微生物產(chǎn)品或其提取物制成的培養(yǎng)基。培養(yǎng)藏拙主要成分是復雜的天然物質(zhì),如馬鈴薯、豆芽、麥芽、牛肉膏、蛋白胨、雞蛋、酵母膏、血清等。一般難于確切知道其中的營養(yǎng)成分。Defined/syntheicmedium(合成培養(yǎng)基):是指人工設計、配制,化學成分明確,組分穩(wěn)定的培養(yǎng)基。serumfreemedium,SFM(無血清培養(yǎng)基):是全部用已知成分組配的不信血清的合成培養(yǎng)基,通常在含有細胞所需營養(yǎng)和貼壁因子的基礎(chǔ)中加入促細胞生長因子,保證細胞良好生長,是最適合于制藥生產(chǎn)的培養(yǎng)基。celltheory(細胞學說):是1838年由德國植物學家Schleiden和動物學家Schwann提出來的。主要觀點是,①細胞是有機體,一切動植物都是由單細胞發(fā)育而來,即生物是由細胞和細胞的產(chǎn)物所組成;②所有細胞在結(jié)構(gòu)和組成上基本相似;③新細胞是由已存在的細胞分裂而來;④生物的疾病是因為其細胞機能失常。⑤.細胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。⑥.生物體是通過細胞的活動來反映其功能的。Totipotency(全能性):在多細胞生物中每個體細胞的細胞核具有該物種的全部遺傳信息,只要條件許可,都可發(fā)育成完整的個體。Differentiation(細胞分化):是指由發(fā)育起始狀態(tài)的合子沿個體發(fā)育方向不斷分化出形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能不同的細胞、組織、器官而最終形成完整植株的過程,即由于細胞的分工而導致其結(jié)構(gòu)和功能改變或發(fā)育方式改變的過程。Dedifferentiation(脫分化/去分化):已經(jīng)分化的細胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只毎匦缘倪^程。Callus(愈傷組織):通常是指植物受到機械、動物或微生物等傷害后,創(chuàng)傷部位的細胞脫分化而不斷增殖形成松散排列、無特定結(jié)構(gòu)和功能,具有分生能力的一團不規(guī)則薄壁細胞。Explant(外植體):把由活植物體上切取下來以進行培養(yǎng)的那部分組織或器官叫做外植體。Micropropagation(微繁殖):又稱Clonalpropagateioninvitro(離體無性繁殖)或rapidvegetativepropagateion(離體快繁),是指在離體培養(yǎng)條件下,將來自優(yōu)良植株的莖尖、腋芽、葉片、鱗片等器官、組織和細胞進行無菌培養(yǎng),經(jīng)過不斷地切割和重復培養(yǎng),使其增殖并再生形成完整植株,在短期內(nèi)獲得大量遺傳性均一的個體的方法。platingculture(平板培養(yǎng)):是指將制備好的單細胞懸浮液,按照一定的細胞密度(通常為103~105個/mL),接種在1mm厚的薄層固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的方法。nursingculture(看護培養(yǎng)):在培養(yǎng)中用一塊活躍生長的愈傷組織來哺育單細胞,從而使其正常分裂、增殖的方法稱為看護培養(yǎng)。Suspensionculture(懸浮培養(yǎng)):是指將游離的單細胞或小的細胞團,按照一定的細胞密度,懸浮在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法。microchamberculture(微室培養(yǎng)):人工制造一個小室,將單細胞培養(yǎng)在小室中的少量培養(yǎng)基上,使其分裂增殖形成細胞團的方法稱為微室培養(yǎng)。Protoplast(原生質(zhì)體):是指除去細胞壁后裸露的有生活力的原生質(zhì)團。用機械方法或酶解方法可去除細胞壁。Adventitiousbud(不定芽):相對于頂芽和腋芽,由植物的其他部位或器官、組織上通過器官發(fā)生重新形成的、無固定著生位置的芽統(tǒng)稱為不定芽。Germplasm(種質(zhì)):是指親代通過生殖細胞或體細胞直接傳遞給決定固有生物改善的遺傳物質(zhì)。Germplasmconservation(種質(zhì)保存):是指利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境,借以保存種質(zhì)資源,使個體所含有的遺傳物質(zhì)保持其遺傳完整性,并且有強的生活力,能通過繁殖將其遺傳特性傳遞下去。Germplasmband(種質(zhì)庫):用來保存種質(zhì)資源(一般為種子)的低溫保存設施。Syntheticseedorartificeialseed(人工種子):建立在植物細胞的全能性上,將離體培養(yǎng)所產(chǎn)生的體胚或具有發(fā)育成完整植株的分生組織(如胚狀體、花粉胚等)包裹在一塊含有營養(yǎng)物并且有保護功能的外膜內(nèi),形成在適宜條件下能夠發(fā)育成完整植株,似種子結(jié)構(gòu)的小顆粒。Embryo(胚性):二.解答題1、培養(yǎng)基中有那些成分?他們所起的作用分別是?培養(yǎng)基的成分有:無機化合物、有機化合物、激素、培養(yǎng)材料的支持物。其作用分別是,無機化合物是細胞或植物組織培養(yǎng)過程中必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)。有機化合物有利于細胞或植物組織的快速生長。激素是植物細胞生長最適宜的調(diào)節(jié)物質(zhì),它能誘導細胞分裂、愈傷組織再分化以及胚狀體發(fā)育。培養(yǎng)材料的支持物,顧名思義,對培養(yǎng)材料具有支持作用。除上述四類成分外,有時還添加一些其他物質(zhì),如防止菌類污染的抗生素、抗酚類氧化藥物及具有吸附能力的活性炭等。2、病毒在植物體內(nèi)的分布、傳播和危害?植物脫毒的一般方法,莖尖脫毒的原理?病毒在植物體內(nèi)的分布是不無均勻的,較老的組織含病毒較多,幼嫩的組織中含量較少,通過有性過程形成的種子以及旺盛生長的根尖、莖尖等一般都無病毒或很少有病毒。病毒在植株個體間的傳播分為介體和非介體傳播兩類。介體傳播指病毒借助生物體的活動而進行的傳播,如昆蟲、螨類、線蟲、真菌、菟絲子等,其中,昆蟲是最主要的傳播介體;非介體傳播是指無其他機體介入的傳播方式,包括自然接觸和汁液接觸傳播,嫁接傳播和花粉傳播,病毒隨種子和無性繁殖材料傳帶。植物一旦感染病毒會終生帶毒。受病毒侵染的植株多表現(xiàn)為系統(tǒng)發(fā)病,如植株發(fā)育不良、矮小,葉片變小、畸形,產(chǎn)生花葉、雜斑等癥狀;果實和種子變小,嚴重的引起組織、器官或整個植物壞死;有的植株感染病毒后并不表現(xiàn)明顯的癥狀,但會引起生長衰退、產(chǎn)量下降,品質(zhì)變劣,需肥量增多,壽命縮短等慢性危害;許多優(yōu)良品種由于受病毒侵染導致種性退化,嚴重的已在生產(chǎn)上失去應用價值。植物脫毒的一般方法有:物理方法,是根據(jù)病毒對光譜的吸收我和對溫度的敏感性等物理特性,使材料攜帶的病毒鈍化或失活,從而達到掏病毒的目的。方法包括高、低溫處理,紫外線、X射線照射等,其中,熱處理最常用。化學方法,應用化學試劑防治病毒病。生物學方法,指通過植物組織培養(yǎng)、微型嫁接等除去病毒的方法。莖尖脫毒原理莖尖這一區(qū)域由分生細胞構(gòu)成,無維管束,胞間連絲也不發(fā)達,病毒很難進入;同時,分生細胞不斷進行活躍的分裂增殖,需要消耗大量的能量,代謝旺盛,能抑制病毒的復制;莖尖中內(nèi)源激素濃度水平較高,抑制了病毒的復制。3、原生質(zhì)體分離的材料主要有哪些?最理想的是由葉肉細胞分離的原生質(zhì)體;自然條件下生長的植株及各部分組織及器官的細胞;無菌幼苗的胚根、子葉和胚軸細胞;外植體來源的愈傷組織、體細胞胚,懸浮培養(yǎng)細胞等。4、原生質(zhì)體分離效果的影響因素?原生質(zhì)體分離效果的影響因素有:材料的基因型和外植體;酶的各類、濃度與酶解時間;滲透壓穩(wěn)定劑;質(zhì)膜穩(wěn)定劑;酶解方式;pH值;溫度和光照;5、原生質(zhì)體培養(yǎng)的影響因素?材料(基因型和原生質(zhì)體的來源);培養(yǎng)基的類型、特性;滲透壓穩(wěn)定劑;原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度;培養(yǎng)條件(光照和溫度)6、PEG-高pH-高Ca2+誘導原生體融合原理?基本原理:PEG是相鄰原生質(zhì)體表面間的分子橋。當PEG分子被高pH-、高Ca2+洗掉時,可能引起原生質(zhì)體表面電荷的紊亂和再分布,從而促進了融合。高國楠認為,PEG和高pH、高Ca2+之所以能提高融合率,是因為增加了電荷紊亂的程度。PEG和高pH-、高Ca2+對融合起了協(xié)同作用,PEG直接或間接地通過鈣離子起作用。7、什么是花粉培養(yǎng)?什么是花藥培養(yǎng)?花粉培養(yǎng)(pollenculture),又稱小孢子培養(yǎng)(microsporeculture),或游離小孢子培養(yǎng)(isolatedmicrosporeculture),是指在無菌條件下,將花粉從花藥中流離出來,使其成為分散或游離態(tài),發(fā)育成單倍體植株的過程。花粉培養(yǎng)屬于細胞培養(yǎng)?;ㄋ幣囵B(yǎng)(ahtherculture),是指用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將發(fā)育到一定階段的勤儉節(jié)約剝離下來(切去花絲部分)接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),最終形成完整植株的過程。8、什么是胚乳培養(yǎng)及其意義?Endospermculture(胚乳培養(yǎng)):是指對處于細胞期的胚乳組織的離體培養(yǎng)。意義: 首先,三倍體種子在早期就發(fā)生敗育,因此可利用三倍體植株生產(chǎn)無籽西瓜、香蕉和蘋果等。其次,三倍體植株經(jīng)二倍體植株高大,生長速度快,生物產(chǎn)量高,這在以營養(yǎng)器官為產(chǎn)品的植物生產(chǎn)上有重要價值,例如,有些甜菜、桑樹和茶樹的優(yōu)良品種是三倍體。再次,三倍體植物的品質(zhì)優(yōu)于二倍體,如三倍體顫楊的木材能抽出質(zhì)量較好的紙漿.9、什么是突變體?什么是變異體?他們之間的區(qū)別?突變體(Mutant):由真正的遺傳事件所造成的變異體,事件包括了核苷酸的取代、插入、缺失,染色體節(jié)段的重復、倒位、易位,染色體數(shù)目的增加、減少等。變異體Variationbody(variant):在一項離體選擇實驗中,還沒有足夠的根據(jù)把入選的一種新的表現(xiàn)型確認為一種新的基因型的細胞或個體稱為變異體。兩者的區(qū)別自己總結(jié)10、體細胞無性系變異的分子生物學基礎(chǔ)?細胞學基礎(chǔ)?分子生物學基礎(chǔ)堿基突變;DNA序列選擇性的擴增與丟失;轉(zhuǎn)座子的活化(變異頻率高低);DNA甲基化(沉默基因活化);細胞學基礎(chǔ)DNA核內(nèi)重復復制;染色體重組與斷裂;染色體非整數(shù)倍有絲分裂;11、植物細胞全能性實現(xiàn)通過哪幾個周期完成的?他們之間的聯(lián)系?生命周期,細胞周期和組織培養(yǎng)周期三者之間聯(lián)系密切,自Swift(1950)發(fā)現(xiàn)DNA復制發(fā)生在細胞間期而不是有絲分裂期時起,生命周期和細胞周期的聯(lián)系已為人所共知。生命周期是通過細胞周期來實現(xiàn)全能性,之后由于DNA重組技術(shù)的成功,密切了細胞周期和組培周期之間的聯(lián)系。克隆后的DNA,必須經(jīng)過組培周期實現(xiàn)轉(zhuǎn)化和表達,組培周期又必須經(jīng)過生命周期來實現(xiàn)細胞的全能性??梢?,通過生命周期、細胞周期和組培周期可使植物細胞全能性得以充分實現(xiàn)和利用。同時證明離體培養(yǎng)技術(shù)在實現(xiàn)植物細胞全能性中的重要作用。離體培養(yǎng)技術(shù)的作用在于將離體狀態(tài)下的植物細胞,通過理化因子的人工調(diào)控而發(fā)育成完整植物體,從而使植物固有的潛在能力得以充分表達。12、植物細胞的全能性較優(yōu)于動物細胞?從以下下三方面考慮可能與以下因素有密切關(guān)系動物、植物對營養(yǎng)需要的不同
植物是自養(yǎng)型的,植物細胞內(nèi)有葉綠體,可以進行光合作用,合成有機養(yǎng)分,還可以通過強大的根系選擇性吸收各種無機營養(yǎng)和水分。動物是異養(yǎng)型的,動物所需的養(yǎng)分和水分,完全由外界供給,而且動物除了需要無機營養(yǎng)外,不要求供給有機營養(yǎng)。動物、植物的代謝類型不同
植物領(lǐng)先簡單的輸導組織進行養(yǎng)分吸收和運輸,如木質(zhì)運輸水分和無機物,韌皮部運輸有機營養(yǎng)。動物攝入各種有機、無機營養(yǎng)后,要通過各種復雜的系統(tǒng),如消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)送往全身。植物通過滲透性強的細胞壁進行物質(zhì)交換,通過細胞內(nèi)的液泡調(diào)節(jié)滲透壓。因此植物可以吸收稀薄的養(yǎng)分,進行自身濃縮來滿足植物體生長發(fā)育的需要。則是在濃縮的營養(yǎng)環(huán)境中生活,不滿足這種條件,動物的行長發(fā)育就會受到影響。動物、植物發(fā)育方式的不同
植物的發(fā)育模式與動物有很大的區(qū)別。植物的器官分化在某種意義上是一個無限的過程。種子萌發(fā)成苗后,在整個生活史中不斷地形成新的器官,直到生命的終結(jié)。植物器官的建成可以多次重復,是無限的。動物
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