云南省沾益縣第四中學(xué)2025屆生物高二下期末統(tǒng)考模擬試題含解析

云南省沾益縣第四中學(xué)2025屆生物高二下期末統(tǒng)考模擬試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號(hào)?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．如圖是溫度對(duì)a、b、c三種酶活性影響的曲線，下列相關(guān)說法正確的是A．三種酶中a酶的最適溫度最高B．該實(shí)驗(yàn)中有兩個(gè)自變量C．A、B兩點(diǎn)時(shí)a酶的結(jié)構(gòu)相同D．增加b酶的用量，b酶的酶活性曲線的最高點(diǎn)上升2．最近媒體報(bào)道的“地溝油”事件，引起了公眾的關(guān)注。“地溝油”的主要成分是脂肪，但還含有許多致病、致癌的毒性物質(zhì)。下列有關(guān)敘述正確的是A．“地溝油”的主要成分的組成元素一定是C、H、O、NB．“地溝油”的主要成分是生物體內(nèi)的主要能源物質(zhì)C．“地溝油”的主要成分遇蘇丹Ⅲ染液可能呈現(xiàn)橘黃色D．“地溝油”的主要成分其單體是甘油和脂肪酸3．蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者，相關(guān)敘述正確的是A．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)多樣性與氨基酸的連接方式有關(guān)B．基因多樣性是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性的根本原因C．細(xì)胞間的信息交流均以蛋白質(zhì)作為信息分子D．在免疫過程中起作用的蛋白質(zhì)不具有催化功能4．如圖為滲透平衡時(shí)的裝置(糖類不能通過半透膜)，燒杯的液面高度為a，漏斗的液面高度為b，液面差m＝b－a。在此基礎(chǔ)上繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，以滲透平衡時(shí)的液面差為觀測(cè)指標(biāo)，正確的是()A．若向漏斗中滴入清水，平衡時(shí)m將增大B．若向漏斗中加入蔗糖分子，則平衡時(shí)m不變C．若向漏斗中加入蔗糖酶，則平衡時(shí)m不變D．達(dá)到新的平衡時(shí)，水分子進(jìn)出半透膜的速率相等5．引起腹瀉的病原微生物主要是痢疾桿菌，下列關(guān)于痢疾桿菌的敘述正確的是：A．細(xì)胞中沒有核糖體等復(fù)雜的細(xì)胞器B．細(xì)胞中具有擬核，核內(nèi)有染色質(zhì)C．構(gòu)成細(xì)胞壁的物質(zhì)與植物細(xì)胞壁的成分不同，不含纖維素D．痢疾桿菌的DNA呈線型6．雄蜂（n=16）是由未受精的卵細(xì)胞直接發(fā)育而來。如圖所示為雄蜂精原細(xì)胞進(jìn)行的減數(shù)分裂的部分流程圖，而圖中僅繪出雄蜂一個(gè)染色體組內(nèi)的兩條染色體的行為變化和數(shù)量變化。據(jù)圖分析，下列相關(guān)敘述中正確的是A．雄蜂的減數(shù)分裂機(jī)制有利于其產(chǎn)生正常的雄配子B．雄蜂體內(nèi)含有2個(gè)染色組的細(xì)胞為次級(jí)精母細(xì)胞C．蜜蜂的精細(xì)胞和卵細(xì)胞含有的染色體數(shù)目不同D．雄蜂減數(shù)第一次分裂過程中會(huì)出現(xiàn)聯(lián)會(huì)現(xiàn)象和四分體7．纖維素和殼聚糖都是多糖類化合物，纖維素酶對(duì)其都有不同程度的水解作用。下圖表示相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究，相關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．可以利用富含纖維素的培養(yǎng)基富集能合成纖維素酶的微生物B．本實(shí)驗(yàn)研究的自變量是pH、溫度、底物種類C．纖維素酶對(duì)纖維素的水解作用，強(qiáng)于對(duì)殼聚糖的水解作用D．纖維素酶對(duì)兩種底物水解作用的差異可能與底物和酶結(jié)合部位不同有關(guān)8．（10分）下列細(xì)胞結(jié)構(gòu)中，不能用光學(xué)顯微鏡直接觀察的是()A．細(xì)胞壁B．細(xì)胞膜C．大液泡D．細(xì)胞核二、非選擇題9．（10分）“今朝春氣寒，自問何所欲“。用吃喝來御寒，這未嘗不是一個(gè)好辦法。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：（1）在寒冷的環(huán)境中，人體體溫能保持相對(duì)恒定是在神經(jīng)和體液的共同調(diào)節(jié)下，______保持動(dòng)態(tài)平衡的結(jié)果。低溫刺激冷覺感受器并使之產(chǎn)生興奮，興奮傳至下丘腦，使下丘腦分泌的______增加，該激素作用于______細(xì)胞。（2）葡萄酒中所含的乙醇能使大腦的相關(guān)神經(jīng)中樞系統(tǒng)興奮。適量地飲葡萄酒有利于緩解疲

勞，松弛神經(jīng)，促進(jìn)血液循環(huán)和機(jī)體的新陳代謝等。當(dāng)乙醇刺激的神經(jīng)元的軸突上某部位時(shí)，這個(gè)部位的細(xì)胞膜內(nèi)電位發(fā)生的變化是______。10．（14分）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。圖1為限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列，圖2表示目的基因及限制酶切點(diǎn)，圖3表示目的基因上的DNA片段，圖4表示質(zhì)粒。請(qǐng)回答下列問題：（1）若用圖1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特異性而言，切開的是________________________________之間相連的化學(xué)鍵。（2）圖3為目的基因中的某一片段，下列有關(guān)敘述正確的是____。A．若圖中的ACT能決定一個(gè)氨基酸，則ACT可稱為一個(gè)密碼子B．DNA聚合酶和DNA連接酶都可作用于②處，解旋酶作用于①處C．若只用這個(gè)片段中的3個(gè)堿基對(duì)，排列出的DNA片段有64種D．就游離的磷酸基而言，該片段與重組質(zhì)粒相比多了2個(gè)游離的磷酸基（3）若利用PCR技術(shù)增擴(kuò)目的基因的數(shù)量，由圖2可知，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取_____________作為引物（DNA復(fù)制子鏈的延伸方向5’→3’）。該DNA分子在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)后會(huì)產(chǎn)生等長(zhǎng)的目的基因片段______個(gè)。（4）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是____________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時(shí)對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割，假設(shè)同時(shí)只有任意兩個(gè)位點(diǎn)被切斷且每次機(jī)會(huì)相等，則形成含有完整抗四環(huán)素基因的DNA片段有________種。（5）如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含_________________基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。11．（14分）以現(xiàn)有大豆品種作為受體材料，利用基因工程技術(shù)，獲得轉(zhuǎn)基因植株，分析其對(duì)疫霉根腐病的抗病性，篩選出抗病大豆新株（品）系。請(qǐng)據(jù)此回答問題：（1）基因工程的核心技術(shù)是_________，該過程用到的酶有________。（2）在用土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)時(shí)往往要用_________處理土壤農(nóng)桿菌，使之成為_________細(xì)胞，然后將它們?cè)诰彌_液中混合培養(yǎng)以完成轉(zhuǎn)化過程。（3）抗性植株的分子生物學(xué)檢測(cè)是基因工程成功與否的重要一環(huán)，其中檢測(cè)目的基因是否表達(dá)的方法是__________，其個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)方法為_______________。（4）轉(zhuǎn)基因大豆細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因大豆植株，需要通過的過程是____________，依據(jù)的原理是________。12．回答基因工程中的有關(guān)問題：Ⅰ.限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題：（1）一個(gè)圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后，會(huì)增加___________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。（2）與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止________________________________。Ⅱ.原核生物(如大腸桿菌)是基因工程中較理想的受體細(xì)胞，它們具有一些其他生物沒有的特點(diǎn)：①繁殖快，②多為單細(xì)胞，③_______________等優(yōu)點(diǎn)。大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用__________處理細(xì)胞，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，然后完成轉(zhuǎn)化。Ⅲ.植物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是__________，且一般將目的基因插入Ti質(zhì)粒的________中形成重組Ti質(zhì)粒，這樣可將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體上，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)：這樣得到的轉(zhuǎn)基因植株，其目的基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律，則該轉(zhuǎn)基因植株一般為雜合子。若要避免基因污染，一般需將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的________DNA中。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

題文考查的是溫度對(duì)a、b、c三種酶活性影響的曲線，觀察曲線可知三種酶的最適溫度依次為c、a、b?！驹斀狻緼、從圖形分析，c酶的酶活性曲線隨著溫度升高沒有下降，其他兩種酶的酶活性曲線下降，因此c酶的最適溫度最高，錯(cuò)誤。B、該實(shí)驗(yàn)的自變量為溫度和酶的種類，正確。C、A、B兩點(diǎn)時(shí)a酶的酶活性相同，但B點(diǎn)時(shí)的溫度高于a酶的最適溫度，酶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，而A點(diǎn)時(shí)酶的空間結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變，C錯(cuò)誤。D、酶量不影響酶的活性，錯(cuò)誤。故選B。溫度對(duì)酶活性影響規(guī)律：在溫度低于最適溫度下，溫度越高，酶活越高；在溫度高于最適溫度時(shí)，溫度越高，酶變性越嚴(yán)重，酶活越低。2、C【解析】

“地溝油”的主要成分是脂肪，明確脂肪的元素組成、化學(xué)組成、功能和檢測(cè)方法是解答本題的關(guān)鍵。【詳解】A、脂肪的組成元素一定是C、H、O，A錯(cuò)誤；B、脂肪是生物體內(nèi)的主要儲(chǔ)能物質(zhì)，糖類是主要能源物質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、脂肪遇蘇丹Ⅲ染液呈現(xiàn)橘黃色，遇蘇丹Ⅳ呈現(xiàn)紅色，C正確；D、脂肪是甘油和脂肪酸結(jié)合而成的化合物，不是單體聚合而成的生物大分子，D錯(cuò)誤。故選C。能源物質(zhì)的3個(gè)“一”與1個(gè)“二”3、B【解析】

A、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)多樣性與構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸的數(shù)量、種類、排序和肽鏈的形成的空間結(jié)構(gòu)相關(guān)，氨基酸的連接方式都是脫水縮合，A錯(cuò)誤；B、基因多樣性導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)具有多樣性，使生物具有多樣性，B正確；C、細(xì)胞間的信息交流有多種途徑：通過細(xì)胞膜直接接觸；通過細(xì)胞通道聯(lián)系；通過信息分子如受體等，C錯(cuò)誤；D、免疫過程的相關(guān)酶如水解酶將抗原-抗體結(jié)合物溶解，體現(xiàn)酶的催化功能，D錯(cuò)誤。故選B。本題考查蛋白質(zhì)相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。4、D【解析】向漏斗中滴入清水，漏斗內(nèi)的濃度降低，滲透壓下降，m將減小，A錯(cuò)誤；若向漏斗中加入蔗糖，將導(dǎo)致漏斗內(nèi)蔗糖溶液滲透壓進(jìn)一步增大，平衡時(shí)m將增大，B正確；若向漏斗中加入蔗糖酶，則蔗糖在蔗糖酶的作用下水解成單糖，溶質(zhì)分子增多，吸水能力增強(qiáng)，此時(shí)漏斗中液面升高，m將增大，C錯(cuò)誤；達(dá)到新的平衡時(shí)，水分子進(jìn)出半透膜的速率相等，D正確。5、C【解析】

考點(diǎn)是細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，主要考查原核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，屬于識(shí)記水平的考查，基礎(chǔ)題?！驹斀狻苛〖矖U菌是細(xì)菌，屬于原核生物。原核細(xì)胞中沒有核糖體以外的眾多細(xì)胞器，A錯(cuò)誤.原核細(xì)胞中具有擬核，沒有染色質(zhì)，B錯(cuò)誤.原核細(xì)胞的細(xì)胞壁與植物細(xì)胞壁的成分不同，是肽聚糖，不含纖維素，C正確.原核細(xì)胞的DNA呈環(huán)型，D錯(cuò)誤.6、A【解析】

雄蜂是單倍體，體細(xì)胞中含16條染色體，一個(gè)染色體組。在產(chǎn)生精子的過程中,它的精母細(xì)胞進(jìn)行的是一種特殊形條式的減數(shù)分裂，分裂結(jié)束后染色體并沒有減半?！驹斀狻啃鄯涞?個(gè)精母細(xì)胞,通過減數(shù)分裂,只產(chǎn)生1個(gè)精子,精母細(xì)胞和精子都是單倍體細(xì)胞并且含有本物種正常配子染色體數(shù)，A項(xiàng)正確。雄蜂的次級(jí)精母中只有分裂后期含2個(gè)染色體組，B項(xiàng)錯(cuò)誤。蜜蜂的精細(xì)胞和卵細(xì)胞含有的染色體數(shù)目都是16條，C項(xiàng)錯(cuò)誤。雄蜂是單倍體生物，含一個(gè)染色體組，無同源染色體，不會(huì)出現(xiàn)聯(lián)會(huì)現(xiàn)象，D項(xiàng)錯(cuò)誤，故選A。本題的突破口主要是理解雄蜂的減數(shù)分裂過程，減數(shù)第1次分裂中,染色體數(shù)目并沒有變化,只是細(xì)胞質(zhì)分成大小不等的兩部分.大的那部分含有完整的細(xì)胞核,小的那部分只是一團(tuán)細(xì)胞質(zhì),一段時(shí)間后將退化消失.減數(shù)第2次分裂,則是1次普通的有絲分裂：在含有細(xì)胞核的那團(tuán)細(xì)胞質(zhì)中,染色單體相互分開,而細(xì)胞質(zhì)則進(jìn)行不均等分裂,含細(xì)胞質(zhì)多的那部分（含16條染色體）進(jìn)一步發(fā)育成精子,含細(xì)胞質(zhì)少的那部分（也含16條染色體）則逐步退化.雄蜂的1個(gè)精母細(xì)胞,通過這種減數(shù)分裂,只產(chǎn)生1個(gè)精子,精母細(xì)胞和精子都是單倍體細(xì)胞.這種特殊的減數(shù)分裂稱為“假減數(shù)分裂”。7、C【解析】

據(jù)題文的描述和圖示分析可知：該題考查學(xué)生對(duì)酶的特性及影響酶活性的因素、纖維素分解菌的篩選等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行解釋、分析能力。【詳解】能合成纖維素酶的微生物在富含纖維素的環(huán)境中豐富，因此可以利用富含纖維素的培養(yǎng)基富集能合成纖維素酶的微生物，A正確；分析圖示可知：本實(shí)驗(yàn)研究的自變量是pH、溫度、底物種類，B正確；纖維素酶對(duì)纖維素的水解作用，在pH小于4.8、溫度低于60℃時(shí)強(qiáng)于對(duì)殼聚糖的水解作用，在pH大于4.8、小于6.3的范圍內(nèi)弱于對(duì)殼聚糖的水解作用，在pH為4.8與6.3、溫度為60℃時(shí)，纖維素酶對(duì)纖維素和殼聚糖的水解作用相同，C錯(cuò)誤；酶分子中與底物有關(guān)的部位稱為結(jié)合部位，每種酶具有一個(gè)或一個(gè)以上的結(jié)合部位，每個(gè)結(jié)合部位至少結(jié)合一種底物，結(jié)合部位決定酶的專一性，酶分子中促使底物發(fā)生化學(xué)變化的部位稱為催化部位，催化部位決定酶的催化能力以及酶促反應(yīng)的性質(zhì)，因此纖維素酶對(duì)兩種底物水解作用的差異可能與底物和酶結(jié)合部位不同有關(guān)，D正確。8、B【解析】

本題考查細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，考查對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的理解和識(shí)記。解答此題，可根據(jù)各細(xì)胞結(jié)構(gòu)的位置、特點(diǎn)判斷其能否用光學(xué)顯微鏡直接觀察?！驹斀狻考?xì)胞壁是植物細(xì)胞最外層的結(jié)構(gòu)，部分大液泡含有色素，細(xì)胞核折光性較強(qiáng)，三者均可在光學(xué)顯微鏡下觀察到，細(xì)胞膜是緊貼細(xì)胞壁的一層透明薄層，光學(xué)顯微鏡下看不到，只能用光學(xué)顯微鏡觀察到細(xì)胞的邊界，選B。細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)與亞顯微結(jié)構(gòu)：（1）顯微結(jié)構(gòu)：光學(xué)顯微鏡下看到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可以看到細(xì)胞核、葉綠體、線粒體等結(jié)構(gòu)，但不能看到其內(nèi)部結(jié)構(gòu)，不能看到核糖體、中心體等細(xì)胞器?？床坏郊?xì)胞膜，但可根據(jù)細(xì)胞的邊界推測(cè)細(xì)胞膜的存在。（2）亞顯微結(jié)構(gòu)：電子顯微鏡下看到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如核糖體、中心體、葉綠體、線粒體內(nèi)部結(jié)構(gòu)、細(xì)胞核具體結(jié)構(gòu)等。二、非選擇題9、產(chǎn)熱量和散熱量促甲狀腺激素釋放激素垂體由負(fù)電位變?yōu)檎娢弧窘馕觥?/p>

體溫調(diào)節(jié)是神經(jīng)—體液的調(diào)節(jié)，在寒冷時(shí)，甲狀腺激素和腎上腺素分泌增加，甲狀腺激素的分泌有分級(jí)調(diào)節(jié)和反饋調(diào)節(jié)的過程。下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素作用在垂體上，垂體分泌的促甲狀腺激素作用在甲狀腺上，促進(jìn)甲狀腺分泌甲狀腺激素?！驹斀狻浚?）在寒冷的環(huán)境中，人體體溫能保持相對(duì)恒定是在神經(jīng)和體液的共同調(diào)節(jié)下，產(chǎn)熱量和散熱量保持動(dòng)態(tài)平衡的結(jié)果。低溫刺激冷覺感受器并使之產(chǎn)生興奮，興奮傳至下丘腦，使下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素增加，該激素作用于垂體細(xì)胞。（2）當(dāng)乙醇刺激的神經(jīng)元的軸突上某部位產(chǎn)生興奮時(shí)，這個(gè)部位的細(xì)胞膜內(nèi)電位發(fā)生的變化是由負(fù)電位變?yōu)檎娢弧?.體溫調(diào)節(jié)的中樞在下丘腦，下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素只能作用在垂體上，因?yàn)橹挥性诖贵w上有促甲狀腺激素釋放激素的特異性受體。2.神經(jīng)細(xì)胞未受刺激時(shí)膜電位是外正內(nèi)負(fù)，受刺激興奮時(shí)變成外負(fù)內(nèi)正。10、鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌脫氧核苷酸BDB和C8PstI、EcoRI1抗四環(huán)素基因【解析】

1、基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。2、基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒?！驹斀狻浚?）DNA分子的一條多核苷酸鏈中，兩個(gè)脫氧核苷酸之間以磷酸基團(tuán)和五碳糖相連。由題目可知，EcoRⅠ識(shí)別的DNA序列只有G和A，故切開的是鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸之間相連的化學(xué)鍵。（2）A、密碼子是mRNA上決定一個(gè)氨基酸的3個(gè)相鄰的堿基，若圖中的ACT能決定一個(gè)氨基酸，則其對(duì)應(yīng)的密碼子是UGA，A錯(cuò)誤；B、DNA聚合酶和DNA連接酶都可作用于②磷酸二酯鍵處，解旋酶作用中①氫鍵處，B正確；C、A和T之間有2個(gè)氫鍵，C和G之間有3個(gè)氫鍵，因此若只用這片段中的3個(gè)堿基對(duì)，可以排列出23種片段，C錯(cuò)誤；D、就游離的磷酸基而言，該片段有2個(gè)游離的磷酸基，而重組質(zhì)粒不含游離的磷酸基，因此該片段與重組質(zhì)粒相比多了2個(gè)游離的磷酸基，D正確。故選BD。（3）若利用PCR技術(shù)增加目的基因的數(shù)量，由圖2可知，DNA復(fù)制只能從5’到3’，因此構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取B和C作為引物，該DNA分子在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)后會(huì)產(chǎn)生基因片段16個(gè)，其中等長(zhǎng)的目的基因片段8個(gè)。（4）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，四環(huán)素抗性基因沒有被破壞，應(yīng)該選擇的限制酶是PstⅠ、EcoRⅠ。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時(shí)對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割，假設(shè)同時(shí)只有任意兩個(gè)位點(diǎn)被切斷且每次機(jī)會(huì)相等，若PstI酶的切割位點(diǎn)用1表示，EcoRI酶的切割位點(diǎn)用2表示，HindⅢ酶的切割位點(diǎn)用3表示，則形成的DNA片段1→2，2→1，2→3，3→2，1→3，3→1六種片段，其中只有2→1片段含有完整四環(huán)素抗性基因，即含有完整四環(huán)素抗性基因的DNA片段只有1種。（5）如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含抗四環(huán)素基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。本題考查基因工程的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握基因工程的操作工具限制酶的特點(diǎn)和作用，理解基因工程的操作步驟和標(biāo)記基因的作用，識(shí)記PCR擴(kuò)增技術(shù)的過程和計(jì)算，這是該題考查的重點(diǎn)；掌握限制酶的選擇和作用結(jié)果是突破該題的關(guān)鍵。11、基因表達(dá)載體的構(gòu)建限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶Ca2+（CaCl2溶液）感受態(tài)抗原-抗體雜交用大豆疫霉菌感染大豆植株，觀察其生長(zhǎng)狀況植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性【解析】試題分析：基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，需要限制酶和DNA連接酶的參與。（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌之前，往往需要用鈣離子處理農(nóng)桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，便于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（3）目的基因的表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，可以利用抗原-抗體雜交進(jìn)行分子水平的檢測(cè)，也可以用大豆疫霉菌感染大豆植株，觀察其生長(zhǎng)狀況。（4）轉(zhuǎn)基因大豆細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因大豆植株，需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。12、2質(zhì)粒和含目的基