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考點(diǎn)二細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)的過(guò)程——原理:植物細(xì)胞的全能性(1)植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。(2)脫分化階段不需要光,再分化階段需要光。(3)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值高時(shí),促進(jìn)根的分化、抑制芽的形成;比值低時(shí),促進(jìn)芽的分化、抑制根的形成。(4)體內(nèi)細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因:基因的表達(dá)具有選擇性。2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)——原理:植物細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性3.針對(duì)三類(lèi)目標(biāo)(試管苗、人工種子、細(xì)胞產(chǎn)物)的培養(yǎng)流程4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——原理:細(xì)胞增殖(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同:第一次:處理剪碎的組織,使其分散成單個(gè)細(xì)胞;第二次:使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上脫落下來(lái)。(2)使用或冷凍保存的是10代以內(nèi)的細(xì)胞,原因是保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)避免雜菌污染的措施:培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理,加入一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液。(4)區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。5.動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)(核移植技術(shù))——原理:動(dòng)物細(xì)胞核的全能性(1)核移植獲得的克隆動(dòng)物與提供細(xì)胞核的親本性狀可能不同的三個(gè)原因:①克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)來(lái)自兩個(gè)親本。②發(fā)育過(guò)程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異。③外界環(huán)境可能引起不可遺傳的變異。(2)克隆動(dòng)物的產(chǎn)生是無(wú)性繁殖,而試管動(dòng)物則是在體外受精形成受精卵,由受精卵發(fā)育成的個(gè)體,因此屬于有性繁殖。6.單克隆抗體的制備——原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的增殖2次篩選目的不同:①第1次:獲得雜交瘤細(xì)胞。②第2次:獲得能分泌所需特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。1.(2019·全國(guó)Ⅱ,38)植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用。回答下列問(wèn)題:(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比,這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有___________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。(2)通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù),可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)成胚狀體,再通過(guò)人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示),這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長(zhǎng)。人工種皮具備透氣性的作用是______________________________。人工胚乳能夠?yàn)榕郀铙w生長(zhǎng)提供所需的物質(zhì),因此應(yīng)含有植物激素、__________和________等幾類(lèi)物質(zhì)。(3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖,可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗,可以選取植物的______進(jìn)行組織培養(yǎng)。(4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整植株的基本程序是______________________________________(用流程圖表示)。思維延伸——填充(1)(2019·全國(guó)Ⅲ,38節(jié)選)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過(guò)程如圖所示,步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,原因是________________________;從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基,其原因是________________________________________________。而步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng),其作用是____________________________________________。(2)(2020·天津,15節(jié)選)在誘導(dǎo)形成愈傷組織階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體,原因是____________________________________________________________________________。2.(2020·全國(guó)Ⅰ,38)為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是_____________________________。(2)寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:______________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于______________,使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是____________________。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是_________________________________________________________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法有_________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。3.(2021·湖南,22節(jié)選)M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?,F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中,切割質(zhì)粒DNA的工具酶是____________________,這類(lèi)酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的__________________斷開(kāi)。(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí),需要定期更換培養(yǎng)液,目的是__________________________________________________________________。(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比,體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低,原因是_____________________________________________________________________________________________。(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:以免疫小鼠的________淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,篩選融合雜種細(xì)胞,制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫(xiě)出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路:___________________________________________________________________。思維延伸——判斷與填充(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)剪碎動(dòng)物組織的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行(2021·浙江1月選考,18)()(2)單克隆抗體制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合(2021·山東,15)()(3)(2019·江蘇,29節(jié)選)采集豬的組織塊,用________________________處理獲得分散的成纖維細(xì)胞,放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的作用是__________________________。題組一植物細(xì)胞工程1.(2022·黑龍江齊齊哈爾高三測(cè)試)人工種子是由體細(xì)胞胚、人工種皮以及提供胚發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)(人工胚乳)三部分組成。人工種子在農(nóng)業(yè)、林業(yè)生產(chǎn)中具有重要的作用。某研究人員利用體細(xì)胞胚作為材料制作人工種子,體細(xì)胞胚選用的是胚狀體?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)胚狀體是由植物莖、葉等外植體經(jīng)過(guò)________________技術(shù)獲得的一種類(lèi)似于自然胚的結(jié)構(gòu)。該技術(shù)的原理是__________________,包括的兩個(gè)重要過(guò)程是________________。除胚狀體之外,人工種子還可選用__________________(答兩種)等作為材料。(2)制備體細(xì)胞胚常出現(xiàn)細(xì)胞不能同步發(fā)育的現(xiàn)象,同一外植體上常出現(xiàn)不同發(fā)育時(shí)期的體細(xì)胞胚,給制作人工種子帶來(lái)麻煩。為使體細(xì)胞胚達(dá)到同步化,研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常采用一定低溫處理外植體一段時(shí)間,再將溫度提升到正常培養(yǎng)溫度。這種做法的原理是____________________________________________________________________________。(3)植物激素是調(diào)節(jié)體細(xì)胞胚發(fā)育的重要因素,培養(yǎng)體細(xì)胞胚的培養(yǎng)基中需要加入的兩種關(guān)鍵植物激素是____________________________________________________________________。(4)目前常選用一些膠質(zhì)化合物薄膜制作人工種皮,理想的人工種皮應(yīng)該具備一定封閉性和良好的透氣性,原因是_____________________________________________________________。2.(2022·江西宜春高三三模)非對(duì)稱(chēng)細(xì)胞融合技術(shù)常指利用某種外界因素(如射線)照射某一細(xì)胞原生質(zhì)體,選擇性地破壞其細(xì)胞核,使其染色體片段化并喪失再生能力;再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與另一原生質(zhì)體融合,從而實(shí)現(xiàn)有限基因的轉(zhuǎn)移,在保留親本之一全部?jī)?yōu)良性狀的同時(shí),改良其某個(gè)不良性狀。用這種方法可以將胡蘿卜的抗黑腐病性狀轉(zhuǎn)移到煙草中,獲得抗黑腐病(由真菌引起)煙草雜種植株,流程如圖所示?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是________________。與誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合相比,②過(guò)程不宜采用的誘導(dǎo)方法是_____________;③④過(guò)程中需添加的兩種關(guān)鍵性植物激素是________________________,④過(guò)程的實(shí)質(zhì)是____________________。(2)紫外線作用于根細(xì)胞原生質(zhì)體,使染色體片段化,說(shuō)明非對(duì)稱(chēng)細(xì)胞融合技術(shù)的原理之一是________________________________________________________________________。(3)非對(duì)稱(chēng)細(xì)胞融合過(guò)程中,染色體丟失的程度在同一組合不同的雜種中是不一致的,導(dǎo)致融合后再生后代中的________________數(shù)量變化很大。影響細(xì)胞融合染色體丟失程度的因素,除了紫外線還可能與____________________________________________________________________________________________________________________________(答兩點(diǎn))等有關(guān)。(4)對(duì)雜種植株進(jìn)行____________接種實(shí)驗(yàn),可篩選出對(duì)黑腐病具有高抗性的雜種植株。題組二動(dòng)物細(xì)胞工程3.我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物——食蟹猴,流程如圖所示,①~⑥表示過(guò)程,該動(dòng)物可作為研究癌癥等人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型。請(qǐng)分析回答:(1)進(jìn)行過(guò)程①時(shí),為了防止________________________對(duì)細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液;培養(yǎng)液通常加入抗生素其目的是_______________________________________________________________________________________________________________。(2)據(jù)圖分析,過(guò)程③是利用________技術(shù),將成纖維細(xì)胞注入猴去核的MⅡ中期卵母細(xì)胞。用于過(guò)程③的細(xì)胞通常是10代以內(nèi)的細(xì)胞,其原因是_____________________________。一般利用未受精的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞,而不用精子,其原因是_________________。(3)2001年,美國(guó)科學(xué)家已經(jīng)培育出胚胎細(xì)胞核移植猴,核移植是指__________________________________________________________________________________________________。獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植,原因是__________________,________________恢復(fù)其全能性較難。通過(guò)核移植方法獲得的食蟹猴,與核供體相比,食蟹猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目________________________________________(填“減半”“加倍”或“不變”)。4.(2022·黑龍江哈爾濱九中高三二模)2021年12月8日,中國(guó)國(guó)家藥監(jiān)局應(yīng)急批準(zhǔn)騰盛華創(chuàng)醫(yī)藥技術(shù)(北京)有限公司新冠病毒中和抗體聯(lián)合治療藥物安巴韋單抗注射液(BRⅡ-196)及羅米司韋單抗注射液(BRⅡ-198)注冊(cè)申請(qǐng),是中國(guó)全自主研發(fā)的單抗,聯(lián)合用于治療新冠病毒感染患者,效果顯著。結(jié)合所學(xué)生物知識(shí),回答下列問(wèn)題:(1)制備新冠單克隆抗體時(shí),可以將新冠抗原注入不同人體內(nèi),下表表示免疫次數(shù)和抗體效價(jià)(每分子抗體能結(jié)合抗原的數(shù)量)之間的關(guān)系,若血清抗體效價(jià)需達(dá)到1∶4000以上,則人體要至少經(jīng)過(guò)________________次免疫才能符合要求,第一次免疫和第二次免疫時(shí),人體內(nèi)能產(chǎn)生新冠抗體的細(xì)胞分別是由______________________________增殖分化形成的。人體編號(hào)抗體效價(jià)免疫次數(shù)ABCDE第一次1∶10001∶10001∶10001∶10001∶1000第二次1∶20001∶25001∶36001∶22001∶3000第三次1∶40001∶46001∶80001∶50001∶4500(2)制備新冠單克隆抗體過(guò)程中,涉及的技術(shù)原理是__________________________,專(zhuān)一抗體檢測(cè)陽(yáng)性和克隆化培養(yǎng)的目的是________________________________________,培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的四個(gè)基本條件有適宜的
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