DB13T 2656-2018 小麥抗禾谷孢囊線蟲鑒定技術(shù)規(guī)程

小麥抗禾谷孢囊線蟲鑒定技術(shù)規(guī)程2018-04-13實(shí)施2018-04-13實(shí)施河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB13/T2656—2018本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)有河北省農(nóng)林科學(xué)院提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李秀花、馬娟、高波、王容燕、陳書龍。DB13/T2656—2018小麥抗禾谷孢囊線蟲鑒定技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小麥抗禾谷孢囊線蟲鑒定技術(shù)相關(guān)術(shù)語(yǔ)和定義、接種體制備、鑒定技術(shù)和抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于小麥對(duì)禾谷孢囊線蟲的抗性鑒定及評(píng)價(jià)。2術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。是指危害禾谷類作物孢囊線蟲種類的統(tǒng)稱，本文特指燕麥孢囊線蟲(Heteroderaavenae)。是禾谷孢囊線蟲在發(fā)育過(guò)程中雌蟲的發(fā)育前期，呈白色。孢囊是孢囊類線蟲發(fā)育過(guò)程中的特殊階段，是雌蟲死亡后形成的褐色蟲體，褐色外殼包裹諸多卵粒。3禾谷孢囊線蟲接種體制備3.1禾谷孢囊線蟲的孢囊分離方法于小麥?zhǔn)斋@后至種植前，在禾谷孢囊線蟲發(fā)生嚴(yán)重小麥田，取5cm～20cm深的根際土樣，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行孢囊分離。將土樣加適量水混合，攪拌均勻后，靜止10s,把上清液傾倒在20目和80目上下鑲嵌的網(wǎng)篩上，重復(fù)3次，然后用水沖洗20目網(wǎng)篩上的雜質(zhì)至80目，把80目網(wǎng)篩上的殘留物沖洗到濾紙上，在體式顯微鏡下挑取禾谷孢囊線蟲孢囊。將新鮮的純凈孢囊置于5℃條件下存放8周，然后在15℃條件下繼續(xù)培養(yǎng)，每隔1天～2天直接吸取二齡幼蟲或用淺盤法收集二齡幼蟲。將孵化不超過(guò)一周的二齡幼蟲用于接種試驗(yàn)。4室內(nèi)抗性鑒定人工接種鑒定室應(yīng)具備人工調(diào)節(jié)溫度15℃~25℃、光照3000Lux的條件，使人工接種后具備良好的發(fā)病環(huán)境。工2DB13/T2656—2018鑒定時(shí)選用矮抗58、石家莊8號(hào)為感病對(duì)照品種。4.3鑒定材料準(zhǔn)備4.3.1播種基質(zhì)的準(zhǔn)備挖取田園土壤與細(xì)沙混合(3:1),調(diào)整土壤含水量為10%～15%,分裝1kg塑料袋，高壓滅菌(121℃,2h),在室溫條件下放置2d～3d后使用。4.3.2小麥種子的催芽用3%次氯酸鈉溶液浸泡小麥種子5min,用無(wú)菌水沖洗3次～5次直到去除次氯酸鈉，然后將小麥種子在鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)(25℃),在芽長(zhǎng)0.5cm～1cm時(shí)即可進(jìn)行播種。取PVC塑料管(5cm×20cm)裝入已消毒濕潤(rùn)土壤，用牛皮紙包住底部，土壤表面距PVC塑料管上部邊緣3cm,每管點(diǎn)播一粒已發(fā)芽的種子，同時(shí)在根尖滴加幼蟲懸浮液1ml(約含200條幼蟲),覆土約1cm~1.5cm厚，以后每隔3天接種一次，共接種3次，累計(jì)接種量約600條二齡幼蟲/管。在第二和第三次接種時(shí)，均在離麥苗旁約1cm處扎一個(gè)小孔，孔深4.0cm左右，把配好的線蟲懸液1ml加入該孔內(nèi)，再把孔埋上。每品種重復(fù)3次，每重復(fù)10株苗，隨機(jī)排列。4.4接種后管理接種后將植株置于16±2℃鑒定室內(nèi)培養(yǎng)10天，然后將溫度調(diào)到18℃~20℃,補(bǔ)光(3000Lux),每天光照14h,定期澆水、施肥，保證小麥正常生長(zhǎng)。在生長(zhǎng)期間，控制病蟲發(fā)生。5.1調(diào)查時(shí)間小心清洗小麥根系，檢查并記錄根上的白雌蟲數(shù)，同時(shí)用漂浮法分離土壤中的孢囊，統(tǒng)計(jì)每株上的白雌蟲與孢囊總和。白雌蟲與孢囊數(shù)量為三次重復(fù)的算術(shù)平均值。6.2鑒定有效性判別當(dāng)感病對(duì)照品種白雌蟲與孢囊數(shù)量大于20時(shí)，該批次抗禾谷孢囊線蟲鑒定視為有效。6.3抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)3DB13/T2656—2018依據(jù)不同品種根部形成的白雌蟲與孢囊數(shù)量確定其對(duì)禾谷孢囊線蟲的抗性水平，劃分標(biāo)準(zhǔn)見表1。