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微生物的純培養(yǎng)技術(shù)主講教師:須瑛敏蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院SuzhouAgriculturalVocationalandTechnicalCollege1無菌操作技術(shù)2微生物的分離3微生物的培養(yǎng)微生物的純培養(yǎng)技術(shù)Part1無菌操作技術(shù)01無菌操作技術(shù)無菌操作技術(shù)01無菌室、超凈工作臺(tái)。試管、培養(yǎng)皿、三角瓶等。環(huán)境玻璃儀器材料人生理鹽水培養(yǎng)基。消毒酒精燈火焰5厘米范圍內(nèi)操作。無菌操作技術(shù)01Part2微生物的分離02微生物的分離0201平板劃線分離法02稀釋傾注平板分離法03涂布分離法02微生物的分離平板劃線分離法用接種環(huán)以無菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線,微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增多而減少,并逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。微生物的分離02分區(qū)劃線(適用于濃度較大的樣品)。特點(diǎn):快速、方便。連續(xù)劃線(適用于濃度較小的樣品)。微生物的分離0202微生物的分離②傾注平板法將待分離的材料用無菌生理鹽水進(jìn)行一系列稀釋。然后取不同稀釋液少許(一般是1ml)分別與已熔化并冷卻到50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合倒入無菌平皿中,冷凝后進(jìn)行培養(yǎng)。如果稀釋得當(dāng),在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落,這樣的菌落可能是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的,隨后挑取該單個(gè)菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,就可得到純培養(yǎng)。比較常用的方法,但對(duì)熱敏感菌及嚴(yán)格耗氧菌不太適合。操作過程圖示:微生物的分離021ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml02微生物的分離③平板涂布分離法先用固體培養(yǎng)基制成無菌平板。將一定稀釋度的少量樣品(一般0.2-0.5ml)加到平板上,并用無菌玻璃涂棒將菌液均勻涂布到整個(gè)平板表面,經(jīng)過培養(yǎng)后挑取單個(gè)菌落。是最常用的方法。簡(jiǎn)單易行,但易造成機(jī)械損傷02微生物的分離Part3微生物的培養(yǎng)0303微生物的培養(yǎng)①好氧培養(yǎng)與厭氧培養(yǎng)。②分批培養(yǎng)、流加培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)。03微生物的培養(yǎng)1、好氧培養(yǎng)靜置培:試管、平板震蕩培養(yǎng):搖床小型發(fā)酵罐:幾升—幾十升厭氧培養(yǎng)箱微生物的培養(yǎng)03厭氧培養(yǎng)獨(dú)立封閉的系統(tǒng)微生物的培養(yǎng)032、分批培養(yǎng)、流加培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)補(bǔ)料邊補(bǔ)料邊以同樣速度排出發(fā)酵液微生物的培養(yǎng)032、分批培養(yǎng)、流加培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)感謝觀看主講教師:須瑛敏蘇州農(nóng)業(yè)
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