一生物樣品預(yù)處理的目的藥品質(zhì)量與安全專業(yè)教學(xué)使藥物從綴合物

藥品質(zhì)量與安全專業(yè)教學(xué)資源庫藥物分析技術(shù)一、生物樣品預(yù)處理的目的

使藥物從綴合物及結(jié)合物中釋放

——測(cè)定藥物的總濃度

使樣品純化——消除生物基質(zhì)中內(nèi)源性物質(zhì)的干擾

提高檢測(cè)靈敏度——適應(yīng)和符合測(cè)定方法要求的靈敏度

防止分析儀器的污染和劣化——提高分析儀器的耐受程度、改善分析結(jié)果（一）使藥物從綴合物及結(jié)合物中釋放

藥物——吸收——蛋白結(jié)合物

Ⅰ相代謝——代謝物

Ⅱ相代謝——綴合物在體內(nèi)存在形式：游離型藥物+代謝物

+藥物或代謝物與蛋白結(jié)合物

+藥物或代謝物Ⅱ相代謝的綴合物預(yù)處理—藥物或代謝物從“結(jié)合物”或綴合物中釋放，測(cè)定藥物或代謝物的總濃度（二）樣品純化

生物樣品的基質(zhì)——組成復(fù)雜、干擾多

血清中含有高分子的蛋白質(zhì)和低分子的糖、脂肪、尿素等有機(jī)物，也含有Na+、K+、Cl-等無機(jī)物

尿液中含有尿素、肌酸、尿囊素、氨、Na+、K+、Cl-等

藥物組分——藥物含量低，一般為

g或

ng水平，經(jīng)預(yù)處理使純化、富集（三）提高檢測(cè)靈敏度預(yù)處理—降低背景噪音—提高靈敏度特異性強(qiáng)、靈敏度高的分析方法

—

預(yù)處理簡(jiǎn)單不具備分離功能的方法(光譜法)

—

預(yù)處理十分重要（四）防止分析儀器的污染和劣化

生物樣品基質(zhì)中脂肪、蛋白質(zhì)、不溶性顆粒污染分析儀器

根據(jù)分析儀器的耐受程度，選擇不同的預(yù)處理方法

返回第二節(jié)

高效液相色譜法—去除血漿（或血清）中的蛋白質(zhì)

預(yù)處理—改善分析結(jié)果的準(zhǔn)確度與精密度，延長(zhǎng)色譜柱的壽命（除固體雜質(zhì)）

—改善選擇性（排除生物基質(zhì)的干擾）

—改善組分可測(cè)性（被測(cè)組分的富集）

—改善組分色譜行為（化學(xué)衍生化）

返回第二節(jié)（四）防止分析儀器的污染和劣化二、樣品制備時(shí)應(yīng)考慮的問題

1．被測(cè)組分的理化性質(zhì)、存在形式、濃度范圍2．測(cè)定目的3．生物樣品種類和基質(zhì)的干擾類型

返回第二節(jié)二、樣品制備時(shí)應(yīng)考慮的問題

4．樣品的化學(xué)組成5．藥物的蛋白結(jié)合率6．被測(cè)組分在預(yù)處理過程中的穩(wěn)定性7．樣品在收集、儲(chǔ)存和預(yù)處理中容器的污染8．保證必要的專屬性、靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度的前提下預(yù)處理過程盡量簡(jiǎn)單返回第二節(jié)1.藥物的理化性質(zhì)和存在形式酸堿性(pKa)、溶解性——提取性質(zhì)揮發(fā)性——揮發(fā)損失及氣相色譜法的應(yīng)用光譜特性——分析儀器的選擇官能團(tuán)性質(zhì)——化學(xué)衍生化和檢測(cè)器應(yīng)用化學(xué)穩(wěn)定性——處理?xiàng)l件的選擇存在形式及血漿蛋白結(jié)合率——預(yù)處理方法

2.待測(cè)藥物的濃度范圍不同藥物在體內(nèi)中濃度相差極為懸殊

——地高辛治療血濃為1~2ng/ml

——水楊酸鹽治療血濃為20~100

g/ml

濃度大——預(yù)處理要求稍低 濃度低——樣品制備要求高返回第二節(jié)

二、樣品制備考慮3.藥物測(cè)定目的

測(cè)定藥物及代謝物

——要求使代謝物從綴合物中釋放出來并在不同pH介質(zhì)中分離獲得酸性、中性或堿性代謝物，對(duì)樣品預(yù)處理的要求全面、細(xì)致返回第二節(jié)

二、樣品制備考慮4.選用的生物樣品類型

待測(cè)生物樣品的類型決定樣品預(yù)處理方法：

血漿、血清——常需去除蛋白質(zhì)

唾液——主要采用離心沉淀除去粘蛋白

尿液——常采用酸或酶法使綴合物水解

頭發(fā)——需要將頭發(fā)進(jìn)行有機(jī)破壞后測(cè)定微量元素返回第二節(jié)

二、樣品制備考慮5.樣品預(yù)處理與分析技術(shù)的關(guān)系

1.分析方法特