2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(5卷單選題100道)

2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(5卷單選題100道)2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，主要依賴的參數(shù)是？【選項(xiàng)】A.熒光信號(hào)強(qiáng)度B.前向散射光（FSC）C.側(cè)向散射光（SSC）D.熒光補(bǔ)償值【參考答案】D【詳細(xì)解析】流式細(xì)胞儀分選功能基于熒光信號(hào)強(qiáng)度差異，需通過熒光補(bǔ)償值消除多色標(biāo)記間的干擾，確保分選準(zhǔn)確性。FSC和SSC用于細(xì)胞形態(tài)分析，非分選核心參數(shù)?！绢}干2】熒光標(biāo)記的抗體需滿足哪些條件？【選項(xiàng)】A.分子量小于100kDaB.具有生物相容性C.與熒光染料結(jié)合后不影響抗原表位D.均等結(jié)合細(xì)胞表面抗原【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光標(biāo)記抗體需具備生物相容性以避免細(xì)胞損傷。分子量影響結(jié)合效率但非硬性條件，抗原表位完整性取決于抗體質(zhì)量，均等結(jié)合不符合實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景?！绢}干3】流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析中，F(xiàn)SC和SSC分別反映細(xì)胞的哪些特征？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積和熒光強(qiáng)度B.細(xì)胞復(fù)雜度和熒光強(qiáng)度C.細(xì)胞大小和復(fù)雜度D.細(xì)胞密度和熒光強(qiáng)度【參考答案】C【詳細(xì)解析】FSC反映細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度，與細(xì)胞大小和復(fù)雜度正相關(guān)；SSC反映側(cè)向散射光強(qiáng)度，與細(xì)胞復(fù)雜度（如核質(zhì)比）相關(guān)，與熒光強(qiáng)度無關(guān)?！绢}干4】流式細(xì)胞儀的熒光通道通常包含？【選項(xiàng)】A.熒光素和藻藍(lán)蛋白B.單色標(biāo)記和多色標(biāo)記C.固定劑和滲透劑D.抗體和細(xì)胞器【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光通道設(shè)計(jì)需兼容單色標(biāo)記（單一熒光染料）和多色標(biāo)記（多種熒光染料組合），以實(shí)現(xiàn)多參數(shù)聯(lián)合分析。藻藍(lán)蛋白屬于生物熒光而非人工熒光標(biāo)記?！绢}干5】流式細(xì)胞儀的鞘液作用不包括？【選項(xiàng)】A.維持細(xì)胞均勻懸浮B.提供穩(wěn)定流動(dòng)環(huán)境C.固定細(xì)胞位置D.過濾雜質(zhì)顆?！緟⒖即鸢浮緾【詳細(xì)解析】鞘液核心功能是形成穩(wěn)定流體層包裹細(xì)胞，維持流速和懸浮狀態(tài)，但無法固定細(xì)胞位置。過濾雜質(zhì)通常由上游進(jìn)樣系統(tǒng)完成?！绢}干6】熒光染料與細(xì)胞膜結(jié)合后，需進(jìn)行哪些處理？【選項(xiàng)】A.封閉未結(jié)合位點(diǎn)B.固定染料位置C.均一化標(biāo)記密度D.以上均需【參考答案】D【詳細(xì)解析】完整標(biāo)記流程包括封閉未結(jié)合位點(diǎn)（如用BSA或胎牛血清）、固定染料（如4%多聚甲醛）和均一化標(biāo)記密度（調(diào)整抗體濃度），三者缺一不可?！绢}干7】流式細(xì)胞術(shù)樣本制備中，避免溶血的關(guān)鍵步驟是？【選項(xiàng)】A.快速離心B.使用低pH緩沖液C.添加EDTAD.避免渦旋震蕩【參考答案】D【詳細(xì)解析】渦旋震蕩易破壞紅細(xì)胞膜完整性導(dǎo)致溶血，低pH緩沖液可抑制酶活性但非核心措施，EDTA用于抗凝而非溶血預(yù)防?！绢}干8】流式細(xì)胞儀的熒光補(bǔ)償校正主要針對(duì)？【選項(xiàng)】A.背景熒光干擾B.多色標(biāo)記間串色C.細(xì)胞凋亡狀態(tài)D.樣本濃度差異【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光補(bǔ)償通過計(jì)算各通道間的交叉干擾，消除多色標(biāo)記間的熒光串色效應(yīng)，背景熒光校正需通過空白對(duì)照實(shí)現(xiàn)?！绢}干9】流式細(xì)胞儀的熒光檢測(cè)波長(zhǎng)范圍通常為？【選項(xiàng)】A.400-700nmB.500-900nmC.350-550nmD.600-1000nm【參考答案】A【詳細(xì)解析】常用熒光染料激發(fā)波長(zhǎng)集中在400-700nm（如488nm藍(lán)光、546nm綠光、633nm紅光），900nm以上為遠(yuǎn)紅外非可見光范圍?！绢}干10】流式細(xì)胞儀的細(xì)胞分選閾值設(shè)置原則是？【選項(xiàng)】A.基于細(xì)胞群形態(tài)分布B.參考儀器說明書C.確保分選效率＞90%D.以上均正確【參考答案】D【詳細(xì)解析】分選閾值需綜合細(xì)胞群形態(tài)分布（如FSC-SSC散點(diǎn)圖）、儀器說明書推薦參數(shù)及分選效率要求（＞90%），三者共同決定?！绢}干11】流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡細(xì)胞的常用染料組合是？【選項(xiàng)】A.7-AAD和PIB.AnnexinV-FITC和CD3C.hoechst33342和DAPID.CD45和CD34【參考答案】A【詳細(xì)解析】7-AAD結(jié)合線粒體膜通透性改變，PI檢測(cè)細(xì)胞核完整性，兩者聯(lián)用可區(qū)分凋亡和壞死。AnnexinV-FITC用于膜磷脂暴露檢測(cè)，需配合PI使用。【題干12】流式細(xì)胞儀的熒光通道數(shù)量受哪些因素限制？【選項(xiàng)】A.光源類型B.探測(cè)器靈敏度C.儀器成本D.以上均影響【參考答案】D【詳細(xì)解析】熒光通道數(shù)量受光源（如激光數(shù)量）、探測(cè)器靈敏度（信噪比）和儀器成本（多色模塊價(jià)格）共同制約，需根據(jù)實(shí)際需求平衡配置?！绢}干13】流式細(xì)胞術(shù)樣本保存的關(guān)鍵要求是？【選項(xiàng)】A.4℃避光保存＜24小時(shí)B.室溫保存＜2小時(shí)C.固定后分裝-80℃D.使用抗凍劑保存【參考答案】C【詳細(xì)解析】未固定樣本需4℃避光保存且不超過24小時(shí)；固定樣本（如4%formaldehyde）分裝后-80℃長(zhǎng)期保存，抗凍劑僅適用于特殊保存需求?！绢}干14】流式細(xì)胞儀的電壓設(shè)置與哪些參數(shù)相關(guān)？【選項(xiàng)】A.熒光強(qiáng)度和SSCB.前向光和側(cè)向光C.熒光補(bǔ)償和分選閾值D.以上均相關(guān)【參考答案】B【詳細(xì)解析】電壓設(shè)置直接影響前向光（FSC）和側(cè)向光（SSC）信號(hào)采集質(zhì)量，需根據(jù)樣本特性調(diào)整。熒光補(bǔ)償和分選閾值需在電壓設(shè)置后確定?！绢}干15】流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖的常用標(biāo)記是？【選項(xiàng)】A.5-氟尿嘧啶B.EdUC.CFSED.Brdu【參考答案】B【詳細(xì)解析】EdU（5-ethynyl-2’-deoxyuridine）通過胸苷激酶整合到DNA鏈，結(jié)合熒光染料（如Cy5）定量增殖細(xì)胞。CFSE（carboxyfluoresceinsuccinimide）用于長(zhǎng)期增殖監(jiān)測(cè)?！绢}干16】流式細(xì)胞儀的熒光淬滅現(xiàn)象如何避免？【選項(xiàng)】A.縮短染色時(shí)間B.使用預(yù)冷染料C.避光染色D.以上均有效【參考答案】D【詳細(xì)解析】熒光淬滅可通過縮短染色時(shí)間（＜30分鐘）、使用預(yù)冷染料（4℃儲(chǔ)存）和避光操作（染色盒封閉）三管齊下預(yù)防?！绢}干17】流式細(xì)胞儀的細(xì)胞分選效率主要受哪些因素影響？【選項(xiàng)】A.鞘液流速和分選閾值B.樣本濃度和熒光強(qiáng)度C.激光功率和探測(cè)器靈敏度D.以上均影響【參考答案】D【詳細(xì)解析】分選效率受鞘液流速（影響細(xì)胞捕獲率）、樣本濃度（過高導(dǎo)致?lián)矶拢?、分選閾值（過高過低均降低效率）、激光功率（影響信號(hào)強(qiáng)度）和探測(cè)器靈敏度（信噪比）共同制約?！绢}干18】流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T細(xì)胞亞群時(shí)，常用標(biāo)記是？【選項(xiàng)】A.CD3-PE和CD4-FITCB.CD19-APC和CD5-BrduC.CD34-allophycocyanin和CD45-ECDD.CD31-藻藍(lán)蛋白和CD105-allophycocyanin【參考答案】A【詳細(xì)解析】CD3-PE標(biāo)記T細(xì)胞總?cè)?，CD4-FITC區(qū)分輔助T細(xì)胞（CD4+）和細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CD8+）。其他選項(xiàng)涉及B細(xì)胞（CD19）、造血干細(xì)胞（CD34）、血管內(nèi)皮（CD31）等不同細(xì)胞類型。【題干19】流式細(xì)胞儀的熒光通道偏移通常由哪些原因引起？【選項(xiàng)】A.電壓設(shè)置不當(dāng)B.熒光補(bǔ)償不足C.樣本污染D.以上均可能【參考答案】D【詳細(xì)解析】熒光通道偏移可能由電壓設(shè)置偏差（信號(hào)過飽和或不足）、熒光補(bǔ)償不準(zhǔn)確（交叉干擾未消除）或樣本污染（雜質(zhì)信號(hào)干擾）共同導(dǎo)致?！绢}干20】流式細(xì)胞儀的鞘液污染檢測(cè)方法不包括？【選項(xiàng)】A.觀察FSC直方圖B.檢測(cè)熒光背景C.使用熒光標(biāo)記陰性樣本D.更換鞘液【參考答案】A【詳細(xì)解析】FSC直方圖異常（如出現(xiàn)雙峰）提示細(xì)胞而非鞘液污染，檢測(cè)熒光背景（如加入未染色樣本）和熒光標(biāo)記陰性樣本（如僅用陰性對(duì)照）可驗(yàn)證鞘液污染，更換鞘液為直接解決方法。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】流式細(xì)胞術(shù)中，用于標(biāo)記細(xì)胞表面抗原的熒光染料通常是（A.碘化鉀(B.羥基熒光黃(C.磺基水楊酸(D.碘化鉍鉀）【參考答案】B【詳細(xì)解析】羥基熒光黃（如CFSE）常用于標(biāo)記細(xì)胞增殖周期，碘化鉀（Ki-67）是增殖相關(guān)蛋白，磺基水楊酸用于細(xì)胞固定，碘化鉍鉀用于染色質(zhì)染料。羥基熒光黃通過嵌入DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)標(biāo)記，是表面抗原標(biāo)記常用染料?！绢}干2】流式細(xì)胞儀的熒光信號(hào)采集系統(tǒng)主要包含（A.光源與單色器(B.發(fā)光二極管與濾光片(C.激發(fā)光源與檢測(cè)器(D.激發(fā)光源與補(bǔ)償器）【參考答案】C【詳細(xì)解析】光源（如氬離子激光）和檢測(cè)器（光電倍增管）構(gòu)成核心部件。單色器用于分光，濾光片用于信號(hào)純化，補(bǔ)償器用于消除光譜重疊。檢測(cè)器負(fù)責(zé)將光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，是信號(hào)采集的關(guān)鍵?！绢}干3】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞分選的機(jī)制基于（A.熒光強(qiáng)度差異(B.細(xì)胞體積與熒光雙參數(shù)(C.電荷量與密度雙參數(shù)(D.電場(chǎng)強(qiáng)度與磁場(chǎng)強(qiáng)度雙參數(shù)）【參考答案】B【詳細(xì)解析】細(xì)胞分選依賴雙參數(shù)閾值判斷（如前向散射光FSC與側(cè)向散射光SSC），通過電磁閥控制細(xì)胞通過孔徑。熒光強(qiáng)度、電荷量、電場(chǎng)強(qiáng)度等參數(shù)不直接參與分選機(jī)制?！绢}干4】流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)分析中，門控技術(shù)主要用于（A.消除背景噪聲(B.篩選目標(biāo)細(xì)胞群(C.調(diào)節(jié)光源強(qiáng)度(D.優(yōu)化電壓參數(shù)）【參考答案】B【詳細(xì)解析】門控技術(shù)通過設(shè)定熒光強(qiáng)度或散射光閾值，排除非目標(biāo)細(xì)胞（如碎片、雜質(zhì)）。背景噪聲消除依賴光學(xué)系統(tǒng)校準(zhǔn)，光源強(qiáng)度由儀器自動(dòng)調(diào)節(jié)?！绢}干5】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞分選的物理原理屬于（A.光學(xué)散射原理(B.生物特異性結(jié)合原理(C.電化學(xué)分離原理(D.熱力學(xué)平衡原理）【參考答案】A【詳細(xì)解析】分選依賴前向/側(cè)向散射光信號(hào)，通過電磁閥控制細(xì)胞流量。生物結(jié)合（如抗體標(biāo)記）影響分選特異性，但分選機(jī)制本身是光學(xué)信號(hào)驅(qū)動(dòng)。電化學(xué)和熱力學(xué)參數(shù)不直接參與分選?！绢}干6】流式細(xì)胞儀中，熒光漂白（FRET）現(xiàn)象主要影響（A.熒光強(qiáng)度(B.熒光量子產(chǎn)率(C.染料壽命(D.細(xì)胞存活率）【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光漂白導(dǎo)致熒光量子產(chǎn)率降低，影響信號(hào)穩(wěn)定性。熒光強(qiáng)度可能因儀器增益調(diào)整而變化，但漂白本質(zhì)是能量傳遞導(dǎo)致的染料失效。染料壽命與保存條件相關(guān)?！绢}干7】流式細(xì)胞儀的熒光補(bǔ)償技術(shù)主要用于（A.消除光譜重疊(B.校準(zhǔn)儀器精度(C.優(yōu)化電壓參數(shù)(D.消除背景熒光）【參考答案】A【詳細(xì)解析】補(bǔ)償技術(shù)通過交叉校正不同熒光通道的信號(hào)，消除光譜重疊（如FITC與PE的熒光干擾）。校準(zhǔn)精度依賴儀器定期校準(zhǔn)，電壓參數(shù)由儀器自動(dòng)優(yōu)化。背景熒光需通過光學(xué)清洗和門控技術(shù)消除?！绢}干8】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞凋亡的檢測(cè)常用（A.TUNEL法(B.AnnexinV/PI雙標(biāo)記(C.Ki-67/PCNA雙標(biāo)記(D.FSC/SSC雙參數(shù)）【參考答案】B【詳細(xì)解析】AnnexinV（磷脂酰絲氨酸外翻）標(biāo)記凋亡細(xì)胞，PI（核酸染料）檢測(cè)細(xì)胞核損傷，雙標(biāo)記可區(qū)分凋亡與壞死。TUNEL法需特殊試劑，Ki-67/PCNA用于增殖分析，F(xiàn)SC/SSC用于形態(tài)學(xué)分類?！绢}干9】流式細(xì)胞儀中，熒光染料的最大激發(fā)波長(zhǎng)與發(fā)射波長(zhǎng)關(guān)系是（A.激發(fā)波長(zhǎng)大于發(fā)射波長(zhǎng)(B.激發(fā)波長(zhǎng)小于發(fā)射波長(zhǎng)(C.兩者相等(D.取決于染料類型）【參考答案】A【詳細(xì)解析】所有熒光染料的激發(fā)波長(zhǎng)均小于發(fā)射波長(zhǎng)（如488nm激發(fā)，530nm發(fā)射）。波長(zhǎng)關(guān)系由分子結(jié)構(gòu)決定，與儀器配置無關(guān)?！绢}干10】流式細(xì)胞儀的鞘液系統(tǒng)主要功能是（A.消除背景熒光(B.維持細(xì)胞單列流(C.提高熒光信號(hào)(D.消除光譜重疊）【參考答案】B【詳細(xì)解析】鞘液形成穩(wěn)定液流，使細(xì)胞以單列形式通過檢測(cè)孔。背景熒光消除依賴光學(xué)清洗和補(bǔ)償技術(shù)，熒光信號(hào)優(yōu)化需調(diào)整電壓和增益?！绢}干11】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞體積參數(shù)（FSC）主要反映（A.細(xì)胞核大小(B.細(xì)胞質(zhì)密度(C.細(xì)胞膜完整性(D.細(xì)胞代謝活性）【參考答案】B【詳細(xì)解析】前向散射光（FSC）與細(xì)胞體積和細(xì)胞質(zhì)密度正相關(guān)。細(xì)胞核大小影響側(cè)向散射光（SSC），膜完整性影響結(jié)合效率，代謝活性與熒光標(biāo)記相關(guān)?！绢}干12】流式細(xì)胞儀的熒光通道設(shè)置中，補(bǔ)償品通常選擇（A.同一熒光染料的雙波長(zhǎng)(B.不同熒光染料的同波長(zhǎng)(C.熒光淬滅的染料(D.未標(biāo)記的細(xì)胞）【參考答案】B【詳細(xì)解析】補(bǔ)償品需為同波長(zhǎng)不同染料（如PE和Cy5在610nm附近），通過交叉點(diǎn)消除光譜重疊。同一染料雙波長(zhǎng)用于單染補(bǔ)償，淬滅染料用于背景校正，未標(biāo)記細(xì)胞用于陰性對(duì)照?！绢}干13】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞分選的回收率主要受（A.染料結(jié)合效率(B.儀器電壓設(shè)置(C.鞘液流速穩(wěn)定性(D.數(shù)據(jù)分析軟件版本）【參考答案】C【詳細(xì)解析】鞘液流速不穩(wěn)定會(huì)導(dǎo)致分選閥堵塞或細(xì)胞碰撞，影響回收率。電壓設(shè)置影響分選閾值，但直接影響回收率的是鞘液系統(tǒng)。染料結(jié)合效率影響分選特異性而非回收率?！绢}干14】流式細(xì)胞儀的熒光信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)化方法中，常用（A.標(biāo)準(zhǔn)微球法(B.同一細(xì)胞雙標(biāo)記法(C.外參法(D.內(nèi)參法）【參考答案】A【詳細(xì)解析】標(biāo)準(zhǔn)微球（如熒光標(biāo)記的微球）用于校準(zhǔn)儀器，通過已知熒光強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。雙標(biāo)記法用于內(nèi)參，外參法需額外樣本，內(nèi)參法依賴細(xì)胞自身參數(shù)?！绢}干15】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞分選的陽性對(duì)照應(yīng)選擇（A.未標(biāo)記的細(xì)胞(B.標(biāo)記目標(biāo)抗原的細(xì)胞(C.染料淬滅的細(xì)胞(D.陰性對(duì)照細(xì)胞）【參考答案】B【詳細(xì)解析】陽性對(duì)照需包含目標(biāo)抗原標(biāo)記的細(xì)胞，用于驗(yàn)證分選閾值合理性。未標(biāo)記細(xì)胞作為陰性對(duì)照，淬滅細(xì)胞用于背景校正，陰性對(duì)照用于排除非特異性結(jié)合?！绢}干16】流式細(xì)胞儀的熒光淬滅現(xiàn)象主要與（A.染料濃度過高(B.激發(fā)光源強(qiáng)度不足(C.細(xì)胞固定劑種類(D.儀器電壓設(shè)置不當(dāng)）【參考答案】C【詳細(xì)解析】固定劑（如甲醇）會(huì)改變?nèi)玖戏肿訕?gòu)象，導(dǎo)致熒光淬滅。濃度過高可能引起細(xì)胞破裂，光源強(qiáng)度不足影響檢測(cè)靈敏度，電壓設(shè)置不當(dāng)影響信號(hào)采集?！绢}干17】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞凋亡小體識(shí)別常用（A.膜聯(lián)蛋白V-FITC(B.Ki-67-FITC(C.7-AAD(D.PI(E.AnnexinV-PE）【參考答案】A【詳細(xì)解析】AnnexinV-FITC標(biāo)記凋亡細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸外翻，7-AAD（7-氨基-actinomycinD）檢測(cè)細(xì)胞核損傷，PI用于壞死細(xì)胞。Ki-67標(biāo)記增殖細(xì)胞?！绢}干18】流式細(xì)胞儀的熒光通道設(shè)置中，熒光淬滅染料通常用于（A.補(bǔ)償品(B.陰性對(duì)照(C.標(biāo)準(zhǔn)品(D.背景校正）【參考答案】D【詳細(xì)解析】淬滅染料（如DQ-FITC）用于背景校正，通過測(cè)量未標(biāo)記細(xì)胞的熒光強(qiáng)度建立淬滅基準(zhǔn)。補(bǔ)償品需為有效熒光染料，陰性對(duì)照用于排除非特異性結(jié)合，標(biāo)準(zhǔn)品用于校準(zhǔn)?！绢}干19】流式細(xì)胞儀中，細(xì)胞周期分析的關(guān)鍵參數(shù)是（A.FSC與SSC雙參數(shù)(B.Ki-67與CyclinD雙標(biāo)記(C.DNA含量與增殖活性雙參數(shù)(D.細(xì)胞體積與熒光強(qiáng)度）【參考答案】B【詳細(xì)解析】Ki-67標(biāo)記增殖細(xì)胞，CyclinD反映G1/S期進(jìn)展，結(jié)合分析細(xì)胞周期分布。FSC/SSC用于形態(tài)學(xué)分類，DNA含量（PI或7-AAD）與增殖活性（Ki-67）需聯(lián)合分析?！绢}干20】流式細(xì)胞儀的熒光信號(hào)采集中，增益調(diào)節(jié)的主要目的是（A.提高信噪比(B.消除光譜重疊(C.校準(zhǔn)儀器精度(D.消除背景熒光）【參考答案】A【詳細(xì)解析】增益調(diào)節(jié)通過調(diào)整光電倍增管靈敏度，平衡信號(hào)強(qiáng)度與噪聲水平。光譜重疊消除依賴補(bǔ)償技術(shù)，儀器校準(zhǔn)需定期使用標(biāo)準(zhǔn)微球，背景熒光消除需優(yōu)化鞘液和清洗程序。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】流式細(xì)胞術(shù)中的熒光標(biāo)記技術(shù)主要依賴于哪種分子特性實(shí)現(xiàn)細(xì)胞檢測(cè)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜的通透性差異B.細(xì)胞表面抗原的特異性結(jié)合C.熒光素分子與酶的共價(jià)結(jié)合D.熒光基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水作用【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光標(biāo)記技術(shù)的核心是抗原-抗體特異性結(jié)合。選項(xiàng)B正確，因?yàn)闊晒饪贵w通過抗原-抗體反應(yīng)特異性結(jié)合目標(biāo)抗原或抗體，釋放熒光信號(hào)。選項(xiàng)A涉及細(xì)胞膜通透性，與熒光標(biāo)記無關(guān)；選項(xiàng)C描述的是酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理；選項(xiàng)D屬于非特異性結(jié)合，無法實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè)?！绢}干2】流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，以下哪項(xiàng)參數(shù)用于區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積B.細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度C.細(xì)胞膜完整性D.細(xì)胞表面標(biāo)記密度【參考答案】C【詳細(xì)解析】細(xì)胞膜完整性是區(qū)分活死細(xì)胞的金標(biāo)準(zhǔn)?；罴?xì)胞膜完整，能維持細(xì)胞內(nèi)離子平衡，而死亡或受損細(xì)胞膜通透性改變。選項(xiàng)C正確。選項(xiàng)A用于區(qū)分細(xì)胞類型而非生死；選項(xiàng)B需結(jié)合熒光標(biāo)記特異性判斷；選項(xiàng)D反映表面標(biāo)記數(shù)量，與細(xì)胞活性無關(guān)?！绢}干3】熒光補(bǔ)償技術(shù)主要用于解決哪種問題？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積與熒光強(qiáng)度的非線性關(guān)系B.多色熒光標(biāo)記間的光譜重疊C.儀器背景信號(hào)過高D.細(xì)胞分選效率不足【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光補(bǔ)償技術(shù)針對(duì)多色標(biāo)記光譜重疊導(dǎo)致的信號(hào)干擾。例如，當(dāng)熒光素（紅色）與羅丹明（黃色）光譜部分重疊時(shí)，需通過補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)消除交叉熒光影響。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A屬于體積與熒光的物理關(guān)系，需通過標(biāo)定解決；選項(xiàng)C需調(diào)整光源或光學(xué)系統(tǒng)；選項(xiàng)D涉及分選模塊優(yōu)化?！绢}干4】流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析中，"雙參數(shù)散點(diǎn)圖"用于評(píng)估哪種特性？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞表面抗原表達(dá)量B.細(xì)胞增殖周期階段C.細(xì)胞體積與熒光強(qiáng)度的相關(guān)性D.細(xì)胞凋亡程度【參考答案】C【詳細(xì)解析】雙參數(shù)散點(diǎn)圖通過橫縱坐標(biāo)的連續(xù)參數(shù)（如細(xì)胞體積與CD4+熒光強(qiáng)度）繪制散點(diǎn)分布，直觀反映參數(shù)間的相關(guān)性。選項(xiàng)C正確。選項(xiàng)A需單參數(shù)直方圖；選項(xiàng)B需多色組合（如Ki67與CD45）；選項(xiàng)D需結(jié)合凋亡特異性標(biāo)記（如AnnexinV-FITC）?！绢}干5】流式細(xì)胞儀細(xì)胞分選的物理參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)通常包括？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞大小與復(fù)雜度B.細(xì)胞表面電荷C.細(xì)胞代謝活性D.細(xì)胞核質(zhì)比【參考答案】A【詳細(xì)解析】細(xì)胞分選的物理參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞大?。w積）和復(fù)雜度（形態(tài)）。分選閥根據(jù)預(yù)設(shè)閾值將細(xì)胞按體積大小分離，復(fù)雜度（如細(xì)胞碎片）影響分選精度。選項(xiàng)A正確。選項(xiàng)B表面電荷非分選參數(shù)；選項(xiàng)C需通過熒光標(biāo)記檢測(cè)；選項(xiàng)D需核染色技術(shù)。【題干6】流式細(xì)胞術(shù)樣本制備中，"固定"的主要目的是？【選項(xiàng)】A.提高細(xì)胞膜通透性B.穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)抗原構(gòu)象C.抑制細(xì)胞增殖D.防止細(xì)胞聚集【參考答案】B【詳細(xì)解析】固定劑（如甲醇、甲醛）通過交聯(lián)蛋白質(zhì)或沉淀核酸，穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)抗原構(gòu)象，避免檢測(cè)過程中抗原脫落或降解。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A是permeabilization（通透處理）目的；選項(xiàng)C需使用細(xì)胞抑制劑；選項(xiàng)D需加入EDTA或肝素?！绢}干7】熒光素類染料（如DAPI）主要用于檢測(cè)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜完整性B.細(xì)胞核DNA含量C.細(xì)胞表面糖蛋白D.細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)【參考答案】B【詳細(xì)解析】DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）通過嵌入細(xì)胞核DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)出熒光，常用于定量細(xì)胞核DNA含量及凋亡檢測(cè)。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A需臺(tái)盼藍(lán)染色；選項(xiàng)C用凝集素-FITC；選項(xiàng)D用鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）?！绢}干8】流式細(xì)胞儀的熒光通道補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)中，"空白對(duì)照"應(yīng)包含哪些樣本？【選項(xiàng)】A.未標(biāo)記的陰性對(duì)照B.標(biāo)記一抗的樣本C.標(biāo)記二抗的樣本D.陽性對(duì)照與陰性對(duì)照混合【參考答案】A【詳細(xì)解析】熒光補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)需設(shè)置空白對(duì)照（未標(biāo)記任何熒光抗體）與標(biāo)記樣本（如一抗或二抗）進(jìn)行光譜重疊校正。選項(xiàng)A正確。選項(xiàng)B和C為單通道對(duì)照；選項(xiàng)D無法單獨(dú)校正多色標(biāo)記的交叉干擾?！绢}干9】流式細(xì)胞術(shù)樣本中熒光淬滅現(xiàn)象的主要影響因素是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜通透劑濃度B.樣本保存溫度與時(shí)間C.熒光抗體與抗原結(jié)合比例D.儀器激光強(qiáng)度【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光淬滅指熒光強(qiáng)度隨時(shí)間或溫度下降的現(xiàn)象。保存溫度過高或時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致熒光素類染料分解，而低溫（如-80℃）可延長(zhǎng)保存期。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A影響標(biāo)記結(jié)合效率；選項(xiàng)C需優(yōu)化抗體稀釋度；選項(xiàng)D需校準(zhǔn)激光功率。【題干10】流式細(xì)胞儀進(jìn)行多色分析時(shí)，若檢測(cè)兩種熒光染料（如CD3ε-FITC和CD4-PE），補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)應(yīng)如何設(shè)置？【選項(xiàng)】A.用CD3ε-FITC標(biāo)記的陰性細(xì)胞與CD4-PE標(biāo)記的陰性細(xì)胞交替檢測(cè)B.用CD3ε-FITC標(biāo)記的陽性細(xì)胞與CD4-PE標(biāo)記的陽性細(xì)胞同步檢測(cè)C.用未標(biāo)記的陰性細(xì)胞與CD3ε-FITC標(biāo)記的陽性細(xì)胞交替檢測(cè)D.用未標(biāo)記的陰性細(xì)胞與CD4-PE標(biāo)記的陽性細(xì)胞交替檢測(cè)【參考答案】A【詳細(xì)解析】多色補(bǔ)償需分別設(shè)置兩種熒光的陰性對(duì)照。例如，用未標(biāo)記的陰性細(xì)胞（空白對(duì)照）和CD3ε-FITC標(biāo)記的陽性細(xì)胞（一抗對(duì)照）校正FITC通道，同時(shí)用未標(biāo)記的陰性細(xì)胞和CD4-PE標(biāo)記的陽性細(xì)胞（二抗對(duì)照）校正PE通道。選項(xiàng)A正確。其他選項(xiàng)無法完整補(bǔ)償交叉干擾?！绢}干11】流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)中，"門控（Gating）"技術(shù)主要用于？【選項(xiàng)】A.消除背景熒光信號(hào)B.篩選特定亞群細(xì)胞C.優(yōu)化儀器光源強(qiáng)度D.調(diào)整細(xì)胞分選閾值【參考答案】B【詳細(xì)解析】門控技術(shù)通過繪制散點(diǎn)圖（如FSCvsSSC）設(shè)定細(xì)胞門，排除碎片、細(xì)胞器等非目標(biāo)細(xì)胞。例如，在CD4+T細(xì)胞分析中，通過SSC-FSC門排除凋亡細(xì)胞和碎片。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A需調(diào)整光路或使用單色通道；選項(xiàng)C涉及儀器校準(zhǔn)；選項(xiàng)D屬于分選參數(shù)設(shè)置?！绢}干12】流式細(xì)胞術(shù)樣本中，"細(xì)胞簇（CellCluster）"現(xiàn)象通常由哪種原因引起？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞聚集B.熒光淬滅C.樣本混濁度過高D.儀器電壓設(shè)置不當(dāng)【參考答案】A【詳細(xì)解析】細(xì)胞簇指在散點(diǎn)圖中呈現(xiàn)聚集狀態(tài)的細(xì)胞群，常見于未充分解離的細(xì)胞團(tuán)塊（如造血細(xì)胞團(tuán)）。需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化固定/解離步驟或使用裂解液。選項(xiàng)A正確。選項(xiàng)B導(dǎo)致信號(hào)強(qiáng)度降低；選項(xiàng)C需離心去除顆粒；選項(xiàng)D需校準(zhǔn)電壓參數(shù)?！绢}干13】流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)，"AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記法"中PI用于檢測(cè)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜完整性B.細(xì)胞核DNA碎片化C.細(xì)胞表面受體表達(dá)D.細(xì)胞代謝活性【參考答案】B【詳細(xì)解析】AnnexinV標(biāo)記凋亡細(xì)胞膜磷脂外翻，而PI（碘丙啶）可嵌入細(xì)胞核DNA，凋亡細(xì)胞因膜通透性增加使PI染色陽性。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A需臺(tái)盼藍(lán)染色；選項(xiàng)C用CD3ε等表面標(biāo)記；選項(xiàng)D需MTT法檢測(cè)?！绢}干14】流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析中，"標(biāo)準(zhǔn)曲線法"主要用于？【選項(xiàng)】A.計(jì)算細(xì)胞增殖倍數(shù)B.定量熒光標(biāo)記強(qiáng)度C.確定細(xì)胞分選閾值D.評(píng)估儀器穩(wěn)定性【參考答案】B【詳細(xì)解析】標(biāo)準(zhǔn)曲線法通過已知濃度的熒光標(biāo)準(zhǔn)品建立熒光強(qiáng)度-濃度關(guān)系曲線，用于定量未知樣本的熒光標(biāo)記強(qiáng)度（如細(xì)胞表面抗原表達(dá)量）。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A需使用Ki67等增殖標(biāo)記；選項(xiàng)C通過門控技術(shù)；選項(xiàng)D需重復(fù)性檢測(cè)?！绢}干15】流式細(xì)胞儀的熒光通道波長(zhǎng)設(shè)置錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致？【選項(xiàng)】A.信號(hào)強(qiáng)度降低B.交叉熒光干擾C.細(xì)胞分選效率下降D.數(shù)據(jù)分析軟件無法運(yùn)行【參考答案】B【詳細(xì)解析】波長(zhǎng)設(shè)置錯(cuò)誤（如將CD5（572nm）與CD8（488nm）通道混淆）會(huì)導(dǎo)致熒光信號(hào)錯(cuò)位，產(chǎn)生交叉干擾。例如，CD8標(biāo)記的細(xì)胞可能被錯(cuò)誤歸為CD5+群體。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A因染料分解或濃度不足；選項(xiàng)C需調(diào)整分選閥參數(shù)；選項(xiàng)D與硬件無關(guān)。【題干16】流式細(xì)胞術(shù)樣本處理中，"預(yù)染"步驟通常用于？【選項(xiàng)】A.活細(xì)胞固定B.細(xì)胞表面抗原暴露C.細(xì)胞核染色D.細(xì)胞膜通透【參考答案】B【詳細(xì)解析】預(yù)染（Pretreatment）指在固定前用酸性溶液（如0.1%HCl）處理細(xì)胞，使細(xì)胞膜表面抗原（如MHC分子）外露，便于抗體結(jié)合。選項(xiàng)B正確。選項(xiàng)A需固定劑處理；選項(xiàng)C需PI或DAPI染色；選項(xiàng)D需通透劑處理?！绢}干17】流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí)，"流式細(xì)胞儀直方圖"顯示的橫坐標(biāo)通常為？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積B.細(xì)胞熒光強(qiáng)度C.細(xì)胞DNA含量D.細(xì)胞表面標(biāo)記密度【參考答案】C【詳細(xì)解析】細(xì)胞周期分析通過PI染色定量細(xì)胞DNA含量，直方圖橫坐標(biāo)為DNA含量（以熒光強(qiáng)度或細(xì)胞數(shù)表示），縱坐標(biāo)為細(xì)胞數(shù)。選項(xiàng)C正確。選項(xiàng)A用于區(qū)分細(xì)胞類型；選項(xiàng)B需結(jié)合熒光標(biāo)記；選項(xiàng)D反映表面抗原分布?！绢}干18】流式細(xì)胞儀的熒光通道靈敏度主要受哪種因素影響？【選項(xiàng)】A.激光功率穩(wěn)定性B.樣本濃度過高C.熒光染料保存時(shí)間D.儀器電壓設(shè)置【參考答案】A【詳細(xì)解析】激光功率穩(wěn)定性直接影響熒光信號(hào)強(qiáng)度。功率波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致同一樣本在不同檢測(cè)中信號(hào)差異（如FMO校準(zhǔn)）。選項(xiàng)A正確。選項(xiàng)B需調(diào)整樣品制備；選項(xiàng)C需避免染料光漂白；選項(xiàng)D需校準(zhǔn)電壓參數(shù)。【題干19】流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖時(shí)，"Ki67"標(biāo)記的適用細(xì)胞階段是？【選項(xiàng)】A.G0/G1期B.S期C.G2/M期D.所有增殖活躍細(xì)胞【參考答案】D【詳細(xì)解析】Ki67蛋白在細(xì)胞增殖活躍階段（G1/S期、S期、G2/M期）表達(dá)，靜止細(xì)胞（G0期）不表達(dá)。選項(xiàng)D正確。選項(xiàng)A、B、C均為Ki67陽性階段，但選項(xiàng)D更全面。需注意Ki67標(biāo)記的是增殖細(xì)胞，而非特定周期階段。【題干20】流式細(xì)胞術(shù)樣本中，"碎片（碎片細(xì)胞）"的典型特征是？【選項(xiàng)】A.FSC低、SSC高B.FSC高、SSC低C.FSC與SSC均低D.FSC與SSC均高【參考答案】A【詳細(xì)解析】碎片細(xì)胞體積小（FSC低）且形態(tài)不規(guī)則（SSC高），常見于凋亡或壞死細(xì)胞。選項(xiàng)A正確。選項(xiàng)B描述的是大細(xì)胞（如有核紅細(xì)胞）；選項(xiàng)C為未成熟造血細(xì)胞；選項(xiàng)D為巨型細(xì)胞（如血小板簇）。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】流式細(xì)胞儀的核心部件不包括以下哪項(xiàng)？【選項(xiàng)】A.光源系統(tǒng)B.檢測(cè)器陣列C.分選模塊D.數(shù)據(jù)處理軟件【參考答案】D【詳細(xì)解析】流式細(xì)胞儀的核心硬件包括光源、檢測(cè)器和分選模塊，數(shù)據(jù)處理軟件屬于配套軟件而非核心部件。選項(xiàng)D不符合題干要求。【題干2】熒光染料的激發(fā)波長(zhǎng)選擇主要依據(jù)以下哪項(xiàng)參數(shù)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞類型B.熒光素種類C.樣本體積D.檢測(cè)器靈敏度【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光染料的激發(fā)波長(zhǎng)由染料自身熒光特性決定，不同熒光素（如FITC、PE）需匹配特定波長(zhǎng)光源。選項(xiàng)B為正確依據(jù)，其他選項(xiàng)與波長(zhǎng)選擇無直接關(guān)聯(lián)。【題干3】流式細(xì)胞術(shù)樣本制備中，固定細(xì)胞時(shí)常用哪種試劑？【選項(xiàng)】A.戊二醛B.甲醇C.磷酸緩沖液D.聚乙二醇【參考答案】A【詳細(xì)解析】戊二醛可固定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，保持細(xì)胞形態(tài)不被破壞。甲醇易使細(xì)胞脫水皺縮，磷酸緩沖液無固定作用，聚乙二醇用于通透處理。選項(xiàng)A為正確答案。【題干4】流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)分析時(shí)，"門控"技術(shù)主要用于排除哪種干擾？【選項(xiàng)】A.儀器噪聲B.非特異性結(jié)合C.細(xì)胞碎片D.樣本污染【參考答案】C【詳細(xì)解析】門控技術(shù)通過設(shè)定參數(shù)范圍（如熒光強(qiáng)度、前向散射光）篩選目標(biāo)細(xì)胞，排除因操作不當(dāng)產(chǎn)生的細(xì)胞碎片。選項(xiàng)C正確，其他選項(xiàng)需通過其他技術(shù)處理?！绢}干5】氣溶膠分選器適用于哪種樣本類型？【選項(xiàng)】A.液體懸液B.固體組織C.血細(xì)胞團(tuán)簇D.干燥粉末【參考答案】A【詳細(xì)解析】氣溶膠分選器通過將液體霧化成微滴進(jìn)行單細(xì)胞分選，適用于液體樣本（如單細(xì)胞懸液）。選項(xiàng)A正確，其他選項(xiàng)需使用光鑷或激光捕獲分選器。【題干6】流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，前向散射光（FSC）主要反映細(xì)胞哪種特性？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積B.細(xì)胞密度C.細(xì)胞膜通透性D.細(xì)胞熒光強(qiáng)度【參考答案】A【詳細(xì)解析】前向散射光與細(xì)胞體積正相關(guān)，大細(xì)胞散射光更強(qiáng)。后向散射光反映細(xì)胞密度，熒光強(qiáng)度由檢測(cè)器測(cè)量。選項(xiàng)A正確?！绢}干7】熒光染料標(biāo)記的抗體在4℃保存時(shí)，最多可保存多少天？【選項(xiàng)】A.7B.15C.30D.60【參考答案】B【詳細(xì)解析】未開封的熒光標(biāo)記抗體在4℃避光保存條件下保質(zhì)期通常為15天，超過時(shí)間可能導(dǎo)致抗體變性或熒光淬滅。選項(xiàng)B為正確答案?！绢}干8】流式細(xì)胞儀的熒光補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)中，需同時(shí)檢測(cè)哪兩種熒光標(biāo)記？【選項(xiàng)】A.PE和Cy5B.FITC和PE-Cy5C.CD45和CD34D.上調(diào)與下調(diào)標(biāo)記【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)需使用同源異熒光素標(biāo)記（如FITC和PE-Cy5）進(jìn)行雙參散點(diǎn)圖校正。選項(xiàng)B正確，其他選項(xiàng)不滿足補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)條件?！绢}干9】流式細(xì)胞儀分選精度受哪些因素主要影響？【選項(xiàng)】A.激光功率B.樣本流速C.分選孔徑D.染料濃度【參考答案】B【詳細(xì)解析】分選精度與樣本流速直接相關(guān)，流速過快會(huì)導(dǎo)致分選不均，過慢則降低通量。激光功率影響檢測(cè)靈敏度，分選孔徑?jīng)Q定細(xì)胞通過面積，染料濃度影響熒光強(qiáng)度。選項(xiàng)B為關(guān)鍵因素?！绢}干10】流式細(xì)胞儀的熒光淬滅現(xiàn)象最可能由以下哪項(xiàng)引起？【選項(xiàng)】A.激光波長(zhǎng)偏移B.樣本體積不足C.染料保存過期D.空氣濕度過高【參考答案】C【詳細(xì)解析】熒光淬滅是熒光染料在光照或儲(chǔ)存過程中發(fā)生光降解的典型現(xiàn)象，保存過期的染料熒光效率顯著下降。選項(xiàng)C正確，其他選項(xiàng)與淬滅無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干11】流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡細(xì)胞時(shí)，AnnexinV-FITC標(biāo)記主要用于識(shí)別哪種分子？【選項(xiàng)】A.磷酸化組蛋白B.膜磷脂外翻C.蛋白質(zhì)合成D.膜完整性【參考答案】B【詳細(xì)解析】AnnexinV-FITC特異性結(jié)合凋亡細(xì)胞膜表面外翻的磷脂酰絲氨酸，用于檢測(cè)早期凋亡階段。選項(xiàng)B正確，其他選項(xiàng)對(duì)應(yīng)不同檢測(cè)指標(biāo)?！绢}干12】流式細(xì)胞儀的熒光檢測(cè)器通常采用哪種光電倍增管（PMT）？【選項(xiàng)】A.直接光電轉(zhuǎn)換B.光子雪崩二極管C.光子計(jì)數(shù)器D.光導(dǎo)晶體管【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光檢測(cè)需高靈敏度光電轉(zhuǎn)換器件，光子雪崩二極管（PMT）通過增益放大信號(hào)，適用于微弱熒光檢測(cè)。選項(xiàng)B正確，其他選項(xiàng)靈敏度不足?！绢}干13】流式細(xì)胞儀的鞘液壓力調(diào)節(jié)不當(dāng)可能導(dǎo)致哪種問題？【選項(xiàng)】A.分選效率下降B.檢測(cè)信號(hào)噪聲增加C.細(xì)胞團(tuán)塊形成D.熒光強(qiáng)度偏移【參考答案】C【詳細(xì)解析】鞘液壓力不足會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞通過分選孔時(shí)黏連成團(tuán)，壓力過高則可能損傷細(xì)胞。選項(xiàng)C正確，其他選項(xiàng)與壓力關(guān)系不直接?！绢}干14】流式細(xì)胞儀的熒光標(biāo)記抗體需提前與樣本孵育多長(zhǎng)時(shí)間？【選項(xiàng)】A.15分鐘B.30分鐘C.1小時(shí)D.2小時(shí)【參考答案】B【詳細(xì)解析】常規(guī)熒光抗體孵育時(shí)間為30-60分鐘，15分鐘可能不足以充分結(jié)合，2小時(shí)可能引起非特異性結(jié)合。選項(xiàng)B為推薦時(shí)間?！绢}干15】流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)分析中，"雙陰性細(xì)胞"通常指哪種免疫細(xì)胞？【選項(xiàng)】A.CD4+CD8+B.CD4-CD8-C.CD3+CD19+D.CD16+CD56+【參考答案】B【詳細(xì)解析】雙陰性細(xì)胞（DN）指同時(shí)缺乏CD4和CD8分子的T細(xì)胞前體，常見于臍帶血或特定疾病狀態(tài)。選項(xiàng)B正確，其他選項(xiàng)對(duì)應(yīng)不同細(xì)胞亞群?！绢}干16】流式細(xì)胞儀的熒光漂白現(xiàn)象最可能由以下哪項(xiàng)引起？【選項(xiàng)】A.激光能量過高B.樣本保存不當(dāng)C.染料濃度過低D.空氣濕度不足【參考答案】A【詳細(xì)解析】激光能量過高會(huì)導(dǎo)致熒光物質(zhì)光解，縮短檢測(cè)壽命。選項(xiàng)A正確，其他選項(xiàng)與漂白無直接關(guān)聯(lián)。【題干17】流式細(xì)胞儀的細(xì)胞分選精度與哪種參數(shù)呈正相關(guān)？【選項(xiàng)】A.激光功率B.鞘液粘度C.分選孔徑D.樣本濃度【參考答案】B【詳細(xì)解析】鞘液粘度增加可減少細(xì)胞飛濺，提高分選精度。激光功率影響檢測(cè)靈敏度而非分選精度，分選孔徑過小易導(dǎo)致堵塞。選項(xiàng)B正確?！绢}干18】流式細(xì)胞儀檢測(cè)造血干細(xì)胞時(shí)，常用哪種表面標(biāo)記物？【選項(xiàng)】A.CD34+B.CD45+C.CD133+D.CD19+【參考答案】A【詳細(xì)解析】CD34+是造血干/祖細(xì)胞的特異性標(biāo)志，CD45+為成熟血細(xì)胞標(biāo)記，CD133+多見于前體造血細(xì)胞，CD19+為B細(xì)胞標(biāo)志。選項(xiàng)A正確。【題干19】流式細(xì)胞儀的熒光信號(hào)強(qiáng)度與哪種參數(shù)呈線性關(guān)系？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積B.染料濃度C.激光波長(zhǎng)D.樣本通量【參考答案】B【詳細(xì)解析】在檢測(cè)范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度與染料濃度呈正相關(guān)，但超過檢測(cè)線性范圍會(huì)因淬滅現(xiàn)象出現(xiàn)非線性。選項(xiàng)B正確?！绢}干20】流式細(xì)胞儀的校準(zhǔn)品主要用于驗(yàn)證哪種性能參數(shù)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞分選效率B.熒光檢測(cè)靈敏度C.儀器時(shí)間精度D.鞘液壓力穩(wěn)定性【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光校準(zhǔn)品含已知熒光強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)顆粒，用于驗(yàn)證檢測(cè)器的線性響應(yīng)和靈敏度。選項(xiàng)B正確，其他參數(shù)需使用專用校準(zhǔn)品驗(yàn)證。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)(士)-流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】流式細(xì)胞儀分析技術(shù)中，用于標(biāo)記細(xì)胞表面抗原的熒光染料通常需要經(jīng)過哪種處理以避免非特異性結(jié)合？【選項(xiàng)】A.羧基修飾B.磺酸化處理C.聚乙二醇化D.戊二醛交聯(lián)【參考答案】A【詳細(xì)解析】熒光染料的羧基修飾使其能夠與細(xì)胞膜上的氨基形成共價(jià)結(jié)合，減少非特異性吸附?；撬峄幚矶嘤糜陔姾芍泻?，聚乙二醇化用于延長(zhǎng)染料半衰期，戊二醛交聯(lián)多用于固定化蛋白質(zhì)載體，均非本題考察要點(diǎn)?！绢}干2】流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析中，門控技術(shù)的核心目的是什么？【選項(xiàng)】A.提高樣本通量B.優(yōu)化熒光信號(hào)強(qiáng)度C.增加統(tǒng)計(jì)樣本量D.排除非目標(biāo)細(xì)胞【參考答案】D【詳細(xì)解析】門控技術(shù)通過設(shè)定特定參數(shù)（如前向散射光與側(cè)向散射光閾值）篩選目標(biāo)細(xì)胞群，排除碎片、凋亡細(xì)胞等干擾信號(hào)，確保后續(xù)分析準(zhǔn)確性。選項(xiàng)A與樣本處理速度相關(guān)，B涉及儀器校準(zhǔn)，C為統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，均非核心目的。【題干3】流式細(xì)胞儀的熒光補(bǔ)償技術(shù)主要解決哪種問題？【選項(xiàng)】A.染料淬滅現(xiàn)象B.多色熒光信號(hào)重疊C.細(xì)胞體積差異D.儀器漂移誤差【參考答案】B【詳細(xì)解析】熒光補(bǔ)償通過測(cè)量未激發(fā)的熒光強(qiáng)度（背景信號(hào)），消除多色通道間因染料吸收/發(fā)射光譜重疊導(dǎo)致的交叉干擾。選項(xiàng)A需通過避光保存解決，C需調(diào)整液流控制，D需定期校準(zhǔn)光源。【題干4】流式細(xì)胞儀中，用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)抗原的熒光染料類型通常是？【選項(xiàng)】A.羧基修飾型B.氨基標(biāo)記型C.磺酸酯化型D.磺酸化型【參考答案】B【詳細(xì)解析】氨基標(biāo)記型染料（如FITC、PE）通過共價(jià)結(jié)合細(xì)胞內(nèi)蛋白的羧基，常用于胞內(nèi)抗原檢測(cè)；羧基修飾型（如CD34抗體）多用于表面抗原標(biāo)記；磺酸酯化型用于電荷中和，磺酸化型與氨基標(biāo)記型功能相反?！绢}干5】流式細(xì)胞儀的鞘液壓力過高會(huì)導(dǎo)致哪種故障？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞碎片率增加B.熒光信號(hào)強(qiáng)度下降C.門控統(tǒng)計(jì)誤差D.儀器死機(jī)【參考答案】A【詳細(xì)解析】鞘液壓力過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞通過檢測(cè)孔時(shí)受剪切力作用破碎，碎片細(xì)胞因體積變化影響前向散射光信號(hào)，進(jìn)而導(dǎo)致門控錯(cuò)誤。選項(xiàng)B與染料濃度或儀器光源相關(guān)，C需調(diào)整門控參數(shù)，D為極端情況?！绢}干6】流式細(xì)胞儀的熒光檢測(cè)器通常采用哪種光敏元件？【選項(xiàng)】A.光電倍增管B.光電二極管C.光纖傳感器D.硅光電池【參考答案】A【詳細(xì)解析】光電倍增管（PMT）具有高靈敏度、低噪聲特性，適用于檢測(cè)微弱熒光信號(hào)（如CFSE染料），而光電二極管用于紫外/可見光檢測(cè)，光纖傳感器用于信號(hào)傳輸，硅光電池用于光強(qiáng)測(cè)量。【題干7】流式細(xì)胞儀的熒光淬滅現(xiàn)象主要與哪種因素相關(guān)？【選項(xiàng)】A.染料濃度B.儀器電壓C.細(xì)胞密度D.保存溫度【參考答案】A【詳細(xì)解析】熒光淬滅指染料與生物分子結(jié)合后發(fā)射效率下降，與染料濃度過高或作用時(shí)間過長(zhǎng)有關(guān)（如固定劑過量導(dǎo)致結(jié)合過強(qiáng)）。選項(xiàng)B影響信號(hào)強(qiáng)度但非淬滅主因，C需控制樣品制備量，D為保存條件?！绢}干8】流式細(xì)胞儀的熒光通道補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)中，為什么要使用陰性對(duì)照細(xì)胞？【選項(xiàng)】A.驗(yàn)證儀器穩(wěn)定性B.排除背景熒光干擾C.優(yōu)化電壓設(shè)置D.檢測(cè)細(xì)胞活性【參考答案】B【詳細(xì)解析】陰性對(duì)照（如未標(biāo)記抗體）可提供各通道背景熒光強(qiáng)度，補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)消除非特異性結(jié)合導(dǎo)致的交叉干擾。選項(xiàng)A需通過儀器自檢完成，C需調(diào)整電壓參數(shù)，D需使用活細(xì)胞染色劑?！绢}干9】流式細(xì)胞儀的細(xì)胞體積參數(shù)通常通過哪種信號(hào)檢測(cè)？【選項(xiàng)】A.前向散射光（FSC）B.側(cè)向散射光（SSC）C.熒光強(qiáng)度D.質(zhì)心散射【參考答案】A【詳細(xì)解析】前向散射光強(qiáng)度與細(xì)胞體積成正比，常用于區(qū)分細(xì)胞大?。ㄈ鐓^(qū)分紅細(xì)胞與白細(xì)胞）。側(cè)向散射光反映細(xì)胞復(fù)雜結(jié)構(gòu)（如核質(zhì)比），熒光強(qiáng)度用于抗原表達(dá)量分析，質(zhì)心散射為多參數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果?！绢}干10】流式細(xì)胞儀的熒光通道電壓設(shè)置不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致哪種問題？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞漏檢B.信號(hào)飽和C.統(tǒng)計(jì)偏差D.儀器噪聲增加【參考答案】B【詳細(xì)解析】電壓過高會(huì)導(dǎo)致熒光信號(hào)飽和（如PE染料在激發(fā)光強(qiáng)度過高時(shí)信號(hào)衰減），電壓過低則信號(hào)信噪比降