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腓腸肌與坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備,學(xué)習(xí)蛙類動物單毀髓與雙毀髓的方法。 學(xué)習(xí)并掌握蛙類腓腸肌與坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備方法。,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?動物與器材,蛙、常用手術(shù)器械(手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)刀、金冠剪、眼科剪、眼科鑷、毀髓針和玻璃分針)、蠟盤、蛙板、玻璃板、固定針、鋅銅弓、培養(yǎng)皿、污物缸、滴管、紗布、粗棉線、任氏液。,方法步驟,蛙或蟾蜍的單毀髓與雙毀髓 坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備,1蛙或蟾蜍的單毀髓與雙毀髓,一手握住蛙,背部向上。用拇指壓住蛙或蟾蜍的背部,食指按壓其頭部前端,使頭端向下低垂;另一手持毀髓針,由兩眼之間沿中線向后觸劃,當(dāng)觸及到兩耳中間的凹陷處(此處與兩眼的連線成等邊三角形)時,持針手即感覺針尖下陷,此處即是枕骨大孔的位置。 將毀髓針由凹陷處垂直刺人,即可進(jìn)入枕骨大孔。然后將針尖向前刺人顱腔,在顱腔內(nèi)攪動搗毀腦組織。如毀髓針確在顱腔內(nèi),實(shí)驗(yàn)者可感到針尖觸及顱骨。此時的動物為單毀髓動物。 再將毀髓針退至枕骨大孔,針尖轉(zhuǎn)向后方,與脊柱平行刺人椎管,以搗毀脊髓。徹底搗毀脊髓時,可看到動物的后肢突然蹬直,而后癱軟如棉,此時的動物為雙毀髓動物。,2坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備,(1)剝制后肢標(biāo)本 (2)分離兩后肢 (3)分離坐骨神經(jīng) (4)游離腓腸肌 (5)分離股骨頭或脛腓骨頭 (6)檢驗(yàn)標(biāo)本,(1)剝制后肢標(biāo)本,將雙毀髓的動物腹面向上放人蠟盤中。一手持手術(shù)鑷輕輕提起恥骨聯(lián)合上方的皮膚,另一手用手術(shù)剪橫向剪開皮膚,再剪開體壁肌肉(開口要大)。然后用手術(shù)鑷輕輕提起內(nèi)臟,自恥骨部剪斷(勿損傷脊神經(jīng))。一手輕輕托起蟾蜍后肢,使頭部及內(nèi)臟向下,看清支配后肢的脊神經(jīng)發(fā)出部位,于其前方用金冠剪橫向剪斷脊柱。然后再沿脊柱兩側(cè)到橫向切口剪斷體壁,一手用蘸有任氏液的拇指和食指捏住斷開的脊柱后端,另一手向后撕剝皮膚并除去斷開脊柱以上部位肢體及內(nèi)臟。如果下肢撕皮困難,可在撕皮至股部時,用手勾住雙股中間后再行撕剝。將剝干凈的后肢放人任氏液中備用。,(2)分離兩后肢,將去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上,脊柱端在左側(cè),左手固定標(biāo)本的股部兩側(cè)肌肉,右手持手術(shù)刀,于恥骨聯(lián)合處向下按壓刀刃,切開恥骨聯(lián)合。然后用手托起標(biāo)本,用金冠剪剪開兩后肢相連的肌肉組織,并縱向剪開脊柱(尾桿骨留在一側(cè)),使兩后肢完全分離。將分開的后肢,一只繼續(xù)剝制標(biāo)本,另一只放入任氏液中備用。,(3)分離坐骨神經(jīng),將一側(cè)后肢的脊柱端腹面向上,趾端向外側(cè)翻轉(zhuǎn),使其足底向上,用固定針將標(biāo)本固定在蛙板上。用玻璃分針沿脊神經(jīng)向后分離坐骨神經(jīng)。股部沿腓腸肌正前方的股二頭肌和半膜肌之間的肌縫,找出坐骨神經(jīng)。坐骨神經(jīng)基部(即與脊神經(jīng)相接的部位),背部有一梨狀肌蓋住神經(jīng),用玻璃分針輕輕挑起肌肉,便可看清下面穿行的坐骨神經(jīng)。剪斷(或用玻璃分針扯斷)梨狀肌,完全暴露坐骨神經(jīng)與其相連的脊神經(jīng)。再用玻璃分針輕輕挑起神經(jīng),自前向后剪去支配腓腸肌之外的神經(jīng)分支,將坐骨神經(jīng)分離至腘窩處。取下脊柱端的固定針,保留神經(jīng)發(fā)出部位的一小塊脊柱骨,用金冠剪剪去其余部分脊柱骨及肌肉。用手術(shù)鑷輕輕提起連有神經(jīng)的脊柱骨片,將神經(jīng)移開股骨。,(4)游離腓腸肌,一手捏住趾端,另一手用手術(shù)鑷(尖頭鑷)在腓腸肌跟腱下面穿線,并用結(jié)線扎緊。提起結(jié)線,游離腓腸肌。,(5)分離股骨頭或脛腓骨頭,如果所用動物個體小,可分離股骨頭。方法是:一手捏住股骨,沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,再用金冠剪自膝關(guān)節(jié)向前刮干凈股骨上的肌肉,保留1.5cm股骨頭并剪斷股骨。提起腓腸肌上的扎線,剪去膝關(guān)節(jié)下部的后肢,僅保留腓腸肌與股骨的聯(lián)系。 如果所用動物個體大,可分離脛腓骨頭。此方法簡便而易于操作。即在分離出腓腸肌的基礎(chǔ)上,移開腓腸肌,用金冠剪剪去脛腓骨上的肌肉,自膝關(guān)節(jié)以下保留1.5 cm長的脛腓骨并剪斷后肢,然后自膝關(guān)節(jié)剪斷股骨。,制備完整的坐骨神經(jīng)脖腸肌標(biāo)本應(yīng)包括:連有坐骨神經(jīng)的脊柱骨、坐骨神經(jīng)、腓腸肌、股骨頭或脛腓骨頭四部分。,(6)檢驗(yàn)標(biāo)本,用手術(shù)鑷輕輕提起標(biāo)本的脊柱骨片,使神經(jīng)離開玻璃板。再用任氏液蘸濕的鋅銅弓,將其兩極接觸神經(jīng),如腓腸肌發(fā)生迅速收縮,則表示標(biāo)本機(jī)能正常。提起腓腸肌上的結(jié)扎線,不使神經(jīng)受
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