探討母血胎兒DNA濃度與早產(chǎn)的相關(guān)性.doc

探討母血胎兒DNA濃度與早產(chǎn)的相關(guān)性 謝莉莉 深圳市婦幼保健院兒科，廣東深圳518000 摘要目的對(duì)母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)的相關(guān)性進(jìn)行分析與探討。方法選取30例在該院接受治療的早產(chǎn)孕婦先兆早產(chǎn)孕婦，將其劃分為實(shí)驗(yàn)組，并選取30例爭(zhēng)產(chǎn)孕周孕婦，將其劃分為對(duì)照組，對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)組孕婦孕周取其血液標(biāo)本。所有標(biāo)本都為Y染色體中的SRY位點(diǎn)，熒光定量PCR男性胎兒的DNA，對(duì)其中帶有SRY基因胎兒的DNA濃度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果與實(shí)驗(yàn)組孕婦相比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.652.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.557.4）拷貝/mL，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。早產(chǎn)組孕婦平均宮頸長(zhǎng)度是（29.106.7）mm，而假性早產(chǎn)組孕婦平均宮頸長(zhǎng)度則為（41.96.3）mm，此外，對(duì)照組產(chǎn)婦平均宮頸長(zhǎng)度為（42.35.7）mm.對(duì)照組與早產(chǎn)組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。母血母血胎兒DNA與孕婦宮頸長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論研究表明，母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)存在相關(guān)性。 關(guān)鍵詞先兆早產(chǎn)；母血胎兒dna；熒光定量pcr；相關(guān)性 R4A1674-074（4）07（b）045-02 作者簡(jiǎn)介謝莉莉（1960.4-），女，錫伯族，天津人，本科，副主任醫(yī)師，主要從事兒內(nèi)科專業(yè)工作。 現(xiàn)階段，早產(chǎn)在產(chǎn)科領(lǐng)域被稱為最具挑戰(zhàn)性的婦科問(wèn)題，而且是導(dǎo)致新生兒死亡與疾病的首要因素，所以，早產(chǎn)在始終備受醫(yī)學(xué)界的關(guān)注1。一些研究人員致力于對(duì)孕婦早產(chǎn)的預(yù)測(cè)，對(duì)真、假性早產(chǎn)進(jìn)行區(qū)分，對(duì)早產(chǎn)臨產(chǎn)與先兆早產(chǎn)的間隔時(shí)間進(jìn)行有效掌握，適當(dāng)與及時(shí)用藥，確保早產(chǎn)兒成活率的提高，同時(shí)有效降低早產(chǎn)兒發(fā)病率2。為了對(duì)母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)的相關(guān)性進(jìn)行分析與探討，確保孕婦與新生兒生命健康，該院選取30例xx年8月xx年7月在該院接受治療的早產(chǎn)孕婦先兆早產(chǎn)孕婦，和30例初次妊娠正常孕婦，對(duì)母血母血胎兒DNA進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)，結(jié)果表明母血母血胎兒DNA與孕婦宮頸長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)，報(bào)道如下。 1資料與方法 1.1一般資料 選取30例在該院接受治療的早產(chǎn)孕婦先兆早產(chǎn)孕婦，將其劃分為實(shí)驗(yàn)組，對(duì)其進(jìn)行B超檢測(cè)結(jié)果為男胎，其中早產(chǎn)孕婦平均年齡為（26.41.2）歲，平均孕周為（283.5）周，先兆早產(chǎn)孕婦平均年齡為（25.12.6）歲，平均孕周為（293.1）周。再選取所懷男胎的30例初次妊娠正常孕婦，作為對(duì)照組，平均年齡為（27.11.8）歲，平均孕周為（292.5）周。先兆早產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)為，孕婦妊娠滿7個(gè)月后，孕婦出現(xiàn)10min/次的宮縮，而且孕婦宮頸管縮短。孕婦早產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)為，孕婦妊娠在28周以上，37周以下，規(guī)律性宮縮，宮頸擴(kuò)張超過(guò)2cm。兩組孕婦年齡、孕周等一般資料P0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。 1.2方法 所選用儀器設(shè)備為可調(diào)式微量移液儀，iCycler-IQ定量PCR儀，低溫高速TGL-16C臺(tái)式離心機(jī)以及恒溫水浴鍋。主要試劑為德國(guó)生產(chǎn)的DNA提取試劑盒，中山大學(xué)達(dá)安基因公司生產(chǎn)的PCR檢測(cè)SRY熒光定量試劑盒、國(guó)產(chǎn)的無(wú)水酒精以及中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院生產(chǎn)的淋巴細(xì)胞分離液3。 通過(guò)抗凝管對(duì)所有先兆早產(chǎn)孕婦進(jìn)行3mL的外周血抽取，3000r/min離心10min，將孕婦血漿吸取在離心小管中。依照孕婦先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，將其具體分為真假性早產(chǎn)孕婦。 1.2.1胎兒DNA提取在1.5mL的離心管中加入20L的蛋白酶，并將分離出來(lái)的白細(xì)胞與200L血漿置于離心管中，在56下進(jìn)行10min的溫育，瞬時(shí)離心去上清。再于離心管中加入酒精200L，進(jìn)行15s的混勻，瞬時(shí)離心去上清。最后將QIAampspincolumn加入到混合物中，助于2mL的收集管中，將存廢液的收集管去除掉，置換一個(gè)新的收集管。 1.2.2熒光定量PCR所有標(biāo)本都為Y染色體中的SRY位點(diǎn)，熒光定量PCR男性胎兒的DNA，對(duì)其中帶有SRY基因胎兒的DNA濃度進(jìn)行檢測(cè)。 1.3判斷與評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 依照IAMS所描述的具體措施對(duì)宮頸長(zhǎng)度進(jìn)行測(cè)量，反復(fù)測(cè)量3次，宮頸長(zhǎng)度取最短者。用單因素方差分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，判斷胎兒游離DNA濃度與先兆早產(chǎn)的關(guān)系。 1.4統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS10.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差（xs）表示結(jié)果，通過(guò)q檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩對(duì)比。 2結(jié)果 2.1對(duì)比正常孕婦與真假性早產(chǎn)母血中胎兒的DNA濃度 實(shí)驗(yàn)組孕婦對(duì)比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.652.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.557.4）拷貝/mL，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。 2.2母血胎兒DNA和宮頸長(zhǎng)度相關(guān)性分析 通過(guò)回歸系數(shù)假設(shè)檢驗(yàn)，采用方差進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，母血胎兒DNA和產(chǎn)婦宮頸長(zhǎng)度相關(guān)性非常大，P0.05（P=0.012），r=-0.676，呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性。 3討論 3.1游離母血胎兒DNA和早產(chǎn)的關(guān)系 相關(guān)研究結(jié)果表明4，母血母血胎兒DNA會(huì)由孕婦妊娠的上升而呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，到晚孕時(shí)會(huì)出現(xiàn)明顯升高的趨勢(shì)，此現(xiàn)象在很大程度上和孕婦分娩期逐漸臨近有關(guān)，也就是說(shuō)，早產(chǎn)孕婦血漿中的胎兒DNA會(huì)呈現(xiàn)高濃度的情況5-6。 孫陽(yáng)等7對(duì)母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)相關(guān)性研究結(jié)果表明，孕婦在孕周為35周時(shí)，胎兒DNA平均濃度為74拷貝/mL，在晚孕的情況下，母血胎兒DNA和孕周呈現(xiàn)正相關(guān)性，而且每周呈29.3%的增加趨勢(shì)，同時(shí)胎兒血漿中總DNA濃度和產(chǎn)婦孕周并沒(méi)有相關(guān)關(guān)系，然而，總的來(lái)說(shuō)，母血胎兒DNA與總DNA濃度呈正相關(guān)性，由此表明，母血母血胎兒DNA可以作為早產(chǎn)的重要指標(biāo)。對(duì)比12位足月產(chǎn)孕婦與早產(chǎn)孕婦血漿中母血胎兒DNA，結(jié)果顯示，發(fā)生自發(fā)性早產(chǎn)前，就在孕婦血漿中檢測(cè)到母血胎兒DNA比較高，對(duì)其進(jìn)行相應(yīng)保胎治療后，母血胎兒DNA出現(xiàn)一定程度