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生物化學試題及答案(14)第十四章 基因重組與基因工程 測試題一、名詞解釋:1. 基因工程(genetic engineering)。2. 接合作用 (conjugation )。3. 轉(zhuǎn)化作用 (transforation )。4. 轉(zhuǎn)導(dǎo)作用 (transduction )。5. 轉(zhuǎn)座 (transposition )。6. 轉(zhuǎn)座子 (transposons )。7. 同源重組 (homologous recombination )。8. 基本重組 (general recombination )。9. DNA克隆 (DNA cloning )。10. 復(fù)制子 ( replicon )。11. 限制性核酸內(nèi)切酶 (restriction endonuclease )。12. 回文結(jié)構(gòu) (palindrome )。13. 配伍末端 (compatible end )。14. 目的DNA (target DNA)。15. 互補DNA (complementary DNA;cDNA )。16. 克隆載體 (cloning vector )。17. 表達載體 (expression vector )。18. 質(zhì)粒 (plasmid )。19. 互補 (alpha complementation )。20. 基因組DNA文庫 ( genomic DNA library )。21. 標志補救 (marker rescue )。22. 轉(zhuǎn)染 (transfection )。23. 基因組DNA (genomic DNA)。24. 感受態(tài)細胞 (competent cell )。25. 聚合酶鏈反應(yīng) (polymerase chain reaction )。26. cDNA文庫 (cDNA library )。27. 保守性轉(zhuǎn)座 (conservative transposition )。28. 復(fù)制性轉(zhuǎn)座 (duplicative transposition )。29. 溶菌生長途徑 (lysis pathway )。30. 溶源生長途徑 (lysogenic pathway)。二、填空題:31. 自然界的常見基因轉(zhuǎn)移方式有_ 、_ 、_ 、_。32. 不同DNA分子間發(fā)生的共價連接稱為_有_ 、_兩種方式。33. 某些基因可以從一個位置移動到另一個位置,這些可移動的DNA序列包括_和_。34. 由_和_介導(dǎo)的基因移位或重排稱為轉(zhuǎn)座。35. 反轉(zhuǎn)錄病毒整合酶可特異地識別整合反轉(zhuǎn)錄病毒的cDNA的_,轉(zhuǎn)座酶可特異識別轉(zhuǎn)座子的_,發(fā)生特異性整合。36. 基因工程的載體必須具備的條件有_ 、_ 、_。37. 限制性內(nèi)切核酸酶識別的核苷酸序列的個數(shù)為_、_和_,其切口有_端和_端。38. 基因工程常用的載體DNA分子有_ 、_和_。39. 一個完整的DNA克隆過程應(yīng)包括_ 、_ 、_ 、_ 、_。40. 目的基因獲取的途徑或來源有_ 、_ 、_ 、_。41. 基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有_ 、_ 、_。42. 基因克隆的原核表達體系的E,coli表達體系的表達載體應(yīng)符合的標準有:_ 、_ 、_ 、_。43. 基因克隆真核生物表達體系常見的有_ 、_ 、_表達體系。44. 根據(jù)重組體DNA的性質(zhì)不同,將重組體DNA導(dǎo)入受體細胞的方式有_ 、_ 、_等。45. M13噬菌體基因間隔區(qū)插入E,coli的一段調(diào)節(jié)基因及_的N端_個氨基酸殘基的編碼基因,其編碼產(chǎn)物為_的片段,突變型lac- E,coli可表達該酶的片段。當宿主細胞與克隆載體同時表達兩個片段時,宿主細胞可使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物,即稱為_。46. 如果M13的外源基因被插入到lac Z 基因內(nèi),則在含有Xgal的培養(yǎng)基上生長時會出現(xiàn)_色菌落,如果在lac Z基因內(nèi)無外源基因插入,在同樣的條件下呈現(xiàn)_色菌落。47. 典型的插入序列是由_序列和一個_編碼基因構(gòu)成。48. 插入序列發(fā)生的轉(zhuǎn)座有_和_兩種形式。49. 當細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,_就可以從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移到另一細胞(細菌),這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為_作用。50. 重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有_、_、_、_。三、選擇題: A型題51. 關(guān)于接合作用正確的是A與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,染色體DNA從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移至另一細胞(細菌)B細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,某些較大質(zhì)粒DNA從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移至另一細胞(細菌)C細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,噬菌體DNA從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移至另一細胞(細菌)D細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,所有類型的質(zhì)粒DNA從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移至另一細胞(細菌)E細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,所有類型的噬菌體DNA從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移至另一細胞(細菌)52. 下列那種方式保證了免疫球蛋白的多樣性?A轉(zhuǎn)化 B轉(zhuǎn)染 C轉(zhuǎn)位 D轉(zhuǎn)導(dǎo) E接合53. 微切割技術(shù)使目的基因可來源于下列那種物資?A真核細胞染色體DNA B人工合成DNA CCDNA DG文庫 EC文庫54. 基因工程的特點是:A在分子水平上操作,在分子水平上表達 B在分子水平上操作,在細胞水平上表達C在細胞水平上操作,在分子水平上表達 D在細胞水平上操作,在細胞水平上表達E以上均可以55. 實驗室內(nèi)常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是:ADNA連接酶 BDNA聚合酶 CDNA聚合酶 DDNA聚合酶 E反轉(zhuǎn)錄酶56用來鑒定DNA的技術(shù)是:ANorthern印跡 BSouthern印跡 CWestern印跡 D親和層析 E離子交換層析57用來鑒定DNA的技術(shù)是:ANorthern印跡 BSouthern印跡CWestern印跡 D親和層析E離子交換層析58重組DNA技術(shù)中常用的工具酶下列那項不是:A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA連接酶CDNA聚合酶 DRNA聚合酶E反轉(zhuǎn)錄酶59F- 細胞與F+細胞混合培養(yǎng),產(chǎn)生F+細胞的過程為:A轉(zhuǎn)化 B轉(zhuǎn)導(dǎo)C接合 D突變E轉(zhuǎn)位60DNA致癌病毒感染宿主細胞后,使之發(fā)生癌變是因為發(fā)生了:A轉(zhuǎn)化 B轉(zhuǎn)導(dǎo)C接合 D轉(zhuǎn)座E轉(zhuǎn)位61關(guān)于基因工程的敘述,不正確的是:A根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇目的基因 B選擇一個適合的載體C把目的基因和載體分別用限制性核酸內(nèi)切酶切開 D連接酶只連接目的基因和載體E把重組體轉(zhuǎn)化到細胞中去的過程不是絕對的62限制性核酸內(nèi)切酶不具有那項特點:A僅存在原核細胞中 B用于重組DNA技術(shù)中的為類酶C能識別雙鏈DNA中特定的堿基順序 D具有一定的外切酶活性E辨認的核苷酸序列常具有回文結(jié)構(gòu)63限制性核酸內(nèi)切酶識別DNA中核苷酸序列的個數(shù)為:A4、5、6 B 5、6、7C 6、7、8 D4、6、8E 4864如果某限制性核酸內(nèi)切酶識別的堿基序列為6個,則24Kb的一段隨機的DNA序列可出現(xiàn)的切口數(shù)為:A4次 B5次C6次 D7次E8次65關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的敘述,下列那項是錯誤的:A限制性核酸內(nèi)切酶分為三類,用于基因工程的為酶 B限制性核酸內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生粘性末端或平端C識別的核苷酸序列個數(shù)可以是6個或8個 D識別的序列一般具有回文結(jié)構(gòu)E識別的DNA為單鏈66關(guān)于基因工程的敘述,下列那項是錯誤的?A基因工程也稱基因克隆 B只有質(zhì)粒DNA可作為載體C重組體DNA轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細胞 D需獲得目的基因E需對重組DNA進行純化篩選67有關(guān)質(zhì)粒的敘述,下列那項是錯誤的?A. 小型環(huán)狀雙鏈DNA分子 B可小到23Kb ,大到數(shù)百個KbC能在宿主細胞中獨立自主地進行復(fù)制 D常含有耐藥基因E只有一種限制性核酸內(nèi)切酶切口68有關(guān)質(zhì)粒的敘述,下列那項是錯誤的?A質(zhì)粒的某些遺傳信息可賦予宿主細胞 B質(zhì)粒較易轉(zhuǎn)化C質(zhì)粒的遺傳表型可作為轉(zhuǎn)化子的篩選依據(jù) DPBR322的分子中僅有一個EcoR內(nèi)切酶位點 EPBR322含有半乳糖苷酶的片段基因69有關(guān)噬菌體的敘述錯誤的是:A. 常用作克隆載體的噬菌體有噬菌體和M13噬菌體 B噬菌體DNA改造成的載體有g(shù)t系列和EMBL系列Cgt系列適用于插入型載體,用于cDNA克隆 DEMBL系列適用于置換型載體,用于基因組DNA克隆EM13噬菌體基因間隔區(qū)插入了Ecoli的一段調(diào)節(jié)基因和LacZ的C端氨基酸編碼基因70下列那項不是重組DNA的連接方式A粘性末端與粘性末端的連接 B平端與平端的連接C粘性末端與平端的連接 D人工接頭連接E同聚物加尾連接71關(guān)于翻譯,下列那項不正確?A重組體由目的基因與載體連接組成 B重組體能轉(zhuǎn)化細胞C重組體的表達在細胞水平 D重組體有獨立繁殖的能力E重組體的表達體系有真核和原核兩種72關(guān)于基因重組的敘述,錯誤的是:A整段的DNA不能在細胞內(nèi)進行交換 B整段的DNA能在細胞內(nèi)進行交換C整段的DNA能在不同的物種間進行交換 D交換的DNA能在新的位置上進行復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯E基因重組可引起自然突變現(xiàn)象73基因重組的方式不包括:A轉(zhuǎn)化 B轉(zhuǎn)導(dǎo)C轉(zhuǎn)位 D轉(zhuǎn)換E整合74關(guān)于噬菌體錯誤的是;A. 噬菌體DNA進入宿主菌后可整合到宿主菌DNA中又可保持獨立狀態(tài)B. B依賴本身的酶系進行其DNA的復(fù)制C. C依賴宿主的酶系進行其DNA的轉(zhuǎn)錄D. D依賴宿主的酶系表達其蛋白質(zhì)外殼E. E當噬菌體從宿主細胞釋放出來,再感染另外的宿主時,可發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用75有關(guān)噬菌體的敘述那項不符合:A感染大腸桿菌時僅把DNA注入大腸桿菌內(nèi) B有溶源和裂解兩種生活方式C溶源和裂解兩種生活方式可以相互轉(zhuǎn)變 D噬菌體是由外殼蛋白和DNA組裝而成E當從一個宿主細胞釋放出來,再感染另外宿主時,一定發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用76DNA克隆不包括下列那項步驟?A選擇一個適合的載體 B限制性核酸內(nèi)切酶在特異位點裂解質(zhì)粒和目的基因C用連接酶連接載體DNA和目的DNA,形成重組體 D用載體的相應(yīng)抗生素抗性篩選含重組體的細菌E重組體用融合法導(dǎo)入細胞77下列那項不能作為表達載體導(dǎo)入真核細胞的方法?A磷酸鈣轉(zhuǎn)染 B電穿孔C脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 D顯微注射E氯化鈣轉(zhuǎn)染78下列那項不能作為基因工程重組體的篩選方法A 抗藥性標志選擇 B宿主菌的營養(yǎng)缺陷標志補救C原位雜交 DSouthern印跡PCR技術(shù)79下列那項不是重組體篩選的免疫化學方法的工作原理及特點:A. 將瓊脂培養(yǎng)板上的轉(zhuǎn)化子菌落經(jīng)蒸汽裂解釋放抗原B. 將固定目的基因編碼蛋白質(zhì)的抗血清聚乙烯薄膜覆蓋在裂解菌落上C. 再使用32P標記的DNA探針與薄膜反應(yīng)D. 經(jīng)放射自顯影檢出陽性反應(yīng)菌落E免疫學方法特異性強靈敏度高,尤其適用于選擇不為宿主菌提供任何選擇標志的基因80重組DNA技術(shù)不能應(yīng)用于:A疾病基因的發(fā)現(xiàn) B生物制藥CDNA序列分析 D基因診斷E基因治療81基因重組是指DNA分子的:A共價連接 B氫鍵連接C離子鍵連接 D交換E退火82下列那種藥物不能用基因工程的方法生產(chǎn)?A胰島素 B干擾素C白細胞介素 D性激素E促紅細胞生成素83DNA重組技術(shù)不能應(yīng)用于下列哪個方面?A. 產(chǎn)前診斷 B攜帶者測試C癥候前診斷 D遺傳病的易感性E傳染病的傳染性84一種可靠的DNA診斷學方法,下列那項是不必符合的?A能正確擴增靶基因 B能準確區(qū)分單個堿基的差別C本底或噪聲低,不干擾DNA的鑒定 D便于完全自動化操作E方法簡便,易于推廣應(yīng)用85關(guān)于轉(zhuǎn)化錯誤的是:A受體細胞獲得新的遺傳表型 B外源DNA一定整合進受體細胞基因組C自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率較低 D自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率較高E越大的外源DNA與染色體整合幾率越低86關(guān)于同源重組不正確的是:A同源重組不需要特異的DNA序列 B同源重組要求兩分子間序列必須相同CRecBCD具有內(nèi)切酶和解旋酶活性 DHolliday中間體的形成,是同源重組的重要步驟E需要DNA連接酶參與87下列那種酶是重組DNA技術(shù)中最重要的?A反轉(zhuǎn)錄酶 B堿性磷酸酶C末端轉(zhuǎn)移酶 DDNA聚合酶EDNA連接酶88在分子生物學中,基因克隆主要指:ADNA的復(fù)制 BDNA的轉(zhuǎn)錄CDNA的剪切 DRNA的轉(zhuǎn)錄ERNA的剪接89在分子生物學中,重組DNA又稱為:A酶工程 B蛋白質(zhì)工程C細胞工程 D基因工程EDNA工程90基因工程中,不常用到的酶是;A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA聚合酶CDNA連接酶 D逆轉(zhuǎn)錄酶EDNA解鏈酶91限制性核酸內(nèi)切酶酶切后的DNA末端最常見的是:A平頭末端 B3突出末端C5突出末端 D粘性末端E缺口末端92能識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類酶稱為:ADNA內(nèi)切酶 B限制性內(nèi)切核酸酶C非限制性內(nèi)切核酸酶 D限制性外切核酸酶E非限制性外切核酸酶93cDNA是指:A在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNA B在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補的DNAC在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的RNA D在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的RNAE在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNA94基因工程中通常使用的質(zhì)粒存在于:A細菌染色體 B酵母染色體C細菌染色體外 D酵母染色體外E以上均不是95質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)是:A環(huán)狀雙鏈DNA B環(huán)狀單鏈DNAC環(huán)狀單鏈RNA D線狀雙鏈DNAE線狀單鏈DNA96聚合酶鏈反應(yīng)常??s寫為:APRC BPERCPDR DBCREPCR97在已知DNA序列的情況下,獲取目的基因的最方便的方法是:A人工化學合成 B基因組文庫法CcDNA文庫法 DPCR法E從染色體DNA直接提取98EcoR切割DNA雙鏈產(chǎn)生:A平端 B5突出的粘性末端C3突出的粘性末端 D鈍性末端E配伍末端99用于PCR反應(yīng)的酶是:ADNA連接酶 B堿性磷酸酶C逆轉(zhuǎn)錄酶 D限制性內(nèi)切核酸酶ETaq DNA聚合酶100Pst內(nèi)切酶切割目的基因后產(chǎn)生:A 5G A A T T C 3 B 5G T TA A C 3 3C T T A AG 5 3C A A T T G 5 C 5C T G C AG 3 D5C T GC A G 3 3GA C G T C 5 3G A CG T C 5 E 5G A A T T C 3 3C T T A A G 5101將Pst切割后的目的基因與同樣切割的載體DNA連接是:A同聚物加尾連接 B人工接頭連接C平端連接 D粘性末端連接E非粘性末端連接102限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生:A3磷酸末端和5羥基末端 B5磷酸末端和3羥基末端C3磷酸末端和5磷酸末端 D3羥基末端和5羥基末端E3羥基末端5羥基末端和磷酸103基因工程中使目的基因與載體拼接的酶是:ADNA聚合酶 BRNA聚合酶CDNA連接酶 DRNA連接酶E限制性核酸內(nèi)切酶104以質(zhì)粒為載體,將外源基因?qū)胧荏w菌的過程稱為:A轉(zhuǎn)化 B轉(zhuǎn)染C轉(zhuǎn)導(dǎo) D轉(zhuǎn)位E感染105最常用的篩選轉(zhuǎn)化細菌是否含有質(zhì)粒的方法是:A營養(yǎng)互補篩選 B抗藥性篩選C免疫化學篩選 D原位雜交篩選ESouthern印跡篩選106互補篩選屬于:A抗藥性標志篩選 B酶聯(lián)免疫篩選C標志補救篩選 D原位雜交篩選E免疫化學篩選107進行同聚物加尾法連接目的基因和載體DNA時,需要那種酶?ADNA聚合酶 BRNA聚合酶C引物酶 D逆轉(zhuǎn)錄酶E末端轉(zhuǎn)移酶108確切的講,cDNA文庫包含:A一個物種的全部基因信息 B一個物種的全部RNA信息C一個生物體組織或細胞的全部基因信息 D一個生物體組織或細胞的全部RNA信息E一個生物體組織或細胞所表達mRNA信息109下列描述最能確切表達質(zhì)粒DNA作為克隆載體特性的是:A小型環(huán)狀雙鏈DNA分子 B攜帶有某些耐藥基因C在細胞分裂時恒定地傳遞給子代細胞 D具有自我復(fù)制能力E獲得目的基因110表達人類蛋白質(zhì)的最理想的細胞體系是:AEcoli表達體系 B原核表達體系C酵母表達體系 D昆蟲表達體系E哺乳類細胞表達體系B型題:(111113)A噬菌體感染宿主菌后核酸進入菌體的過程 B外來DNA引起生物類型改變的過程C溶源菌中的噬菌體全部基因都表達 D溶源菌中的噬菌體部分調(diào)控區(qū)的基因表達E帶有宿主DNA的噬菌體111溶源狀態(tài)是:112進入裂解周期是:113轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是指:(114116)A接合作用 B轉(zhuǎn)化作用C轉(zhuǎn)導(dǎo)作用 D轉(zhuǎn)座作用E轉(zhuǎn)移作用114F因子陰性細胞與F因子陽性細胞形成F因子陽性細胞的是:115病毒從被感染的細胞釋放出來,再次感染另一細胞時,發(fā)生在供體細胞與受體細胞之間的DNA轉(zhuǎn)移的是:116從一個染色體位點轉(zhuǎn)移至另一位點的分散的重復(fù)序列稱為:(117120)A插入序列轉(zhuǎn)座 B轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座C位點特異的重組 D同源重組E溶源117噬菌體DNA和宿主染色體的特異靶位點整合稱為:118噬菌體的生長方式是:119Tn3發(fā)生的DNA轉(zhuǎn)移的是:120復(fù)制后的一個復(fù)制本遷移至新位,另一個仍保留在原位的是: (121123)ARec A BEcoRCRuv C DLex AEF factor121有蛋白水解酶活性的是:122能使同源重組中單鏈DNA對另一雙鏈DNA的侵入的是:123切割Holliday中間體的內(nèi)切酶是:(124126)AReplicon BCloningCInverted repeats DPalindromeETransposons124目的基因與載體連接形成:125來自同一始祖的相同副本或拷貝的集合稱為:126限制性內(nèi)切核酸酶識別的序列具有:(127129)A抗藥性篩選 B分子雜交篩選CRNA反轉(zhuǎn)錄 D免疫學方法E體外翻譯127用于鑒定質(zhì)粒是否轉(zhuǎn)化的一般方法是:128用于鑒定轉(zhuǎn)化子細胞是否含有目的基因的常用方法是:129利用目的基因表達產(chǎn)物的特異性抗體來篩選含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細胞的方法是:(130132)A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA連接酶C反轉(zhuǎn)錄酶 DTaq DNA聚合酶E堿性磷酸酶130識別DNA回文結(jié)構(gòu)并對其雙鏈進行切割的是:131用于PCR反應(yīng)的酶是:132將目的基因與載體進行拼接的酶是:(133134)A支原體 B衣原體C噬菌體 D細菌E酵母133常用于原核表達體系的是:134常用于真核表達體系的是:(135137)A轉(zhuǎn)染 B轉(zhuǎn)化C感染 D轉(zhuǎn)導(dǎo)E轉(zhuǎn)位135以質(zhì)粒為載體,細菌為宿主的導(dǎo)入方式是:136以噬菌體為載體,細菌為宿主的導(dǎo)入方式是:137以病毒為載體,哺乳動物細胞為宿主的導(dǎo)入方式是:(138139)A抗藥性篩選 BRNA反轉(zhuǎn)錄C免疫化學方法 D體外翻譯EPCR138對重組體內(nèi)基因進行直接篩選的方法是:139通過鑒定基因表達產(chǎn)物篩選重組體的方法是:(140142)ARNA聚合酶 B末端轉(zhuǎn)移酶C堿性磷酸酶 D反轉(zhuǎn)錄酶E核苷酸酶140能切除DNA末端磷酸基的是:141能在DNA3羥基末端進行同聚物加尾的是:142合成cDNA用的是:(143145)A同聚物加尾連接 B人工接頭連接C粘性末端連接 D缺口末端連接E平端連接143外源基因和載體DNA經(jīng)過EcoR切割后的連接屬于:144在外源基因和載體DNA末端加同聚物后進行連接屬于:145在外源基因和載體DNA末端添加短核苷酸序列,人為制造粘性末端后進行連接屬于:X型題:146可用于基因工程載體的DNA分子有:A染色體DNA B病毒DNAC細菌DNA D噬菌體DNAE質(zhì)粒DNA147重組DNA技術(shù)的基本過程包括:A目的基因的獲取 BPCR反應(yīng)C克隆載體的構(gòu)建 D目的基因與載體的連接E重組體分子導(dǎo)入受體菌148基因克隆又稱為:A重組DNA B重組RNACDNA克隆 DRNA克隆E蛋白質(zhì)復(fù)制149組成PCR反應(yīng)體系的物質(zhì)包括:ARNA引物 BTaq DNA聚合酶CRNA聚合酶 DDNA模板EddNTP150對于重組體的篩選,屬于直接選擇法的是:A免疫化學法 B原位雜交法CSouthern印跡 D補救標志篩選E抗藥性標志篩選151對于重組體的篩選,屬于非直接選擇法的是:A免疫化學法 B原位雜交法CSouthern印跡 D補救標志篩選E酶聯(lián)免疫篩選152限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA時可產(chǎn)生:A5粘性末端 B3粘性末端C平末端 D單鏈缺口E粘性末端153基因工程中目的基因的來源有:A化學合成 BPCR合成CCDNA文庫 D基因組文庫E組織細胞中染色體DNA直接提取154基因工程中外源性基因又稱為:A目的基因 B目的DNAC目的RNA Dtarget DNAE外源RNA155重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有:A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA聚合酶CDNA連接酶 D反轉(zhuǎn)錄酶E末端轉(zhuǎn)移酶156使細胞獲取新的遺傳表型的方式有:A接合作用 B轉(zhuǎn)化作用C轉(zhuǎn)導(dǎo)作用 D轉(zhuǎn)座E以上均可以157作為基因工程的載體必須具備的條件是:A能獨立自主復(fù)制 B易轉(zhuǎn)化C易檢測(含有抗藥性基因等) D具有限制性內(nèi)切核酸酶的切口E易提取獲得158限制性內(nèi)切核酸酶識別的核苷酸序列可以是:A4個 B5個C6個 D7個E8個159將表達載體導(dǎo)入真核細胞的轉(zhuǎn)染方法有:A磷酸鈣轉(zhuǎn)染 BDEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染C電穿孔 D脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染E顯微注射160為保證轉(zhuǎn)錄和翻譯的順利進行,表達載體必須具備的DNA序列應(yīng)包括:A較強的啟動子 B較強的衰減子C較強的沉默子 D合適的SD序列E核糖體結(jié)合位點161融合蛋白的結(jié)構(gòu)中包含有:AN端為原核蛋白質(zhì) BN端為真核蛋白質(zhì)CC端為原核蛋白質(zhì) DC端為真核蛋白質(zhì)ENC兩端為原核蛋白質(zhì),中間為真核蛋白質(zhì)162可以連接的目的基因與載體的末端有:A同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的粘性末端 B不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的配伍末端C不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的不同類型的粘性末端 D同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端 E不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端四、問答題:163什么叫基因克?。亢喪龌蚩寺〉牟襟E。164限制性內(nèi)切核酸酶有哪些特點?165簡述重組DNA技術(shù)中目的基因的獲取來源和途徑。166簡述互補篩選重組體質(zhì)粒細菌的原理。167基因工程中重組體篩選的方法有那些?168基因工程Ecoli表達體系的表達載體必須符合那些標準?169常用的真核表達體系有哪些?常用于細胞轉(zhuǎn)染的方法有哪些?170已知有一mRNA分子,你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)?簡述其過程。171一種可靠的DNA診斷學方法必須符合哪些標準?172作為基因工程的載體必須具備哪些條件?173什么叫基因重組?簡述沙門氏菌是怎樣逃避宿主免疫監(jiān)視的?參考答案:一、名詞解釋:1. 基因工程(gentic engineering )是指將DNA重組體引進受體細胞中,建立無性系的過程。因此,又稱為基因克隆(gene cloning)??寺∧骋换蚧駾NA 片段過程中,將外源DNA插入載體分子所形成的復(fù)制子是雜合分子-嵌合DNA(DNA chimerase),所以又稱為重組DNA(recombinant DNA)。2. 當細胞(細菌)與細胞(細菌)相互接觸時,質(zhì)粒DNA就可以從一個細胞(細菌)轉(zhuǎn)移到另一個細胞(細菌),這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用。3. 由外源性DNA導(dǎo)入宿主細胞,并引起生物類型改變的過程或使宿主細胞獲得新的遺傳表型稱為轉(zhuǎn)化作用。4. 當病毒從被感染的(供體)細胞釋放出來,再次感染另一(受體)細胞時,發(fā)生在供體細胞與受體細胞之間的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用?;驇в兴拗鱀NA的噬菌體或病毒,再感染另外的宿主的過程中發(fā)生的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。5. 轉(zhuǎn)座即是指一個或一組基因從一個位置轉(zhuǎn)倒基因組的另一個位置??梢苿拥腄NA序列包括插入序列和轉(zhuǎn)座子。故由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移或重排稱轉(zhuǎn)座。6. 轉(zhuǎn)座子是可以從一個染色體位點轉(zhuǎn)移至另一個位點的分散的重復(fù)序列。轉(zhuǎn)座子也包括含有兩個反向重復(fù)序列的側(cè)翼,內(nèi)有轉(zhuǎn)座酶基因,并含有抗生素耐藥基因等其他基因7. 8. 9. 10. 11. 。 7 發(fā)生在 同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組 (general recombination)。 同源重組不需要特異DNA 列,而是依賴兩分子間序列的相同或類似性。 8 發(fā)生在 同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組 (general recombination)。 9 是指含有單一DNA重組體的無性系。或指將DNA重組體引進受體細胞中,建立無性系的過程。因此,又稱為基因克?。╣ene cloning)。 10 外源DNA插入載體DNA分子所形成的具有自我復(fù)制能力的DNA分子稱為復(fù)制子( replicon )。11 限制性內(nèi)切核酸酶(Restriction endonuclease)是指能識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。12. DNA的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱結(jié)構(gòu)即回文結(jié)構(gòu)Palindrome(或正讀反讀序列相同的DNA序列)。13. 不同限制性內(nèi)切酶識別位點不同,但切割后產(chǎn)生相同類型的粘性末端,稱為配伍末端。14. DNA重組技術(shù)中是我們所需要的DNA序列或基因,就稱為目的基因(target gene)或目的 DNA (target DNA )。15. 以mRNA為模板,利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補的DNA稱為cDNA ( complementary DNA)。16. 克隆載體(cloning vector )是攜帶目的基因,實現(xiàn)目的基因的無性繁殖或表達有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子。17. 為使插入的目的基因可轉(zhuǎn)錄進而翻譯成多肽鏈,而特意設(shè)計的克隆載體又稱為表達載體(expression vector)。即具有轉(zhuǎn)錄和翻譯所必須的DNA序列的載體。18. 存在于細菌染色體以外的環(huán)狀DNA分子。19. M13噬菌體的基因間隔區(qū)插入EColi 的調(diào)節(jié)基因及LacZ(-半乳糖苷酶基因)的N-端146個aa殘基編碼基因,其產(chǎn)物為-半乳糖苷酶的-片段。而突變型 Lac Ecoli 可表達-半乳糖苷酶的片段(酶的C-端), 單獨的-片段及-片段均無-半乳糖苷酶的活性,當含有LacZ的 M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac Ecoli 細菌時, -片段及-片段共同表達,宿主 Lac Ecoli 細菌才有-半乳糖苷酶活性,使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物,(生長的細菌為蘭色)即-互補。20. 把生物體全部的DNA 提純后,用限制性內(nèi)切核酸酶,隨機切割成許多片段,將所有片段均重組入同一類載體上,得到許多重組DNA分子,繼而全部轉(zhuǎn)入受體菌擴增,使每個細菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA分子的多個拷貝,這樣生長的全部細菌所攜帶的所有基因組DNA片段,即為整個基因組。21. 如克隆基因能夠在宿主菌表達,且表達產(chǎn)物與宿主菌的營養(yǎng)缺陷互補,那么就可以利用營養(yǎng)突變菌株進行篩選,即標志補救。22. 將表達載體導(dǎo)入真核細胞的過程或方法。23. 一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息,或整套基因的全部DNA片段。24. 具備接受外源DNA的能力的經(jīng)過特殊方法處理的受體菌。25. PCR (polymerase chain reaction ) 是一種DNA迅速大量擴增的方法,短時間內(nèi)獲得大量DNA。有利目的基因的獲得。26. 以
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