胎兒胰島素樣生長因子-Ⅰ的檢測及意義.doc

胎兒胰島素樣生長因子-的檢測及意義中華婦產(chǎn)科雜志 1998年第12期第33卷 論著作者：萬貴平俞淑劉嘉茵王海琦單位：210029 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科關(guān)鍵詞：胰島素樣生長因子-；胎兒；胎盤；放射免疫測定摘要目的評(píng)估胰島素樣生長因子-(IGF-)在胎兒、胎盤生長發(fā)育中的作用。方法用放射免疫分析法(RIA)測定大于胎齡兒(LGA)組30例，適于胎齡兒(AGA)組36例及小于胎齡兒(SGA)組36例的臍血清IGF-的水平。用線性相關(guān)分析法分析各組變量之間的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果3組胎兒臍血清IGF-與胎齡、胎兒體重、胎盤重量均呈顯著正相關(guān)(r=0.32，P0.001；r=0.68，P0.001；r=0.75，P0.001)，其中與胎盤重量呈高度正相關(guān)。臍血清IGF-水平，AGA組為144.5946.73 g/L；SGA組為90.80 g/L（t=4.77，P0.001），LGA組為209.17 g/L(t=7.97, P0.001）。結(jié)論IGF-是胎兒、胎盤生長發(fā)育的重要調(diào)節(jié)因子，對(duì)巨大兒、小于胎齡兒的形成有重要作用。Serum Concentration of Insulin-like Growth Factor-I in Cord BloodWan guiping, Yu Shu, Liu Jiayin, et al. First Affiliated Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing 210029【Abstract】ObjectiveTo evaluate the role of insulin-like growth factor-(IGF-) in fetal growth and placental growth.MethodsCord blood IGF- was determined by radioimmunoassay (RIA) after serum samples were extracted with acid-ethanol. Linear correlation between variables was tested by calculating pearsons correlation coefficient. students test was used to compare mean values between groups.ResultsIn 102 tested samples, the concentration of cord blood serum IGF- was correlated with the gestational age, the birth weight of neonates and placental weight (r=0.32, P0.001, r=0.68, P0.001, r=0.75, P0.001). The mean serum level of IGF- in the small-for-gestational-age (SGA) neonates was significantly lower than that in average-for gestational-age (AGA) (t=4.77, P0.001), But the serum concentration of IGF- in the Large-for-gestational-aga (LGA) neonates was significantly higher than that of AGA neonates (t=7.97, P0.001).ConclusionThose results suggested that IGF- is an important regulator for fetal and placental growth and development. It has the key role for macrosomia and IUGR forming.【Key word】Insulin-like growth factor FetusPlacentaRadioimmunoassay胰島素樣生長因子-(IGF-)由70個(gè)氨基酸組成，其編碼基因位于12號(hào)染色體短臂上，它只有通過細(xì)胞表面的特異性受體才能刺激細(xì)胞增生、分化。哺乳動(dòng)物幾乎所有組織和細(xì)胞均能合成IGF-，表達(dá)IGF受體。Lassarre等1研究發(fā)現(xiàn)，臍血清 IGF-的水平隨胎齡的增加而升高，推測IGF-在胎兒生長發(fā)育階段可能起作用，本研究通過放射免疫分析法，測定臍血清中的 iGF-水平，探討其在胎兒、胎盤生長發(fā)育中的作用。資料與方法一、研究對(duì)象自1997年5月至11月在南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院和第二附屬醫(yī)院分娩的102例孕婦，無明顯的妊娠合并癥及內(nèi)外科合并癥。相應(yīng)胎齡出生體重在90百分位以上為大于胎齡兒（LGA）組，1090百分位之間為適于胎齡兒（AGA）組，10百分位以下為小于胎齡兒（SGA）組2。SGA組36例、AGA組36例、LGA組30例。在分娩或剖宮產(chǎn)時(shí)采集臍動(dòng)、靜脈混和血10ml。孕婦年齡1938歲，孕齡3742周。所有標(biāo)本的采集均征得孕婦本人同意。血樣本采集后1 500 r/min離心15分鐘，取血清1 ml，-20保存待測。二、方法1.試劑： IGF-標(biāo)準(zhǔn)品由美國Sigma公司提供，10 g/瓶，純度98%。125I-IGF- (92.5 KBq、化學(xué)純度74 TBq/mmol）、兔抗人兔血清（25 ml，最終稀釋濃度112 000）、包被驢抗兔抗體的Amerlex-M磁性分離劑均由英國Amersham公司提供。2. IGF-放射免疫分析測定法：在放射免疫分析測定之前，血清經(jīng)過酸-醇抽提將IGF-從結(jié)合蛋白中分離出來3，主要步驟：樣品血清0.2 ml加到0.8 ml的抽提液中，抽提液由87.5%（v/v）無水乙醇、12.5%（v/v）濃度為2 mol/L的鹽酸組成?；旌虾笫覝叵蚂o置30分鐘，4 以下1 850 r/min離心30分鐘，取上清液0.5 ml加到0.2 ml、濃度為0.86 mol/L 的Trisbase液中。IGF-放射免疫分析測定是在含5%小牛血清（0.05 mol/L，pH7.4)的PBS液中進(jìn)行的，均采用雙管測定。在100 l標(biāo)準(zhǔn)品或抽提樣品中加100l抗血清（最終稀釋濃度為1:12 000）、100 l125IGF-(370 KBq、放免化學(xué)純度74TBq/mmol)，搖勻后在24 下孵育48小時(shí)。應(yīng)用Amerlex-M分離試劑，分離出結(jié)合IGF-與游離IGF-，加500 l Amerlex-M分離劑，搖勻后在1530下靜置10分鐘，置于磁性分離架上15分鐘，傾棄上清液，倒置5分鐘，測每分鐘計(jì)數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)品濃度共11點(diǎn)，由此得出標(biāo)準(zhǔn)曲線。批內(nèi)變異5 g/L時(shí)為1.40%，500 g/L時(shí)為9.07%。三、統(tǒng)計(jì)處理各組間均數(shù)檢驗(yàn)用t檢驗(yàn)，各類數(shù)據(jù)間用線性相關(guān)分析。結(jié)果一、臍血清IGF-與胎齡、胎兒體重、胎盤重量關(guān)系直線相關(guān)分析表明，臍血清IGF-與胎齡、胎兒體重、胎盤重量均呈顯著正相關(guān)(r=0.32，P0.001；r=0.68，P0.001；r=0.75，P0.001)，其中與胎盤重量呈高度正相關(guān)。二、3組臍血清IGF-水平比較臍血清IGF-在SGA組、AGA組、LGA組分別為90.8049.00 g/L、144.5946.73 g/L、209.1781.45 g/L。與AGA組比較，臍血清IGF-水平在SGA組顯著降低（t=4.77，P0.001），在LGA組顯著升高（t=7.97，P0.001）。討論一、臍血清IGF-與胎盤生長發(fā)育的關(guān)系本研究結(jié)果顯示， 臍血清IGF-的濃度與胎齡、胎兒體重、胎盤重量均呈正相關(guān)，與Lassarre等1報(bào)道相似。說明臍血清IGF-隨孕齡的增長而升高，且與胎兒、胎盤的發(fā)育密切相關(guān)。但與胎盤重量的相關(guān)性較與胎兒體重的相關(guān)性更強(qiáng)，說明臍血清IGF-的水平可能與胎盤的生長發(fā)育更為密切。二、IGF-在胎兒生長發(fā)育中的作用與AGA組比較，臍血清IGF-在SGA組的水平顯著降低，在LGA組的水平顯著升高，與Wang等4報(bào)道不一致，與Lassarre等1報(bào)道相似。提示IGF-可能與胎兒的發(fā)育相關(guān)，至少胎兒在宮內(nèi)生活的晚期是這樣。Baker等5通過轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究顯示：去除IGF-基因的小鼠，在宮內(nèi)發(fā)育遲緩，從而間接證實(shí)了IGF-在胎兒生長發(fā)育中的作用。Simmons等6研究發(fā)現(xiàn)，IGF-能使胎鼠肺和肌肉的糖原攝取、糖轉(zhuǎn)移因子-1蛋白和mRNA增加。Schoknecht等7研究發(fā)現(xiàn)，外源性IGF-能使宮內(nèi)發(fā)育遲緩胎兒蛋白質(zhì)、脂肪積累增加，生長速率加快,說明IGF-通過促進(jìn)胎兒糖、蛋白質(zhì)、脂肪代謝而影響胎兒生長發(fā)育。參考文獻(xiàn)1Lassarre C ,Hardouin S, Daffos F,et al.Serum insulin-like growth factors and insulin-like growth factor binding proteins in the human fetus： relationships with growth in normal subjects and in subjects with intrauterine growth retardation. Pediatr Res,1991,29:219-225.2Brenner WE .A standard of fetal growth for the united states of america. Am J Obstet Gynecol,1976,126:555-564.3Daughaday WH, Ward AP, Goldberg AC, et al. Characterization of somatomedin binding in human serum by ultracentrifugation and gelfiltration. J Clin Endocrinol Metab,1982,55:916-921.4Wang HS, Lim J, Irvine L, et al. The concentration of insulin-like growth factor-I and insulin-like growth factor-binding protein-1 in human umbilical cord serum at delivery:relation to fetal weight.J Endocrine,1991,129:459-464.5Baker J ,Liu JP,Robertson EJ,et al.Role of insulin-like growth factors in embryonic and postnatal growth.Cell,1993,75:73-82.6Simmons RA, Flozak AS. Ogata ES. The effect of insulin and insulin-like growth factor- on glocose transport in normal and small for gestational age