兩種工藝制備黃芪口服液的實(shí)驗(yàn)研究.doc

兩種工藝制備黃芪口服液的實(shí)驗(yàn)研究?jī)?nèi)蒙古中醫(yī)藥兩種工藝制備黃芪口服液的實(shí)驗(yàn)研究周玲君摘要:采用水醇法與動(dòng)態(tài)提取法制備黃芪口服液,從制劑的澄明度,黃芪甲苷的含量等方面比較,工業(yè)生產(chǎn)中可采用動(dòng)態(tài)提取法生產(chǎn)工藝.關(guān)鍵詞:黃芪口服液,提取工藝中圖分類(lèi)號(hào)R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):10060979(2010)060040-02黃芪是豆科植物黃芪的根,主要含黃芪甙I,乙酰黃芪甙I,異黃芪甙I等,黃芪臨床上可增強(qiáng)機(jī)體特異和非特異的免疫功能,使細(xì)胞的生理代謝作用增強(qiáng),對(duì)血清性腎炎可是尿蛋白量明顯下降,腎臟病變減輕,有明顯利尿作用,對(duì)中樞神經(jīng)有鎮(zhèn)靜,安定作用.臨床上單獨(dú)使用或與其他藥配伍用于預(yù)防感冒,防止小兒哮喘以及治療慢性氣管炎均有較好的療效,臨床上黃芪常用劑型為口服液,是黃芪的提取液加蜂蜜精制而成,口味更為適宜,黃芪精口服液是多種慢性消耗性疾病的調(diào)補(bǔ)劑,又是中老年人養(yǎng)生保健的強(qiáng)壯劑,主要用于氣血虧,四肢乏力,精神不足,久病衰弱,脾胃不壯等癥狀.傳統(tǒng)的中藥純化方法乃至一些現(xiàn)代的純化技術(shù)由于其只作用于某一有效成分或某一類(lèi)有限成分,因而往往會(huì)造成另一種有效成分或另一類(lèi)有效成分的損失,比如說(shuō)采用酸沉法從黃連中提取有效成分時(shí),只能得到鹽酸小劈堿,而同時(shí)有效成分的藥根堿,黃連堿等大部分損失掉了,這既不符合中醫(yī)的整體觀念,而且療效也會(huì)受到影響,采用這種方法來(lái)提取的話,黃連和黃柏這兩味藥酒沒(méi)有什么區(qū)別了,而實(shí)質(zhì)上黃連和黃柏作用有很大的不同,傳統(tǒng)的中藥純化方法還存在使用大量有機(jī)溶媒,提取方法復(fù)雜,提取速率低,除雜不徹底,有效成分損失或破壞嚴(yán)重,并常造成環(huán)境污染等一系列問(wèn)題,應(yīng)用已受到很大的限制.黃芪精口服液生產(chǎn)中常采用水醇法制備,通過(guò)對(duì)水醇法與動(dòng)態(tài)提取法進(jìn)行比較,優(yōu)化生產(chǎn)工藝,尋找更好的方法來(lái)更好的除雜,保留有效成分,提高臨床療效.1儀器和材料G清型高速管式離心機(jī)(遼陽(yáng)天興制藥機(jī)械有限公司),SSC300三足離心機(jī)(張家港威龍機(jī)械制造設(shè)備有限公司),UF一1板框超濾器(上海離心機(jī)研究所),725紫外光柵分光光度計(jì)(上海第二分析儀器廠);黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品由中國(guó)生物制品檢定所提供,所用試劑均為分析純.2實(shí)驗(yàn)制法2.1黃芪中有效成分的提取:用天平稱(chēng)取黃芪飲片100克,倒入鍋內(nèi),放500毫升純化水浸泡20分鐘,再加200毫升純化水,注意總共加水不可多于800毫升,置于電爐上煮沸,調(diào)節(jié)電壓,用文火保持微沸煮40分鐘,攪拌防止溫度過(guò)高藥液飛濺,過(guò)濾得450毫升藥液,將藥液分為體積相等的兩份,一份用醇沉法制備一份用離心法精制.2.2醇沉法制法:水醇法是根據(jù)重要成分既溶于水,用溶于醇的原理,利用其中所含成分在水中或乙醇中溶解度不同而進(jìn)行的純化方法,藥物與水煮時(shí),大多數(shù)有效成分如藥材中所含生物堿鹽,苷類(lèi),氨基酸等可被提取,但同時(shí)也煎出許多雜質(zhì)如淀粉,蛋白質(zhì),色素等水溶性雜質(zhì),他們?cè)诖贾腥芙舛刃?加入乙醇可部分或大部分沉淀除去,但水溶性色素,樹(shù)脂等含量提高,雖然可降低溶解度,但不易完全除去,用乙醇沉淀雜質(zhì)醇化水提液,可以一次也可以反復(fù)處理2至3次,每次藥液含醇量逐漸提高防止一次加入過(guò)量乙醇致使有效成分同時(shí)沉出的量過(guò)多損失,如分兩次醇沉?xí)r,第一次使醇量達(dá)50%60%,第二次達(dá)65%一75%,若需第三次醇沉,含醇量達(dá)75%85%,本實(shí)驗(yàn)僅需兩次醇沉.向制得的黃芪水煎液中加人乙醇418毫升,調(diào)節(jié)乙醇含量為65%,以去掉淀粉,在冰箱中靜置24小時(shí),采用減壓抽濾回收乙醇,蒸至無(wú)乙醇味,得江蘇省江都市第三人民醫(yī)院(225200)2010年1月10日收稿200毫升藥液,然后加入乙醇600毫升,使乙醇含量調(diào)至體積分?jǐn)?shù)為75%以去除色素等少數(shù)無(wú)效成分,再在冰箱中靜置24小時(shí)至48小時(shí),后抽濾,再常壓回收乙醇,即得成品100毫升,再用電爐加熱濃縮至75毫升,濾過(guò),直接配藥液,灌封,滅菌得成品,放入冰箱備用,每瓶相當(dāng)于黃芪藥材75克.2.3離心機(jī)制備:離心法是以離心機(jī)為主要設(shè)備,通過(guò)離心機(jī)的高速運(yùn)轉(zhuǎn),使離心機(jī)加速度超過(guò)重力加速度的成百上千倍,而使沉降速度增加,以加速藥液中的雜質(zhì)沉淀并除去的一種方法,其原理是利用混合液的密度差來(lái)分離藥液,比較適合于難于沉降的細(xì)微?；蛐鯛钗锏膽腋∫憾?靜置24小時(shí)的黃芪提取液余液用減壓抽濾得澄清液,將抽濾得到的上清液放人成對(duì)的心管,放在天平兩端調(diào)節(jié)至平衡,放人離心機(jī)的對(duì)稱(chēng)位置,啟動(dòng)離心機(jī),轉(zhuǎn)速為30oo至5000轉(zhuǎn),分,反復(fù)離心,合并離心管中上清液,備用,得藥液120毫升加熱濃縮至75毫升藥液既得,直接配藥液灌封滅菌,得成品,每瓶相當(dāng)于黃芪藥材75克.3質(zhì)量比較3.1雜質(zhì)的檢查:從兩種工藝所制的的產(chǎn)品中取2毫升各3份,分別加入1%明膠試劑,1%鞣酸溶液和O.1%碘試劑,檢查產(chǎn)品中的鞣質(zhì),蛋白質(zhì),淀粉三種雜質(zhì),結(jié)果如表1.表1兩種工藝成品雜質(zhì)檢查注:一澄清,+沉淀,+多沉淀3.2穩(wěn)定性觀察:將兩種工藝制成的121服液于室溫放置,每一個(gè)月檢查一次澄明度,連續(xù)觀察3個(gè)月,結(jié)果如表2.表2兩種工藝穩(wěn)定性觀察注:一澄清3.3兩種工藝口服液中黃芪甲苷的含量測(cè)定:取黃芪口服液29毫升,用水飽和的正丁醇提取2次,每次2O毫升,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次20毫升,合并正丁醇提取液,用氨試液提取2次,每次2O毫升,棄去氨液,正丁醇液置水浴蒸干,殘?jiān)蛹状?毫升溶解,作為供試品溶液.另精密稱(chēng)取黃芪甲苷對(duì)照品,加甲醇溶制成每毫升含1毫克的溶液,作為對(duì)照品.照薄層色譜法試驗(yàn),洗去供試品溶液.具體結(jié)果見(jiàn)表3.2010年3月表3兩樣品黃芪甲苷含量測(cè)定結(jié)果(單位:mg/m1)3.4黃芪多糖的檢測(cè)反應(yīng):取樣品1和樣品II各2毫升傾入兩支試管中,各加入5%萘酚醇溶液3滴,搖勻沿試管壁緩緩加入1毫升濃硫酸,觀察口服液于硫酸交界面產(chǎn)生的反應(yīng),樣品I與樣品II均產(chǎn)生深紫色環(huán),說(shuō)明兩種工藝中黃芪多糖含量高.4討論黃芪中有效成分主要為以黃芪甲苷為代表的皂苷類(lèi),黃芪多糖等.水醇法制備黃芪口服液工藝成本較高,有效成分損失較大,特別是醇沉多糖類(lèi)成分損失更大;高速離心法是一種物理分離法,它除去的是固體雜質(zhì),本法減少了有效成分的損壞和破壞,節(jié)省了大量物料,降低了藥品成本,高速離心法簡(jiǎn)便可行,適宜工業(yè)化生產(chǎn)采用,值得進(jìn)一步推廣.超聲提取黃芩多糖工藝研究朱智勇摘要:目的:采用(3)正交實(shí)驗(yàn)法,研究黃芩多糖的超聲波法提取最佳工藝條件.方法:以多糖得率為指標(biāo),以提取溫度,提取時(shí)間,料液比,粒度為因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn).結(jié)果:超聲波法提取黃芩多糖的最佳工藝條件為萃取溫度65C,萃取時(shí)/160min,料液比l:1O,黃苓粉碎過(guò)200目篩.結(jié)論:此實(shí)驗(yàn)工藝簡(jiǎn)單易行,通過(guò)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),最佳提取工藝條件得率為3.40%.關(guān)鍵詞:超聲波;黃芩;多糖;提取工藝中圖分類(lèi)號(hào):R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):10060979(2010)06-004102黃芩始載于神農(nóng)本草經(jīng),為唇形科多年草本植物,黃芩(Scutellm-iabaicalensisGeorg1)的根別名黃金茶,山茶根,爛心草,為中醫(yī)常用的清熱燥濕藥.具有清熱燥濕,瀉火解毒,止血安胎等功效【l】.中草藥多糖及糖復(fù)合物參與和介導(dǎo)了細(xì)胞各種生命現(xiàn)象的調(diào)節(jié),在抗腫瘤,抗菌,抗病毒,抗?jié)?抗糖尿病,降血脂,抗凝血及免疫調(diào)節(jié)等方面有作用.近年來(lái)研究表明,黃芩多糖可以抑制豬生殖和呼吸系統(tǒng)綜合癥病毒,對(duì)病毒感染引起的非典型性肺炎等疾病具有一定的防治作用.本實(shí)驗(yàn)采用超聲提取技術(shù)對(duì)黃芩多糖的提取工藝進(jìn)行了研究.1材料與儀器1.1藥材:黃芩購(gòu)自江西宜春老百姓大藥房.1.2試劑:葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品,上?；瘜W(xué)試劑公司;苯酚,上?；瘜W(xué)試劑公司;乙醚,95%乙醇,正丁醇,無(wú)水乙醇,濃硫酸均為分析純.1.3儀器:Branson2200型超聲清洗儀(上海正方電子電器有限公司);BS一223S型電子分析天平(江西華科精密儀器有限公司);RE一200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);UV一4501S型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(天津市港東科技有限公司).2方法與結(jié)果一2.1黃芩多糖提取方法優(yōu)選:選定影響黃芩多糖提取效率的四個(gè)主要因素:提取溫度A,提取時(shí)間B,料液比C,和黃芩粉末粒度D作為考察因素,以黃芩多糖的得率為考察指標(biāo),選用(3)正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn).因素水平安排見(jiàn)表1.表1因素水平表2.2黃芩多糖提取方法:稱(chēng)取黃芩1000g,干燥,粉碎,過(guò)篩(120目,100目,80目)后,分別稱(chēng)取黃芩粉末5Og,加入95%乙醇35rn1(脫單糖,低聚糖),藥粉揮干溶劑后,加入蒸餾水,超聲提取2次,每次30rain,合并提取液,過(guò)濾.濾液經(jīng)減壓濃縮至體積一半.濾液中加入2.5倍量的95%乙醇,放置過(guò)夜,濾出沉淀,加入l5rIll蒸餾水溶解沉淀,sevag法去除蛋白,即加入等體積的氯仿一正丁醇溶液(氯仿:正丁醇=5:1),離心,上清液用2mol/L的NaOH調(diào)pH=7,離心,加入2.5倍量的95%乙醇靜置48小時(shí),濾出沉淀,依次用95%乙醇,無(wú)水乙醇,丙酮,乙醚反復(fù)洗滌,將沉淀物(即粗多糖)真空干燥至恒重,即得黃芩多糖.江西省宜春學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院(336000)2010年1月4日收稿2.3黃芩多糖含量測(cè)定:參照文獻(xiàn)5,61方法,進(jìn)行多糖含量測(cè)定,分別準(zhǔn)確吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和黃芩多糖提取液1.0ml于具塞試管中,以蒸餾水1.0ml作空白,每管加人5%苯酚溶液1.Oml,再垂直快速加入濃硫酸,搖勻,放置5min,沸水水浴加熱15rain,之后用流水速冷至室溫,以蒸餾水為空白對(duì)照,在20070Ohm范圍內(nèi)用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行掃描,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明葡萄糖和黃芩多糖最大吸收峰值均在490nm處,經(jīng)重復(fù)性,穩(wěn)定性,回收率實(shí)驗(yàn)確定硫酸一苯酚法作為黃芩多糖含量的測(cè)定方法,校準(zhǔn)曲線回歸方程為:A=0.0243C一0.0853,R:=-0.9967.2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析:實(shí)驗(yàn)按照IJ9(3)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2.從表中數(shù)據(jù)可分析,影響黃芩多糖提取因素的主次順序?yàn)镈>A>B>C,即黃芩粉末粒度D,提取溫度A,提取時(shí)間B,料液比C對(duì)黃芩多糖提取率的影響依次減少.通過(guò)直觀分析可知最佳提取工藝為D,B2C:,即:黃芩粒度200目,料液比1:10,萃取溫度65,萃