【金版教程】高考生物一輪復習 1 微生物的利用課件 新人教版選修1.ppt

選修一生物技術實踐 專題一微生物的利用 1 培養(yǎng)基的概念 人們按照微生物對的不同需求 配制出供其生長繁殖的 2 培養(yǎng)基的成分 一般都含有水 提供碳元素的物質 提供氮元素的物質 和無機鹽 還需要滿足微生物生長對 特殊營養(yǎng)物質以及的要求 營養(yǎng)物質 營養(yǎng)基質 碳源 氮源 ph 氧氣 1 為什么倒平板后等平板冷卻后要將平板倒置 提示 將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落到平板上造成污染 稀釋涂布平板法測定微生物的生長情況及應用可在培養(yǎng)物生長的不同階段用稀釋涂布平板法進行測定 將培養(yǎng)物進行一系列稀釋并接種到平板培養(yǎng) 統(tǒng)計培養(yǎng)后平板上的菌落數 就可以計算出原培養(yǎng)物的密度 平板上的菌落應該是彼此分散開的 菌落數最好在30 300個 計算公式 每毫升的細菌數 平板上的菌落數 樣品的稀釋倍數 注 平板上的菌落來自1ml稀釋液 舉例 稀釋1000倍的平板上有38個菌落 原培養(yǎng)物含有 38 1000 3 8 104個細菌細胞 ml 稀釋涂布平板法廣泛應用于微生物學的研究 這種技術只統(tǒng)計活菌數 而且需要培養(yǎng)一段時間形成菌落后才能計數 因此 這種方法不宜用于某些食品工業(yè)的質量控制 因為有些食品如牛奶易腐敗變質 不宜延擱這么長的時間 這時可使用直接的方法 如使用顯微鏡直接統(tǒng)計細胞的數目 1 含義 指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止雜菌污染的方法 2 關鍵 防止外來雜菌的入侵 3 措施 1 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟 計算 溶化 倒平板 2 純化大腸桿菌的原理 在培養(yǎng)基上將聚集的菌種稀釋分散成單個細胞 形成單個菌落 此菌落是由一個細胞繁殖而來的子細胞群體 稱量 滅菌 3 接種技術 平板劃線法和稀釋涂布平板法 1 平板劃線法 是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面操作 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 2 稀釋涂布平板法 是將菌液進行一系列的 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 連續(xù)劃線 梯度稀釋 2 平板劃線法為什么要把第一次以后的每一次劃線的起點放在上一次劃線的末端 提示 目的是使每一次劃線后菌體數目減少 培養(yǎng)之后形成的菌落是由單個菌體繁殖而成 小貼士 1 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數 1 菌種篩選 使用是唯一氮源的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 2 統(tǒng)計菌落數目 常用方法有 顯微鏡直接計數法 3 設置對照 指設置除了以外 其他條件都相同的實驗 目的是排除實驗組中對實驗結果的影響 提高實驗結果的可信度 4 實驗流程 土壤取樣 制備 微生物的培養(yǎng)與觀察 細菌的計數 尿素 稀釋涂布平板法 被測試的條件 非測試因素 培養(yǎng)基 2 分解纖維素的微生物的分離 1 纖維素酶的組成 是一種復合酶 至少包括三種組分 即c1酶 cx酶和酶 2 纖維素酶的作用 3 篩選方法 剛果紅染色法 即通過是否產生來篩選纖維素分解菌 葡萄糖苷 透明圈 4 實驗操作步驟 1 培養(yǎng)基的種類 1 按物理性質分類 2 按功能分類 2 培養(yǎng)基的配制原則 1 目的要明確 根據微生物的種類 培養(yǎng)目的選擇不同的原料配制培養(yǎng)基 2 營養(yǎng)要協(xié)調 配制培養(yǎng)基時要注意各營養(yǎng)物質的濃度和比例 ph要適宜 3 平板劃線操作的注意事項 1 第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌 2 灼燒接種環(huán)之后 要冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 3 劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連 4 劃線用力大小要適當 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 平板劃線法幾次灼燒滅菌的目的比較 如圖是微生物平板劃線示意圖 劃線的順序為12345 下列操作方法正確的是 a 操作前不用做任何處理b 劃線操作須在火焰上進行c 在5區(qū)域中才可以得到所需菌落d 在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌 解析 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種 使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端 從而通過劃線次數的增加 使每次劃線時菌種的數目減少 以便得到菌落 劃線后灼燒接種環(huán) 能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種 避免細菌污染環(huán)境和感染操作者 答案 d 1 篩選原理配制選擇培養(yǎng)基 把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源 原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長 其他微生物則不能在此培養(yǎng)基上生長 2 統(tǒng)計菌落數目 1 理論依據 當樣品的稀釋度足夠高時 培養(yǎng)基表面生長的一個菌落 來源于樣品稀釋液中的一個活菌 通過統(tǒng)計平板上的菌落數 就能推測出樣品中大約含有多少活菌 為了保證結果準確 一般選擇菌落數在30 300的平板進行計數 2 計算方法 每克樣品中的菌株數 c v m其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數 v代表涂布平板時所用稀釋液的體積 ml m代表稀釋倍數 3 統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目低 因為當兩個或多個細胞連在一起時 平板上觀察到的只是一個菌落 4 為使結果接近真實值 要設置重復組 取其平均值 可將同一稀釋度的樣品接種到三個或三個以上的平板上 經涂布 培養(yǎng)計算出菌落平均數 3 設置對照可排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響 提高實驗結果的可信度 4 實驗流程 1 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基作為實驗組 制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照組 用來判斷選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用 2 以培養(yǎng)基加土壤樣品進行培養(yǎng)為實驗組 培養(yǎng)基不加土壤樣品進行培養(yǎng)為對照組 判斷培養(yǎng)基是否被污染 5 課題延伸由于分離分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基上可能生長著以尿素分解菌代謝產物為氮源的其他微生物 因此還需借助生物化學方法對分離細菌作進一步鑒定 1 原理 細菌合成的脲酶將尿素分解成nh3 使培養(yǎng)基堿性增強 ph升高 因此 可通過檢測ph的變化來判斷該化學反應是否發(fā)生 2 方法 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 培養(yǎng)某種細菌 若ph升高 則指示劑變紅 說明該種菌能分解尿素 下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方a組 b組 上述兩種培養(yǎng)基中的物質溶解后 均用蒸餾水定容至1000ml 1 如果要對土壤中分解尿素的細菌進行分離 則需要選擇上述哪種培養(yǎng)基 該培養(yǎng)基中的碳源是 能分離尿素分解菌的原因是 2 在分離尿素分解菌所用的培養(yǎng)基中可加入 指示劑 根據指示劑的顏色可鑒定某種細菌能否分解尿素 若有分解尿素的細菌 培養(yǎng)基將會呈現 3 從功能上來看 上述兩種培養(yǎng)基均屬于 培養(yǎng)基 從物理性質來看 a屬于 培養(yǎng)基 思路點撥 解析 培養(yǎng)基a中 氮源只有尿素 所以只有能分解尿素的微生物才能從中獲得氮源 分解尿素的細菌在分解尿素過程中產生氨 會使ph升高 酚紅指示劑變紅 因為培養(yǎng)基a中有凝固劑 瓊脂 所以屬于固體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基b中 纖維素是唯一的碳源 所以也屬于選擇培養(yǎng)基 答案 1 培養(yǎng)基a葡萄糖培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源 只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖 2 酚紅紅色 3 選擇固體 1 篩選原理即 可根據是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌 2 實驗流程土壤取樣 富含纖維素的環(huán)境 選擇培養(yǎng) 用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 以增加纖維素分解菌數量 梯度稀釋 涂布平板 將樣品涂布于鑒別培養(yǎng)基上 挑選產生透明圈的菌落 3 兩種常用剛果紅 cr 染色法的比較 纖維素分解菌能夠產生纖維素酶分解纖維素 回答下列問題 1 在篩選纖維素分解菌的過程中 通常用 染色法 這種方法能夠通過顏色反應直接對纖維素分解菌進行篩選 甲同學在實驗時得到了如圖所示的結果 則纖維素分解菌位于 a b c d 2 乙同學打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計數 與分離醋酸菌相比 進行培養(yǎng)時除了營養(yǎng)不同外 最主要的實驗條件差別是 該同學采用活菌計數法統(tǒng)計的菌落數目往往比活菌的實際數目 3 丙同學在提取和分離纖維素酶的過程中 為了抵制外界酸和堿對酶活性的影響 采取的措施是向提取液和分離液中添加 若探究纖維素酶活性的最適溫度 如何設置對照 解析 1 剛果紅與纖維素形成的紅色復合物在纖維素被分解后將不再形成 則在培養(yǎng)基上出現以纖維素分解菌為中心的透明圈 2 牛胃是一個厭氧的環(huán)境 所以其中的纖維素分解菌與需氧的醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同 因是活菌計數法 所以部分死亡菌無法計數 另外當兩個或多個細菌連在一起時平板上只觀察到一個菌落 所以偏小 3 探究最適溫度可設置一系列的溫度梯度相互對照 其他無關變量要適宜 答案 1 剛果紅a 2 保證無氧環(huán)境小 低 3 緩沖溶液不同的溫度梯度之間相互對照 1 分離微生物的方法從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種 1 利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質有 嗜好 的原理 專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質 從而使它成為一種加富培養(yǎng)基 2 利用該分離對象對某種抑菌物質的抗性 在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物 經培養(yǎng)后 原來占優(yōu)勢的微生物生長受抑制 而分離對象卻可乘機大大增殖 在數量上占優(yōu)勢 2 選擇培養(yǎng)基應用實例 1 培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌 2 培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌 3 培養(yǎng)基中缺乏氮源時 可以分離固氮微生物 因為非固氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存 4 當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學成分時 也具有分離效果 如石油是唯一碳源時 可以抑制不能利用石油的微生物的生長 使能夠利用石油的微生物生存 達到分離能消除石油污染的微生物的目的 5 改變微生物的培養(yǎng)條件 也可以達到分離微生物的目的 如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物 2012 江蘇鎮(zhèn)江調研 通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物 在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長 在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌 在培養(yǎng)基中加入10 的酚可以抑制細菌和霉菌 利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出 大腸桿菌 霉菌 放線菌 固氮細菌a b c d 解析 缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長 而固氮細菌能生長 在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌 霉菌能生長 在培養(yǎng)基中加入10 的酚可以抑制細菌和霉菌 放線菌能生長 答案 a 特定微生物的數量測定1 為了保證結果準確 一般選擇菌落數在30 300的平板上進行計數 2 在同一稀釋度下 至少對3個平板進行重復計數 然后求出平均值 并根據平板所對應的稀釋度計算出樣品中細菌的數目 如果某個平板的菌落數與其他差別甚遠 說明該平板操作過程中出現失誤 應舍棄 3 統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數目低 這是因為當兩個或多個細胞連在一起時 平板上觀察到的只是一個菌落 因此 統(tǒng)計結果用菌落數而不是活菌數來表示 2012 廣東中山一中測試 用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數 在對應稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中 得到以下幾種統(tǒng)計結果 正確的是 a 涂布了一個平板 統(tǒng)計的菌落數是230b 涂布了兩個平板 統(tǒng)計的菌落數是215和260 取平均值238c 涂布了三個平板 統(tǒng)計的菌落數分別是21 212和256 取平均值163d 涂布了三個平板 統(tǒng)計的菌落數分別是210 240和250 取平均值233 解析 在設計實驗時 一定要涂布至少3個平板作為重復組 才能增強實驗的說服力與準確性 所以a b不正確 c項雖涂布了3個平板 但是 其中1個平板的計數結果與另兩個相差太遠 說明在操作過程中可能出現了錯誤 此時 不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值 答案 d 微生物的實驗室培養(yǎng)過程微生物的實驗室培養(yǎng)過程涉及培養(yǎng)基的配制 滅菌 接種 培養(yǎng) 觀察等過程 其中配制培養(yǎng)基時要注意各種營養(yǎng)要素的均衡以及ph的適宜 這是基礎 配制好培養(yǎng)基后 要進行滅菌 倒平板 接種后要對培養(yǎng)基進行倒置培養(yǎng) 這些過程都是我們在微生物實驗室培養(yǎng)中需要注意的問題 另外我們還要對為什么這樣操作 說出原因 2012 煙臺診斷 某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行實驗 實驗包括制備培養(yǎng)基 滅菌 接種及培養(yǎng) 菌落觀察與計數 請回答與此實驗相關的問題 1 培養(yǎng)基中含有的蛋白胨 淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了 和 除此之外 培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是 和 2 對培養(yǎng)基進行滅菌 應該采用的方法是 3 為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果 應將接種了湖水樣品的平板置于 中培養(yǎng) 培養(yǎng)的溫度設定在37 要使該實驗所得結果可靠 還應該同時在另一平板上接種 作為對照進行實驗 4 培養(yǎng)20h后 觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落 這說明湖水樣品中有 種細菌 一般說來 菌落總數越多 湖水遭受細菌污染的程度越 5 如果提高培養(yǎng)基中nacl的濃度 可以用于篩選耐 細菌 這種培養(yǎng)基被稱為 解析 3 小題易回答錯誤 錯誤原因是不知道如何處理對照實驗 該實驗中對照組為空白對照 因此應接種無菌水 蛋白胨來源于動物原料 含有維生素 糖和有機氮等營養(yǎng)物質 在培養(yǎng)基中主要是作為氮源 微生物的培養(yǎng)基各種配方一般都要含有水 碳源 氮源 無機鹽 實驗室的滅菌方法一般有 灼燒滅菌法 適合于接種工具的滅菌 干熱滅菌法 適合于耐高溫的 需要保持干燥的物品的滅菌 高壓蒸汽滅菌法 適合于培養(yǎng)基等物體的滅菌 要想使微生物快速地繁殖 就要置于適宜的條件下 特別是溫度 所以要置于恒溫箱中 對照實驗就是要設置一個無菌的培養(yǎng)基加以比較 進行觀察 不同的細菌形成的菌落具有不同的形態(tài) 細菌菌落的特征是識別不同細菌的主要依據 菌落是由一個細菌細胞繁殖而來的 菌落多則說明細菌的數目就多 加入了特定的物質 用于篩選各種特定細菌的培養(yǎng)基就是選擇培養(yǎng)基 例如加入了nacl就可以用于篩選耐鹽細菌 答案 1 氮源 碳源不作要求 碳源無機鹽水 2 高壓蒸汽滅菌 3 恒溫箱無菌水 4 多高 5 鹽 或nacl 選擇培養(yǎng)基 1 2009 安徽理綜 下列是關于 檢測土壤中細菌總數 實驗操作的敘述 其中錯誤的是 a 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經高溫 高壓滅菌后倒平板b 取104 105 106倍的土壤稀釋液和無菌水各0 1ml 分別涂布于各組平板上c 實驗組和對照組平板倒置 37 恒溫培養(yǎng)24 48小時d 確定對照組無菌后 選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數 解析 檢測土壤中細菌總數 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經高溫 高壓滅菌后倒平板 取104 105 106倍的土壤稀釋液和無菌水各0 1ml 分別涂布于各組平板上 將實驗組和對照組平板倒置 37 恒溫培養(yǎng)24 48小時 在確定對照組無菌后 選擇菌落數在30 300的一組平板為代表進行計數 答案 d 2 2011 課標全國 有些細菌可分解原油 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株 回答問題 1 在篩選過程中 應將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 從功能上講 該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 2 純化菌種時 為了得到單菌落 常采用的接種方法有兩種 即 和 3 為了篩選出高效菌株 可比較單菌落周圍分解圈的大小 分解圈大說明該菌株的降解能力 4 通常情況下 在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 和 無菌技術要求實驗操作應在酒精燈 附近進行 以避免周圍環(huán)境中微生物的污染 解析 本題主要考查生物技術實踐中微生物的培養(yǎng)與分離 意在考查考生對相關知識的靈活運用能力 1 欲篩選出能降解原油的菌株 培養(yǎng)基中應只含有原油而無其他碳源 這樣不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存 這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 2 分離純化菌種時 接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法 使聚集在一起的微生物分散成單個細胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 以便于純化菌種 3 降解原油能力越強的菌株 在菌落周圍形成的分解圈越大 4 實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 如接種環(huán) 干熱滅菌 如培養(yǎng)皿 和高壓蒸汽滅菌 如培養(yǎng)基 等 無菌技術要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行 以避免周圍微生物的污染 答案 1 原油選擇 2 平板劃線法稀釋涂布平板法 3 強 4 干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰 3 2009 寧夏理綜 1 在大腸桿菌培養(yǎng)過程中 除考慮營養(yǎng)條件外 還要考慮 和滲透壓等條件 由于該細菌具有體積小 結構簡單 變異類型容易選擇 等優(yōu)點 因此常作為遺傳學研究的實驗材料 2 在微生物培養(yǎng)操作過程中 為防止雜菌污染 需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行 消毒 滅菌 操作者的雙手需進行清洗和 靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅 其原因是紫外線能使蛋白質變性 還能 3 若用稀釋涂布平板法計數大腸桿菌活菌的個數 要想使所得估計值更接近實際值 除應嚴格操作 多次重復外 還應保證待測樣品稀釋的 4 通常 對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀 大小等菌落特征對細菌進行初步的 5 培養(yǎng)大腸桿菌時 在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是 6 若用大腸桿菌進行實驗 使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經過 處理后才能丟棄 以防止培養(yǎng)物的擴散 解析 1 大腸桿菌具有體積小 結構簡單 變異類型容易選擇 易培養(yǎng) 生活周期短等優(yōu)點 培養(yǎng)過程中 除考慮營養(yǎng)條件外 還要考慮溫度 酸堿度和滲透壓等條件 2 滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物 所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌 消毒是用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物 操作者的雙手需要進行清洗和消毒 紫外線能使蛋白質變性 還能損傷dna的結構 3 稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 進行培養(yǎng) 應保證樣品稀釋的比例適合 4 對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀 大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定 5 培養(yǎng)大腸桿菌時 在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生 6 因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素 并可能導致腸管出現嚴重癥狀 使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經過滅菌處理后才能丟棄 以防止培養(yǎng)物的擴散 答案 1 溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短 2 滅菌消毒損傷dna的結構 3 比例合適 4 鑒定 或分類 5 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生 6 滅菌 4 2010 廣東生物 苯酚是工業(yè)生產排放的有毒污染物質 自然界中存在著降解苯酚的微生物 某工廠產生的廢水中含有苯酚 為了降解廢水中的苯酚 研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株 篩選的主要步驟如圖所示 為土壤樣品 請回答下列問題 1 中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入 作為碳源 中不同濃度碳源的培養(yǎng)基 a 影響 b 不影響 細菌的數量 如果要測定 中活細菌數量 常采用 法 2 為對照 微生物在 中不生長 在 中生長 與 培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于 使用 法可以在 上獲得單菌落 采用固體平板培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng) 3 如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小 4 實驗過程中如何防止其他微生物的污染 解析 1 從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株 其培養(yǎng)基中必須添加苯酚作為碳源 碳源的濃度不同 培養(yǎng)基中生存的細菌的數量也不同 采用平板菌落計數 活菌計數或菌落計數 可以測定活細菌數量 2 與 培養(yǎng)基的區(qū)別主要是 中添加的是除 苯酚 以外的碳源 中添加的碳源只有苯酚 使用平板分離 稀釋涂布平板或平板劃線分離 法可以在平板培養(yǎng)基上獲得單菌落 采用固體平板培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng) 目的是避免培養(yǎng)過程中產生的水分影響微生物的生長 3 4 見答案 答案 1 苯酚a平板菌落計數 活菌計數或菌落計數 2 含除苯酚外的其他碳源 以苯酚為唯一碳源平板分離 稀釋涂布平板或平板劃線分離 避免培養(yǎng)過程產生的水分影響微生物的生長 3 用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株 一定時間后 測定培養(yǎng)液中苯酚含量 4 培養(yǎng)基滅菌 接種環(huán)境滅菌 接種過程無菌操作 1 2012 聊城高考模擬 有些微生物能合成纖維素酶 通過對這些微生物的研究 使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產酒精 用纖維素酶處理服裝面料等 研究人員用化合物a 硝酸鹽 磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基 成功地篩選到能產生纖維素酶的微生物 分析回答問題 1 培養(yǎng)基中加入的化合物a是 為微生物的生長提供 這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 2 為了篩選出能產生纖維素酶的微生物 向培養(yǎng)基中加入 3 在篩選出能產生纖維素酶的微生物之前 可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng) 增加微生物的濃度 若獲得純凈的菌株 常采用平板劃線的方法進行接種 此過程所用的接種工具是 操作時采用 滅菌的方法 還可用 方法操作 4 實驗結束后 使用過的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理才能掉 這樣做的目的是 解析 在對微生物進行選擇培養(yǎng)時 要針對微生物利用的營養(yǎng)物質的特點 滿足微生物需要的某一種營養(yǎng)要素 其他微生物不能利用這一營養(yǎng)物質 就能從多種微生物中進行選擇培養(yǎng) 要分離分解纖維素的微生物 就應該在培養(yǎng)基中加入纖維素作為碳源 不能利用纖維素的微生物在這樣的培養(yǎng)基上不能生長 所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基 在篩選分解纖維素的微生物時 加入剛果紅作為指示劑 剛果紅能與纖維素形成紅色的復合物 當纖維素被分解后 紅色消失形成了透明圈 在平板劃線法進行接種時 常用接種環(huán)作為接種工具 操作時采用灼燒滅菌 接種的方法除了平板劃線法外 還可以用稀釋涂布平板法進行操作 實驗結束后 為了防止微生物污染實驗環(huán)境 需要對培養(yǎng)基進行滅菌處理后倒掉 答案 1 纖維素碳源選擇 2 剛果紅 3 接種環(huán)灼燒稀釋涂布平板 4 防止造成環(huán)境污染 2 2012 北京東城一模 某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 設計實驗步驟如下 請給予合理的補充 1 采樣與培養(yǎng) 將采集的土樣混勻后稱取1g 置于經過 法滅菌處理的 填 固體 或 液體 培養(yǎng)基中 28 振蕩培養(yǎng) 2 接種與選擇 為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高 需將培養(yǎng)液進行 處理 之后 將菌液涂布接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 30 條件下培養(yǎng) 為避免污染 需將培養(yǎng)皿呈 狀態(tài)放置 此外 為排除其他因素的影響 提高實驗可信度 本步驟需設計 作為空白對照 3 篩選與純化 將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍 如果菌落周圍的現象是 則說明此種菌能夠 從平板中挑取實驗效果明顯的目的菌株 采用 法接種于新的培養(yǎng)基平板 可對菌株進行進一步的純化 解析 1 對培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌 因為后面要進行涂布 所以應該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng) 2 降低培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋的方法 由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 所以培養(yǎng)基就應以淀粉為唯一碳源 倒置可以避免培養(yǎng)基受污染 為排除其他因素影響 需要設置未接種