最終滅菌注射劑的質(zhì)量控制.ppt

最終滅菌注射劑質(zhì)量控制 污染微生物的來源 內(nèi)源性的影響因素空氣凈化系統(tǒng)水工藝過程物料外源性的影響因素人員 芽孢是關(guān)鍵控制點 G G 微生物無處不在氣源性微生物革蘭氏陽性菌較多它們可形成芽孢 難以殺滅因此 藥品生產(chǎn)需要HVAC水源性則革蘭氏陰性菌居多不會生成孢子但會形成細(xì)菌內(nèi)毒素 一 什么是芽孢 當(dāng)某些細(xì)菌遇到不良生存環(huán)境條件時 為保護(hù)自身 在細(xì)胞內(nèi)形成一外壁厚而堅硬的體眠體 該體眠體即稱芽孢 Spore 或孢子 由于其對不良環(huán)境的耐受性遠(yuǎn)高于生長態(tài)細(xì)胞 常被用于挑戰(zhàn)滅菌工藝 以確認(rèn)被滅菌物品無菌的可靠性 芽孢的特性 主要產(chǎn)生于Gram 細(xì)菌的兩個屬芽孢桿菌屬Bacillus梭菌屬Clostridium能抵御各種惡劣環(huán)境 可存活上百萬年 因為它有厚的皮層結(jié)構(gòu)僅含核酸及少量萌發(fā)必需物含水量極低休眠體 內(nèi)生孢子 不可再生 每個細(xì)胞只產(chǎn)生一個芽孢 真菌孢子屬于分生孢子 不具上述特性 細(xì)菌芽胞 孢 的形成及其特性 熱對活細(xì)胞的作用 有一種可引發(fā)克雅氏綜合癥 Creutzfekldt Jakob 的普里昴 prion 病原體 在132 下加一小時才可完全殺滅 克雅氏綜合癥 俗稱人體瘋牛病 需氧菌中的芽孢桿菌屬 Bacillus 和厭氧菌中的梭狀芽孢桿菌屬 Clostridium 耐熱性較強它們能產(chǎn)生內(nèi)源性孢子 芽孢 或胞間休眠體 對熱 干燥及化學(xué)消毒劑的耐受性大大增強這類芽孢的干熱滅菌溫度一般在100 170 濕熱滅菌的溫度則在80 129 之間 從 欣弗 事件談滅菌工藝 欣弗事件的發(fā)生2006年7月安徽華源克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液不良事件報告81例 涉及10個省份 欣弗到底怎么了 克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查 克林霉素磷酸酯氯化鈉注射 100ml 0 6g 采用半無菌工藝生產(chǎn)滅菌條件100 7分鐘貯存條件陰涼有效期1年有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇穩(wěn)定性考察有一批留樣的有關(guān)物質(zhì)為7 9 有關(guān)物質(zhì)總雜不得過8 0 單雜不得過5 0 克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查 克林霉素磷酸酯注射液 2ml 0 3g 滅菌條件100 3 10分鐘貯存條件遮光 密閉保存有效期2年處方中含有苯甲醇有關(guān)物質(zhì)總雜不得過6 0 2004年底改為8 0 單雜不得過4 0 從上述調(diào)查看國內(nèi)滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷 對滅菌的認(rèn)識不正確產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性忽視工藝的可行性 盲目跟風(fēng)報批注射劑用原料藥的雜質(zhì)控制不嚴(yán)忽視產(chǎn)品的安全性 中國醫(yī)藥報 2007年1月4日A6版 無菌藥品常用滅菌工藝的比較 影響濕熱滅菌效果的因素 待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌設(shè)備 無菌保證水平SAL 無菌保證水平 SterilityAssuranceLevel 表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)按國際標(biāo)準(zhǔn) 濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于10 6 即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一 滅菌工藝驗證的必要性 滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗 而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝 嚴(yán)格的GMP管理和良好的無菌保證體系滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件滅菌工藝經(jīng)過驗證后 方可正式用于生產(chǎn) 國內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷 無包裝規(guī)格無裝載方式未對每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進(jìn)行驗證采用留點溫度計監(jiān)測溫度無溫度探頭校準(zhǔn)記錄驗證的滅菌工藝與實際工藝不一致未驗證最差滅菌條件設(shè)定的驗證合格標(biāo)準(zhǔn)達(dá)不到無菌保證水平 SAL 10 6生物指示劑使用不規(guī)范 滅菌工藝檢查要點 生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控待滅菌產(chǎn)品的包裝形式 裝載方式和裝載數(shù)量滅菌工藝條件滅菌設(shè)備關(guān)鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準(zhǔn)設(shè)備維護(hù)和維修滅菌的記錄滅菌工藝的驗證選用的生物指示劑熱分布試驗 找出最冷點位置無菌檢驗樣品的取樣 無菌檢查 無菌檢查的局限性 無菌的定義理論上 無菌 沒有任何活的微生物實際上 我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在無法對整批產(chǎn)品進(jìn)行100 檢驗無菌檢驗的結(jié)果只是一個基于 可能性 的判斷無菌檢驗用培養(yǎng)基有其局限性只進(jìn)行細(xì)菌和真菌的檢驗對實驗結(jié)果的判定是基于 是否在培養(yǎng)基中生長 培養(yǎng)條件 如溫度和時間 是有限的我們的工作環(huán)境及操作是在相對無菌的狀態(tài) 美國非腸道藥物學(xué)會注射劑無菌測試結(jié)果 試驗?zāi)康?不合格的可能性 試驗批量 60 000支試驗方法 按美國藥典無菌測試方法 上述無菌測試結(jié)果的啟示 含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能 通過 無菌檢驗一批產(chǎn)品的染菌率越低 根據(jù)無菌檢驗的結(jié)果來判定整批產(chǎn)品的無菌 其風(fēng)險就越大 如何用無菌檢驗來證明整批產(chǎn)品無菌 要求有一個取樣計劃來涵蓋整個批號有足夠的取樣量和檢驗量選擇適用的培養(yǎng)基采用經(jīng)驗證的無菌檢驗方法良好的環(huán)境監(jiān)控 檢驗標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù) 2003驗證指南QC 751E注射劑藥液過濾前含菌量測定M 00061A注射劑滅菌前藥液污染水平及耐熱性檢查 大容量注射劑舉例 滅菌前藥液的含微生物的計算過程 根據(jù) 2003版藥品上產(chǎn)驗證指南 lgP lgN F0 D121 P 滅菌后產(chǎn)品內(nèi)微生物存活概率N 滅菌前藥液的含耐熱孢子的量D121 微生物耐熱參數(shù) 系指一定溫度下將微生物殺滅90 或使之下降一個對數(shù)單位所需的時間 分 lgN lgP F0 D121 lgP FT DT N值與FT成正比 與DT成反比 該產(chǎn)品 葡萄糖 采用115 滅菌32min 產(chǎn)品滅菌的F0 8 為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載 F0取8計算 大容量注射劑舉例 DT與生產(chǎn)環(huán)境 以及過濾截留得到的微生物有關(guān) 需要確認(rèn)污染微生物的耐熱性 在未檢測到耐熱微生物時 DT通常按 1計算 為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載 取DT為1計算 lgN lg10 6 8 1N 100CFU 袋 產(chǎn)品規(guī)格為250ml N 40CFU 100ml 檢測重點 污染水平微生物耐熱性 取樣 滅菌前藥液直接取樣 每個樣品取樣大容量注射劑 兩個最小包裝 最少各100mL 小容量注射劑兩份 最少各100mL 滅菌后取樣大容量注射劑各約50mL 檢測方法 污染水平檢查先用滅菌的含5 吐溫80的pH7 0氯化鈉蛋白胨潤濕0 45 m濾膜 然后過濾100mL滅菌前藥液 有抑菌性的藥液需用已驗證量的緩沖液沖洗濾膜 以消除藥液的抑菌性 再以無菌方式將濾膜菌面朝上貼于準(zhǔn)備好的胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基 TSA 上 同時做1個陰性對照 胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基在30