立式壓力蒸汽滅菌器效果驗證報告.doc

重慶西南制藥二廠有限責(zé)任公司 SVR-09002-00-2011立式壓力蒸汽滅菌器效果驗證報告重慶西南制藥二廠有限責(zé)任公司頁 數(shù)共10頁文件編碼：SVR-09002-00-2011 文件名稱立式壓力蒸汽滅菌器效果驗證報告制 定 人制定日期審 核 人審核日期QA審閱人審閱日期批 準(zhǔn) 人批準(zhǔn)日期受控狀態(tài)分發(fā)號生效日期分發(fā)部門質(zhì)量部QA質(zhì)量部QC技術(shù)部綜合部供銷部設(shè)備工程部動力車間EHS部財務(wù)部生產(chǎn)部一車間二車間三車間制劑車間文件歷史日期變更原因變更前文件版本號驗證小組人員名單組 長姓名職務(wù)/職稱職責(zé)李輝質(zhì)量部負(fù)責(zé)驗證方案和報告的審核工作；負(fù)責(zé)組織實施滅菌效果確認(rèn) 組 員姓名職務(wù)/職稱職 責(zé)付娜QC負(fù)責(zé)驗證方案和報告的起草； 負(fù)責(zé)實施滅菌效果確認(rèn)；負(fù)責(zé)進(jìn)行檢測；統(tǒng)計檢測數(shù)據(jù)；陳靜QC主管負(fù)責(zé)驗證方案和報告的起草； 負(fù)責(zé)實施滅菌效果確認(rèn)；負(fù)責(zé)進(jìn)行檢測；統(tǒng)計檢測數(shù)據(jù)；黃福鵬QA協(xié)調(diào)驗證工作目錄序號項目名稱頁碼1 目的52 驗證類別53 驗證時間54 驗證依據(jù)55 驗證內(nèi)容56 接受標(biāo)準(zhǔn)57 驗證的實施步驟58 偏差及異常處理99 驗證報告、結(jié)果分析和結(jié)論910 驗證結(jié)論批準(zhǔn)、會簽及日期911 驗證證書10摘要公司對立式高壓蒸汽滅菌器121高壓滅菌30分鐘的滅菌效果進(jìn)行了驗證，為確認(rèn)立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠。驗證結(jié)果如下： 當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后顯混濁，而在115滅菌20分鐘后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后清亮，無混濁，說明枯草桿菌黑色變種芽胞菌全部被滅活。當(dāng)未滅菌的嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指劑經(jīng)培養(yǎng)后由紫色變?yōu)辄S色，而在121壓力蒸汽滅菌20分鐘后的仍為紫色時，說明嗜熱脂肪芽孢桿菌全部被滅活?？莶菅挎邨U菌、大腸桿菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)在121滅菌30分鐘后，經(jīng)培養(yǎng)無菌生長，細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗合格。1 目的：提供足夠的數(shù)據(jù)和文件依據(jù)，確認(rèn)立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠。2 驗證類別：同步驗證3 驗證時間：2011年12月4 驗證依據(jù)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）； 藥品生產(chǎn)驗證指南（2003年修訂）； 驗證管理規(guī)定SMP-10002-035.驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)驗證項目驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)驗證方法細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗滅菌后指示菌應(yīng)全部死亡微生物限度檢查121壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡變色反應(yīng)滅菌后指示卡顏色應(yīng)達(dá)到或深于標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色）目測法生物指示劑滅活實驗滅菌后指示菌應(yīng)全部被滅活培養(yǎng)法6.驗證的實施步驟6.1 試驗條件6.1.1 檢測用儀表確認(rèn)名稱型號編號校驗日期校驗結(jié)論有效時間壓力表02010015642011.09.30符合規(guī)定2012.09.30結(jié)論： 符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期7.1.2檢測用菌種、指示劑（卡）等的確認(rèn)名稱規(guī)格來源枯草芽孢桿菌中國藥品生物制品檢定所大腸埃希菌中國藥品生物制品檢定所沙門菌中國藥品生物制品檢定所銅綠假單孢菌中國藥品生物制品檢定所金黃色葡萄球菌中國藥品生物制品檢定所嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠有限公司枯草桿菌黑色變種芽胞菌片中國藥品生物制品檢定所121壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠有限公司結(jié)論： 符合規(guī)定檢驗人/日期：復(fù)核人/日期：7.1.3 菌培養(yǎng)物制備：分別取枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌1白金耳于裝有9ml營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的試管中，于3035培養(yǎng)1824小時后，出現(xiàn)渾濁，說明各種菌均有生長，即得枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)物，備用。7.2取樣方法：7.2.1 取樣點：立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)上、中、下三部位各取樣點（見物品放置圖）321645897物品放置圖7.2.2取樣頻次：每個試驗進(jìn)行三次。7.3生物指示劑滅活試驗：7.3.1枯草桿菌黑色變種芽胞菌片(115滅菌20分鐘)7.3.1.1 驗證方法：取9張枯草桿菌黑色變種芽胞菌片按物品放置圖位置放于立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于115滅菌20分鐘后，取出于3035培養(yǎng)2448小時。同時取兩片未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片作對照，分別于24小時和48小時觀察，記錄結(jié)果。7.3.1.2 結(jié)果判定：當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后顯混濁，而滅菌后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后清亮，無混濁，說明枯草桿菌黑色變種芽胞菌全部被滅活。7.3.1.3 驗證結(jié)果：取樣點標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)后現(xiàn)象結(jié)論第一次第二次第三次1培養(yǎng)基清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁符合規(guī)定2清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁3清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁4清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁5清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁6清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁7清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁8清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁9清亮、無混濁清亮、無混濁清亮、無混濁陽性對照1號培養(yǎng)基混濁渾濁渾濁渾濁2號渾濁渾濁渾濁檢驗人/日期：復(fù)核人/日期：7.3.2 嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑(121滅菌15分鐘)7.3.2.1 驗證方法：取9瓶嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑按物品放置圖位置放于立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121滅菌15分鐘后，取出于54培養(yǎng)48小時。同時取2支未滅菌的嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑作對照。7.3.2.2 結(jié)果判定：當(dāng)未滅菌的嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指劑經(jīng)培養(yǎng)后由紫色變?yōu)辄S色、而滅菌后的仍為紫色時，說明嗜熱脂肪芽孢桿菌全部被滅活。7.3.2.3.1 驗證結(jié)果：檢測結(jié)果滅菌時間及溫度123456789陽性對照1212115分鐘第一次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色黃色黃色第二次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色黃色黃色第三次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色黃色黃色結(jié)論：符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期7.4 121壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡變色反應(yīng)試驗：7.4.1 驗證方法：將每組9張“121壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡”按物品放置圖位置放于立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121滅菌15和30分鐘各一次后，取出與化學(xué)指示卡自帶標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色）比較。7.4.2 結(jié)果判定： 121壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡滅菌后顏色如達(dá)到或深于標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色），則本試驗合格。7.4.3 驗證結(jié)果：檢測結(jié)果滅菌時間及溫度12345678912115分鐘第一次相同相同相同相同相同相同相同相同相同第二次相同相同相同相同相同相同相同相同相同第三次相同相同相同相同相同相同相同相同相同12130分鐘第一次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于結(jié)論：符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期7.5 細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗：7.5.1 驗證方法：將枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)物各9支培養(yǎng)物按物品放置圖位置放于立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121滅菌30分鐘后，取出，即得枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌的滅菌培養(yǎng)物。取各滅菌培養(yǎng)物1ml，置直徑90mm的滅菌平皿中，將預(yù)先準(zhǔn)備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基熔化，冷至約45時，傾注上述平皿各約15-20mL，混勻待凝。將各凝固平板倒置于3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24小時和48小時觀察，記錄結(jié)果，每管平行測定2份。同時用兩個滅菌平皿各加注0.9%的無菌氯化鈉溶液1mL作為陰性對照；并用大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌作陽性對照。7.5.2 結(jié)果判定：枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物滅菌后，經(jīng)培養(yǎng)應(yīng)無菌生長，則細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗合格。7.5.3 驗證結(jié)果：檢測結(jié)果滅菌培養(yǎng)物123456789陽性對照12枯草芽孢桿菌第一次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性大腸桿菌第一次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性沙門菌第一次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性銅綠假單孢菌第一次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性金黃色葡萄球菌第一次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性結(jié)論：符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期8. 異常及偏差處理 無9. 驗證報告、結(jié)果分析和結(jié)論：9.1 當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后顯混濁，而在115滅菌20分鐘后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后清亮，無混濁，說明枯草桿菌黑色變種芽胞菌全部被滅活。9.2 當(dāng)未滅菌的嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指劑經(jīng)培養(yǎng)后由紫色變?yōu)辄S色，而在121壓力蒸汽滅菌20分鐘后的仍為紫色時，說明嗜熱脂肪芽孢桿菌全部被滅活。9.3 枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、沙門菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)在121滅菌30分鐘后，經(jīng)培養(yǎng)無菌生長，細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗合格。驗證小組組員： 日期： 驗證小組組長： 日期： 10. 驗證結(jié)論批準(zhǔn)、會簽及日期驗證證書 編號：SVR-09002-00-2011驗證項目立式高壓滅菌器效果驗證驗證要求及目的確認(rèn)立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠驗證文件編號SVR-09002-00-2011驗證文件名稱立式高壓滅菌器效果驗證報告驗證小組按照立式高壓滅菌器效果驗證方案（SVP-09002-00-2011）對對立式高壓蒸汽滅菌器121高壓滅菌30分鐘的滅菌效果進(jìn)行了驗證，為確認(rèn)立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠。驗證結(jié)果如下： 當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)培養(yǎng)后顯混濁，而在115滅菌20分鐘后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)肉湯經(jīng)