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課題2月季的花藥培養(yǎng)1被子植物花粉發(fā)育的基本過(guò)程: 小孢子母細(xì)胞小孢子四分體時(shí)期單核期雙核期。2花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩條途徑:一是胚狀體途徑,二是愈傷組 織途徑,這兩種途徑主要取決于激素的種類及其濃度配比。3影響花藥培養(yǎng)的主要因素是材料的選擇與培養(yǎng)基的組成。選擇單 核靠邊期的花藥培養(yǎng)成功率最高。4確定花粉發(fā)育時(shí)期的方法有醋酸洋紅法(最常用)和焙花青一鉻礬法(花粉細(xì)胞核不易著色時(shí))。5在花藥培養(yǎng)中,常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。一、被子植物的花粉發(fā)育1花粉:是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成的單倍體的生殖細(xì)胞。2花粉的發(fā)育過(guò)程二、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑兩種途徑之間并沒(méi)有絕對(duì)的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。三、影響花藥培養(yǎng)的因素1主要因素:材料的選擇與培養(yǎng)基的組成。(1)花藥方面,應(yīng)選擇初花期的花藥。(2)花粉方面,應(yīng)選擇單核期的花粉。(3)花蕾方面,應(yīng)選擇完全未開(kāi)放的花蕾。2.其他因素:親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理及接種密度等。四、花藥培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)操作1材料的選取(1)花粉的鑒定:一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定花藥中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。(2)鏡檢方法:最常用的方法是醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。2.材料的消毒(1)將花蕾放入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中浸泡約30 s,立即取出,在無(wú)菌水中沖洗,后用無(wú)菌吸水紙吸干。(2)放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中24 min,再用無(wú)菌水沖洗35次。3.接種(1)剝離花藥時(shí),盡量不損傷花藥,徹底去除花絲。(2)每瓶接種花藥710個(gè)。4.培養(yǎng)(1)溫度:25_左右。(2)光照:開(kāi)始不需要光照,幼小植株形成后才需要光照。(3)轉(zhuǎn)移:將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上;如果釋放出胚狀體,盡快將幼小植株分開(kāi),分別移植到新的培養(yǎng)基上。5.鑒定和篩選:鑒定染色體倍性的變化,并進(jìn)行篩選。1被子植物的花粉發(fā)育依次經(jīng)過(guò)()雙核期四分體時(shí)期單核居中期單核靠邊期abc d解析:選b被子植物的花粉發(fā)育過(guò)程為:四分體時(shí)期單核居中期單核靠邊期雙核期。2從小孢子母細(xì)胞到形成精子,經(jīng)歷的分裂方式是()a有絲分裂 b減數(shù)分裂c先有絲分裂后減數(shù)分裂 d先減數(shù)分裂后有絲分裂解析:選d小孢子母細(xì)胞形成精子過(guò)程如下:小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂,小孢子花粉(內(nèi)含精子)3花粉植株能否誘導(dǎo)成功受多種因素的影響,主要因素是()a材料的選擇與培養(yǎng)基的組成b親本植株的生理狀況c接種密度d材料的低溫處理效果解析:選a花粉植株能否誘導(dǎo)成功受多種因素的影響,如植株的生理狀況、接種密度、材料低溫處理效果,但主 要影響因素是材料的選擇與培養(yǎng)基的組成。4在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過(guò)程中,應(yīng)選擇哪個(gè)時(shí) 期的花藥最易成活()a四分體時(shí)期 b單核期前c單核期 d雙核期解析:選c單核期的花藥菌少、易消毒。而單核期以前的花藥質(zhì)地幼嫩,極易破碎。選擇單核期以后的花藥, 其花瓣已有些松動(dòng),給材料的消毒帶來(lái)困難。5選擇花藥時(shí),一般要通過(guò)鏡檢來(lái)確定花粉的發(fā)育時(shí)期,以下說(shuō)法正確的是()a確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法是焙花青一鉻礬法b對(duì)某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色時(shí)采用醋酸洋紅法c焙花青鉻礬法能將細(xì)胞核染成藍(lán)黑色d醋酸洋紅法和焙花青鉻礬法染色過(guò)程完全一樣解析:選c在選擇花藥時(shí),通過(guò)鏡檢確定花粉的發(fā)育時(shí)期,最常用的方法是醋酸洋紅法;對(duì)于不易著色的花粉細(xì)胞核,則采用焙花青鉻礬法;焙花青鉻礬法可將花粉 細(xì)胞核染成藍(lán)黑色,醋酸洋紅法與焙花青鉻礬法過(guò)程不同,前者需用鑷柄將花粉搗碎,后者在染色前需用卡諾 氏固定液固定。1花粉發(fā)育的基本過(guò)程2花粉發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目的變化(設(shè)體細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目為2n)名師點(diǎn)撥關(guān)于花粉發(fā)育過(guò)程的幾點(diǎn)提醒(1)由上面發(fā)育過(guò)程可以得出,1個(gè)小孢子母細(xì)胞最終可發(fā)育形成4個(gè)花粉粒、8個(gè)精子。(2)在被子植物的花粉發(fā)育過(guò)程中,2個(gè)精子和1個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞是由同一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)有絲分裂而形成的,所以它們的核基因是相同的。(3)花粉管細(xì)胞核與花粉管的生成和生長(zhǎng)有關(guān),生殖細(xì)胞核直接參與受精作用。題組沖關(guān)1關(guān)于被子植物花粉的形成,下列說(shuō)法正確的是()a花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的b花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分體時(shí)期、單核期和雙核期等c花粉發(fā)育經(jīng)歷的四分體時(shí)期與減數(shù)第一次分裂的四分體時(shí)期含義相同d花粉母細(xì)胞形成花粉粒中精子的過(guò)程是一系列減數(shù)分裂的過(guò)程解析:選b花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂及有絲分裂形成的,經(jīng)歷四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段?;ǚ哿V械纳臣?xì)胞經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生2個(gè)精子。花粉發(fā)育的四分體時(shí)期指4個(gè)小孢子連在一起,而減數(shù)分裂的四分體時(shí)期是指同源染色體配對(duì)后,1個(gè)四分體含4條染色單體的階段。2下面是被子植物花粉發(fā)育過(guò)程的簡(jiǎn)略表示,請(qǐng)據(jù)此回答問(wèn)題:(1)是指_時(shí)期,由小孢子母細(xì)胞經(jīng)_分裂形成。(2)和分別是指_期和_期,這兩個(gè)時(shí)期細(xì)胞的共同特點(diǎn)是_。(3)1個(gè)花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)分裂最多能形成_個(gè)花粉粒,_個(gè)細(xì)胞核。(4)雙核期的兩個(gè)核分別叫_核和_核。(5)在進(jìn)行花藥組織培養(yǎng)時(shí)選擇_階段的培養(yǎng)成功率最高。解析:花粉是由小孢子母細(xì)胞先經(jīng)減數(shù)分裂后再經(jīng)有絲分裂(依次經(jīng)歷了四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段)產(chǎn)生的。單核期的細(xì)胞含濃厚的原生質(zhì),核開(kāi)始時(shí)位于細(xì)胞的中央,隨著細(xì)胞不斷長(zhǎng)大,核由中央移向細(xì)胞一側(cè),此時(shí)是花藥組織培養(yǎng)的最佳時(shí)期,細(xì)胞核再分裂成1個(gè)生殖細(xì)胞核和1個(gè)花粉管細(xì)胞核,進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞,即生殖細(xì)胞和營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞,生殖細(xì)胞將再分裂一次,形成兩個(gè)精子。答案:(1)四分體減數(shù)(2)單核居中單核靠邊含濃厚的原生質(zhì)(3)412(4)生殖細(xì)胞花粉管細(xì)胞(5)1實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng) 名師點(diǎn)撥在花藥培養(yǎng)過(guò)程中,常常會(huì)出現(xiàn)染色體組數(shù)目變化的原因(1)花粉細(xì)胞的融合。(2)接種花粉過(guò)程中混有小孢子母細(xì)胞。(3)在材料的低溫預(yù)處理時(shí)低溫抑制了紡錘體的形成。(4)在雙核期時(shí),生殖細(xì)胞核與花粉管細(xì)胞核并沒(méi)有形成兩個(gè)細(xì)胞,而是兩個(gè)核發(fā)生了融合。2.菊花莖段組織培養(yǎng)與月季的花藥培養(yǎng)比較項(xiàng)目?jī)?nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性基本過(guò)程脫分化再分化影響因素選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、ph、溫度、光照等材料選取體細(xì)胞生殖細(xì)胞繁殖方式無(wú)性生殖有性生殖培養(yǎng)結(jié)果正常植株單倍體植株可育性可育高度不育,染色體加倍后可育操作流程制備培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培選材消毒接種培養(yǎng)篩選和誘導(dǎo)移栽栽培選育題組沖關(guān)3下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)的說(shuō)法錯(cuò)誤的是()a材料的選擇最常用的方法是醋酸洋紅法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成深紅色b材料消毒時(shí)消毒劑一般是酒精和氯化汞c接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照,但幼小植株形成后需要光照d接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織后,要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基,以便進(jìn)一步分化成再生植株,若釋放出胚狀體,則不必轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基解析:選d確定花粉發(fā)育的時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法,有些植物花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青鉻礬法。在形成愈傷組織或胚狀體前,沒(méi)有葉綠素的形 成,不進(jìn)行光合作用,不需要光照;幼小植株形成后,開(kāi)始進(jìn)行光合作用,需要光照。花藥離體培養(yǎng)的不同階段,對(duì)主要營(yíng)養(yǎng)的需求不一樣,所以要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基。4玉米是一種重要的農(nóng)作物,為了提高玉米的產(chǎn)量,科學(xué)家在玉米育種和栽培中進(jìn)行了大量的研究。如圖所示是關(guān)于玉米培養(yǎng)的過(guò)程,據(jù)圖判斷下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()a從繁殖原理上分析,ad屬于無(wú)性繁殖b植株d和g
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