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文檔簡介

ABI7300使用方法-絕對定量1 打開電腦，待電腦完全打開后打開熒光定量機器，預(yù)熱十分鐘，期間布板子2 File-new 新建一個程序，進入界面做絕對定量時 ASSay 選擇 Standard Curve（Absolote Quantitation）做相對定量時 選擇 ddCt（Relative Quantitation）Plate做完相對定量時分析數(shù)據(jù)選擇ddCt（Relative Quantitation）Study 其他不用改Plate Name 一欄給板子命名 點擊“下一步” 不要點擊“完成”3初次做時選擇“New Detector”添加引物Name 一欄命名基因的名字 Reporter Dye 一欄選擇FAM Quencher Dye一欄選擇none Color一欄自己選顏色 其他內(nèi)容不選選擇Add 將命名的引物添加進去 以后做實驗就可以直接添加了右上角的Passive Reference 選擇 none (切記)點擊“下一步”4 布板 樣品選擇UnKnown標準質(zhì)粒選擇 Standard點擊完成4進入界面 點擊Setup-Plate 雙擊樣品加樣孔 在彈出的界面里 對樣品進行命名 其他不填 同理 雙擊標準質(zhì)粒加樣孔 Sample Name 對質(zhì)粒命名 注意在Quantity一欄寫上質(zhì)粒的拷貝數(shù) （切記）5 完成后點擊Insteument步驟程序 第一步 95攝氏度 十分鐘第二步 95攝氏度 5秒 65攝氏度 34秒 循環(huán) 40次 第三步 溶解曲線 修改Sample Volume 為20ul DateCollection 為Stage2，Step2（65 0:34）（熒光收集信號 切記要從循環(huán)那步開始，切記切記）6設(shè)好之后將程序保存 7 整完之后開始Start待出現(xiàn)運行時間后方可離開8 運行結(jié)束后 分析數(shù)據(jù) 點擊Results 里的Standard Curve 看標準曲線 可以將不正常的樣舍棄 打開Results里的 Plate 點擊

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