腦缺血模型總結(jié)PPT課件

.,1,腦缺血模型的發(fā)展,1986年，Koizumi等首先采用血管內(nèi)栓塞堵塞腦中動(dòng)脈開(kāi)口建立大鼠局灶性腦缺血模型(MCAO)。1989年，Longa等采用血管內(nèi)栓線阻塞法制備該模型。之后發(fā)展起來(lái)的還有雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法、開(kāi)顱機(jī)械閉塞法、微栓子栓塞阻斷法、化學(xué)刺激誘導(dǎo)血栓性閉塞法、光化學(xué)誘導(dǎo)血栓形成法等。綜合考慮操作難易度以及缺血效果等方面因素，運(yùn)用最為廣泛的是血管內(nèi)栓線法。,.,2,4VO全腦缺血法,麻醉動(dòng)物，電凝燒灼雙側(cè)椎動(dòng)脈；頸前分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈；分別結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)近端，并從中間剪斷，以確保阻斷動(dòng)脈血流。優(yōu)點(diǎn)：缺血模型狀態(tài)穩(wěn)定，成功率較高。缺點(diǎn)：對(duì)實(shí)驗(yàn)溫度要求較高，如控制不當(dāng)，大鼠易在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中死亡。,.,3,雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法,麻醉動(dòng)物，頸前分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈；分別結(jié)扎，結(jié)扎14min,以確保阻斷動(dòng)脈血流后縫合。優(yōu)點(diǎn)：操作較簡(jiǎn)單，對(duì)動(dòng)物的創(chuàng)傷較小。缺點(diǎn)：對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)要求較高，在分離迷走神經(jīng)時(shí)，若操作不當(dāng)，大鼠易在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中死亡。,.,4,開(kāi)顱法,麻醉動(dòng)物，耳眼連線的中點(diǎn)垂直切開(kāi)皮膚，通過(guò)鈍性分離顳肌，開(kāi)顱后暴露MCA，用電凝器橫過(guò)嗅束旁的MCA使其凝閉，用10號(hào)手術(shù)絲線結(jié)扎MCA，造成MCA支配區(qū)局灶性腦缺血模型。優(yōu)點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)條件恒定，缺血效果可靠，全身影響小，局部條件可控制。缺點(diǎn)：需要開(kāi)顱，創(chuàng)傷大，易感染。,.,5,光學(xué)法,將大鼠頭部固定于立體定位儀上，切開(kāi)皮膚，暴露顱骨，靜脈注射光敏材料虎紅酸鈉，用特定冷光源(500-600nm)照射切口處顱骨，光線透過(guò)顱骨與血管內(nèi)的光敏物質(zhì)接觸，激發(fā)光化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生單線態(tài)氧，直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞而誘導(dǎo)血栓形成。優(yōu)點(diǎn)：不開(kāi)顱，手術(shù)創(chuàng)傷小，動(dòng)物易長(zhǎng)時(shí)間存活，血栓形成過(guò)程與人類近似，適用于抗血小板、抗血栓及內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)藥物的急慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。缺點(diǎn)：較早地導(dǎo)致終未動(dòng)脈及微血管永久性閉塞，不利于擴(kuò)血管及促進(jìn)側(cè)支循環(huán)作用的研究。,.,6,栓塞法,麻醉動(dòng)物，將無(wú)菌干燥研碎篩濾的血凝塊、碳素顆粒、塑料顆粒、花生四烯酸鹽等作為栓塞劑，由頸外動(dòng)脈注入栓子后結(jié)扎，開(kāi)放CCA，栓子由頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)進(jìn)入MCA，造成以MCA供血區(qū)腦組織損傷為主的缺血模型。優(yōu)點(diǎn)：不用開(kāi)顱，操作較為簡(jiǎn)單。缺點(diǎn)：無(wú)法預(yù)測(cè)栓塞部位與大小，腦組織缺血不一，不利于神經(jīng)癥狀和腦組織定量分析。,.,7,Longas線栓法,麻醉動(dòng)物，頸部正中切口，暴露并結(jié)扎CCA和ECA，在CCA分叉處剪一小口，插入40手術(shù)絲線，進(jìn)入ICA1720mm,阻斷MCA起始端及其所有側(cè)枝供應(yīng)，在一定缺血時(shí)間后抽出絲線至CCA分叉處，進(jìn)行再灌注。,.,8,檢測(cè)指標(biāo),參照Z(yǔ)eaLong評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，分別于大鼠術(shù)后清醒時(shí)、再灌注開(kāi)始前后評(píng)分：0分：無(wú)神經(jīng)損害癥狀；1分：不能完全伸展左側(cè)前爪；2分：向左側(cè)轉(zhuǎn)圈；3分：行走時(shí)向左側(cè)傾倒；4分：不能自發(fā)行走。,.,9,Longas法的優(yōu)缺點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需開(kāi)顱，對(duì)動(dòng)物病理刺激小。模型重復(fù)穩(wěn)定性高，方法相對(duì)簡(jiǎn)單。,缺點(diǎn)：對(duì)動(dòng)物體重要求嚴(yán)格，一般在250-300g間，且絲線粗細(xì)要適中。,.,10,改良線栓法,方法步驟：僅分離并結(jié)扎頸總動(dòng)脈，于頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉處插入線栓，而不分離頸外動(dòng)脈和翼腭動(dòng)脈。優(yōu)點(diǎn)，能精確控制缺血和再灌注時(shí)間，模型損傷評(píng)價(jià)高。缺點(diǎn)：模型成功率高,.,11,二法比較,Longas法改良法神經(jīng)功能評(píng)分2.20.842.60.55模型制作時(shí)間30.834.6220.174.88成功率83.33%83.33%死亡率16.67%0梗死率（23.037.94）%（18.652.61）%,.,12,梗死灶區(qū)域比較,Longas傳統(tǒng)線栓法,改良線栓法,.,13,參考文獻(xiàn)1孫宇，嚴(yán)國(guó)鋒.改良線栓法大鼠中腦動(dòng)脈阻塞模型的建立J.中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2008,18（8）:8-102吳巍，王彥云等.開(kāi)心解郁湯對(duì)雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎大鼠行為學(xué)及腦血流量的影響J.中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2010，,12（4）：562-5643王軍，大鼠腦缺血模型研究進(jìn)展J.中醫(yī)研究，2003,15（5）:60-614WalsonBD，PraoloR，DietrichMD，eta1InductionofreproduciblebraininfarctionbyphotochemicallyinitiatedthrombosisJAnnNeurel，1985，17：4975張成英，陳前芬走置腦映血模型血管阻斷郝住的選擇四川解剖學(xué)雜志20008(3)：146_1496吳遠(yuǎn)華，朱廣旗，胡蓉.線栓法大鼠腦缺血