梅毒檢測(cè)

梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)梅毒血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略探討主要內(nèi)容梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的意義臨床服務(wù)篩查、確定現(xiàn)癥梅毒患者；判斷療效。梅毒篩查篩查梅毒感染者，盡早發(fā)現(xiàn)梅毒患者（保證安全用血預(yù)防經(jīng)血傳播病原體和抗體）流行病學(xué)監(jiān)測(cè)掌握梅毒流行趨勢(shì)；了解不同高危人群的梅毒感染率、發(fā)病率。概述梅毒病原體小而纖細(xì)的螺旋狀微生物長(zhǎng)520M，粗細(xì)2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒,病期越長(zhǎng)，傳染性越小發(fā)病機(jī)理入侵途徑在性行為過程中，蒼白螺旋體通過皮膚或黏膜微小損傷入侵機(jī)體，也能在妊娠過程中經(jīng)胎盤傳給胎兒。感染的播散感染后數(shù)小時(shí)，在臨床癥狀出現(xiàn)之前，梅毒螺旋體經(jīng)淋巴系統(tǒng)到達(dá)局部淋巴結(jié)，再經(jīng)血流擴(kuò)散至全身梅毒螺旋體在梅毒的任何時(shí)期均有可能侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)梅毒體液免疫IGM抗體感染梅毒后，首先產(chǎn)生IGM型抗梅毒螺旋體抗體，感染2周后即可測(cè)出早期梅毒治療39個(gè)月后，或晚期梅毒治療2年后，大部分病人IGM抗體轉(zhuǎn)陰再感染梅毒時(shí)，IGM抗體又重新出現(xiàn)IGM抗體出現(xiàn)是活動(dòng)性梅毒表現(xiàn)IGM抗體不能通過胎盤胎兒在宮內(nèi)感染梅毒螺旋體抗體后，在胚胎晚期69個(gè)月能合成IGM抗體新生兒或嬰兒檢出IGM抗體是診斷先天梅毒證據(jù)梅毒體液免疫IGG抗體感染梅毒第4周后產(chǎn)生IGG型抗梅毒螺旋體抗體IGG抗體可以持續(xù)存在梅毒治療后，梅毒螺旋體抗原消失很長(zhǎng)時(shí)間，IGG抗體仍可繼續(xù)產(chǎn)生，甚至終生可以檢出IGG抗體能通過胎盤新生兒出生后第3個(gè)月開始形成IGG抗體梅毒體液免疫反應(yīng)素REAGIN梅毒螺旋體破壞人體組織，在體內(nèi)釋放一種抗原性心磷脂，能刺激機(jī)體產(chǎn)生反應(yīng)素反應(yīng)素是具有抗體性質(zhì)的物質(zhì)，能與從牛心中提取的心磷脂發(fā)生抗原抗體反應(yīng)反應(yīng)素一般在感染后57周產(chǎn)生或硬下疳出現(xiàn)后23周產(chǎn)生反應(yīng)素在治療后可以逐步消失檢測(cè)反應(yīng)素可以評(píng)價(jià)治療效果概述梅毒的診斷梅毒的診斷必須依靠病史、癥狀及實(shí)驗(yàn)檢查進(jìn)行綜合分析。梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義。常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)病原學(xué)檢查原理一期、二期梅毒時(shí)，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式進(jìn)行檢測(cè)。方法病原學(xué)檢查的主要方法有暗視顯微鏡檢查、鍍銀染色法和直接熒光法病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、方便、易操作的特點(diǎn)。螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法，對(duì)于患者的早期診斷、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性，14梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒實(shí)驗(yàn)室檢查分類暗視野顯微鏡檢查梅毒血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)?zāi)X脊液檢查其它檢查直接熒光抗體檢查免疫熒光染色檢查病理檢查聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）蛋白質(zhì)印跡（WESTERNBLOT）暗視野顯微鏡檢查蒼白螺旋體可以通過普通光學(xué)顯微鏡觀察到，暗視野中可以通過典型特點(diǎn)確定，包括螺旋外形，1014個(gè)螺旋，螺旋狀運(yùn)動(dòng)方式，620微米長(zhǎng)度。一期梅毒硬下疳的潰瘍滲出物有大量的梅毒螺旋體二期梅毒肛周及外陰部的扁平濕疣表面分泌物中都有大量的梅毒螺旋體以玻片壓片后，滴加生理鹽水，在暗視野顯微鏡下可看到呈螺旋狀、活動(dòng)的螺旋體暗視野顯微鏡檢查暗視野檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)可立即確診（在一期和二期梅毒）快速檢測(cè)暗視野檢測(cè)的缺點(diǎn)需要有經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)鏡檢人員和專業(yè)設(shè)備（除特殊實(shí)驗(yàn)室外一般不具備）易與其他致病性和非致病性的螺旋菌混淆，一般不推薦用來檢測(cè)口腔皮損，因?yàn)榭谇恢写嬖诜侵虏⌒缘穆菪仨毩⒓寸R檢，因?yàn)槁菪w的運(yùn)動(dòng)性對(duì)確診有重要價(jià)值，隨著皮損愈合，暗視野檢測(cè)的敏感性降低局部使用香皂，水以及抗生素軟膏等會(huì)增加假陰性的可能性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)一般硬下疳出現(xiàn)23周才開始出現(xiàn)，78周后全部陽性，故早期血清反應(yīng)常是陰性非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)VDRL不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗(yàn)USR快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)RPR甲苯胺紅試驗(yàn)TRUST這些實(shí)驗(yàn)檢測(cè)非梅毒螺旋體抗體反應(yīng)素IGM和IGG抗體非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清實(shí)驗(yàn)的滴度通常與病情活動(dòng)相關(guān)，滴度改變四倍或者稀釋度改變兩倍（例如，從116到14或者18到132）具有臨床意義。在同一患者進(jìn)行連續(xù)的血清學(xué)檢測(cè)需采用同一種方法（例如，VDRL或RPR），并在同一實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。VDRL與RPR的結(jié)果均有效，但兩者結(jié)果不能直接比較，因?yàn)镽PR的滴度一般比VDRL的滴度稍高，TRUST結(jié)果與RPR相當(dāng)，USR與VDRL相當(dāng)。非梅毒螺旋體抗原檢測(cè)通常在治療后不陰轉(zhuǎn)，很多病人在治療后非梅毒螺旋體抗體在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持低滴度，有時(shí)會(huì)維持終身，稱為“血清固定”。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)非梅毒螺旋體血清抗原實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)快速，費(fèi)用低可以用血漿不用血清（RPR,TRUST）易于操作，可以在診室或辦公室進(jìn)行結(jié)果定量可以用來評(píng)估治療效果與再感染非梅毒螺旋體抗原血清實(shí)驗(yàn)的缺點(diǎn)對(duì)梅毒螺旋體無特異性，不能用于確證對(duì)某些梅毒不太敏感（早期梅毒，晚期潛伏梅毒，晚期梅毒）可發(fā)生假陽性反應(yīng)前帶現(xiàn)象，可造成假陰性結(jié)果。前帶現(xiàn)象的發(fā)生是因?yàn)檫^多的抗體抑制了陽性反應(yīng)，二期梅毒中發(fā)生較多。如果臨床上高度疑似二期梅毒，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)116稀釋血清并重復(fù)實(shí)驗(yàn)以排除前帶現(xiàn)象。梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)TPPA梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)TPHA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)EIA熒光螺旋體抗體吸收實(shí)驗(yàn)FTAABS直接檢測(cè)梅毒螺旋體抗體檢測(cè)結(jié)果即使在足量治療后通常終身不陰轉(zhuǎn)，梅毒螺旋體抗體滴度與病情活動(dòng)關(guān)系不大，不能用來評(píng)估治療效果梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)敏感性和特異性均高，用作證實(shí)試驗(yàn)一旦陽性，則不管治療與否或疾病是否活動(dòng)，通常終身保持陽性只有在治愈的一期梅毒患者中，約1525在23年后螺旋體抗原血清試驗(yàn)可以轉(zhuǎn)為陰性。主要作為確診試驗(yàn)，不能用于觀察療效、復(fù)發(fā)和再感染梅毒血清試驗(yàn)抗體產(chǎn)生的時(shí)間順序IGMFTAABS2周IGGTPHA/TPPA4周反應(yīng)素RPR/TRUST57周梅毒血清試驗(yàn)抗體陰轉(zhuǎn)時(shí)間IGMFTAABS陰轉(zhuǎn)最快一期梅毒治療后3個(gè)月100陰轉(zhuǎn)二期梅毒治療后9個(gè)月100陰轉(zhuǎn)早期潛伏梅毒治療后2年100陰轉(zhuǎn)反應(yīng)素RPR/TRUST陰轉(zhuǎn)其次二期梅毒治療后9個(gè)月273陰轉(zhuǎn)早期潛伏梅毒治療后2年384IGGTPHA/TPPA陰轉(zhuǎn)可終生陽性梅毒血清試驗(yàn)反應(yīng)的陽性曲線一期低二期高三期降低梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中均存在假陽性反應(yīng)引起非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)的因素技術(shù)性假陽性由于標(biāo)本的保存、轉(zhuǎn)送或操作技術(shù)不當(dāng)引起。生物學(xué)假陽性非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)所用抗原也存在其它組織中，檢測(cè)的梅毒病人體內(nèi)的反應(yīng)素，而其它疾病甚至極少數(shù)正常人也出現(xiàn)反應(yīng)素，故而陽性反應(yīng)發(fā)生率高，而梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)檢測(cè)的是梅毒螺旋體抗體，特異性高，發(fā)生假陽性率低。引起非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)的因素急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病麻疹風(fēng)疹水痘傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性肝炎上呼吸道感染猩紅熱肺炎球菌性肺炎病毒性肺炎牛痘疹其它如亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、活動(dòng)性肺結(jié)核、斑疹傷寒、絲蟲病、錐蟲病、瘧疾、鼠咬熱、回歸熱、鉤端螺旋體病等。引起非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)的因素急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的特點(diǎn)滴度低，一般低于18持續(xù)時(shí)間短，多在疾病消退后6日內(nèi)轉(zhuǎn)陰用梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)檢測(cè)呈陰性引起非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)的因素慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡盤狀紅斑狼瘡干燥綜合征類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎自家免疫性溶血性貧血橋本氏甲狀腺炎風(fēng)濕性心臟病慢性腎炎肝硬化系統(tǒng)性硬化癥毒品癮者孕婦老年麻風(fēng)病引起非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)的因素慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的特點(diǎn)可持續(xù)6個(gè)月以上，甚至終身。滴度低，一般低于18用梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)檢測(cè)呈陰性梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)假陽性發(fā)生率比非螺旋體抗原血清試驗(yàn)少假陽性發(fā)生的情況如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、盤狀紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、混合結(jié)締組織病、硬皮病、肝硬化、自身免疫性溶血性貧血、麻風(fēng)、結(jié)腸癌、生殖器皰疹、糖尿病、淋巴瘤、腦膜瘤、海洛因成癮者、妊娠等其它螺旋體感染品它、雅司。引起梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的假陽性反應(yīng)的因素梅毒血清反應(yīng)假陰性一期梅毒硬下疳一般硬下疳出現(xiàn)23周機(jī)體才開始出現(xiàn)抗梅毒螺旋體抗體及反應(yīng)素，78周后全部陽性，故早期血清反應(yīng)常是陰性。感染梅毒立即治療或晚期梅毒由于血清反應(yīng)素低，出現(xiàn)陰性。二期梅毒假陰性不到1的二期梅毒患者，其未稀釋血清非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)呈陰性或弱陽性反應(yīng)，而在高稀釋度后反而為陽性，即前帶現(xiàn)象，這是因?yàn)檠逯蟹磻?yīng)素過多，造成抗原抗體比例不適，抑制了陽性反應(yīng)的結(jié)果。合并HIV感染的梅毒患者其梅毒血清試驗(yàn)可呈陰性。技術(shù)操作或抗原敏感性的出現(xiàn)血清試驗(yàn)陰性。梅毒血清反應(yīng)假陰性腦脊液CSF檢查神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)診斷方法CSF檢查對(duì)神經(jīng)梅毒，尤其是無癥狀的神經(jīng)梅毒的診斷、治療及預(yù)后判斷均有幫助。腦脊液檢查指征對(duì)所有原因不明的神經(jīng)系統(tǒng)異常的梅毒患者病程超過一年梅毒合并HIV感染先天梅毒患兒應(yīng)檢查腦脊液。腦脊液檢查項(xiàng)目VDRL試驗(yàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)總蛋白測(cè)定膠體金試驗(yàn)等CSFVDRL試驗(yàn)是CSF的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)對(duì)神經(jīng)梅毒特異性較高，偶爾也出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，如脊髓癆病人。試驗(yàn)陽性，對(duì)神經(jīng)梅毒具有診斷意義如果CSFVDRL試驗(yàn)陰性，而臨床考慮為神經(jīng)梅毒，可使用CSF的梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)如FTAABS/TPHA，其敏感性高，但特異性不如CSFVDRL神經(jīng)梅毒患者CSFFTAABS均呈陽性，故CSFFTAABS為陰性，可排除神經(jīng)梅毒感染腦脊液檢查項(xiàng)目白細(xì)胞淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)正常人3106/L，如10106/L提示中樞神經(jīng)系統(tǒng)有炎癥。蛋白測(cè)定正常人總蛋白0104G/L神經(jīng)梅毒可升高至1020G/L，白蛋白和球蛋白比例改變，球蛋白升高。腦脊液檢查項(xiàng)目梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類1非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）2梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）兩類方法。問題1為什么梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷需要兩類血清學(xué)檢測(cè)方法非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理梅毒螺旋體一旦感染人體，宿主迅速對(duì)螺旋體表面的脂質(zhì)作出免應(yīng)答，在3周4周產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（反應(yīng)素）?？贵w主要是IGM和IGG混合抗體。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。問題2臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)煞N檢測(cè)方法非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)原理所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣方法包括（1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)RPR（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）（3）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)VDRL等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)原理VDRL試驗(yàn)USRRPR/TRUSTVDRL試驗(yàn)抗原組成003心磷脂021卵磷脂090膽固醇抗原需新鮮配制不能保存待檢血清需滅活目前主要用于腦脊液檢查顯微鏡觀測(cè)結(jié)果USR試驗(yàn)是VDRL試驗(yàn)的改良抗原組成同VDRL，另含（1）乙二胺四醋酸EDTA使抗原可長(zhǎng)期保存，能維持一年；（2）含有氯化膽堿對(duì)血清能起到化學(xué)滅活的作用不必加熱滅活（3）制成試劑盒使用方便RPR試驗(yàn)在USR試劑成分的基礎(chǔ)上加入黑色碳顆粒作為沉淀的指示物用白色的硬紙片替代玻片血清不需要滅活不需要顯微鏡觀測(cè)結(jié)果可作定量試驗(yàn)有現(xiàn)成的試劑盒攜帶方便操作簡(jiǎn)單價(jià)格便宜非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)原理TRUST其原理和成分與RPR試驗(yàn)相同用紅色的甲苯胺紅替代了碳顆粒其余的特點(diǎn)均與RPR相同非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理示意圖非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作要點(diǎn)1、儀器水平旋轉(zhuǎn)儀。2、定性試驗(yàn)加樣吸取005ML血清漿放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)加抗原將抗原輕輕搖勻，用9號(hào)針頭加1滴抗原反應(yīng)將卡片置水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘，立即在亮光下觀察結(jié)果3、定量試驗(yàn)稀釋夜準(zhǔn)備在圈內(nèi)加入50UL生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開。加樣吸取50UL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個(gè)圈內(nèi)。下同定性試驗(yàn)。RPRTRUSTVDRL非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果判斷滴度出現(xiàn)凝集反應(yīng)的血清最高稀釋倍數(shù)。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，VDRL試驗(yàn)抗體滴度下降2個(gè)稀釋度，6個(gè)月下降4個(gè)稀釋度。一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50病人血清反應(yīng)仍為陽性。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)臨床意義非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、快速、敏感性和特異性較好。適用于大量人群的篩查。早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周2周后，血清可呈陽性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)特點(diǎn)非梅毒患者的梅毒血清反應(yīng)呈陽性，此現(xiàn)象稱為梅毒血清反應(yīng)假陽性。技術(shù)性假陽性反應(yīng)由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。生物學(xué)假陽性反應(yīng)是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽性非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)特點(diǎn)梅毒假陽性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽性反應(yīng)，經(jīng)過重復(fù)試驗(yàn)即可除外。對(duì)急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)，應(yīng)做TPHA（TPPA）等試驗(yàn)進(jìn)行排除。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)特點(diǎn)前帶現(xiàn)象指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)了陽性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)特點(diǎn)耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理梅毒螺旋體特異蛋為抗原，檢測(cè)梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。問題3梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的定量試驗(yàn)在梅毒診療中有意義嗎梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)TPPA梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)TPHA梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）梅毒免疫層析法梅毒快速檢測(cè)RT熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTAABS）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）TPPA/TPHATPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相同。TPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒替代TPHA試驗(yàn)中致敏羊紅細(xì)胞，此致敏顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生可見的凝集反應(yīng)，具有較高的敏感性。明膠粒子為洋紅色，在操作部步上也較為方便，出結(jié)果較快。SHEEPREDCELLTPALLIDUMSENSITISEDCELLSENSITISEDCELLSPECIFICANTIBODYHEMAGGLUTINATIONTPPATPHA試驗(yàn)原理示意圖TPPA試驗(yàn)檢測(cè)流程試驗(yàn)前期準(zhǔn)備微量振蕩儀試劑檢查25L移液器、吸頭記號(hào)筆、廢物缸有蓋濕盒工作服一次性手套、口罩、帽子生物安全柜TPPA試驗(yàn)檢測(cè)流程使用前將試劑盒從冰箱中取出，室溫放臵30分鐘。在96孔U型板上編上相應(yīng)的待檢樣本的編號(hào)。按標(biāo)簽標(biāo)明量（06ML向每瓶?jī)龈芍旅袅Ｗ樱–液）和未致敏粒子（D液）各加入溶解用液（A液）復(fù)溶，臵室溫不得少于30分鐘。TPPA試驗(yàn)檢測(cè)流程每份標(biāo)本做4孔，加標(biāo)本稀釋液（B液）至U型反應(yīng)板，第1孔100L，第24孔各25L。用移液器取血清25L至第1孔，反復(fù)混勻后取25L至第2孔，連續(xù)倍比稀釋至第4孔，最后1孔混勻后棄去25L。第3孔加未致敏粒子D液25L，第4孔加致敏粒子C液25L將微量反應(yīng)板臵震蕩器震蕩30秒。臵微量反應(yīng)板于有蓋濕盒內(nèi)，37孵箱或室溫（1530）靜臵2小時(shí)后，觀察結(jié)果。TPPA試驗(yàn)檢測(cè)流程結(jié)果報(bào)告觀察加D液的第3孔，不出現(xiàn)凝集為有效試驗(yàn)。陽性第3孔不出現(xiàn)凝集，第4孔出現(xiàn)14凝集反應(yīng)。陰性第3、4孔均不產(chǎn)生凝集反應(yīng)。FTAABS試驗(yàn)FTAABS試驗(yàn)是檢測(cè)梅毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”試驗(yàn)。其原理是將有完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑（用REITER螺旋體制備而成）吸收過的梅毒患者血清形成抗原抗體復(fù)合物，再加入熒光素（FTIC）標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，與抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，形成熒光的抗原抗體復(fù)合物。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯出蘋果綠色的熒光，即為陽性反應(yīng)。FTAABS試驗(yàn)示意圖及結(jié)果TPELISA試驗(yàn)原理TPELISA試驗(yàn)是用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標(biāo)記物，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶聯(lián)檢測(cè)儀判定試驗(yàn)陽性反應(yīng)。本法可用于大規(guī)模血清檢測(cè)。梅毒免疫層析快速檢測(cè)方法梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的臨床意義梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)，它們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽性反應(yīng)是真陽性還是假陽性。一旦這些試驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的臨床意義試驗(yàn)特異性強(qiáng)，很少出現(xiàn)假陽性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在普通人群中，有1的生物學(xué)假陽性發(fā)生。如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清可使FTAABS試驗(yàn)呈假陽性反應(yīng)，但大多數(shù)病例中螺旋體呈串株?duì)顭晒狻魅拘詥魏思?xì)胞增多癥，可能由于嗜異性抗體所致，可使TPHA呈假陽性。麻風(fēng)患者也可使特異試驗(yàn)呈陽性。梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)臨床意義作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)如RPR等初篩陽性標(biāo)本的確證試驗(yàn)。梅毒患者經(jīng)過抗梅治療后，TPPA等梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)試驗(yàn)仍可陽性，故TPPA等試驗(yàn)陽性不能作為療效觀察的指標(biāo)。TPPA等陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行診斷。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果解釋示意圖早期晚期一期二期早期潛伏晚期潛伏三期治療前治療后陽性陰性梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果解釋示意圖早期一期二期早期潛伏晚期晚期潛伏三期治療前治療后陽性陰性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的臨床意義總匯RPRTPPATRUSTTPELISA臨床意義VDRLTPRT_排除梅毒（一期梅毒的早期）現(xiàn)癥梅毒梅毒孕婦所生的嬰兒除外生物學(xué)假陽性早期梅毒經(jīng)治療后（早早期梅毒）先天梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷方法依據(jù)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)診斷查到螺旋體其抗心磷脂抗體滴度持續(xù)上升其抗心磷脂抗體滴度高于其母親四倍檢測(cè)抗梅毒的IGM特異性抗體陽性隨訪18個(gè)月觀察抗體的變化梅毒檢測(cè)知識(shí)要點(diǎn)1梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)WS2732007代替GB159741995，梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則2梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原實(shí)驗(yàn)，梅毒螺旋體抗原實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)的是抗原還是抗體3非梅毒螺旋體抗原實(shí)驗(yàn)陽性標(biāo)示什么A現(xiàn)癥感染梅毒檢測(cè)知識(shí)要點(diǎn)B接受或未接受過治療的近期感染。C生物學(xué)假陽性，一般人群假陽性率13，但滴度14。4梅毒螺旋體抗原實(shí)驗(yàn)陽性可表示A現(xiàn)癥感染。B接受或未接受過治療的近期感染。C既往感染。梅毒檢測(cè)知識(shí)要點(diǎn)5梅毒診斷原則A必須根據(jù)病史；B臨床癥狀；C體檢；D實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)等E綜合分析，慎重作出診斷。測(cè)試題關(guān)于梅毒螺旋體，下列哪種說法是正確的可以在體外培養(yǎng)增代時(shí)間3033小時(shí)直徑03微米以上均正確測(cè)試題關(guān)于梅毒螺旋體，下列哪種說法是正確的可以在體外培養(yǎng)增代時(shí)間3033小時(shí)直徑03微米以上均正確測(cè)試題感染梅毒螺旋體后機(jī)會(huì)產(chǎn)生抗體的時(shí)間的順序依次是IGG、反應(yīng)素、IGM反應(yīng)素、IGG、IGMIGM、IGG、反應(yīng)素IGM、反應(yīng)素、IGG測(cè)試題感染梅毒螺旋體后機(jī)會(huì)產(chǎn)生抗體的時(shí)間的順序依次是IGG、反應(yīng)素、IG