水產(chǎn)動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、水產(chǎn)動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)水產(chǎn)動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一生理學(xué)實(shí)驗(yàn)及常用儀器介生理學(xué)實(shí)驗(yàn)及常用儀器介紹紹興奮與興奮性的觀察及分析興奮與興奮性的觀察及分析【目的要求【目的要求】1 1通過生理學(xué)實(shí)驗(yàn)及常用儀器介紹、了解生理學(xué)實(shí)驗(yàn)通過生理學(xué)實(shí)驗(yàn)及常用儀器介紹、了解生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本任務(wù)、內(nèi)容和方法，理解生理學(xué)既是一門理的基本任務(wù)、內(nèi)容和方法，理解生理學(xué)既是一門理論科學(xué)、又是一門實(shí)驗(yàn)科學(xué)的重要意義。論科學(xué)、又是一門實(shí)驗(yàn)科學(xué)的重要意義。2 2學(xué)習(xí)蛙類動物雙毀髓的實(shí)驗(yàn)方法學(xué)習(xí)蛙類動物雙毀髓的實(shí)驗(yàn)方法, ,掌握坐骨神經(jīng)掌握坐骨神經(jīng)- -腓腓腸肌標(biāo)本的制備方法。腸肌標(biāo)本的制備方法。3 3通過對組織興奮和興奮性的實(shí)驗(yàn)觀察

2、，加深對興奮通過對組織興奮和興奮性的實(shí)驗(yàn)觀察，加深對興奮與興奮性概念的理解。要求學(xué)會觀察神經(jīng)與興奮性概念的理解。要求學(xué)會觀察神經(jīng)肌肉標(biāo)肌肉標(biāo)本的興奮與興奮性，會分析興奮與興奮性的區(qū)別及本的興奮與興奮性，會分析興奮與興奮性的區(qū)別及相關(guān)聯(lián)系。相關(guān)聯(lián)系?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】一、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本原理及儀器介紹一、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本原理及儀器介紹常用的生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)常用的生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)張力換能器張力換能器神經(jīng)屏蔽盒神經(jīng)屏蔽盒血球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板 二、坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備二、坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備 三、組織興奮和興奮性的實(shí)驗(yàn)觀察三、組織興奮和興奮性的實(shí)驗(yàn)觀察o 依次分別用食鹽(化學(xué)刺激)、熱玻棒

3、(熱剌激），鋅銅弓（電化學(xué)刺激），以及小鑷子夾捏(機(jī)械刺激)坐骨神經(jīng)的中樞端觀察其反應(yīng)。再依次重復(fù)用刺激直接刺激腓腸肌，觀察其反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)二、骨骼肌的單收縮、復(fù)合收縮與強(qiáng)實(shí)驗(yàn)二、骨骼肌的單收縮、復(fù)合收縮與強(qiáng)直收縮直收縮 【目的要求【目的要求】1了解骨骼肌收縮的總和現(xiàn)象。了解骨骼肌收縮的總和現(xiàn)象。2觀察不同頻率的閾上刺激引起肌肉收縮形觀察不同頻率的閾上刺激引起肌肉收縮形式的改變。式的改變?！净驹怼净驹怼縪 兩個(gè)同等強(qiáng)度的閾上刺激，相繼作用于神經(jīng)-肌肉標(biāo)本，如果刺激間隔大于單收縮的時(shí)程，肌肉則出現(xiàn)兩個(gè)分離的單收縮；o 如果刺激間隔小于單收縮的時(shí)程，則出現(xiàn)兩個(gè)收縮反應(yīng)的重疊，稱為收縮的總和。o

4、 當(dāng)同等強(qiáng)度的連續(xù)閾上刺激作用于標(biāo)本時(shí)，出現(xiàn)多個(gè)收縮反應(yīng)的融合，稱為強(qiáng)直收縮。后一收縮發(fā)生在前一收縮的舒張期時(shí)，稱為不完全強(qiáng)直收。后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期時(shí)，各自的收縮完全融合，肌肉處于持續(xù)的收縮狀態(tài)，稱為完全強(qiáng)直收縮?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】1按實(shí)驗(yàn)按實(shí)驗(yàn)1的方法制備坐骨神的方法制備坐骨神經(jīng)經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本并將其固定在腓腸肌標(biāo)本并將其固定在肌槽上。以單脈沖刺激神經(jīng)，肌槽上。以單脈沖刺激神經(jīng)，記錄肌肉收縮曲線（圖記錄肌肉收縮曲線（圖2-12）。）。2刺激強(qiáng)度不變，以刺激強(qiáng)度不變，以1s的間隔的間隔輸出兩個(gè)單脈沖刺激標(biāo)本，輸出兩個(gè)單脈沖刺激標(biāo)本，肌肉則出現(xiàn)肌肉則出現(xiàn)兩個(gè)分離的單收縮，記錄收

5、縮曲兩個(gè)分離的單收縮，記錄收縮曲線。線。3用同等刺激強(qiáng)度，改變刺激用同等刺激強(qiáng)度，改變刺激間隔，刺激標(biāo)本，記錄肌肉間隔，刺激標(biāo)本，記錄肌肉收縮曲線。收縮曲線。實(shí)驗(yàn)三、神經(jīng)干動作電位觀察及神經(jīng)纖維實(shí)驗(yàn)三、神經(jīng)干動作電位觀察及神經(jīng)纖維興奮傳導(dǎo)速度的測定興奮傳導(dǎo)速度的測定 【目的要求【目的要求】1學(xué)習(xí)電生理儀的使用方法。學(xué)習(xí)電生理儀的使用方法。2觀察蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的基本波形，觀察蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的基本波形，并了解其產(chǎn)生的基本原理。并了解其產(chǎn)生的基本原理?！净驹怼净驹怼縪 神經(jīng)或肌肉發(fā)生興奮時(shí)，興奮部位發(fā)生電位變化，這種可擴(kuò)布性的電位變化即為動作電位。神經(jīng)的動作電位是神經(jīng)興奮的客觀指

6、標(biāo)。o 如將兩個(gè)引導(dǎo)電極分別置于正常完整的神經(jīng)干表面，動作電位先后通過兩個(gè)引導(dǎo)電極，可引導(dǎo)出兩個(gè)方向相反的電位偏轉(zhuǎn)，稱為雙相動作電位。o 如將兩引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)麻醉或損傷，動作電位只通過第一個(gè)電極引導(dǎo)出來，它只有一個(gè)方向的電位偏轉(zhuǎn)，稱為單相動作電位?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】1制備蟾蜍坐骨神經(jīng)干標(biāo)本，神經(jīng)干盡可能分離得長些。在制備過程中，要把神經(jīng)周圍的結(jié)締組織分離干凈，但勿損傷神經(jīng)標(biāo)本。2連接實(shí)驗(yàn)裝置： 連接電子刺激器、刺激隔離器、神經(jīng)屏蔽盒和示波器。注意：各儀器應(yīng)妥善接地，各儀器的連接應(yīng)接觸良好。3調(diào)節(jié)刺激器“強(qiáng)度” ，使其從0 逐漸增加。仔細(xì)觀察其波形。4根據(jù)掃描速度，測量從刺激偽跡至兩

7、個(gè)動作電位起始點(diǎn)之間的時(shí)間差（t）。5測量神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)兩對電極之間的距離（s），按公式v=s/t(m/s）計(jì)算神經(jīng)沖動傳導(dǎo)的速度。實(shí)驗(yàn)四、幾種動物血細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白實(shí)驗(yàn)四、幾種動物血細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白的測定的測定 【目的要求【目的要求】1、學(xué)習(xí)紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。、學(xué)習(xí)紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。2、掌握比色法測定血紅蛋白含量的方法。、掌握比色法測定血紅蛋白含量的方法。3、認(rèn)識物種間血液學(xué)差異。、認(rèn)識物種間血液學(xué)差異?！净驹怼净驹怼縪 血液中血細(xì)胞數(shù)的計(jì)算是使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。而且要用適當(dāng)?shù)娜芤簩⒀合♂尯?，放入?jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)，在顯微鏡下計(jì)算一定容積血液稀釋液中的血細(xì)胞個(gè)數(shù)，再將

8、所得結(jié)果換算為1ul 血液中的血細(xì)胞個(gè)數(shù)。o 測定血紅蛋白含量的方法很多，實(shí)驗(yàn)常用比色法。其原理是在一定量的血液中，血紅蛋白經(jīng)少量鹽酸的作用，使亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】o 測定血紅蛋白含量測定血紅蛋白含量1用滴管加0.1mol/LHCl 于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度10 處。2用血紅蛋白吸管的尖端接觸血滴，吸血至刻度20mm3 處（0.02ml）。3搖勻或用小玻璃棒攪勻后，放置10min，使鹽酸與血紅蛋白充分作用。4用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱相同為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100ml 血液血紅蛋白的克數(shù)。紅細(xì)胞、白細(xì)

9、胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)1采血及稀釋用吸管分別吸取0.38ml 白細(xì)胞稀釋液和3.98ml 紅細(xì)胞稀釋液放入試管內(nèi)備用。2、用血紅蛋白吸血管吸血至刻度20ul 處，將血液吹入分別盛有血細(xì)胞稀釋液的試管內(nèi)3計(jì)數(shù)血液稀釋液滴入計(jì)數(shù)室后，須靜置2-3min，然后在低倍顯微鏡下計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)白細(xì)胞時(shí)，數(shù)四角4 個(gè)大方格的白細(xì)胞總數(shù)；計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，數(shù)中央大方格的四角的4 個(gè)中方格和中央的一個(gè)中方格共5 個(gè)中方格的紅細(xì)胞總數(shù)。4計(jì)算白細(xì)胞數(shù)：將4 個(gè)大方格內(nèi)數(shù)得白細(xì)胞總數(shù)乘以50，即得每mm3 血內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)紅細(xì)胞數(shù)：將中央大方格中的5 個(gè)中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞總數(shù)乘以10，000，即得每mm3 血內(nèi)紅細(xì)胞總

10、數(shù)。實(shí)驗(yàn)五、蛙心起搏點(diǎn)觀察，期前收縮與代實(shí)驗(yàn)五、蛙心起搏點(diǎn)觀察，期前收縮與代償間歇償間歇 【目的要求【目的要求】1學(xué)習(xí)暴露蛙類心臟的方法，熟悉心臟的結(jié)學(xué)習(xí)暴露蛙類心臟的方法，熟悉心臟的結(jié)構(gòu)，觀察心臟各部分自動節(jié)律性活動的時(shí)相構(gòu)，觀察心臟各部分自動節(jié)律性活動的時(shí)相及頻率。及頻率。2觀察心室在收縮活動的不同時(shí)期對額外刺觀察心室在收縮活動的不同時(shí)期對額外刺激的反應(yīng)，了解心肌興奮性的變化及代償間激的反應(yīng)，了解心肌興奮性的變化及代償間歇的發(fā)生機(jī)理。歇的發(fā)生機(jī)理?！净驹怼净驹怼縪 兩棲類動物的心臟為兩心房、一心室。正常情況下，心臟的活動節(jié)律服從靜脈竇的節(jié)律，其活動順序?yàn)椋红o脈竇、心房、心室。這種有

11、節(jié)律的活動可以用機(jī)械方法或通過換能器記錄下來，稱為心搏曲線。o 心肌的機(jī)能特征之一是絕對不應(yīng)期幾乎占整個(gè)收縮期。在心室舒張期給以單個(gè)閾上刺激，則產(chǎn)生一次正常節(jié)律以外的收縮反應(yīng)，稱為期外收縮。在期外收縮之后，就會出現(xiàn)一個(gè)較長時(shí)間的間歇期，稱為代償間歇?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】蛙心起搏點(diǎn)觀察蛙心起搏點(diǎn)觀察1暴露心臟，觀察心臟的結(jié)構(gòu)2觀察心搏過程：仔細(xì)觀察靜脈竇、心房及心室收縮的順序和頻率。分別進(jìn)行斯氏第一結(jié)扎和斯氏第二結(jié)扎。待心室恢復(fù)搏動后，計(jì)數(shù)每分鐘心臟各部分的搏動次數(shù)。3記錄心搏曲線仔細(xì)觀察曲線各波與心臟各部位活動的關(guān)系。期前收縮與代償間歇期前收縮與代償間歇1將蟾蜍雙毀髓后暴露心臟，背位固定

12、于蛙板上。用系線的蛙心夾夾住少許心尖肌肉，將系線固定在通用杠桿上。連接張力換能器和生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。2開動生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，記錄正常心搏曲線作為對照。3選擇剛能引起心室發(fā)生期外收縮的刺激強(qiáng)度（于心室舒張期調(diào)試），分別在心室收縮的收縮期和舒張期給予單個(gè)刺激，觀察心搏曲線有無變化。4以同等刺激強(qiáng)度，分別在心室舒張的早期、中期和晚期給予單個(gè)刺激，觀察心搏曲線的變化。裝置圖和收縮波型裝置圖和收縮波型實(shí)驗(yàn)六、實(shí)驗(yàn)六、蛙心灌流及心血管活動的調(diào)節(jié)蛙心灌流及心血管活動的調(diào)節(jié) 【目的要求【目的要求】1學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法。學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法。2觀察觀察Na+、K+、Ca2+及腎上腺素、及腎上腺素、乙酰膽堿

13、等對離體心臟活動的影響。乙酰膽堿等對離體心臟活動的影響。【基本原理【基本原理】o 心肌具有自動節(jié)律性收縮活動的特性，可用人工灌流的方法研究心臟活動的規(guī)律及其特點(diǎn)，還可通過改變灌流液的成分或加入某些藥物來觀察其對心臟活動的影響?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】1離體蛙心的制備：斯氏蛙心插管法取一只蟾蜍或蛙，雙毀髓后背位置于蠟盤中，按 暴露心臟。將盛有少量任氏液（內(nèi)加入一滴肝素抗凝）的斯氏蛙心套管由此插入動脈圓錐。再將結(jié)線固定在套管的小玻璃鉤上。用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)余血，使灌流液不再有血液。保持套管內(nèi)液面高度恒定（1.52cm），即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2實(shí)驗(yàn)觀察(1)開動系統(tǒng)記錄正常心搏曲線。(2)向套管內(nèi)加

14、各種藥物，觀察心搏曲線的頻率及振幅的變化。每次當(dāng)曲線出現(xiàn)明顯變化時(shí)，立即吸去套管中的灌流液（作好沖洗標(biāo)記），用新鮮任氏液清洗23 次，待心搏恢復(fù)正常。實(shí)驗(yàn)七、消化道運(yùn)動的觀察及離體小腸平實(shí)驗(yàn)七、消化道運(yùn)動的觀察及離體小腸平滑肌的特性滑肌的特性 【目的要求【目的要求】1觀察消化道的在體運(yùn)動觀察消化道的在體運(yùn)動2了解哺乳動物離體腸段的一般生理特了解哺乳動物離體腸段的一般生理特性。性。3學(xué)習(xí)離體器官灌流的一種方法。學(xué)習(xí)離體器官灌流的一種方法?！净驹怼净驹怼縪 哺乳動物的胃腸平滑肌具有自動節(jié)律性收縮、伸展性、緊張性和對理化刺激較敏感等生理特性。這些特性對維持消化管一定壓力，保持胃腸等一定的形態(tài)

15、和位置，適合于消化管內(nèi)容物的理化變化具有生理意義。在整體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)觀察及記錄哺乳動物等離體腸段的一般特性及在一些藥物作用下引起的各種效應(yīng)?！痉椒ㄅc步驟【方法與步驟】1平滑肌離體灌流恒溫裝置、張力換能器和記錄儀。平滑肌離體灌流恒溫裝置、張力換能器和記錄儀。2水浴里的水恒溫水浴里的水恒溫37，營養(yǎng)管內(nèi)充滿臺氏液。，營養(yǎng)管內(nèi)充滿臺氏液。3用鐵錘擊兔或大白鼠的頭部，昏迷后，立即剖開腹腔，取出十用鐵錘擊兔或大白鼠的頭部，昏迷后，立即剖開腹腔，取出十二指腸至結(jié)腸間的腸段，剪成約二指腸至結(jié)腸間的腸段，剪成約34cm小段，放入室溫臺氏小段，放入室溫臺氏液內(nèi)輕輕沖洗，以除去腸的內(nèi)容

16、物。邊洗邊通入液內(nèi)輕輕沖洗，以除去腸的內(nèi)容物。邊洗邊通入O2，把腸段，把腸段夾入另一盛有新鮮臺氏液的培養(yǎng)皿內(nèi)，繼續(xù)通夾入另一盛有新鮮臺氏液的培養(yǎng)皿內(nèi)，繼續(xù)通O2備用。備用。4營養(yǎng)管內(nèi)的溶液保持營養(yǎng)管內(nèi)的溶液保持37，然后取出一小段腸，用縫針將腸的，然后取出一小段腸，用縫針將腸的一端穿線結(jié)扎（只結(jié)扎半邊腸腔）。結(jié)扎線系于通用杠桿或張一端穿線結(jié)扎（只結(jié)扎半邊腸腔）。結(jié)扎線系于通用杠桿或張力換能器上，腸的另一端則穿入一不銹鋼的力換能器上，腸的另一端則穿入一不銹鋼的S形小鉤，把小鉤形小鉤，把小鉤系于營養(yǎng)管底部的半月形彎鉤上，使腸段完全浸浴在臺氏液中，系于營養(yǎng)管底部的半月形彎鉤上，使腸段完全浸浴在臺氏液中，并立即通入并立即通入O2。調(diào)節(jié)杠桿或換能器的靈敏度后，讓腸段穩(wěn)定。調(diào)節(jié)杠桿或換能器的靈敏度后，讓腸段穩(wěn)定20min，便可以描記其活動曲線。，便可以描記其活動曲線。5依次加入各種藥物，觀察和記錄腸段運(yùn)動的變化。依次加入各種藥物，觀察和記錄腸段運(yùn)動的變化。裝置圖裝置圖實(shí)驗(yàn)八、胰島素驚厥實(shí)驗(yàn)八、胰島素驚厥 【目的要求【目的要求】了解胰島素調(diào)節(jié)血糖水平的機(jī)能。了解胰島素調(diào)節(jié)血糖水平的機(jī)能。【基本原理【基本原理】o 胰島素是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖的激素之一，當(dāng)胰島素是調(diào)