2種剪穎濕水去雄方法在水稻雜交中的效果分析

1、    2種剪穎濕水去雄方法在水稻雜交中的效果分析    陳宗祥+姜偉+左示敏+張亞芳摘要：以鎮(zhèn)稻88、揚(yáng)稻6號(hào)以及l(fā)emont為研究對象，在抽穗開花時(shí)選擇適宜的稻穗作母本，每穗選留50朵左右成熟度較好的穎花，在前一天下午及當(dāng)天早晨自然開花前，剪去穎花上部至剛好剪破花藥，采用澆淋和噴霧2種給水方法處理剪過的稻穗，父本開花時(shí)分別進(jìn)行不授粉、常規(guī)授粉和飽和授粉處理，10 d后考察各處理結(jié)實(shí)率。結(jié)果表明，不同時(shí)期剪穎對去雄效果沒有影響；2個(gè)品種噴霧給水去雄效果極顯著好于澆淋給水；品種間以lemont去雄效果最好，其次為揚(yáng)稻6號(hào)、鎮(zhèn)稻88；不同時(shí)期、2種給水方法

2、對雌蕊活性影響均不明顯。綜合分析，在水稻雜交實(shí)踐中，采用剪穎后噴霧給水去雄方法比較適宜，澆淋給水去雄方法在粳稻中應(yīng)慎重使用。關(guān)鍵詞：水稻；雜交；剪穎；飽和授粉：s511.035.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： a：1002-1302（2016）04-0118-03水稻雜交是新品種選育創(chuàng)造變異最重要途徑之一，而水稻是自花授粉作物，去雄是實(shí)現(xiàn)雜交最基本的環(huán)節(jié)，水稻雜交有多種去雄方法1-10。不同的方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，在眾多去雄方法中，剪穎濕水去雄法使用設(shè)備少、操作簡便，因而被廣大育種工作者采用。在實(shí)踐中，濕水去雄方法又被不斷地演變簡化，體現(xiàn)在給水方法上，有澆淋、噴霧甚至浸漫，不同方法去雄效果不盡相同。因此，筆者結(jié)合自

3、己的實(shí)踐，就剪穎濕水去雄中2種主要給水方法的去雄效果進(jìn)行試驗(yàn)分析，以期為育種工作者提供幫助。1 材料與方法1.1 試驗(yàn)材料去雄試驗(yàn)材料為粳稻品種鎮(zhèn)稻88、秈稻品種揚(yáng)稻6號(hào)、美國長粒粳稻品種lemont。授粉父本為粳稻品種連粳7號(hào)、秈稻品種明恢63。1.2 試驗(yàn)方法試驗(yàn)于2014年春季在海南陵水基地進(jìn)行，結(jié)合不同單位濕水去雄的實(shí)踐，采用澆淋和噴霧2種給水方法。澆淋即用飲料瓶裝清水對修剪過的稻穗進(jìn)行澆淋至稻穗濕潤，噴霧是用手持氣壓噴壺由上而下向修剪過的稻穗噴水至稻穗濕潤。整穗剪穎時(shí)間：秈稻分別在前一天17：00，當(dāng)天08：00、09：00、10：00時(shí)，粳稻則相應(yīng)時(shí)間分別后延0.5 h，剪穎時(shí)段分

4、別記為1、2、3、4。在田間選擇適宜的稻穗：秈稻抽出劍葉葉鞘3/4至4/5，粳稻抽出劍葉葉鞘4/5至全部，且頂部有部分穎花已開過。用剪刀剪去頂部已開過的穎花和基部幼嫩的穎花，每穗保留穎花5060粒，對保留的穎花剪去上部穎殼，剪穎以剛好剪破花藥為準(zhǔn)，然后進(jìn)行澆淋或噴霧處理，510 min后套袋隔離，每穗1袋。同一時(shí)間同一濕水處理，2個(gè)穗套袋自交，2個(gè)穗套袋飽和授粉，2個(gè)穗套袋一般雜交授粉。剪穎當(dāng)日授粉前，彈去母本穗殘留花藥。飽和授粉的父本為明恢63，父本盛花時(shí)每個(gè)紙袋剪5個(gè)左右父本穗授粉，至母本每朵穎花目測可見黏滿黃色的花粉。一般雜交授粉的父本為連粳7號(hào)，父本盛花時(shí)，剪父本穗授粉，結(jié)合一般雜交習(xí)

5、慣，每個(gè)紙袋剪2個(gè)父本穗授粉，父本穗大小及抽出程度基本一致，盡可能減少雜交授粉量差異。授粉后用紙袋頂部封口。授粉后10 d，剪下套袋穗，逐穗調(diào)查結(jié)實(shí)數(shù)（子房膨大即視為結(jié)實(shí)）、總粒數(shù)，計(jì)算自交結(jié)實(shí)率、雜交結(jié)實(shí)率和偽雜種率，偽雜種率=同一處理自交結(jié)實(shí)率/雜交結(jié)實(shí)率×100%。采用dps 14.50軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。2 結(jié)果與分析2.1 去雄效果分析2.1.1 不同時(shí)間剪穎給水去雄效果 從前一天下午至當(dāng)天上午自然開花前共4個(gè)時(shí)間段剪穎，同一品種同一種給水方法不同時(shí)段自交結(jié)實(shí)率之間沒有明顯差異（表1），說明剪穎給水處理時(shí)間對去雄效果沒有影響。2.1.2 2種給水方法去雄效果 上述結(jié)果分

6、析已表明，不同時(shí)段剪穎給水處理對去雄效果沒有明顯影響。將剪穎時(shí)段作為重復(fù)處理，同一品種不同給水方法之間兩兩成對比較，表2結(jié)果表明，鎮(zhèn)稻88和揚(yáng)稻6號(hào)4個(gè)時(shí)段澆淋給水平均自交結(jié)實(shí)率均極顯著高于噴霧給水自交結(jié)實(shí)率，而lemont 2種給水方法自交結(jié)實(shí)率差異不顯著。說明對于鎮(zhèn)稻88和揚(yáng)稻6號(hào)2個(gè)品種，澆淋給水去雄效果極顯著小于噴霧給水去雄效果。這可能是因?yàn)榧舴f后留下的缺口本身較小，澆淋給水由于水的表面張力，個(gè)別穎花澆水不一定能滲透進(jìn)入浸濕花藥，而噴霧給水由于正對著穎花缺口，有一定的壓力促使水霧較好地進(jìn)入浸濕花藥，從而使花粉粒吸水脹破，失去活性。2.1.3 同一種給水方法對不同品種去雄效果 比較同一種

7、給水方法不同品種間平均自交結(jié)實(shí)率，無論是澆淋還是噴霧，品種間自交結(jié)實(shí)率差異都達(dá)到極顯著水平，其中鎮(zhèn)稻88自交結(jié)實(shí)率最高，lemont自交結(jié)實(shí)率最低，說明給水去雄效果受品種本身特性影響，對鎮(zhèn)稻88的去雄效果最差，而對lemont的去雄效果最好（表3）。可能是因?yàn)閘emont本身花藥比較瘦小，剪穎后穎殼內(nèi)空間較大，有利于給水駐留，使花粉粒充分吸水膨脹，比較而言，粳稻品種鎮(zhèn)稻88剪穎后穎殼內(nèi)空間較小，給水有可能被阻塞在表面，使部分花藥（花粉粒）吸不到水分。2.2 對雌蕊活性的影響從前一天下午至當(dāng)天上午自然開花前共4個(gè)時(shí)段剪穎，同一品種同一種給水方法不同時(shí)段飽和授粉結(jié)實(shí)率沒有明顯差異（表4）；同一品種

8、不同給水方法之間飽和授粉雜交結(jié)實(shí)率也沒有明顯差異（表5），并且鎮(zhèn)稻88和揚(yáng)稻6號(hào)的飽和授粉雜交結(jié)實(shí)率均在98.0%及以上，lemont的在96.0%以上，說明剪穎給水處理對這3個(gè)品種的雌蕊活性沒有影響或影響極小。2.3 正常授粉雜交效果分析2.3.1 正常授粉雜交結(jié)實(shí)率 根據(jù)一般雜交習(xí)慣，每袋剪2個(gè)父本穗授粉，不同時(shí)段剪穎給水雜交結(jié)實(shí)率沒有明顯差異（表6），同一品種2種給水方法雜交結(jié)實(shí)率也沒有明顯差異（表略）。噴霧給水3個(gè)品種雜交結(jié)實(shí)率差異不顯著，而澆淋給水3個(gè)品種雜交結(jié)實(shí)率差異達(dá)極顯著水平，其中鎮(zhèn)稻88雜交結(jié)實(shí)率最高（表7），這可能與澆淋給水時(shí)鎮(zhèn)稻88和揚(yáng)稻6號(hào)都有一定的自交結(jié)實(shí)（表3）有關(guān)

9、。 2.3.2 正常授粉偽雜種率 根據(jù)同一時(shí)段同一剪穎給水處理2穗平均自交結(jié)實(shí)率和正常授粉2穗平均雜交結(jié)實(shí)率計(jì)算獲得的偽雜種率見表8，可見同一品種同一給水方法不同時(shí)間剪穎給水處理偽雜種率沒有明顯規(guī)律。同一品種不同給水處理，鎮(zhèn)稻88和揚(yáng)稻6號(hào)澆淋給水的偽雜種率顯著或極顯著大于噴霧給水的偽雜種率，而lemont 2種給水方法間偽雜種率差異不顯著（表9）。同一種給水處理，鎮(zhèn)稻88偽雜種率最高，lemont偽雜種率最低，3個(gè)品種間偽雜種率差異達(dá)極顯著水平，2種給水方法表現(xiàn)相同的趨勢（表10）。3 小結(jié)與討論一種好的去雄方法，既能夠徹底去雄，又不影響雌蕊活性。本試驗(yàn)結(jié)果表明，剪穎后澆淋和噴霧2種給水方法

10、對雌蕊活性都沒有影響或影響極小，而噴霧給水的去雄效果極顯著好于澆淋給水。盡管品種間表現(xiàn)有差異，噴霧給水處理自交結(jié)實(shí)率最高的鎮(zhèn)稻88也只有2.39%，按照一般的雜交習(xí)慣，剪父本穗授粉雜交結(jié)實(shí)率在50%左右時(shí)，噴霧給水偽雜種率最高的鎮(zhèn)稻88不到5%；相應(yīng)地，如果授粉充分雜交結(jié)實(shí)率提高，偽雜種率還會(huì)降低，這樣的偽雜種率在雜交育種中可以被接受，少量的偽雜種在雜種一代可通過種植母本對照或同一母本不同組合相鄰種植鑒別去除。澆淋給水時(shí)，鎮(zhèn)稻88的自交結(jié)實(shí)率超過5%，一般授粉雜交偽雜種率超過10%，顯然偏高，而lemont的偽雜種率則較低，揚(yáng)稻6號(hào)的偽雜種率也只有5.97%，也就是說，澆淋給水去雄效果品種間差

11、異比較大，一般秈稻品種可以使用，粳稻品種應(yīng)慎重使用。實(shí)質(zhì)上，去雄效果還與給水次數(shù)（量）以及剪穎多少等因素有關(guān)，本試驗(yàn)剪穎后1次給水，即澆淋或噴霧至稻穗濕潤，澆淋給水去雄效果相對較差，筆者在進(jìn)行這一試驗(yàn)的同時(shí)，部分育種雜交組合采用2次澆淋給水（剪穎后立即給水，相隔0.5 h后第2次給水），部分雜交組合在澆淋給水時(shí)邊澆淋邊擠壓稻穗（擠壓過程中穎殼張合有利于水分進(jìn)入其中浸潤花藥），使稻穗充分濕潤，部分雜交組合在噴霧給水過程中邊噴霧邊擠壓稻穗，每種處理雜交組合均在20個(gè)以上，這些組合在2014年正季種植過程中均未發(fā)現(xiàn)偽雜種，說明擠壓等輔助措施提高了去雄效果。余飛宇等研究表明，隨著穎殼剪去部分所占比例的

12、增大，剪穎噴水處理“2034”自交結(jié)實(shí)率逐漸下降，以花藥為標(biāo)準(zhǔn)，剪去花藥的2/3 后再噴水，既能有效殺雄又能有效結(jié)實(shí)10。綜上所述，筆者認(rèn)為，剪穎濕水去雄是可行的去雄方法，其在水稻自然開花前任何時(shí)間都可進(jìn)行，但在實(shí)踐中不宜一味簡化，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：（1）剪穎時(shí)要同時(shí)剪破花藥，便于花粉粒吸水脹破；（2）給水方法以噴霧給水效果最好，在噴霧或澆淋給水時(shí)，增加給水量以及結(jié)合擠壓稻穗等輔助措施，可達(dá)到徹底去雄的效果；（3）授粉前彈去殘留花藥，有利于柱頭接受父本花粉，提高結(jié)實(shí)率。參考文獻(xiàn)：1張集文. 水稻溫水殺雄雜交方法的改進(jìn)j. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，1987（6）：9.2黃治平. 水稻雜交方法的一些改進(jìn)j. 農(nóng)業(yè)科技通訊，1979（5）：4.3周根友，陳啟康，夏 華，等. 水稻雜交方法及其新技術(shù)研究應(yīng)用j. 四川農(nóng)業(yè)科技，2005（12）：14-15.4王 忠. 水稻雜交方法靠交法j. 農(nóng)業(yè)科技通訊，1993（1）：4-5.5王 忠，顧蘊(yùn)潔. 水稻室內(nèi)雜交法j. 種子科技，1993（5）：31-32.6徐國生，譚文兵. 水稻雜交剪穎溫湯去雄方法的研究j. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，1983（3）：17-18.7張鳳鳴，胡 偉. 有關(guān)水稻雜交方法的介紹j. 農(nóng)業(yè)科學(xué)通訊，1956（7）：434-435.8向花香. 淺論水稻雜交技術(shù)的改進(jìn)j. 中國稻米，2010，1