艾滋病病毒抗體篩查快速法SOP文件

1、XXXXXX作 業(yè) 指 導 書文件名稱：艾滋病病毒抗體篩查快速硒(金)標法受 控 號：XXXXX 擬制部門：檢驗科 擬 制 人：XXX 審 核 人：XXX 批 準 人：XXX 發(fā)布日期：2021年9月20日 實施日期：2021年9月20日XXXXX文件編號：XXXXXX文件名稱：艾滋病病毒抗體篩查快速硒(金)標法第 1 頁 共 3 頁 第 1 版 第 2 次 修訂1 目的按統(tǒng)一標準的正確實驗方法進行實驗，有利于本實驗室人員提高檢測結(jié)果的準確性、可靠性、可比性和工作效率，確保檢測工作順利進行和檢測結(jié)果質(zhì)量。2 適用范圍 艾滋病確證實驗室工作人員有關(guān)艾滋病病毒抗體篩查快速硒（金）標法試驗。3 職責

2、3.1 檢測人員執(zhí)行本規(guī)程。3.2 監(jiān)督員負責規(guī)程執(zhí)行情況的檢查和監(jiān)督。3.3 科室主任負責對違規(guī)情況進行查處，并進行跟蹤糾正。4 測試步驟（以萬孚試劑為例）4.1預期用途本產(chǎn)品用于體外定性檢測全血、血清、血漿中的HIV1/2抗體。艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合癥（Acquired immunodefiency syndrome,AIDS）,是由人類免疫缺陷病毒（Human immunodefiency virus,HIV）感染所引起的一種具有嚴重傳染性的免疫缺陷性疾病。其主要攻擊人體的輔助T淋巴細胞系統(tǒng)，一旦侵入機體細胞，就會導致免疫系統(tǒng)失去抵抗力，從而導致各種疾病及癌癥得以在人體內(nèi)生存。從感

3、染艾滋病病毒到發(fā)病有一個完整的自然過程，臨床上將這個過程分為四期：急性感染期、潛伏期、艾滋病前期、典型艾滋病期。艾滋病的主要傳播途徑有性接觸傳播、血液傳播、母嬰傳播。目前，血清學實驗室是HIV實驗室診斷的主要依據(jù)。艾滋病實驗室診斷技術(shù)還包括HIV P24抗原測定、病毒分離、HIV病毒載量測定、HIV核酸檢測和CD4細胞計數(shù)等。這些方法或作為抗體檢測方法的補充用作輔助診斷，或作為判斷預后和指導治療用藥的依據(jù)。本品應用膠體金免疫層析技術(shù)，適用于人類免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。4.2檢驗原理XXXXXXX文件編號： XXXXXXXX文件名稱：艾滋病病毒抗體篩查快速硒(金)標法第 1 頁 共 3 頁

4、第 1 版 第 2 次 修訂本品利用膠體金免疫層析技術(shù)，采用雙抗原夾心法檢測HIV1/2抗體。當待檢測樣本中含有HIV1/2抗體且抗體濃度等于或高于最低檢出限時，HIV1/2抗體先和金標抗原（Ag-Au）形成反應復合物Ab-Ag-Au，由于層析作用反應復合物沿著硝酸纖維膜向前移動，當遇到檢測區(qū)（T）包被HIV1/2重組抗原時，形成Ag-Ab-Ag-Au復合物，在檢測區(qū)上最終形成一條紅色反應線，此時結(jié)果為陽性；相反，當樣本不含HIV1/2抗體且抗體或者抗體濃度低于最低檢出限時，則檢測區(qū)無紅色反應線出現(xiàn)，此時結(jié)果為陰性。質(zhì)控區(qū)（C）包被抗鼠IgG多克隆抗體，與膠體金標記的鼠IgG反應形成紅色反應線

5、作為質(zhì)控。4.3主要組成成分 試劑盒由測試卡、稀釋液和吸管組成。4.3-1測試卡由試紙條、塑料盒組成，試紙條上的主要成分有：4.3-1.1 HIV1/2重組抗原gp41、gp120、gp36(固定在硝酸纖維素膜T區(qū))；4.3-1.2 抗鼠IgG多克隆抗體(固定在硝酸纖維素膜C區(qū))；4.3-1.3 膠體金標記的HIV1/2重組抗原gp41、gp120、gp36（固定在玻璃纖維上）；4.3-1.4 膠體金標記的鼠IgG（固定在玻璃纖維上）；4.3-1.5 其他試紙條支持物。4.3-2 稀釋液為磷酸鹽緩沖液（PBS）(0.1M,pH7.2±0.2)。4.4 儲存條件及有效期4-30保存，有

6、效期24個月。鋁箔袋開封后，測試卡應在1小時內(nèi)盡快使用；稀釋液使用后應立即加蓋，并置于陰涼處或冰箱內(nèi)，請在有效期內(nèi)使用。 生產(chǎn)日期和失效日期：見產(chǎn)品標簽。4.5 樣本要求全血、血清、血漿標本均可用于測試。全血收集：采用抗凝管采血，或在采血管里先加入抗凝劑（抗凝劑種類為肝素、EDTA、檸檬酸鈉或草酸鉀），將采集血樣加入并搖勻備用。指尖、耳垂末梢或靜脈樣本采集后應盡量于1小時內(nèi)進行檢測，如不能立即檢測，應置于2-8冷藏，7天以上的全XXXXXXXXX文件編號： XXXXXXX文件名稱：艾滋病病毒抗體篩查快速硒(金)標法第 1 頁 共 3 頁 第 1 版 第 2 次 修訂血樣本不適用于該試劑。血清、

7、血漿收集：取血后應盡快分離血清、血漿，以免溶血。分離后的血清、血漿樣本應盡快進行測試，如不能及時測試可將樣本置4冰箱貯存；超過3天應置-20冷凍保存，測試前注意恢復至室溫。4.6檢驗方法測試前請仔細閱讀使用說明書，測試應在室溫下進行。4.6.1沿鋁箔袋切口部位撕開，取出測試卡平放于臺面上，并做好標記。4.6.2用吸管吸取血清、血漿樣本然后垂直加入2-3滴（約60µI）于加樣孔中，若樣本粘稠不易爬出，可滴加1滴稀釋液；若為全血樣本，則用吸管吸取全血，垂直加入2-3滴（約60µI）于加樣孔中，同時滴加1滴稀釋液。4.6.3 1-30分鐘觀察顯示結(jié)果；30分鐘后顯示的結(jié)果無臨床意

8、義。4.7檢驗結(jié)果的解釋 陽性：兩條紅色反應線，即在檢測區(qū)（T）及質(zhì)控區(qū)（C）各出現(xiàn)一條紅色反應線。陰性：一條紅色反應線，即僅在質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紅色反應線。無效：質(zhì)控區(qū)（C）無紅色反應線出現(xiàn)，檢測無效，建議此時用新測試卡重新測試。4.8 檢驗方法的局限性4.8.1本試劑盒僅供檢測人全血、血清、血漿。4.8.2樣本若存在個別藥物或操作及技術(shù)上的原因，可能會造成結(jié)果異常；若結(jié)果可疑，請重新測試。4.8.3該測試卡僅對樣本中的人類免疫缺陷病毒抗體提供定性檢測。需要檢測某一指標的具體含量請借助相關(guān)的專業(yè)儀器。4.8.4陽性結(jié)果僅表示樣本中HIV1/2抗體的存在，而不能作為機體感染HIV1/2的唯一

9、標準。檢測結(jié)果必須結(jié)合其它臨床癥狀進行診斷。4.8.5測試結(jié)果呈陰性但有臨床癥狀存在，建議使用其它臨床方法進行測試。陰性結(jié)果并不能完全排除感染HIV1/2的可能性。5.6實驗完成XXXXXXXXXX文件編號： XXXXXXX文件名稱：艾滋病病毒抗體篩查快速硒(金)標法第 1 頁 共 3 頁 第 1 版 第 2 次 修訂5.6.1將廢棄測試紙條等放入實驗室內(nèi)廢棄物處理袋內(nèi)，待高壓滅菌消毒。5.6.2用0.5%的次氯酸鈉或75%的酒精消毒工作臺。5.7質(zhì)控5.7.1為確保檢測結(jié)果有效,技術(shù)人員必須嚴格按照試劑說明書操作。5.7.2操作人員必須經(jīng)過專業(yè)培訓且有較好的視力、環(huán)境光線以準確判斷弱陽性結(jié)果。5.7.3凍存樣品測試前需充分融化、加樣前混勻，如果需要可以離心。5.7.4結(jié)果判定時，質(zhì)控帶必須出現(xiàn)而且樣品帶處必須有完整的紅色條帶。5.8記錄5.8.1所有樣品測試結(jié)束時必須及時作實驗原始記錄。6. 支持文件 6.1 HIV抗體快速診斷試劑盒說明書。6.2 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（202