中藥新藥安全性評(píng)價(jià)VIP

1、整理ppt中藥新藥安全性評(píng)價(jià)中藥新藥安全性評(píng)價(jià)技術(shù)與方法技術(shù)與方法整理ppto 毒理學(xué)毒理學(xué)o 藥物毒理學(xué)藥物毒理學(xué)o 新藥安全性評(píng)價(jià)新藥安全性評(píng)價(jià)中藥新藥急性毒性試驗(yàn)中藥新藥急性毒性試驗(yàn)中藥新藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中藥新藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中藥新藥一般藥理學(xué)試驗(yàn)中藥新藥一般藥理學(xué)試驗(yàn)中藥注射劑過敏、刺激、溶血性試驗(yàn)中藥注射劑過敏、刺激、溶血性試驗(yàn)其他其他整理ppt中藥新藥注冊(cè)分類中藥新藥注冊(cè)分類 1 1、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效成分及其制劑。、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效成分及其制劑。2 2、新發(fā)現(xiàn)的藥材及其制劑。、新發(fā)現(xiàn)的藥材及其制劑。3 3、新的

2、中藥材代用品。、新的中藥材代用品。4 4、藥材新的藥用部位及其制劑。、藥材新的藥用部位及其制劑。5. 5. 未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效部位及其制劑未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效部位及其制劑 國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中未收載的從單一植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的一類或國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中未收載的從單一植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的一類或數(shù)類成份組成的有效部位及其制劑，其有效部位含量應(yīng)占提取物的數(shù)類成份組成的有效部位及其制劑，其有效部位含量應(yīng)占提取物的5050以上。以上。6. 6. 未在國(guó)內(nèi)上市銷售的中藥、天然藥物復(fù)方制劑未在國(guó)內(nèi)上市銷售的中藥、天然藥物復(fù)方制劑6

3、.16.1中藥復(fù)方制劑；中藥復(fù)方制劑； 6.26.2天然藥物復(fù)方制劑；天然藥物復(fù)方制劑； 6.36.3中藥、天然藥物和化學(xué)藥品組成的復(fù)方制劑。中藥、天然藥物和化學(xué)藥品組成的復(fù)方制劑。7 7、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售中藥、天然藥物給藥途徑的制劑。、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售中藥、天然藥物給藥途徑的制劑。8 8、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售中藥、天然藥物劑型的制劑、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售中藥、天然藥物劑型的制劑9 9、已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的中藥、天然藥物。、已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的中藥、天然藥物。整理ppt藥品屬性三原則藥品屬性三原則 安全性安全性 有效性有效性 質(zhì)量穩(wěn)定可控質(zhì)量穩(wěn)定可控 整理ppt中藥、天然藥物申報(bào)資料：中藥、天然藥物申報(bào)資

4、料：綜述資料綜述資料 1、藥品名稱。 2、證明性文件。 3、立題目的與依據(jù)。 4、對(duì)主要研究結(jié)果的總結(jié)及評(píng)價(jià)。 5、藥品說明書樣稿、起草說明及最新參考文獻(xiàn)。 6、包裝、標(biāo)簽設(shè)計(jì)樣稿。整理ppt中藥、天然藥物申報(bào)資料：中藥、天然藥物申報(bào)資料：藥學(xué)研究資料藥學(xué)研究資料 7、藥學(xué)研究資料綜述。 8、藥材來源及鑒定依據(jù)。 9、藥材生態(tài)環(huán)境、生長(zhǎng)特征、形態(tài)描述、或培植（培育）技術(shù)、產(chǎn)地加工和炮制方法 10、藥材標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說明，并提供藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及有關(guān)資料。 11、提供植、礦物標(biāo)本，植物標(biāo)本應(yīng)當(dāng)包括花、果實(shí)、種子等。 12、生產(chǎn)工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料，輔料來源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 整理ppt中藥、天然藥物申

5、報(bào)資料：中藥、天然藥物申報(bào)資料：藥學(xué)研究資料藥學(xué)研究資料 13、確證化學(xué)結(jié)構(gòu)或組分的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 14、質(zhì)量研究工作的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 15、藥品標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說明，并提供藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及有關(guān)資料。 16、樣品檢驗(yàn)報(bào)告書。 17、藥物穩(wěn)定性研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 18、直接接觸藥品的包裝材料和容器的選擇依據(jù)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 整理ppt中藥、天然藥物申報(bào)資料：中藥、天然藥物申報(bào)資料：藥理毒理研究藥理毒理研究 1919、藥理毒理研究資料綜述。、藥理毒理研究資料綜述。2020、主要藥效學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、主要藥效學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。2121、一般藥理研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、一般藥

6、理研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。2222、急性毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、急性毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。2323、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。2424、過敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮膚、粘、過敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮膚、粘膜、肌肉等）刺激性、依賴性等主要與局部、全身給藥相關(guān)的特殊安全性膜、肌肉等）刺激性、依賴性等主要與局部、全身給藥相關(guān)的特殊安全性試驗(yàn)資料和文獻(xiàn)資料。試驗(yàn)資料和文獻(xiàn)資料。2525、致突變?cè)囼?yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、致突變?cè)囼?yàn)資料及文獻(xiàn)資料。2626、生殖毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、生殖毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。27

7、27、致癌試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。、致癌試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。2828、動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料、動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料 。 整理ppt中藥、天然藥物申報(bào)資料：中藥、天然藥物申報(bào)資料：臨床試驗(yàn)資料臨床試驗(yàn)資料 29、臨床試驗(yàn)資料綜述。 30、臨床試驗(yàn)計(jì)劃與方案。 31、臨床研究者手冊(cè)。 32、知情同意書樣稿、倫理委員會(huì)批準(zhǔn)件。 33、臨床試驗(yàn)報(bào)告。整理ppt 急性毒性試驗(yàn)：動(dòng)物單次或急性毒性試驗(yàn)：動(dòng)物單次或2424小時(shí)內(nèi)多次接受一定劑量小時(shí)內(nèi)多次接受一定劑量的受試物，動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的毒性反應(yīng)。的受試物，動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的毒性反應(yīng)。 急性毒性試驗(yàn)主要包括：急性毒性試驗(yàn)主要包

8、括：l 半數(shù)致死量（半數(shù)致死量（LD50LD50）試驗(yàn)）試驗(yàn) l 最大給藥量試驗(yàn)最大給藥量試驗(yàn)l 最大耐受量試驗(yàn)最大耐受量試驗(yàn)l 近似致死劑量試驗(yàn)近似致死劑量試驗(yàn)一、中藥新藥急性毒性試驗(yàn)一、中藥新藥急性毒性試驗(yàn)整理ppto 定性觀察：定性觀察：包括動(dòng)物體重變化、飲食、外觀、行為、包括動(dòng)物體重變化、飲食、外觀、行為、分泌物、排泄物、動(dòng)物異常反應(yīng)的癥狀、起始時(shí)間、分泌物、排泄物、動(dòng)物異常反應(yīng)的癥狀、起始時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆以及動(dòng)物死亡情況嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆以及動(dòng)物死亡情況o 定量指標(biāo)：定量指標(biāo)： 半數(shù)致死量（半數(shù)致死量（LD50LD50） 近似致死劑量（近似致死劑量（ALD

9、ALD） 最大耐受量（最大耐受量（MTDMTD） 最大給藥量最大給藥量整理ppt實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果受試物受試物o 受試物采用制備工藝穩(wěn)定、符合臨床試用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的受試物采用制備工藝穩(wěn)定、符合臨床試用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的中試樣品中試樣品，注明名稱、提供單位、批號(hào)、性狀、含量、劑，注明名稱、提供單位、批號(hào)、性狀、含量、劑型、配制方法、保存條件等。型、配制方法、保存條件等。o 如不采用中試樣品，應(yīng)有充分的理由。如不采用中試樣品，應(yīng)有充分的理由。o 若由于給藥容積或給藥方法限制，可采用原料藥進(jìn)行試驗(yàn)若由于給藥容積或給藥方法限制，可采用原料藥進(jìn)行試驗(yàn)整理ppt試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)動(dòng)物o 1 1，5 5類藥

10、至少必須用類藥至少必須用2 2種動(dòng)物（嚙齒和非嚙齒）種動(dòng)物（嚙齒和非嚙齒）o 一般采用嚙齒類和一般采用嚙齒類和/ /或非嚙齒類動(dòng)物，雌雄各半，所用動(dòng)物或非嚙齒類動(dòng)物，雌雄各半，所用動(dòng)物應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)藥物非臨床安全性研究的要求。應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)藥物非臨床安全性研究的要求。o 如臨床為單性別用藥，可采用相對(duì)應(yīng)的單一性別的動(dòng)物。如臨床為單性別用藥，可采用相對(duì)應(yīng)的單一性別的動(dòng)物。o 如受試物擬用于兒童，建議考慮采用幼年動(dòng)物。如受試物擬用于兒童，建議考慮采用幼年動(dòng)物。o 中毒反應(yīng)或死亡率與動(dòng)物的性別有明顯相關(guān)時(shí)，應(yīng)選擇性中毒反應(yīng)或死亡率與動(dòng)物的性別有明顯相關(guān)時(shí)，應(yīng)選擇性別敏感的動(dòng)物進(jìn)行復(fù)試。別敏感的動(dòng)物進(jìn)

11、行復(fù)試。整理ppt試驗(yàn)分組試驗(yàn)分組 按性別、體重采用分區(qū)隨機(jī)法分組按性別、體重采用分區(qū)隨機(jī)法分組 除受試物不同劑量組外，還應(yīng)設(shè)空白除受試物不同劑量組外，還應(yīng)設(shè)空白( (和和/ /或陰性或陰性) )對(duì)照組。對(duì)照組。充分對(duì)照充分對(duì)照給藥途徑給藥途徑須與臨床擬給藥途徑一致，若不同應(yīng)充分說明理由；根據(jù)新藥研究技須與臨床擬給藥途徑一致，若不同應(yīng)充分說明理由；根據(jù)新藥研究技術(shù)指南，需要進(jìn)行兩種給藥途徑試驗(yàn)的受試物，如臨床為非血管內(nèi)給術(shù)指南，需要進(jìn)行兩種給藥途徑試驗(yàn)的受試物，如臨床為非血管內(nèi)給藥，另一給藥途徑采用靜脈給藥方式；如果因?yàn)橹苿┑仍虿荒懿捎盟?，另一給藥途徑采用靜脈給藥方式；如果因?yàn)橹苿┑仍虿荒?/p>

12、采用靜脈給藥，應(yīng)充分說明理由。靜脈給藥，應(yīng)充分說明理由。整理ppt給藥容量給藥容量o 經(jīng)口給藥前動(dòng)物禁食不禁水過夜，大鼠給藥容量每次一般經(jīng)口給藥前動(dòng)物禁食不禁水過夜，大鼠給藥容量每次一般不超過不超過20ml/kg20ml/kg，小鼠每次一般不超過，小鼠每次一般不超過40ml/kg40ml/kg。觀察期限觀察期限一般觀察一般觀察1414天，如觀察時(shí)間不足天，如觀察時(shí)間不足1414天，應(yīng)充分說明理由。天，應(yīng)充分說明理由。整理ppt觀察指標(biāo)觀察指標(biāo)o 應(yīng)定期記錄動(dòng)物的體重及耗食量。如有異常情況，應(yīng)跟蹤應(yīng)定期記錄動(dòng)物的體重及耗食量。如有異常情況，應(yīng)跟蹤觀察。觀察。o 給藥當(dāng)天，尤其是給藥后給藥當(dāng)天，尤

13、其是給藥后4h4h內(nèi)應(yīng)嚴(yán)密觀察記錄，然后每天內(nèi)應(yīng)嚴(yán)密觀察記錄，然后每天上、下午各觀察上、下午各觀察1 1次，連續(xù)次，連續(xù)1414天，包括動(dòng)物體重變化、飲食、天，包括動(dòng)物體重變化、飲食、外觀、行為、分泌物、排泄物、動(dòng)物異常反應(yīng)的癥狀、起外觀、行為、分泌物、排泄物、動(dòng)物異常反應(yīng)的癥狀、起始時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆以及動(dòng)物死亡情始時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆以及動(dòng)物死亡情況。況。o 剖檢：死亡動(dòng)物應(yīng)及時(shí)進(jìn)行尸檢，其他動(dòng)物在觀察期結(jié)束剖檢：死亡動(dòng)物應(yīng)及時(shí)進(jìn)行尸檢，其他動(dòng)物在觀察期結(jié)束后后( (給藥第給藥第1515天天) )，進(jìn)行大體解剖，記錄病變情況，當(dāng)發(fā)現(xiàn)，進(jìn)行大體解剖，記錄病變情況

14、，當(dāng)發(fā)現(xiàn)器官出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變時(shí)則須進(jìn)行病理檢查并器官出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變時(shí)則須進(jìn)行病理檢查并記錄。記錄。整理ppt半數(shù)致死量的測(cè)定半數(shù)致死量的測(cè)定o 劑量設(shè)定：根據(jù)預(yù)試結(jié)果所獲得的劑量設(shè)定：根據(jù)預(yù)試結(jié)果所獲得的0 0和和100100致死量范圍致死量范圍內(nèi)選用幾個(gè)劑量進(jìn)行試驗(yàn)，分內(nèi)選用幾個(gè)劑量進(jìn)行試驗(yàn)，分4 46 6個(gè)劑量組，組距設(shè)計(jì)一個(gè)劑量組，組距設(shè)計(jì)一般為般為0.650.650.850.85。o 用用BlissBliss的方法求出的方法求出LD50LD50值及值及95%95%的可信區(qū)間的可信區(qū)間，各劑量組的，各劑量組的死亡率。若毒性反應(yīng)有明顯的性別差異，應(yīng)求出不同性別死亡率。

15、若毒性反應(yīng)有明顯的性別差異，應(yīng)求出不同性別的的LD50LD50。詳細(xì)報(bào)告試驗(yàn)過程中動(dòng)物出現(xiàn)的中毒表現(xiàn)及致死。詳細(xì)報(bào)告試驗(yàn)過程中動(dòng)物出現(xiàn)的中毒表現(xiàn)及致死癥狀，綜合評(píng)價(jià)受試物毒性大小。癥狀，綜合評(píng)價(jià)受試物毒性大小。 整理ppt 最大耐受量的測(cè)定最大耐受量的測(cè)定o 劑量設(shè)定：根據(jù)預(yù)試結(jié)果在動(dòng)物死亡的劑量劑量設(shè)定：根據(jù)預(yù)試結(jié)果在動(dòng)物死亡的劑量下按等比級(jí)數(shù)設(shè)劑量組，可分下按等比級(jí)數(shù)設(shè)劑量組，可分2 25 5個(gè)劑量組，個(gè)劑量組，組距設(shè)計(jì)一般為組距設(shè)計(jì)一般為0.650.650.850.85。最大劑量應(yīng)有。最大劑量應(yīng)有動(dòng)物死亡，死亡率小于動(dòng)物死亡，死亡率小于5050。o 詳細(xì)報(bào)告試驗(yàn)過程中動(dòng)物出現(xiàn)的異常表現(xiàn)及

16、詳細(xì)報(bào)告試驗(yàn)過程中動(dòng)物出現(xiàn)的異常表現(xiàn)及致死癥狀，計(jì)算出動(dòng)物總給予藥量致死癥狀，計(jì)算出動(dòng)物總給予藥量g/kgg/kg（或（或以含生藥量以含生藥量g/kgg/kg表示），即動(dòng)物的最大耐受表示），即動(dòng)物的最大耐受量，評(píng)價(jià)受試物毒性情況。量，評(píng)價(jià)受試物毒性情況。整理ppt最大給藥量的測(cè)定最大給藥量的測(cè)定o 劑量設(shè)定：以允許并合理的最大濃度、最大容量單劑量設(shè)定：以允許并合理的最大濃度、最大容量單次或一日內(nèi)次或一日內(nèi)2 23 3次給予動(dòng)物。次給予動(dòng)物。o 體重：雌雄分別進(jìn)行組間比較。體重：雌雄分別進(jìn)行組間比較。o 詳細(xì)報(bào)告試驗(yàn)過程中動(dòng)物出現(xiàn)的異常表現(xiàn)，計(jì)算出詳細(xì)報(bào)告試驗(yàn)過程中動(dòng)物出現(xiàn)的異常表現(xiàn)，計(jì)算出動(dòng)物

17、總給藥量動(dòng)物總給藥量g/kgg/kg（或以含生藥量（或以含生藥量g/kgg/kg表示），即表示），即動(dòng)物的最大給藥量，推算出相當(dāng)于臨床擬用藥量的動(dòng)物的最大給藥量，推算出相當(dāng)于臨床擬用藥量的倍數(shù)，評(píng)價(jià)受試物毒性大小。倍數(shù)，評(píng)價(jià)受試物毒性大小。整理ppt 犬急性毒性試驗(yàn)犬急性毒性試驗(yàn)( (近似致死劑量法）近似致死劑量法）o動(dòng)物試驗(yàn)前隔夜禁食不禁水，根據(jù)小動(dòng)物毒性實(shí)驗(yàn)，參照藥物臨床實(shí)驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)前隔夜禁食不禁水，根據(jù)小動(dòng)物毒性實(shí)驗(yàn)，參照藥物臨床實(shí)驗(yàn)治療使用量，估計(jì)可能引起毒性反應(yīng)和死亡的劑量范圍，按治療使用量，估計(jì)可能引起毒性反應(yīng)和死亡的劑量范圍，按50%50%遞增法，遞增法，設(shè)計(jì)出含設(shè)計(jì)出含10-2

18、010-20個(gè)劑量序列表。個(gè)劑量序列表。o以最大給藥劑量預(yù)實(shí)驗(yàn)一條犬，根據(jù)情況完成下列步驟：以最大給藥劑量預(yù)實(shí)驗(yàn)一條犬，根據(jù)情況完成下列步驟：o若出現(xiàn)死亡或明顯毒性反應(yīng)，由劑量序列表中找出可能的致死劑量范圍，若出現(xiàn)死亡或明顯毒性反應(yīng)，由劑量序列表中找出可能的致死劑量范圍，在此范圍內(nèi)，每間隔一個(gè)劑量染毒一只動(dòng)物，測(cè)出最低致死劑量和最高在此范圍內(nèi)，每間隔一個(gè)劑量染毒一只動(dòng)物，測(cè)出最低致死劑量和最高非致死劑量，然后用兩者之間的劑量染毒一只動(dòng)物，則此劑量即為近似非致死劑量，然后用兩者之間的劑量染毒一只動(dòng)物，則此劑量即為近似致死劑量。致死劑量。o若沒有死亡或沒有出現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)，則按照最大給藥劑量實(shí)驗(yàn)

19、放樣若沒有死亡或沒有出現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)，則按照最大給藥劑量實(shí)驗(yàn)放樣觀察藥物的可能毒性反應(yīng)。觀察藥物的可能毒性反應(yīng)。o同時(shí)平行實(shí)驗(yàn)作為對(duì)照組。同時(shí)平行實(shí)驗(yàn)作為對(duì)照組。整理ppto檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)指標(biāo)o常規(guī)觀察常規(guī)觀察 1 1 中毒表現(xiàn)：犬給藥后密切觀察中毒表現(xiàn)：犬給藥后密切觀察4 4個(gè)小時(shí)。此后每天上、下午各觀個(gè)小時(shí)。此后每天上、下午各觀察一次，連續(xù)觀察察一次，連續(xù)觀察1414天。觀察動(dòng)物的體重變化、飲食、行為、分泌物、天。觀察動(dòng)物的體重變化、飲食、行為、分泌物、排泄物等，并記錄中毒死亡時(shí)間，中毒反應(yīng)起始時(shí)間、持續(xù)時(shí)間、恢復(fù)排泄物等，并記錄中毒死亡時(shí)間，中毒反應(yīng)起始時(shí)間、持續(xù)時(shí)間、恢復(fù)期是否可逆，動(dòng)

20、物最短死亡時(shí)間，最長(zhǎng)死亡時(shí)間，平均死亡時(shí)間等，報(bào)期是否可逆，動(dòng)物最短死亡時(shí)間，最長(zhǎng)死亡時(shí)間，平均死亡時(shí)間等，報(bào)告近似致死劑量和最大耐受劑量。告近似致死劑量和最大耐受劑量。 2 2 剖剖 檢：動(dòng)物死亡應(yīng)及時(shí)剖檢，其他動(dòng)物在觀察期結(jié)束后進(jìn)檢：動(dòng)物死亡應(yīng)及時(shí)剖檢，其他動(dòng)物在觀察期結(jié)束后進(jìn)行大體解剖，記錄病變情況，主要觀察心臟、肺臟、腎臟、肝臟、脾臟、行大體解剖，記錄病變情況，主要觀察心臟、肺臟、腎臟、肝臟、脾臟、胃腸道等內(nèi)臟，觀察是否有出血點(diǎn)、水腫等異常情況，并作書面記錄。胃腸道等內(nèi)臟，觀察是否有出血點(diǎn)、水腫等異常情況，并作書面記錄。當(dāng)發(fā)現(xiàn)器官出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變時(shí)須進(jìn)行病理檢查。當(dāng)發(fā)現(xiàn)器官出

21、現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變時(shí)須進(jìn)行病理檢查。o對(duì)于創(chuàng)新藥物，還可進(jìn)行以下指標(biāo)檢測(cè)（體重、攝食量、體溫、心電圖對(duì)于創(chuàng)新藥物，還可進(jìn)行以下指標(biāo)檢測(cè)（體重、攝食量、體溫、心電圖等指標(biāo)可酌情增加等指標(biāo)可酌情增加1 12 2次檢測(cè)）。次檢測(cè)）。整理ppt二、中藥新藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)二、中藥新藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn) 對(duì)動(dòng)物反復(fù)多次連續(xù)給藥的毒性試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物反復(fù)多次連續(xù)給藥的毒性試驗(yàn) 試驗(yàn)的目的試驗(yàn)的目的 1 1、反復(fù)多次給藥的情況下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、反復(fù)多次給藥的情況下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 出現(xiàn)的毒性反應(yīng)、量效關(guān)系、主要的靶器官、損出現(xiàn)的毒性反應(yīng)、量效關(guān)系、主要的靶器官、損害程度及其可逆性。害程度及其可逆性。 2 2、獲得反復(fù)給藥情況下

22、，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物能、獲得反復(fù)給藥情況下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物能 耐受的劑量范圍及無毒性反應(yīng)的安全范圍。耐受的劑量范圍及無毒性反應(yīng)的安全范圍。整理ppt一般藥物的長(zhǎng)期毒性研究給藥期限表一般藥物的長(zhǎng)期毒性研究給藥期限表藥物臨床療程大鼠長(zhǎng)期毒性研究給藥期限可以支持的臨床研究階段單次2周、期2周1個(gè)月、期2周*1個(gè)月期1個(gè)月1個(gè)月期3個(gè)月期3個(gè)月3個(gè)月期6個(gè)月期6個(gè)月6個(gè)月期6個(gè)月期6個(gè)月6個(gè)月期6個(gè)月期整理ppt動(dòng)動(dòng) 物物o SPFSPF級(jí)級(jí)SDSD或或WistarWistar健康大鼠，一般每組健康大鼠，一般每組10103030只（若藥物毒只（若藥物毒性大，或試驗(yàn)周期為性大，或試驗(yàn)周期為6 6個(gè)月，每組應(yīng)增加個(gè)月，每

23、組應(yīng)增加1010只動(dòng)物），只動(dòng)物）， 6 69 9周齡，動(dòng)物體重差異應(yīng)在平均體重的周齡，動(dòng)物體重差異應(yīng)在平均體重的20%20%之內(nèi)，應(yīng)有動(dòng)物之內(nèi)，應(yīng)有動(dòng)物質(zhì)量合格證書。質(zhì)量合格證書。o 試驗(yàn)周期試驗(yàn)周期3 3個(gè)月以上可選個(gè)月以上可選5 56 6周齡大鼠。周齡大鼠。o 每組雌雄各半，雌性應(yīng)未孕。如臨床為單性別用藥，應(yīng)采每組雌雄各半，雌性應(yīng)未孕。如臨床為單性別用藥，應(yīng)采用相應(yīng)的單一性別的動(dòng)物。用相應(yīng)的單一性別的動(dòng)物。整理ppt飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)管理o 飼料應(yīng)有合格證，寫明供應(yīng)單位、批號(hào)、檢測(cè)報(bào)告等。飼料應(yīng)有合格證，寫明供應(yīng)單位、批號(hào)、檢測(cè)報(bào)告等。o 動(dòng)物飼養(yǎng)應(yīng)在取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證的動(dòng)物房?jī)?nèi)進(jìn)行。動(dòng)物

24、飼養(yǎng)應(yīng)在取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證的動(dòng)物房?jī)?nèi)進(jìn)行。o 大鼠每籠不宜超過大鼠每籠不宜超過5 5只，雌雄分籠飼養(yǎng)。只，雌雄分籠飼養(yǎng)。o 試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)，一般觀察試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)，一般觀察5 57 7天，應(yīng)作好觀察記錄。天，應(yīng)作好觀察記錄。整理ppt受試物受試物o 受試物一般為中試樣品，應(yīng)和藥效、一般藥理、急性毒性、受試物一般為中試樣品，應(yīng)和藥效、一般藥理、急性毒性、藥代動(dòng)力學(xué)研究用藥有相同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。如果由于給藥容藥代動(dòng)力學(xué)研究用藥有相同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。如果由于給藥容量或給藥方法限制，可采用原料藥進(jìn)行試驗(yàn)。量或給藥方法限制，可采用原料藥進(jìn)行試驗(yàn)。o 應(yīng)有受試物名稱或代號(hào)、提供單位、批號(hào)、保存條件、使應(yīng)有

25、受試物名稱或代號(hào)、提供單位、批號(hào)、保存條件、使用注意事項(xiàng)等。用注意事項(xiàng)等。o 溶媒或賦形劑要注明批號(hào)、提供單位等。溶媒或賦形劑要注明批號(hào)、提供單位等。整理ppt 分分 組組一般設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組和對(duì)照組，對(duì)照組則給予相應(yīng)的溶媒或一般設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組和對(duì)照組，對(duì)照組則給予相應(yīng)的溶媒或賦形劑；若溶媒或賦形劑有毒性，則應(yīng)增設(shè)空白對(duì)照組（蒸餾水）。賦形劑；若溶媒或賦形劑有毒性，則應(yīng)增設(shè)空白對(duì)照組（蒸餾水）。給給 藥藥1 1 給藥途徑給藥途徑1.1 1.1 一般要求與臨床給藥途徑一致，若不同則充分說明理由。一般要求與臨床給藥途徑一致，若不同則充分說明理由。1.2 1.2 口服可采用直接灌胃給藥

26、。口服可采用直接灌胃給藥。1.3 1.3 臨床靜脈注射的藥物采用靜脈注射給藥，特殊情況另作說明。臨床靜脈注射的藥物采用靜脈注射給藥，特殊情況另作說明。整理ppt大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)o 低劑量原則上應(yīng)高于動(dòng)物藥效學(xué)試驗(yàn)的等效劑低劑量原則上應(yīng)高于動(dòng)物藥效學(xué)試驗(yàn)的等效劑量或預(yù)期的臨床治療劑量的等效劑量。高劑量量或預(yù)期的臨床治療劑量的等效劑量。高劑量原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)，甚至可原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)，甚至可引起少數(shù)動(dòng)物死亡。高、低劑量組之間應(yīng)再設(shè)引起少數(shù)動(dòng)物死亡。高、低劑量組之間應(yīng)再設(shè)一個(gè)中劑量組。一個(gè)中劑量組。o 對(duì)中藥復(fù)方或其他特殊情況下，可采用長(zhǎng)

27、毒可對(duì)中藥復(fù)方或其他特殊情況下，可采用長(zhǎng)毒可允許的最大濃度和最大劑量作為高劑量。允許的最大濃度和最大劑量作為高劑量。整理ppt劑量設(shè)計(jì)參考方法劑量設(shè)計(jì)參考方法o臨床劑量法：中藥、天然藥物的復(fù)方制劑多根據(jù)擬推薦臨床劑量臨床劑量法：中藥、天然藥物的復(fù)方制劑多根據(jù)擬推薦臨床劑量決定，一般決定，一般3 3個(gè)月以上長(zhǎng)期毒性，大鼠高劑量組原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)個(gè)月以上長(zhǎng)期毒性，大鼠高劑量組原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)，甚至可引起少量動(dòng)物死亡。低劑量組原則上生明顯的毒性反應(yīng)，甚至可引起少量動(dòng)物死亡。低劑量組原則上應(yīng)高于動(dòng)物藥效學(xué)試驗(yàn)的等效劑量或預(yù)期的臨床治療劑量的等效應(yīng)高于動(dòng)物藥效學(xué)試驗(yàn)的等效劑量或預(yù)期的臨床

28、治療劑量的等效劑量。高、低劑量組之間再設(shè)一個(gè)中劑量組。此為最常采用的方劑量。高、低劑量組之間再設(shè)一個(gè)中劑量組。此為最常采用的方法。法。o最大耐受量法（最大耐受量法（MTDMTD）：新藥研究可參考國(guó)外文獻(xiàn)資料或最大耐受）：新藥研究可參考國(guó)外文獻(xiàn)資料或最大耐受量決定。用一個(gè)最大耐受量（量決定。用一個(gè)最大耐受量（MTDMTD）、）、1/3MTD1/3MTD、1/10MTD1/10MTD分別為大分別為大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的高、中、低三個(gè)劑量。鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的高、中、低三個(gè)劑量。o最大濃度法：對(duì)毒性較低的中藥可采用最大濃度法，以藥物可進(jìn)最大濃度法：對(duì)毒性較低的中藥可采用最大濃度法，以藥物可進(jìn)行順利灌胃的濃度

29、作為高劑量組的給藥濃度。行順利灌胃的濃度作為高劑量組的給藥濃度。整理ppto 給藥容量：給藥容量：給藥容量一般為給藥容量一般為1 11.5ml/100g1.5ml/100g體重體重/ /次次（若每天給藥（若每天給藥2 23 3次，每次給藥容量可酌情減少），次，每次給藥容量可酌情減少），每周可根據(jù)體重情況調(diào)整給藥量，一般以不等濃度每周可根據(jù)體重情況調(diào)整給藥量，一般以不等濃度等容量給藥。等容量給藥。o 給藥頻率：給藥頻率：試驗(yàn)周期試驗(yàn)周期33個(gè)月，每周個(gè)月，每周7 7天連續(xù)給藥；天連續(xù)給藥；33個(gè)月，可考慮每周給藥個(gè)月，可考慮每周給藥6 6天，每天給藥時(shí)間應(yīng)盡天，每天給藥時(shí)間應(yīng)盡量保持一致。量保持

30、一致。整理pptp 檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)指標(biāo) 一般觀察 外觀體征和行為活動(dòng)，流涎等腺體分泌、糞便性狀與顏色、毛色、行為、給藥局部反應(yīng)、食量及體重變化。對(duì)死亡動(dòng)物應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)病理學(xué)檢查。整理ppt 血液學(xué)指標(biāo)(10項(xiàng)) 紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 血紅蛋白 血液學(xué)指標(biāo) 白細(xì)胞總數(shù)及分類 血小板 凝血時(shí)間整理ppt 血液生化學(xué)指標(biāo)（15-16項(xiàng)） 天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST) 丙氨酸氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT) 堿性磷酸酶(ALP) 血液生化 尿酸氮(BUN) 、總蛋白(TP) 主要指標(biāo) 白蛋白(Alb) 、血糖(ALU) 總膽紅素(TB)、肌酐(Cr) 總膽固醇(TC) -谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（非嚙齒類動(dòng)物） 整理pp

31、t 特殊檢查 可能引起眼、耳毒性的藥物，應(yīng)增加眼及可能引起眼、耳毒性的藥物，應(yīng)增加眼及耳毒性的檢查。耳毒性的檢查。 有些藥物尚需研究對(duì)酸堿平衡、水鹽代謝有些藥物尚需研究對(duì)酸堿平衡、水鹽代謝的影響。的影響。整理ppt 系統(tǒng)尸體解剖 臟器系數(shù)（10個(gè)）：心、肝、脾、肺、腎、 腎上腺、胸腺、睪丸、 附睪、子宮、卵巢、腦 組織病理學(xué)檢查（34項(xiàng)） 腦、脊髓、視神經(jīng)、眼、垂體、心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺、睪丸、子宮等。整理ppt注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)o大鼠在解剖與取血前禁食不禁水過夜。大鼠在解剖與取血前禁食不禁水過夜。o采血順序：對(duì)照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組各取一只，依次重復(fù)采血順序：對(duì)照組、

32、高劑量組、中劑量組、低劑量組各取一只，依次重復(fù)循環(huán)循環(huán)o血清標(biāo)本應(yīng)避光保存。血清標(biāo)本應(yīng)避光保存。o需要保存的血清，可在需要保存的血清，可在4466的冰箱中保存的冰箱中保存7 7天備用。天備用。7 7天后應(yīng)放在天后應(yīng)放在- -7070冷凍保存。冷凍保存。o低溫下保存的標(biāo)本不能在室溫慢慢溶解，而應(yīng)放在低溫下保存的標(biāo)本不能在室溫慢慢溶解，而應(yīng)放在25253737水浴中短時(shí)水浴中短時(shí)間快速溶解，充分混勻。間快速溶解，充分混勻。o標(biāo)本應(yīng)避免重復(fù)的凍結(jié)溶解，以免標(biāo)本成分變化。標(biāo)本應(yīng)避免重復(fù)的凍結(jié)溶解，以免標(biāo)本成分變化。o采集的樣本異常，應(yīng)予以記錄。采集的樣本異常，應(yīng)予以記錄。整理ppto 檢測(cè)時(shí)間：檢測(cè)時(shí)

33、間：應(yīng)于給藥終期及恢復(fù)期結(jié)束時(shí)進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)應(yīng)于給藥終期及恢復(fù)期結(jié)束時(shí)進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)，或于給藥中期增加檢測(cè)，或于給藥中期增加1 1次指標(biāo)檢測(cè)。次指標(biāo)檢測(cè)。o 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)：試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)：體重、耗食量、臟器指數(shù)依雌雄分別體重、耗食量、臟器指數(shù)依雌雄分別進(jìn)行組間比較。進(jìn)行組間比較。整理ppt結(jié)果與分析結(jié)果與分析o注意毒性反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間、恢復(fù)時(shí)間及動(dòng)物死亡時(shí)間。注意毒性反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間、恢復(fù)時(shí)間及動(dòng)物死亡時(shí)間。o對(duì)所獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行全面和科學(xué)的分析，對(duì)在背景數(shù)據(jù)范圍以外對(duì)所獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行全面和科學(xué)的分析，對(duì)在背景數(shù)據(jù)范圍以外的各實(shí)測(cè)值應(yīng)在試驗(yàn)結(jié)果中詳細(xì)列出，并予以合理的分析。的各實(shí)測(cè)值應(yīng)在試驗(yàn)結(jié)果中

34、詳細(xì)列出，并予以合理的分析。o應(yīng)正確理解均值數(shù)據(jù)和單個(gè)數(shù)據(jù)的意義，并注重個(gè)體分析，同時(shí)應(yīng)正確理解均值數(shù)據(jù)和單個(gè)數(shù)據(jù)的意義，并注重個(gè)體分析，同時(shí)結(jié)合其它相關(guān)安全性試驗(yàn)及藥代結(jié)合其它相關(guān)安全性試驗(yàn)及藥代/ /毒代動(dòng)力學(xué)的結(jié)果進(jìn)行分析。綜毒代動(dòng)力學(xué)的結(jié)果進(jìn)行分析。綜合考慮數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義。合考慮數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義。o試驗(yàn)報(bào)告：試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)全面客觀反映整個(gè)試驗(yàn)過程收集的原始資試驗(yàn)報(bào)告：試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)全面客觀反映整個(gè)試驗(yàn)過程收集的原始資料和信息。料和信息。整理ppt犬長(zhǎng)期毒性觀察指標(biāo)犬長(zhǎng)期毒性觀察指標(biāo)一般狀況觀察一般狀況觀察o每天根據(jù)體重給藥并填寫給藥記錄表每天根據(jù)體重給藥并填寫給藥記錄

35、表o應(yīng)觀察包括犬外觀體征、行為活動(dòng)、惡心嘔吐、腺體分泌、呼吸、糞便、應(yīng)觀察包括犬外觀體征、行為活動(dòng)、惡心嘔吐、腺體分泌、呼吸、糞便、尿液（尿液（1111項(xiàng)）、攝食量、體重、給藥局部及眼科反應(yīng)等。項(xiàng)）、攝食量、體重、給藥局部及眼科反應(yīng)等。o每天應(yīng)觀察記錄犬的一般狀況，填寫觀察表。每天應(yīng)觀察記錄犬的一般狀況，填寫觀察表。o每周應(yīng)固定時(shí)間測(cè)量每周應(yīng)固定時(shí)間測(cè)量1 1次犬體重及攝食量。次犬體重及攝食量。心電圖心電圖o檢查指標(biāo)：檢查指標(biāo)：導(dǎo)聯(lián)心律、心率；導(dǎo)聯(lián)心律、心率；PRPR間期、間期、QTQT間期、間期、QRSQRS波群、波群、T T波等。波等。眼科檢查眼科檢查o指標(biāo)：角膜是否渾濁。虹膜有無充血、腫

36、脹。結(jié)膜有無充血、水腫及分泌指標(biāo)：角膜是否渾濁。虹膜有無充血、腫脹。結(jié)膜有無充血、水腫及分泌物。瞳孔對(duì)光反射是否正常，必要時(shí)檢查眼底血管是否正常。檢查結(jié)果記物。瞳孔對(duì)光反射是否正常，必要時(shí)檢查眼底血管是否正常。檢查結(jié)果記錄在附表錄在附表-2“-2“其他情況其他情況”內(nèi)。觀察到有異常情況時(shí)詳細(xì)記錄。內(nèi)。觀察到有異常情況時(shí)詳細(xì)記錄。. .血液學(xué)指標(biāo)血液學(xué)指標(biāo)o應(yīng)觀察紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、血應(yīng)觀察紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、血小板、凝血酶原時(shí)間等，必要時(shí)做骨髓涂片檢查。小板、凝血酶原時(shí)間等，必要時(shí)做骨髓涂片檢查。整理ppt犬長(zhǎng)期毒性觀察指

37、標(biāo)犬長(zhǎng)期毒性觀察指標(biāo)系統(tǒng)尸解系統(tǒng)尸解o大體解剖：系統(tǒng)尸檢應(yīng)全面細(xì)致，解剖過程同大鼠大體解剖。大體解剖：系統(tǒng)尸檢應(yīng)全面細(xì)致，解剖過程同大鼠大體解剖。o稱重并計(jì)算臟器指數(shù)的器官。稱重并計(jì)算臟器指數(shù)的器官。 組織病理學(xué)檢查組織病理學(xué)檢查o所有藥物長(zhǎng)期毒性均應(yīng)進(jìn)行給藥部位及給藥部位淋巴結(jié)的病理學(xué)檢查。所有藥物長(zhǎng)期毒性均應(yīng)進(jìn)行給藥部位及給藥部位淋巴結(jié)的病理學(xué)檢查。o對(duì)照組、高劑量組及尸檢異常時(shí)要詳細(xì)檢查。其它劑量組應(yīng)取材保存，在對(duì)照組、高劑量組及尸檢異常時(shí)要詳細(xì)檢查。其它劑量組應(yīng)取材保存，在高劑量組有異常時(shí)再進(jìn)行檢查。高劑量組有異常時(shí)再進(jìn)行檢查。o一般需進(jìn)行病理組織學(xué)檢查的組織或器官：詳見下表一般需進(jìn)行

38、病理組織學(xué)檢查的組織或器官：詳見下表o解剖時(shí)肉眼可觀察到的其他異常器官組織應(yīng)做詳細(xì)的病理組織學(xué)檢查。解剖時(shí)肉眼可觀察到的其他異常器官組織應(yīng)做詳細(xì)的病理組織學(xué)檢查。o應(yīng)根據(jù)中藥的性、味、功效、主治等情況增加相應(yīng)的組織病理學(xué)檢查。應(yīng)根據(jù)中藥的性、味、功效、主治等情況增加相應(yīng)的組織病理學(xué)檢查。o組織的病理學(xué)檢查應(yīng)根據(jù)藥物的特點(diǎn)及國(guó)家規(guī)定的技術(shù)要求進(jìn)行。組織的病理學(xué)檢查應(yīng)根據(jù)藥物的特點(diǎn)及國(guó)家規(guī)定的技術(shù)要求進(jìn)行。整理ppt三、中藥新藥免疫毒性研究技術(shù)要點(diǎn)三、中藥新藥免疫毒性研究技術(shù)要點(diǎn) 免疫毒性指外源性化合物對(duì)機(jī)體免疫免疫毒性指外源性化合物對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的損傷作用，包括兩類：系統(tǒng)的損傷作用，包括兩類：

39、免疫抑制免疫抑制 免疫增強(qiáng)免疫增強(qiáng) 整理ppt型過敏反應(yīng)試驗(yàn)型過敏反應(yīng)試驗(yàn) 主動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)（主動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)（ACAACA） 主動(dòng)全身過敏試驗(yàn)（主動(dòng)全身過敏試驗(yàn)（ASAASA） 被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)（被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)（PCAPCA） 試驗(yàn)一試驗(yàn)一 主動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)主動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn) （Active Cutaneous Anaphylaxis, ACA Active Cutaneous Anaphylaxis, ACA ） 動(dòng)物：動(dòng)物： 豚鼠豚鼠 陽性藥：陽性藥： 2 2，4-4-二硝基氯代苯二硝基氯代苯 （1%1%的致敏濃度和的致敏濃度和0.1%0.1%的激發(fā)濃度）的激發(fā)濃度）整理ppt試驗(yàn)方法：

40、試驗(yàn)方法： 致敏：在第致敏：在第0 0、第、第7 7和第和第1414天，以致敏劑量皮膚局部給藥（天，以致敏劑量皮膚局部給藥（致敏接觸階段應(yīng)保證受試物在皮膚上的停留時(shí)間致敏接觸階段應(yīng)保證受試物在皮膚上的停留時(shí)間(6(6小時(shí)小時(shí)) )） 激發(fā)：末次給受試物致敏后激發(fā)：末次給受試物致敏后1414天，再次將受試物涂于脫毛天，再次將受試物涂于脫毛區(qū)激發(fā)，區(qū)激發(fā)，6 6小時(shí)左右后，觀察小時(shí)左右后，觀察7272小時(shí)內(nèi)皮膚過敏反應(yīng)情況，記錄小時(shí)內(nèi)皮膚過敏反應(yīng)情況，記錄各組各時(shí)間的平均分值，并按皮膚過敏反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分各組各時(shí)間的平均分值，并按皮膚過敏反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分，同時(shí)應(yīng)密切觀察動(dòng)物是否有哮喘、站立

41、不穩(wěn)或休克等嚴(yán)重的，同時(shí)應(yīng)密切觀察動(dòng)物是否有哮喘、站立不穩(wěn)或休克等嚴(yán)重的全身性過敏反應(yīng)出現(xiàn)。全身性過敏反應(yīng)出現(xiàn)。 根據(jù)試驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物皮膚反應(yīng)的差別，判斷受試物對(duì)根據(jù)試驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物皮膚反應(yīng)的差別，判斷受試物對(duì)皮膚過敏反應(yīng)的性質(zhì)，計(jì)算致敏發(fā)生率（將出現(xiàn)皮膚紅斑、水皮膚過敏反應(yīng)的性質(zhì)，計(jì)算致敏發(fā)生率（將出現(xiàn)皮膚紅斑、水腫或全身過敏反應(yīng)的動(dòng)物例數(shù)除以受試動(dòng)物總數(shù)）。腫或全身過敏反應(yīng)的動(dòng)物例數(shù)除以受試動(dòng)物總數(shù)）。 整理ppt整理ppt試驗(yàn)二試驗(yàn)二 主動(dòng)全身過敏試驗(yàn)主動(dòng)全身過敏試驗(yàn) （Active Systemic Anaphylaxis, ASAActive Systemic Anaphylax

42、is, ASA） 動(dòng)動(dòng) 物：物： 豚鼠豚鼠 陽性對(duì)照組：陽性對(duì)照組： 1 15mg/5mg/只牛血清白蛋白或卵白蛋白或已只牛血清白蛋白或卵白蛋白或已知致敏陽性物質(zhì)知致敏陽性物質(zhì) 試試 驗(yàn)方驗(yàn)方 法：法： 每組動(dòng)物數(shù)至少每組動(dòng)物數(shù)至少6 6只。只。 低劑量組：低劑量組： 臨床最大劑量臨床最大劑量 高劑量組：低劑量的數(shù)倍量。高劑量組：低劑量的數(shù)倍量。 致敏：靜脈、腹腔或皮下注射，隔日一次，共致敏：靜脈、腹腔或皮下注射，隔日一次，共3-53-5次次 激發(fā)：末次致敏后第激發(fā)：末次致敏后第10101414日一次快速靜脈內(nèi)給藥。日一次快速靜脈內(nèi)給藥。 劑量為致敏劑量的劑量為致敏劑量的2 25 5倍，給藥容

43、積倍，給藥容積1 12ml 2ml 觀察每只動(dòng)物的癥狀及體重；計(jì)算過敏反應(yīng)發(fā)生率。觀察每只動(dòng)物的癥狀及體重；計(jì)算過敏反應(yīng)發(fā)生率。整理ppt整理ppt試驗(yàn)三試驗(yàn)三 被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn) （Passive Cutaneous Anaphylaxis, PCAPassive Cutaneous Anaphylaxis, PCA） 動(dòng)物：動(dòng)物：大鼠，小鼠，有時(shí)用豚鼠大鼠，小鼠，有時(shí)用豚鼠陽性對(duì)照：陽性對(duì)照：1-5mg/1-5mg/只牛血清白蛋白或卵白蛋白或已知致敏陽只牛血清白蛋白或卵白蛋白或已知致敏陽性物質(zhì)性物質(zhì)試驗(yàn)方法：試驗(yàn)方法： 每組動(dòng)物數(shù)至少每組動(dòng)物數(shù)至少6 6只。只。 制備抗血清：

44、制備抗血清： 低劑量組：臨床最大劑量低劑量組：臨床最大劑量 高劑量組：低劑量的數(shù)倍量。高劑量組：低劑量的數(shù)倍量。 致敏：靜脈、腹腔或皮下注射，隔日一次，共致敏：靜脈、腹腔或皮下注射，隔日一次，共3 35 5次次 激發(fā)：末次致敏后激發(fā)：末次致敏后10101414天左右采血，制備抗血清天左右采血，制備抗血清 整理ppt放放 樣：樣： 將上述各組抗血清用生理鹽水稀釋成將上述各組抗血清用生理鹽水稀釋成1 1：2 2、1 1：8 8、1 1：3232或合適的稀釋度?；蚝线m的稀釋度。 在動(dòng)物背部預(yù)先脫毛在動(dòng)物背部預(yù)先脫毛3 34cm24cm2的皮內(nèi)注射各對(duì)應(yīng)組的抗血的皮內(nèi)注射各對(duì)應(yīng)組的抗血清清0.1mL0

45、.1mL。 經(jīng)經(jīng)2424或或4848小時(shí)后，各組靜脈注射與致敏劑量相同的激發(fā)小時(shí)后，各組靜脈注射與致敏劑量相同的激發(fā)抗原加等量的抗原加等量的0.50.51%1%伊文思蘭染料共伊文思蘭染料共1mL1mL。 激發(fā)注射激發(fā)注射3030分鐘后麻醉處死各組動(dòng)物，剪取背部皮膚，分鐘后麻醉處死各組動(dòng)物，剪取背部皮膚，進(jìn)行藍(lán)斑的測(cè)定?？刹捎弥苯訙y(cè)定法或比色測(cè)定法。進(jìn)行藍(lán)斑的測(cè)定?？刹捎弥苯訙y(cè)定法或比色測(cè)定法。整理ppt四、中藥新藥刺激性和溶血性研究四、中藥新藥刺激性和溶血性研究技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn) o 刺激性刺激性是指中藥、天然藥物制劑（包括活性成分和賦形是指中藥、天然藥物制劑（包括活性成分和賦形劑）經(jīng)皮膚、粘膜

46、、腔道、肌肉、血管等非口服途徑給劑）經(jīng)皮膚、粘膜、腔道、肌肉、血管等非口服途徑給藥，經(jīng)局部吸收或注射后對(duì)給藥部位以及全身產(chǎn)生的毒藥，經(jīng)局部吸收或注射后對(duì)給藥部位以及全身產(chǎn)生的毒性作用，包括血管、肌肉、粘膜等刺激性。性作用，包括血管、肌肉、粘膜等刺激性。o 溶血性溶血性是指中藥、天然藥物制劑（包括活性成分和賦形是指中藥、天然藥物制劑（包括活性成分和賦形劑）產(chǎn)生的溶血或紅細(xì)胞凝聚等反應(yīng)。劑）產(chǎn)生的溶血或紅細(xì)胞凝聚等反應(yīng)。整理ppt( (一一) )刺激性試驗(yàn)方法刺激性試驗(yàn)方法1 1、血管刺激性試驗(yàn)、血管刺激性試驗(yàn) 試驗(yàn)動(dòng)物：試驗(yàn)動(dòng)物：家兔，動(dòng)物數(shù)每組不少于家兔，動(dòng)物數(shù)每組不少于3 3只。只。 生理鹽

47、水或溶媒生理鹽水或溶媒對(duì)照對(duì)照 可采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法可采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法給藥部位：給藥部位：選用耳緣靜脈。多次給藥一般不超過選用耳緣靜脈。多次給藥一般不超過7 7天。天。 單次給藥刺激性試驗(yàn)：?jiǎn)未谓o藥刺激性試驗(yàn)：給藥后給藥后48489696小時(shí)對(duì)動(dòng)物和注射部小時(shí)對(duì)動(dòng)物和注射部位進(jìn)行位進(jìn)行肉眼觀察肉眼觀察；多次給藥刺激性試驗(yàn)：多次給藥刺激性試驗(yàn)：每天給藥前以及最后一次給藥后每天給藥前以及最后一次給藥后48489696小時(shí)對(duì)動(dòng)物和注射部位進(jìn)行肉眼觀察。小時(shí)對(duì)動(dòng)物和注射部位進(jìn)行肉眼觀察。 給藥部位給藥部位組織病理學(xué)檢查組織病理學(xué)檢查整理ppt2 2、肌肉刺激性試驗(yàn)、肌肉刺激性試驗(yàn) 試驗(yàn)動(dòng)

48、物：試驗(yàn)動(dòng)物：家兔，也可選用大鼠家兔，也可選用大鼠 生理鹽水或溶媒作為生理鹽水或溶媒作為陰性對(duì)照陰性對(duì)照 分別在左右兩側(cè)股四頭肌內(nèi)以無菌操作法各注入一分別在左右兩側(cè)股四頭肌內(nèi)以無菌操作法各注入一定量的受試物，觀察給藥后不同時(shí)間注射局部肌肉反應(yīng)定量的受試物，觀察給藥后不同時(shí)間注射局部肌肉反應(yīng)情況，如充血、紅腫、變性、壞死等。情況，如充血、紅腫、變性、壞死等。 注射后注射后4848小時(shí)處死動(dòng)物，解剖取出股四頭肌，縱向小時(shí)處死動(dòng)物，解剖取出股四頭肌，縱向切開，觀察注射部位肌肉的刺激反應(yīng)，并計(jì)算相應(yīng)的反切開，觀察注射部位肌肉的刺激反應(yīng)，并計(jì)算相應(yīng)的反應(yīng)級(jí)，并進(jìn)行局部組織病理學(xué)檢查，提供病理照片。應(yīng)級(jí)，

49、并進(jìn)行局部組織病理學(xué)檢查，提供病理照片。 整理ppt3 3、皮膚刺激性試驗(yàn)、皮膚刺激性試驗(yàn) 試驗(yàn)動(dòng)物：試驗(yàn)動(dòng)物：家兔，每組動(dòng)物數(shù)家兔，每組動(dòng)物數(shù)4 48 8只，雌、雄各半，也只，雌、雄各半，也可選用小型豬或其他種屬的動(dòng)物?？蛇x用小型豬或其他種屬的動(dòng)物。 設(shè)賦形劑或溶媒設(shè)賦形劑或溶媒對(duì)照對(duì)照，采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法。，采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法。 將受試物將受試物0.5 ml0.5 ml直接涂布于一側(cè)已去毛的皮膚上，然后直接涂布于一側(cè)已去毛的皮膚上，然后用二層紗布（用二層紗布（2.5 cm2.5 cm2.5 cm2.5 cm）和一層玻璃紙或類似物覆蓋）和一層玻璃紙或類似物覆蓋，再用無刺激性膠布和繃帶加以固定；另一側(cè)涂布賦形劑或，再用無刺激性膠布和繃帶加以固定；另一側(cè)涂布賦形劑或溶媒做對(duì)照。貼敷時(shí)間至少溶媒做對(duì)照。貼敷時(shí)間至少4 4小時(shí)。貼敷結(jié)束后，除去受試物小時(shí)。貼敷結(jié)束后，除去受試物并用溫水或無刺激性溶劑清潔給藥部位。并用溫水或無刺激性溶劑清潔給藥部位。 破損皮膚刺激性試驗(yàn)時(shí)在用藥部位用砂紙磨或劃破損皮膚刺激性試驗(yàn)時(shí)在用藥部位用砂紙磨或劃“井井”字并以滲血為度。字并以滲血為度。整理ppt單次給藥單次給藥在去藥后在去藥后30-6030-60分鐘，分鐘，2424、4848、7272小時(shí)觀小時(shí)觀察，如延長(zhǎng)不超過察，如延長(zhǎng)不超過1414天。天。多次給藥多次給藥