食品著色劑的測定——防腐劑的測定

1、食品著色劑的測定防腐劑的測定 是以食品著色、充實食品的色澤為目的的食品添加劑，可分為食用自然色素和食用合成色素兩大類。自然色素是從動植物組織中提取的，其平安性高，但穩(wěn)定性差，著色能力差，難以調(diào)出愜意的色澤，且資源較短缺，目前還不能滿足食品工業(yè)的需要；合成色素具有穩(wěn)定性好、色澤艷麗、附著力強、能調(diào)出隨意色澤等優(yōu)點，因而得到廣泛應用，但因為許多合成色素本身或其代謝產(chǎn)物具有一定的毒性、致瀉性與致癌性，因此必需對合成色素的用法范圍及用量加以限制，確保其用法的平安性。gb2760-2011規(guī)定了各類食品中各種著色劑的用法限量，其中日落黃為0.025-0.6g/kg、亮藍為0.025-0.5留kg、莧菜紅

2、為0.05一0.3g/kg、喹啉黃為0.1g/kg、專利藍為0.05一0.5g/kg、檸檬黃為0.050.5g/kg、靛藍為0.05一0.3g/kg、胭脂紅為0.05一0.5g/kg、誘惑紅為0.3g/kg,而酸性紅52、紅色2g和酸性紅26為不得添加物質(zhì)。 在食品格業(yè)中用法單一色素已較少，需用法復合色素方可達到較愜意的色澤，因而給其分析測定帶來了一定困難。 食品合成色素測定辦法有多種，國家標準辦法有高效液相色譜法、薄層色譜法、示波極譜法。國內(nèi)文獻報道的檢測辦法有紫外一可見汲取光譜法、分光光度法、微柱法、紙層析法、毛細管電泳法、hplc一ms法，毛細管膠束電動色譜法等，現(xiàn)代儀器分析辦法已經(jīng)成為

3、色素分析的主流。 一、高效液相色譜法 食品中人工合成著色劑用聚酞胺吸附法或液一液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分別，按照保留時光定性和與峰面積比較舉行定量。 橘子汁、果味水、果子露汽水等含co2樣品加熱驅(qū)除co2。配制酒類加小碎瓷片數(shù)片，加熱驅(qū)除乙醇。硬糖、蜜餞類、淀粉軟糖粉碎樣品，放入小燒杯中，加水溫熱溶解，若樣品溶液ph值較高，用檸檬酸溶液調(diào)ph值到6左右。巧克力豆及著色糖衣制品放入小燒杯中，用水洗滌色素，到巧克力豆無色素為止，合并色素漂洗液為樣品溶液。本辦法最小檢出限，新紅5ng，檸檬黃4ng、莧菜紅6ng、胭脂紅8ng、日落黃7ng、赤鮮紅18ng、亮藍26ng

4、，當進樣量為0.025g時最低檢出濃度分離為 0.2mg/kg;0.16mg/kg;0.24mg/kg、0.32mg/kg、0.28mg/kg、0.72mg/kg、1.04mg/kg。 二、薄層色譜法 在酸性條件下，用聚酰胺吸附水溶性合成色素，而與自然色素、蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉等物質(zhì)分別。然后在堿性條件下，用適當?shù)娜芤簩⑵浣馕儆帽訉游龇ㄅe行分別鑒別，與標準比較定性、定量。最低檢出量50.0g，點樣量為1.0g，樣品最低檢出濃度約為50.0mg/kg。 樣品處理：果味水、果子露、汽水需加熱驅(qū)除co2。配制酒于燒杯中，加碎瓷片數(shù)塊，加熱驅(qū)除乙醇。硬糖、蜜餞類、淀粉軟糖加水，溫熱溶解，若樣液ph

5、值較高，用檸檬酸溶液調(diào)至ph=4左右。奶糖加乙醇一氨溶液溶解，置水浴上濃縮，立刻用硫酸溶液調(diào)至微酸性再加硫酸（1+10)，加鎢酸鈉溶液，使蛋白質(zhì)沉淀、過濾，用少量水洗滌，收集濾液。蛋糕類樣品，加海砂少許，混勻，用熱風吹干用品（用手摸已干燥即可以），加入石油醚攪拌，放置片刻，傾出石油醚，如此重復處理3次，以除去脂肪，吹干后研細，所有倒入g3垂融漏斗或一般漏斗中，用乙醇一氨溶液提取色素，直至著色劑所有提完。置水浴上濃縮至約20ml。 吸附分別：將處理后所得的溶液加熱至70，加入聚酰胺粉充分攪拌，用檸檬酸溶液調(diào)ph值至4，使著色劑徹低被吸附，如溶液還有色彩，可以再加一些聚酰胺粉。將吸附著色劑的聚酰胺

6、所有轉(zhuǎn)入g3垂融漏斗中過濾（如用g3垂融漏斗過濾可以用水泵漸漸地抽濾）。用ph=4的70水反復洗滌，邊洗邊攪拌。若含有自然著色劑，再用甲醇一甲酸溶液洗滌1一3次，至洗液無色為止。再用70水多次洗滌至流出的溶液為中性。洗滌過程中必需充分攪拌。然后用乙醇一氨溶液分次解吸所有著色劑，收集所有解吸液，于水浴上驅(qū)氨。假如為單色，則用水精確稀釋，用分光光度法舉行測定。假如為多種著色劑混合液，則舉行紙色譜或薄層色譜法分別后測定，即將上述溶液置水浴上濃縮至2ml后移入5ml容量瓶中，用乙醇洗滌容器，洗液并入容量瓶中并稀釋至刻度。 聚酰胺粉在偏酸性（ph值為4一6）條件下對色素吸附力較強。如溶液中仍有色彩，可再

7、加入少量的聚酞胺粉。如樣品色素濃度太高，要用水適當稀釋，由于在濃溶液中，色素鈉鹽的鈉離子不簡單解離，不利于聚酞胺粉吸附。 樣液中的色素被聚酸胺粉吸附后，用經(jīng)20檸檬酸調(diào)整ph值至4的70水反復洗滌。若含自然色素，可用甲醇一甲酸溶液洗滌至無色，再用70水洗滌至中性。 用乙醇-氨溶液分次解吸色素，收集所有解吸液，水浴驅(qū)氨。若是單一色素，用水定容，用分光光度計比色；若為混合色，將解吸液水浴濃縮，轉(zhuǎn)入容量瓶中，用50乙醇洗滌、定容。 莧菜紅與胭脂紅用甲醇一乙二胺一氨水（10+3+2）綻開劑；靛藍、亮藍用甲醇一氨水一乙醇(5110）綻開劑；檸檬黃與其他色素用檸檬酸鈉溶液(25gl）一氨水一乙醇（812）

8、綻開劑。 測定波長分離為胭脂紅510nm,覽菜紅520nm、檸檬黃430nm、日落黃482nm、亮藍627nm,靛藍620nmo 三、示波極譜法 食品中的合成著色劑，在特定的緩沖溶液中，在滴汞電極上可產(chǎn)生敏感的極譜波，波高與著色劑的濃度成正比，當食品中存在一種或兩種以上互不影響測定的著色劑時，可用其舉行定性定量分析。 不同樣品的處理辦法如下。 (1)飲料和酒類：加熱驅(qū)除co2和乙醇，冷卻后用naoh和hcl調(diào)至中性，然后加蒸餾水至原體積。 (2）表層色素類：用蒸餾水反復漂洗直至色素徹低被洗脫，合并洗脫液并定容至一定體積。 (3）水果糖和果凍類：用水加熱溶解，冷卻后定容。 (4)奶油類：放人離心

9、管中，用石油醚洗滌3次，用玻棒攪勻，離心，棄上清液。低溫揮發(fā)，除去殘留的石油醚后用乙醇一氨溶液溶解并定容，離心，取一定量上清液水浴蒸干，用適量的水加熱溶解色素，用水洗入容量瓶并定容。 (5）奶糖類：溶于乙醇一氨溶液，離心。取上清液，加水，加熱揮發(fā)，除去氨，冷卻，用檸檬酸調(diào)至ph=4，加入200目聚酰胺粉，充分攪拌使色素徹低吸附后，用酸性水洗入離心管，離心，棄上層液體。沉淀物反復用酸性水洗滌3一4次后，用適量酸性水洗入含濾紙的漏斗中。用乙醇一氨溶液洗脫色素，將洗脫液在水浴蒸干，用適量的水加熱溶解色素，用水洗入容量瓶并定容。 四、其他辦法 (1)分光光度法：將薄層色譜的條狀色斑包括有蔓延的部分，分

10、離用刮刀刮下，移入漏斗中，用乙醇一氨溶液解吸色素，少量反復多次至解吸液于蒸發(fā)皿中，水浴上揮發(fā)去氨，移入比色管中，用水稀釋至適當?shù)臐舛龋跇藴蕝⒄障?，于最大汲取波特長測定吸光度，可知其含量，按照汲取光譜可確定為何種色素。用分光光度法測定混合食用合成色素時，常采納最小二乘法的多波長線性回來光度法，但最小二乘法受異樣點影響顯著，且對測量波長的位置等條件要求嚴格。 (2）微柱法：聚酰胺一硅膠填充的微柱法是按照水溶性酸性合成色素在酸性條件下被聚酰胺吸附，在堿性條件下被解吸的特性，利用被分別物質(zhì)在吸附劑與綻開劑之間分配系數(shù)不同，達到分別目的。 (3）紫外一可見汲取光譜法：按照物質(zhì)對光的汲取具有挑選性，應用

11、紫外一可見分光光度計舉行汲取光譜掃描，發(fā)覺胭脂紅、芡菜紅、檸檬黃、日落黃和靚藍等5種不同的食用合成色素具有不同的汲取譜圖，與標準譜圖對比，即可直觀、迅速地定性，且一定濃度下，峰高與含量成正比，可以定量檢測，從而建立了紫外一可見汲取光譜法測定食用合成色素。 (4）紙層析法：紙層析法是以濾紙作為支撐體的分別辦法，利用濾紙吸濕的水分作固定相，有機溶劑作流淌相。流淌相因為毛細作用自下而上移動，樣品中的各組分將在兩相中不斷舉行分配，因為它們的分配系數(shù)不同，不同溶質(zhì)隨流淌相移動的速度不等，因而形成與原點距離不同的層析點，達到分別的目的。 (5）氣相色譜法：水溶性酸性染料在酸性條件下被聚酰胺吸附，而在堿性條

12、件下解吸附，再用紙色譜法或薄層色譜法舉行分別后，與標準比較定性、定量。氣相色譜測定用法合成色素時，樣品中的脂肪、糖類、蛋白質(zhì)等對測定有影響，水溶性雜質(zhì)需用熱水洗滌除去；脂肪用石油醚、丙酮洗滌脫脂，蛋白質(zhì)用鎢酸鈉澄清劑沉淀分別，自然色素用甲醇一甲酸除去。 (6)微機極譜法：覽菜紅、胭脂紅、檸檬黃、赤鮮紅、誘惑紅和日落黃等著色劑在磷酸鹽緩沖溶液中，于滴汞電極上可產(chǎn)生導數(shù)極譜波，亮藍在乙酸鹽緩沖溶液中，于滴汞電極上可產(chǎn)生導數(shù)極譜波，波高與著色劑的含量成正比。 五、幾種辦法的比較 微柱法能很好的解決自然色素紅曲米的廣泛用法，給許多分析測定帶來干擾問題，且不需特定的試驗條件，用法的儀器設備容易。極譜法具有結(jié)果精確度高，檢出限低，于擾少的優(yōu)點，且樣品處理無特別的要求，較其他辦法容易，只需挑選好測定介質(zhì)即可。極譜法相宜于食品中混合色素的分析，測定所用汞假如操作處理不當會給環(huán)境帶來很大的污染問題，是辦法的一點不足。紫外汲取光譜法的優(yōu)點是測定線性范圍寬，敏捷度高，操作簡便、迅速、精確，易普及推廣，但假如存在多組分共存時，有些汲取峰可能存在疊加現(xiàn)象，對測定造成很大的誤差。高效液相色譜法所用儀器設備比較昂貴，工作條件要求比較高，在一些基層單位不簡單普及推廣。此外國家標準辦