華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生物化學(xué)本科試題庫-第18章--基因工程基礎(chǔ)(共5頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第18章 基因工程基礎(chǔ)單元自測題(一) 名詞解釋1. 遺傳工程 2.生物技術(shù) 3.基因工程 4.細(xì)胞工程 5.蛋白質(zhì)工程 6.分子克隆 7.載體 8.轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)染 9.基因文庫 10. cDNA文庫(二) 填空1自然界的常見基因轉(zhuǎn)移方式有 、 、 、 。2不同DNA分子間發(fā)生的共價連接稱為 ，有 、 兩種方式。3基因工程的載體必須具備的條件有 、 、 。4基因工程常用的載體DNA分子有 、 、和 。5一個完整的DNA克隆過程應(yīng)包括 、 、 、 、 。6目的基因獲取的途徑或來源有 、 、 、 。7基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有 、 、 。8基因克隆真核生物表達體系

2、常見的有 、 、 表達體系。9根據(jù)重組體DNA的性質(zhì)不同，將重組體DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的方式有 、 、 等。10如果M13的外源基因被插入到lac Z基因內(nèi)，則在含有X-gal的培養(yǎng)基上生長時會出現(xiàn) 色菌落，如果在lac Z基因內(nèi)無外源基因插入，在同樣的條件下呈現(xiàn) 色菌落。11當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時， 就可以從一個細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移到另一細(xì)胞(細(xì)菌)，這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為 作用。12重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有 、 、 、 。(三) 選擇題1下列那種方式保證了免疫球蛋白的多樣性?A. 轉(zhuǎn)化 B. 轉(zhuǎn)染 C. 轉(zhuǎn)位 D. 轉(zhuǎn)導(dǎo) 2微切割技術(shù)使目的基因可來源于下列那種物質(zhì)?A. 真

3、核細(xì)胞染色體DNA B. 人工合成DNA C. cDNA D. G-文庫 3重組DNA技術(shù)中常用的工具酶下列那項不是：A. 限制性核酸內(nèi)切酶 B. DNA連接酶 C. DNA聚合酶I D. RNA聚合酶 4DNA致癌病毒感染宿主細(xì)胞后，使之發(fā)生癌變是因為發(fā)生了：A. 轉(zhuǎn)化 B. 轉(zhuǎn)導(dǎo) C. 接合 D. 轉(zhuǎn)座 5關(guān)于基因工程的敘述，下列哪項是錯誤的? A. 基因工程也稱基因克隆 B . 只有質(zhì)粒DNA可作為載體 C . 重組體DNA轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞 D. 需獲得目的基因6有關(guān)質(zhì)粒的敘述，下列哪項是錯誤的?A. pB R322含有-半乳糖苷酶的片段基因B. 質(zhì)粒較易轉(zhuǎn)化C. 質(zhì)粒的遺傳表型可作為

4、轉(zhuǎn)化子的篩選依據(jù) D. pB R322的分子中僅有一個E.coR I 內(nèi)切酶位點7下列哪項不是重組DNA的連接方式?A. 粘性末端與粘性末端的連接B 平端與平端的連接C . 粘性末端與平端的連接D . 人工接頭連接8有關(guān)噬菌體的敘述哪項不符合? A. 感染大腸桿菌時僅把D NA注入大腸桿菌內(nèi) B. 只有裂解一種生活方式 C . 溶源和裂解兩種生活方式可以相互轉(zhuǎn)變 D. 噬菌體是由外殼蛋白和D NA組裝而成9D NA克隆不包括下列哪項步驟? A. 選擇一個適合的載體 B . 重組體用融合法導(dǎo)入細(xì)胞 C . 用連接酶連接載體D NA和目的D NA，形成重組體 D . 用載體的相應(yīng)抗生素抗性篩選含重

5、組體的細(xì)菌10下列哪項不能作為表達載體導(dǎo)人真核細(xì)胞的方法? A. 磷酸鈣轉(zhuǎn)染 B . 電穿孔 C . 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 D . 氯化鈣轉(zhuǎn)染11. 下列哪項不能作為基因工程重組體的篩選方法?A. PC R技術(shù)B. 宿主菌的營養(yǎng)缺陷標(biāo)志補救C . 抗藥性標(biāo)志選擇D. Southern印跡12關(guān)于轉(zhuǎn)化錯誤的是： A. 受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型 B. 外源D NA一定整合進受體細(xì)胞基因組 C. 自然界中較大的外源D NA轉(zhuǎn)化幾率較低 D. 自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率較高13下列哪種酶是重組DNA技術(shù)中最重要的? A. 反轉(zhuǎn)錄酶 B. 堿性磷酸酶 C. DNA連接酶 D. DNA聚合酶I 14在分子生物

6、學(xué)中，基因克隆主要指： A. DNA的復(fù)制 B. DNA的轉(zhuǎn)錄 C. DNA的剪切 D. RNA的轉(zhuǎn)錄 15在分子生物學(xué)中，重組DNA又稱為： A. 酶工程 B. 蛋白質(zhì)工程 C. 細(xì)胞工程 D. 基因工程 16cDNA是指： A. 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNA B. 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補的DNA C . 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的RNA D. 在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的RNA17聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)常常縮寫為： A. PRC B. PER C. PC R D. B C R 18在已知DNA序列的情況下，獲取目的基因的最方便的方法是： A. 人工化學(xué)合成 B.

7、 基因組文庫法 C. cDNA文庫法 D. PCR法 19用于PC R反應(yīng)的酶是： A. DNA連接酶 B. TaqDNA聚合酶 C. 逆轉(zhuǎn)錄酶 D. 堿性磷酸酶 20在cDNA技術(shù)中，所形成的發(fā)夾環(huán)可用 A. 限制性內(nèi)切核酸酶切除 B. 用3外切核酸酶切除 C. 用S1核酸酶切除 D. 用5外切核酸酶切除21，cDNA文庫包括該種生物的 A. 某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 B. 所有蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 C. 所有結(jié)構(gòu)基因 D. 內(nèi)含子和調(diào)控區(qū)22關(guān)于感受態(tài)細(xì)胞性質(zhì)的描述，下面哪一種說法不正確? A. 具有可誘導(dǎo)性 B. 具有可轉(zhuǎn)移性 C. 細(xì)菌生長的任何時期都可以出現(xiàn) D. 不同細(xì)菌出現(xiàn)感受態(tài)的比例是

8、不同的 23在簡并引物的3端盡量使用具有簡并密碼的氨基酸，這是因為 A. Taq酶具有一定的不精確性 B. 便于排除錯誤堿基的摻人 C. 易于退火 D. 易于重組連接24變色的酚中含有氧化物，這種酚不能用于DNA分離，原因主要是 A. 氧化物會改變pH值 B. 氧化物可使DNA的磷酸二酯鍵斷裂 C. 氧化物同DNA形成復(fù)合物 D. 氧化物在DNA分離后不易除去(四) 是非題1. 基因表達的最終產(chǎn)物都是蛋白質(zhì)。 2因為密碼子是不重疊的，所以基因也是不重疊。3基因有兩條鏈，與mRNA堿基序列相同(僅T代替了U)的鏈稱為正鏈。4RNA是基因表達的第一產(chǎn)物。5. 在細(xì)菌中，一些酶的合成有賴于這些酶的基

9、因的連續(xù)表達。6原核生物中tRNA基因的轉(zhuǎn)錄是由RNA聚合酶完成。 7毫無例外，從結(jié)構(gòu)基因中的DNA序列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。8蛋白質(zhì)的氨基酸序列是由基因的編碼區(qū)核苷酸序列決定的，只要將基因的編碼序列轉(zhuǎn)入細(xì)胞，就能合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。9利用基因工程的手段，包括基因的定點突變等改造蛋白質(zhì)分子，使之具有更完善，更符合人類要求的功能，這種技術(shù)和學(xué)科被稱之為蛋白質(zhì)工程。10基因工程的特點是在分子水平上操作，在細(xì)胞水平上表達。11DNA連接酶常用來連接載體DNA和外源性DNA。12質(zhì)粒不能在宿主細(xì)胞中獨立自主地進行復(fù)制。（五） 問答題1 什么叫基因克隆?簡述基因克隆的步驟。2、基因克隆是如何使含有單個

10、基因的DNA片段得到純化的？3簡述重組DNA技術(shù)中目的基因的獲取來源和途徑。4簡述互補篩選重組體質(zhì)粒細(xì)菌的原理。5基因工程中重組體篩選的方法有哪些?6基因工程E.coli表達體系的表達載體必須符合哪些標(biāo)準(zhǔn)?7常用的真核表達體系有哪些？常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法有哪些？8已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)？簡述其過程。9. 作為基因工程的載體必須具備哪些條件?10簡并引物設(shè)計的一般原則是什么?11什么是藍白斑篩選法？12. 什么是基因組文庫(genomic library)?構(gòu)建基因組文庫，涉及哪些基本過程?它同遺傳學(xué)上的基因庫有什么不同?13什么是cDNA文庫(complemen

11、tDNAlibrary)?同基因組文庫有何差別?14自然界中具備理想條件的質(zhì)粒載體為數(shù)不多，通常需要進行改造，請問質(zhì)粒改造包括哪些基本內(nèi)容?15YAC克隆載體常出現(xiàn)哪些問題?六、參考答案(一) 名詞解釋1遺傳工程是遺傳學(xué)和工程學(xué)相結(jié)合的一門技術(shù)科學(xué)。借用工程技術(shù)上的設(shè)計思想，在離體條件下，對生物細(xì)胞、細(xì)胞器、染色體或DNA分子進行按圖施工的遺傳操作，以求定向地改造生物的遺傳性。遺傳工程的概念有廣義和狹義之分。2生物技術(shù)又稱生物工藝學(xué)，生物工程學(xué)。是根據(jù)生物學(xué)、化學(xué)和工程學(xué)的原理進行工業(yè)規(guī)模的經(jīng)營和開發(fā)微生物、動植物細(xì)胞及其亞細(xì)胞組分，進而利用生物體所具有的功能元件(如基因、蛋白質(zhì))等來提供商品

12、或社會服務(wù)的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。它包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程等。 3基因工程(gene engineering)又稱基因操作(gere emanipulation)、重組DNA(recombinant DNA)?；蚬こ淌且苑肿舆z傳學(xué)理論為基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因(DNA分子)，按預(yù)先設(shè)計的藍圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)人活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性，獲得新品種，生產(chǎn)新產(chǎn)品，或是研究基因的結(jié)構(gòu)和功能。4細(xì)胞工程(cell engineering)應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)的原理和方法，結(jié)合工程學(xué)的技術(shù)手段，按照人們預(yù)先的設(shè)計，有計劃地改變或創(chuàng)

13、造細(xì)胞遺傳性的技術(shù)，以及在體外大量培養(yǎng)和繁殖細(xì)胞，或獲得細(xì)胞產(chǎn)品，或利用細(xì)胞體本身的技術(shù)領(lǐng)域。主要內(nèi)容包括細(xì)胞融合、細(xì)胞拆合、染色體轉(zhuǎn)移、基因轉(zhuǎn)移、細(xì)胞或組織培養(yǎng)等。由于所用細(xì)胞的來源不同，細(xì)胞工程又分為微生物細(xì)胞工程、植物細(xì)胞工程、動物細(xì)胞工程等。5蛋白質(zhì)工程(protein engineering)是更廣義上的包括酶工程在內(nèi)的蛋白質(zhì)修飾操作，通過對蛋白質(zhì)及酶的化學(xué)修飾及基因改造獲得具有特殊功能的非天然蛋白質(zhì)的技術(shù)。主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能間的相互關(guān)系，利用基因工程技術(shù)，或用化學(xué)方法合成基因、改造基因，以便合成新的蛋白質(zhì)，或改變蛋白質(zhì)的活性、功能以及溶解性等。6.克隆(clone)意為無

14、性繁殖系。DNA克隆即將DNA的限制酶切片段插入克隆載體，導(dǎo)入宿主細(xì)胞，經(jīng)無性繁殖，以獲得相同的DNA擴增分子。故DNA克隆為分子克隆。7.將外源DNA帶入宿主細(xì)胞并進行復(fù)制的運載工具，稱為載體（vector）。克隆載體通常是由質(zhì)粒、病毒或一段染色體DNA改造而成。8.轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)染 將外源DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞，從而改變細(xì)胞遺傳性狀，稱為轉(zhuǎn)化；將病毒DNA直接導(dǎo)入細(xì)跑，稱為轉(zhuǎn)染。9.基因文庫 基因文庫是指整套基因組DNA片段分子克隆的總體?；蛭膸斓臉?gòu)建包括基因組DNA的隨機片段化、載體DNA的制備、重組體DNA的體外包裝、重組噬菌體感染大腸桿菌、基因文庫的鑒定和擴增等步驟。 10. cDNA文庫

15、細(xì)胞全部mRNA的cDNA克隆之總體，稱為cDNA文庫。(二) 填空1接合作用 轉(zhuǎn)化作用 轉(zhuǎn)導(dǎo)作用 轉(zhuǎn)座 2基因重組 位點特異的重組 同源重組 3. 能獨立復(fù)制 便于檢測 可導(dǎo)入宿主細(xì)胞 4質(zhì)粒DNA 噬菌體DNA 病毒DNA 5. 目的基因的獲取 基因載體的選擇與構(gòu)建 目的基因與載體的拼接 重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞 篩選與鑒定出陽性克隆 6化學(xué)合成法 基因組DNA cDNA 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 7抗藥性標(biāo)志選擇 標(biāo)志補救 分子雜交 8酵母 昆蟲 哺乳動物細(xì)胞 9轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)染 感染 10白 藍 11質(zhì)粒DNA 接合作用 12限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 DNA聚合酶I 反轉(zhuǎn)錄酶 (三) 選擇題1. D2

16、. A3. D4. A5. B6. A7. C8. B9. B10. D11. A12. D13. C14. A15. D16. A17. C18. D19. B20. C21. C22. C23. B24. B(四) 是非題：1錯2錯3對4對5對6錯7錯8錯9對10對11對12錯(五) 問答題1. 基因克隆(gene cloning)是指含有單一DNA重組體的無性系或指將DNA重組體引進受體細(xì)胞中，建立無性系的過程。一個完整的基因克隆過程包括：a目的基因和載體的選擇。b. 限制性內(nèi)切酶處理的基因和載體。c目的基因與載體的連接。d重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞。e篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞。 2大分子量的DNA會含有許

17、多特殊限制性內(nèi)切核酸酶的限制位點，因此用一種限制酶處理一完整染色體或整個基因組會產(chǎn)生許多不同的DNA片段，每一個片段帶有基因組的一個不同的基因或一個不同的小片段。當(dāng)全部片段與用同種限制酶處理過的載體分子混合時(圖A141)，每個片段將插入一個不同的載體分子(比如一個質(zhì)粒)，同樣地，當(dāng)用這些質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞時，每個宿主細(xì)胞將只接收一個質(zhì)粒DNA分子而篩選出的含重組質(zhì)粒的每個菌落實際上會含有某一特異的供體DNA片段的多個拷貝。一旦帶有待研究的特定基因的克隆被確認(rèn)了，此重組DNA分子可從宿主細(xì)胞中提取出來進行純化。3. 目的基因的獲取主要有以下幾種途徑：化學(xué)合成法：已知某種基因的核苷酸序列或根據(jù)某種

18、基因產(chǎn)物的aa序列推導(dǎo)出該多肽鏈編碼的核苷酸序列，再利用DNA合成法合成?；蚪MDNA：一個細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息，或整套基因的全部DNA片段。從基因組DNA文庫中獲得。cDNA文庫。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR(polymerase chain reaction)。4. M13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E.coli的調(diào)節(jié)基因及Lac Z-半乳糖苷酶基因的N-端146個aa殘基編碼基因，其產(chǎn)物為-半乳糖苷酶的-片段。而突變型Lac-E.coli可表達-半乳糖苷酶的-片段(酶的C-端)，單獨的-片段及-片段均無-半乳糖苷酶的活性，當(dāng)含有Lac Z的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac-E.coli細(xì)菌時，-片段及

19、-片段共同表達，宿主Lac-E.coli細(xì)菌才有-半乳糖苷酶活性，使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物，(生長的細(xì)菌為蘭色)這就是-互補。可用于重組體的篩選。如果目的基因插入Lac Z基因內(nèi)，則Lac Z不表達，為白色菌落。5重組體的篩選方法有：直接法(direct selection)：針對載體攜帶的某種或某些標(biāo)志基因和目的基因而設(shè)計的篩選方法稱直接法。其特點是：直接測定基因或基因表型。A抗藥性標(biāo)志篩選：如克隆載體攜帶有某個(些)抗藥基因，如：ampr、tetr等。只有被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌才能在含有該抗生素的培養(yǎng)基上生長，并形成菌落，使轉(zhuǎn)化菌與非轉(zhuǎn)化菌區(qū)別開。如重組體中的外源性基因插入到標(biāo)志性基因內(nèi)，標(biāo)志性

20、基因則失活，通過有或無抗菌素培養(yǎng)基對比培養(yǎng)，即可區(qū)分單純載體轉(zhuǎn)化菌和重組體(含目的基因的載體)轉(zhuǎn)化菌。如：將目的基因插入tetr基因中，該載體就失去tetr抗藥性，但仍有apmr抗藥性，被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌(含重組體)可在含有apmr培養(yǎng)基生長，而不能在tetr培養(yǎng)基生長。也叫插入滅活法。B補救標(biāo)志(rescue marker)篩選：如克隆基因能夠在宿主菌表達，且表達產(chǎn)物與宿主菌的營養(yǎng)缺陷互補，那么就可以利用營養(yǎng)突變菌株進行篩選，這就是標(biāo)志補救。如：酵母咪唑甘油磷酸脫水酶基因表達產(chǎn)物與細(xì)菌組氨酸合成有關(guān)。當(dāng)酵母DNA與噬菌體載體結(jié)合后，在轉(zhuǎn)染或感染組氨酸缺陷型大腸桿菌，在無組氨酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，只有含

21、重組體的細(xì)菌能生長(因有咪唑甘油磷酸脫水酶)。再如：-互補也是一種標(biāo)志補救。C.雜交法：利用32P標(biāo)記的探針與轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上的轉(zhuǎn)化子DNA或克隆的DNA片段進行分子雜交，直接選擇鑒定目的基因。如：原位雜交Southern blotting(DNA-DNA雜交)。免疫學(xué)方法(非直接法)：是利用特異抗體與目的基因的表達產(chǎn)物相互作用進行的篩選。分為：免疫化學(xué)法和酶免疫檢測分析。免疫化學(xué)法：原理為將培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化子菌落，經(jīng)氯仿蒸汽裂解，釋放抗原，再將固定有抗血清(目的基因編碼蛋白特異的免疫血清)的聚乙烯膜覆蓋在裂解菌落上，在膜上形成抗原抗體復(fù)合物，再與125I-IgG反應(yīng)，最后放射自顯影，檢出陽性菌

22、落。6含有大腸桿菌適宜的選擇標(biāo)志，具有強的啟動子，含有適當(dāng)?shù)姆g控制序列，含有合理設(shè)計的多接頭克隆位點。7. 真核表達體系常見的有：酵母，昆蟲，哺乳類動物細(xì)胞等。重要的是將重組體導(dǎo)人細(xì)胞。即轉(zhuǎn)染(將表達載體導(dǎo)人真核細(xì)胞的過程)。常見的轉(zhuǎn)染方法有：磷酸鈣轉(zhuǎn)染、DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染、電穿孔、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、顯微注射等。8已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)呢?其過程如下：首先以mRNA分子為模板，進行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA，再合成雙鏈cDNA，擴增后與載體連接形成重組體，轉(zhuǎn)染表達載體，篩選出克隆，進行基因表達即可。9作為基因工程的載體必須具備的條件是：能獨立自主復(fù)制、易轉(zhuǎn)化、易檢測(

23、含有抗藥性基因等)。10(1)選擇保守區(qū)設(shè)計簡并引物； (2)選擇簡并性低的氨基酸密碼區(qū)設(shè)計引物； (3)注意密碼的偏愛性； (4)使用盡可能短的引物，以降低簡并性，最短可用1520個堿基。 (5)由于TaqDNA聚合酶在PCR擴增時容易摻人錯誤堿基，所以設(shè)計的引物，其3端盡量使用具有簡并密碼的氨基酸。11這種方法是根據(jù)組織化學(xué)的原理來篩選重組體。主要是在載體的非必要區(qū)插入一個帶有大腸桿菌半乳糖苷酶的基因片段，攜帶有l(wèi)ac基因片段的載體轉(zhuǎn)入lac的宿主菌后，在含有5-溴4氯3引哚D半乳糖苷(X-gal)平板上形成淺藍色的噬菌斑。外源基因插入lac(或lac基因部分被取代)后，重組的噬菌體將喪失

24、分解X-gal的能力，轉(zhuǎn)入lac'的宿主菌后，在含有5溴4氯3引哚D半乳糖苷(X-gal)平板上形成白色的噬菌斑，非重組的噬菌體則為藍色噬菌斑。12基因組文庫是用基因工程的方法，人工構(gòu)建的含有某一生物基因組DNA的各種片段的克隆群。一般以改造的噬菌體DNA或黏粒作為載體，包括下列過程：(1)高分子量染色體DNA的制備；(2)體外重組連接；(3)包裝蛋白的制備；(4)重組體的體外包裝；(5)將重組DNA導(dǎo)人寄主細(xì)胞；(6)篩選。 基因組文庫同遺傳學(xué)上所講的基因庫是完全不同的概念。基因庫(gene p001)是指在進行有性生殖的某一群體中，能進行生殖的個體所含總的遺傳信息。在基因組文庫的構(gòu)建中，由于使用的載體不同，分為噬菌體載體和黏粒載體構(gòu)建的基因組文庫、YAC文庫、BAC文庫等。13同mRNA互補的DNA稱為cDNA。cDNA文庫是以某一生物的總mRNA為模板，在無細(xì)胞系統(tǒng)中，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，首先合成一互補的DNA,IIp第一鏈，破壞RNA模板后，再以第一鏈為模板合成第二鏈，得到的雙鏈DNA稱為cDNA。選用適合的