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1、實(shí)驗(yàn)九、飼料中粗纖維的測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖箤W(xué)生掌握用飼料中粗纖維的測(cè)定方法,了解粗纖維測(cè)定方法中存在問題及解決的方案。二、實(shí)驗(yàn)原理用固定量的酸和堿,在特定條件下消煮樣品,再用乙醚、乙醇除去醚溶物,經(jīng)高溫灼燒扣除礦物質(zhì)的量,所余量稱為粗纖維。它不是一個(gè)確切的化學(xué)實(shí)體,只是在公認(rèn)強(qiáng)制規(guī)定的條件下,測(cè)出的概略養(yǎng)分。其中以纖維素為主,還有少量半纖維素和木質(zhì)素。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)備1、實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)或研缽;2、分樣篩:孔徑0.45mm(40目);3、分析天平:感量0.0001g;4、電熱恒溫箱:可控制溫度在130;5、高溫爐:電加熱,可控制溫度在550600;6、古氏坩堝:30ml,預(yù)先加入30ml酸洗石棉懸
2、浮液。再抽干,以石棉厚度均勻,不透光為宜;7、消煮器:由冷凝球的高型燒杯(50ml)或有冷凝管的錐形瓶;8、鍋濾裝置:抽真空裝置,吸濾瓶及漏斗;9、濾器:200目不銹鋼網(wǎng)和尼龍網(wǎng),或G2號(hào)玻璃濾器;10、干燥器:用氯化鈣(干燥試劑)或變色硅膠作干燥劑。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、稱樣:稱取12g試樣,準(zhǔn)確至0.0002g,如果脂肪<1%可不脫脂,110%可不必脫脂,但建議脫脂,脂肪>10%必須脫脂,或用測(cè)脂肪后殘?jiān)?、酸煮:加入0.255±0.005mol/L煮沸的硫酸200ml和1滴正辛醇,使其在2min沸騰,且連續(xù)微沸30±1min。注意保持硫酸濃度不變,樣品不可損失
3、。3、過濾:用沸蒸餾水洗至不含酸。4、堿煮:將酸洗不溶物放入原容器中,加濃度準(zhǔn)確為0.313±0.005mol/L且已沸的氫氧化鈉溶液200ml,同樣微沸30min。5、過濾:先用25ml0.255mol/L硫酸洗滌,再用沸蒸餾水洗至中性,用乙醇15ml洗殘?jiān)?、烘干灰化:取下坩堝,130烘干至恒重。550±25灼燒30min,冷卻稱重至恒重。7、計(jì)算結(jié)果:1976年Van Soet提出了中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素作為評(píng)價(jià)飼草纖維類物質(zhì)的指標(biāo)。NDF:木質(zhì)素、纖維素、二氧化硅、半纖維素、細(xì)胞壁的成分如鑲嵌微量的蛋白質(zhì)ADF:木質(zhì)素、纖維素、二氧化硅ADF-
4、NDF=半纖維素ADF-ADL=纖維素該法可以分別測(cè)出纖維素,半纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽,這量一大進(jìn)步,但該法提取出的纖維物質(zhì)中殘留含氮尚有2050%(有可能不消化),在NDF還有淀粉殘留,使準(zhǔn)確性下降,該法不適于纖維量低的精料(蛋白質(zhì)或淀粉多的試樣),因此也叫飼草分析方案。Fonnesback(馮列士貝克)于19701974年提出馮氏法。(1)先用蛋白酶將飼料進(jìn)行消化(pH=3.5),然后用酸性洗滌劑煮沸1h,使原飼料中95%以上的蛋白質(zhì)被消化。(2)將上步分離出的細(xì)胞壁用40%硫酸煮1h,使半纖維素水解,過濾殘?jiān)鼮槔w維素和木質(zhì)素,酸不溶灰分,1步-2步=半纖維素含量。(3)將上步所得的殘?jiān)?2%硫酸處理3h
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