高三生物DNA重組技術(shù)的基本工具ppt課件

1、乳汁中含有人生長激素乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛的轉(zhuǎn)基因牛( (阿根廷阿根廷) )轉(zhuǎn)魚抗寒基因轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄的番茄1轉(zhuǎn)基因抗蟲棉轉(zhuǎn)基因抗蟲棉抗蟲棉抗蟲棉普通棉普通棉23DNA重組技術(shù)的基本工具4基因工程又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗地說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。56789DNA 重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具本節(jié)知識(shí)內(nèi)容 1 DNA1 DNA重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具專題一專題一 基因工程基因工程“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀” 限制酶限制酶 “分子縫合針分子縫合針” DNA連

2、接酶連接酶 “分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車” 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 10粘性末端粘性末端平末端平末端111213141516限制酶所識(shí)別的序列有什么特點(diǎn)？限制酶所識(shí)別的序列，無論是6個(gè)堿基還是4個(gè)堿基，都可以找到一條中心軸線,中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。圖1-1 限制酶識(shí)別序列的中心軸線171、種類：、種類：2、作用部位：、作用部位：兩類兩類Ecoli DNA連接酶連接酶T4 DNA連接酶連接酶 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵 1819 T磷磷酸酸二二酯酯鍵鍵1234512345 A20212223242526練習(xí)答案272和7能連接形成ACGT TGCA；4和8

3、能連接形成GAATTC CTTAAG；3和6能連接形成GCGC CGCG；1和5能連接形成CTGCAG GACGTC。28迄今為止，基因工程中使用的限制酶絕大部分都是從細(xì)菌或霉菌中提取出來的，它們各自可以識(shí)別和切斷DNA上特定的堿基序列。細(xì)菌中限制酶之所以不切斷自身DNA，是因?yàn)槲⑸镌陂L期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制，對(duì)于外源入侵的DNA可以降解掉。生物在長期演化過程中，含有某種限制酶的細(xì)胞，其DNA分子中或者不具備這種限制酶的識(shí)別切割序列，或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識(shí)別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶也不會(huì)使自身的DNA被切斷，并且可以防止外源

4、DNA的入侵 29基因工程中作為載體使用的基因工程中作為載體使用的DNA分子很多都是質(zhì)粒（分子很多都是質(zhì)粒（plasmid），），即獨(dú)立于細(xì)菌擬核處染色體即獨(dú)立于細(xì)菌擬核處染色體DNA之外的一種可以自我復(fù)制、雙之外的一種可以自我復(fù)制、雙鏈閉環(huán)的裸露的鏈閉環(huán)的裸露的DNA分子。是否任何質(zhì)粒都可以作為基因工程分子。是否任何質(zhì)粒都可以作為基因工程載體使用呢？其實(shí)不然，作為基因工程使用的載體必需滿足以下載體使用呢？其實(shí)不然，作為基因工程使用的載體必需滿足以下條件。條件。（1） 載體載體DNA必需有一個(gè)或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，以便目的必需有一個(gè)或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，以便目的基因可以插入到載體上去。這些

5、供目的基因插入的限制酶的切點(diǎn)基因可以插入到載體上去。這些供目的基因插入的限制酶的切點(diǎn)所處的位置，還必須是在質(zhì)粒本身需要的基因片段之外，這樣才所處的位置，還必須是在質(zhì)粒本身需要的基因片段之外，這樣才不至于因目的基因的插入而失活。不至于因目的基因的插入而失活。（2） 載體載體DNA必需具備自我復(fù)制的能力，或整合到受體染色體必需具備自我復(fù)制的能力，或整合到受體染色體DNA上隨染色體上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制。的復(fù)制而同步復(fù)制。（3） 載體載體DNA必需帶有標(biāo)記基因，以便重組后進(jìn)行重組子的篩必需帶有標(biāo)記基因，以便重組后進(jìn)行重組子的篩選。選。（4） 載體載體DNA必需是安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害，

6、或不能進(jìn)必需是安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害，或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去。入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去。（5） 載體載體DNA分子大小應(yīng)適合，以便提取和在體外進(jìn)行操作，分子大小應(yīng)適合，以便提取和在體外進(jìn)行操作，太大就不便操作。太大就不便操作。實(shí)際上自然存在的質(zhì)粒實(shí)際上自然存在的質(zhì)粒DNA分子并不完全具備上述條件，都要分子并不完全具備上述條件，都要進(jìn)行人工改造后才能用于基因工程操作。進(jìn)行人工改造后才能用于基因工程操作。30課本知識(shí)回顧 基因工程又叫做 或 。通俗地說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種 提取出來，加 以 ，然后放到另一種生物的細(xì)胞里， 改造生物的遺傳性狀?；蚱唇蛹夹g(shù)基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)重組技術(shù)基因基因修飾改造修飾改造定向地定向地31DNA 重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀” “分子縫合針分子縫合針” “分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車” 限制酶限制酶DNA連接酶連接酶基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體32原核生物中分離純化出來原核生物中分離純化出來特定的核苷酸序列特定的核苷酸序列磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵粘性末端粘性末端平末端平末端331、種類：、種類：2、作用部位：、作用部位：兩類兩類Ecoli DNA連接酶連接酶