Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移

1、LOGO精選課件精選課件1Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系 項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：羅茜項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：羅茜項(xiàng)目組成員：徐曉萌、劉華旭、劉丹、項(xiàng)目組成員：徐曉萌、劉華旭、劉丹、周瑞泉周瑞泉 指導(dǎo)老師指導(dǎo)老師 ：王悅：王悅 副教授副教授2010-04-112010-04-11LOGO精選課件2項(xiàng)目實(shí)施背景項(xiàng)目實(shí)施背景v 癌癥是全世界人口死亡的重要原因之一癌癥是全世界人口死亡的重要原因之一 。約約8080 的惡性的惡性腫瘤患者死于腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤患者死于腫瘤轉(zhuǎn)移。侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要生。侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要生物學(xué)特征，是腫瘤患者死亡的主要原因。物學(xué)特征，是腫瘤患者死亡的主要原因。v 埃茲

2、蛋白埃茲蛋白(ezrin)(ezrin)即為近年在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移研究中的相即為近年在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移研究中的相關(guān)蛋白，大量研究表明該蛋白在很多腫瘤組織中都有關(guān)蛋白，大量研究表明該蛋白在很多腫瘤組織中都有異常異常表達(dá)表達(dá)，并與促腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)。，并與促腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)。 LOGO精選課件3項(xiàng)目實(shí)施背景項(xiàng)目實(shí)施背景v 埃茲蛋白埃茲蛋白 (Ezrin)為為膜細(xì)胞骨架連接蛋白膜細(xì)胞骨架連接蛋白，是連接細(xì)胞膜，是連接細(xì)胞膜和細(xì)胞骨架之間的和細(xì)胞骨架之間的ERM(Ezrinradixinmesin，埃茲，埃茲蛋白蛋白根蛋白根蛋白膜突蛋白膜突蛋白)家族成員之一。常與根蛋白、家族成員之一。常與根蛋白、膜突蛋白共同表達(dá)

3、于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)?，F(xiàn)在普遍認(rèn)為它通過(guò)與膜突蛋白共同表達(dá)于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)?，F(xiàn)在普遍認(rèn)為它通過(guò)與CD44，E鈣黏素鈣黏素(Ecadherin)、整合素等細(xì)胞表面分、整合素等細(xì)胞表面分子形成復(fù)合體，調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附，參與腫瘤細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和子形成復(fù)合體，調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附，參與腫瘤細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤細(xì)胞吞噬等機(jī)制。腫瘤細(xì)胞吞噬等機(jī)制。LOGO精選課件4項(xiàng)目實(shí)施目的項(xiàng)目實(shí)施目的v 通過(guò)查閱文獻(xiàn)，我們發(fā)現(xiàn)有關(guān)埃茲蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系通過(guò)查閱文獻(xiàn)，我們發(fā)現(xiàn)有關(guān)埃茲蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系并不十分明確。埃茲蛋白在不同的細(xì)胞中過(guò)表達(dá)或低表達(dá)，并不十分明確。埃茲蛋白在不同的細(xì)胞中過(guò)表達(dá)或低表達(dá)，對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的影響也是不同的。對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的

4、影響也是不同的。v 我實(shí)驗(yàn)小組擬通過(guò)研究分析肺癌細(xì)胞系中埃茲蛋白我實(shí)驗(yàn)小組擬通過(guò)研究分析肺癌細(xì)胞系中埃茲蛋白（EzrinEzrin）的）的過(guò)度表達(dá)過(guò)度表達(dá)與與低表達(dá)低表達(dá)對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移活性的影響，對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移活性的影響，探討埃茲蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，從而對(duì)于腫瘤轉(zhuǎn)探討埃茲蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，從而對(duì)于腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制有更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。移機(jī)制有更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。 LOGO精選課件5項(xiàng)目實(shí)施意義項(xiàng)目實(shí)施意義Ezrin了解腫瘤侵襲了解腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制和轉(zhuǎn)移的機(jī)制為臨床觀察腫為臨床觀察腫瘤患者預(yù)后，瘤患者預(yù)后，轉(zhuǎn)移提供參考轉(zhuǎn)移提供參考指標(biāo)指標(biāo)可能成為腫瘤可能成為腫瘤分子靶向治療分子靶向治療的突破點(diǎn)

5、的突破點(diǎn)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)2組組對(duì)照組對(duì)照組RT-PCR技術(shù)檢測(cè)與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)技術(shù)檢測(cè)與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的基因的mRNA水平表達(dá)情況水平表達(dá)情況實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1組組Ezrin蛋白高表達(dá)蛋白高表達(dá)的肺癌細(xì)胞的肺癌細(xì)胞（PG-LH7）Ezrin蛋白低表達(dá)蛋白低表達(dá)的肺癌細(xì)胞（的肺癌細(xì)胞（BE1）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析統(tǒng)計(jì)學(xué)分析正常昆明小鼠正常昆明小鼠結(jié)論結(jié)論荷瘤小鼠荷瘤小鼠腫瘤形態(tài)學(xué)觀察檢測(cè)（形態(tài)、大小、腫瘤形態(tài)學(xué)觀察檢測(cè)（形態(tài)、大小、重量、腹水形成、重量、腹水形成、HE染色）染色）實(shí)驗(yàn)流程圖實(shí)驗(yàn)流程圖LOGO精選課件7實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法10只，標(biāo)準(zhǔn)條件下喂養(yǎng)只，標(biāo)準(zhǔn)條件下喂養(yǎng)1616只，將只，將BE1BE1注射注射到種鼠中，

6、引起癌到種鼠中，引起癌性腹水。抽取腹水性腹水。抽取腹水稀釋后，每只小鼠稀釋后，每只小鼠腹部注射癌瘤液腹部注射癌瘤液0.2ml0.2ml。1616只，將只，將PG-LH7PG-LH7注注射到種鼠中，引起射到種鼠中，引起癌性腹水。抽取腹癌性腹水。抽取腹水稀釋后，每只小水稀釋后，每只小鼠腹部注射癌瘤液鼠腹部注射癌瘤液0.2ml0.2ml。 對(duì)照組對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1組組 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)2組組造模及分組造模及分組LOGO精選課件8小鼠成活時(shí)及死亡后，從新鮮癌旁組織提取小鼠成活時(shí)及死亡后，從新鮮癌旁組織提取mRNA用用PCR儀分析，對(duì)比儀分析，對(duì)比3組樣品中，已確定的與腫瘤組樣品中，已確定的與腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)的基因

7、表達(dá)相關(guān)的轉(zhuǎn)移有關(guān)的基因表達(dá)相關(guān)的mRNA（如（如IL-6、MMP-2，4，9、VEGF等）表達(dá)差異等）表達(dá)差異小鼠死亡后，予以解剖，取出腫瘤組織，小鼠死亡后，予以解剖，取出腫瘤組織，用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤組織的直徑，用電子用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤組織的直徑，用電子天平稱(chēng)量腫瘤重量天平稱(chēng)量腫瘤重量 Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系觀察指標(biāo)觀察指標(biāo) mRNA水平觀察水平觀察 形態(tài)學(xué)觀察形態(tài)學(xué)觀察LOGO精選課件9預(yù)實(shí)驗(yàn)：熟練建立模型，掌握預(yù)實(shí)驗(yàn)：熟練建立模型，掌握PCR技術(shù)技術(shù)實(shí)施實(shí)驗(yàn)，觀察記錄實(shí)施實(shí)驗(yàn)，觀察記錄分析指標(biāo)分析指標(biāo)2010.052010.062010.072010.102010

8、.11-2011.01項(xiàng)目實(shí)施進(jìn)度和安排項(xiàng)目實(shí)施進(jìn)度和安排實(shí)驗(yàn)成果總結(jié)，撰寫(xiě)論文實(shí)驗(yàn)成果總結(jié)，撰寫(xiě)論文2011. 02-2011.04Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系LOGO精選課件10探索探索Ezrin蛋白與腫瘤蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性轉(zhuǎn)移的相關(guān)性促進(jìn)？抑制？無(wú)關(guān)？促進(jìn)？抑制？無(wú)關(guān)？預(yù)期成果預(yù)期成果發(fā)表核心期刊論文發(fā)表核心期刊論文1篇篇Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系LOGO精選課件11經(jīng)費(fèi)預(yù)算經(jīng)費(fèi)預(yù)算預(yù)算科目預(yù)算科目支出項(xiàng)目支出項(xiàng)目金額（元）金額（元）實(shí)驗(yàn)業(yè)務(wù)費(fèi)實(shí)驗(yàn)業(yè)務(wù)費(fèi)學(xué)術(shù)會(huì)議學(xué)術(shù)會(huì)議 、版面費(fèi)、審稿、版面費(fèi)、審稿費(fèi)費(fèi) 200.00實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、

9、藥品、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、藥品、飼料、耗材飼料、耗材3550.00圖書(shū)資料費(fèi)圖書(shū)資料費(fèi)文獻(xiàn)檢索、復(fù)印費(fèi)、文獻(xiàn)檢索、復(fù)印費(fèi)、圖書(shū)購(gòu)買(mǎi)圖書(shū)購(gòu)買(mǎi) 250.00合計(jì)合計(jì)4000.00Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系LOGO精選課件12主要參考文獻(xiàn)主要參考文獻(xiàn)v1 Yu Y，Khan J，Khanna C，et a1Expression profiling identifies thecyTo skeletal organizer Ezrin and the developmental homeoproteinSix一一1 askey metastatic regulatorsJNat Med，20

10、04，10v(2)：175 2 謝麗，楊俊玲，張培蓮，細(xì)胞骨架蛋白謝麗，楊俊玲，張培蓮，細(xì)胞骨架蛋白Ezrin的生物學(xué)特性，現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)的生物學(xué)特性，現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)2009年年1月第月第17卷第卷第1期期v3 Martin TA ，Harrison G，Manse lRF，et a1The role of the CD44-Ezrin complex in cancer metastasisJCrit Rev Oncol Hematol，2003，46(2)：165v 4 史榮亮，李建芳，翟穎，等腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因史榮亮，李建芳，翟穎，等腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因Ezrin在胃癌中的表達(dá)及意義在胃癌中的表達(dá)

11、及意義J中華胃腸外科雜志，中華胃腸外科雜志，2006，9(5)：433-435v 5Hushes SC，F(xiàn)ehonRGUndemanding ERM proteins-the aweBorne power of genetics finally brou to bearJCurt OpinCell Bio，2OO7，19(1)：5156v6Saotome I，Curto M，McOatchey,4F13n is essential for epithelial organization and villus morphogenesis in the developing intestineJD

12、ev Cell，2004，6(6)：855864v7Tamura A，Kikuchi S，Hata M，et a1Achlorhydria by ezrinknockdown： Defects in the formationexpansion of apicalcanaliculi in gastric raietal cellsJJ Cel Biol，2005，169(1)：2128v8 屈洪波屈洪波, Ezrin蛋白與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展蛋白與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展, 實(shí)用癌癥雜志實(shí)用癌癥雜志2009年年1月第月第24卷第卷第1期期 v9ShenZY，XuLY，ChenMH，eta1Upregulated expressionofFFin and invasive phenotype in malignantly transformedesophageal epithelial cellsJWorld J Gastroenterol，2003，9(6)：1 1821 186LOGO精選課件精選課件13LOGO精選課件14實(shí)驗(yàn)進(jìn)度實(shí)驗(yàn)進(jìn)度2013.082013.04 2012.062012.072011.092012.052011.052011.08分析結(jié)果分析結(jié)果、撰寫(xiě)論文撰寫(xiě)論文核酸測(cè)序核酸測(cè)序核酸擴(kuò)增、純