Elisa實(shí)驗(yàn)藥品步驟及相關(guān)材料精品文檔17頁(yè)

1、本實(shí)驗(yàn)室 Elisa所需試劑器材1. 試劑(1) 包被緩沖液 碳酸鹽緩沖液 (PH9.6 0.05M) ：Na2 CO3 1.59gNaHCO32.93g加蒸餾水至1000ml作用：稀釋抗原（菌懸浮液）(2) 洗滌緩沖液 PBST (PH7.4 0.15M) ：KH2PO40.2gNa2 HPO412H2O2.9gNaCl8.0gKCl0.2gTween-200.05 0.5ml加蒸餾水至1000ml作用：洗滌(3) 緩沖液 PBS (PH7.4 0.15M) ：KH2PO40.2gNa2 HPO412H2O2.9gNaCl8.0gKCl0.2g加蒸餾水至1000ml作用：制備封閉液第 1頁(yè)(

2、4) 封閉液：牛血清白蛋白 (BSA) 0.1g ，加緩沖液（PBS）至 100ml 或PBS加 2 BSA作用：封閉空隙(5) 稀釋液： PBST 加 1牛血清白蛋白 (BSA)作用：稀釋抗體及酶標(biāo)抗體(5)HRP 羊抗兔 IgG 一酶標(biāo)抗體作用：結(jié)合抗體(6) 底物緩沖液 磷酸鹽檸檬酸 (PH5.5):0.2M Na 2HPO4(28.4g/L)25.7ml0.1M 檸檬酸 (19.2g/L)24.3ml蒸餾水 50ml作用：制備TMB(7) TMB(四甲基聯(lián)苯胺 ) 使用液 :TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇 ) 0.5ml底物緩沖液 (PH5.5)10ml0.75 H2O232l作用：

3、顯色(8) 終 止 液 (2M H2SO4 ）： 蒸 餾 水 178.3ml ， 逐 滴 加 入 濃 硫 酸(98 )21.7ml作用：終止反應(yīng)2. 器材 :聚苯乙烯塑料板 ( 酶標(biāo)板 )96 孔第 2頁(yè)抗原制備：以平板劃線法將供試菌菌接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊瓊脂培養(yǎng)基上，28 培養(yǎng) 24 h后，挑取單菌落接種于LB 液體培養(yǎng)基中，過(guò)夜培養(yǎng)；5 000 r min -1 離心 10 min ，棄上清；加入 1%的甲醛于37 滅活 24 h ，通過(guò)菌落涂布法檢測(cè)滅活效果； 5 000r min-1 離心 10min，棄上清，用麥?zhǔn)媳葷岱?，配制出濃度約為1109 cells mL-1 的菌懸液作為免疫抗原

4、?？寡逯苽洌嚎寡宀荒苤苯佑糜诎唬瑧?yīng)先提取IgG。大量工作表明，只用硫酸銨沉淀就可以得到足夠純度及高活性的IgG 蛋白。其基本步驟如下：(1) 取抗血清 0.2 ml ；(2) 加生理鹽水（ 0.85 NaCl ） 0.3 ml ，混勻；(3) 逐滴加入飽和 (NH4) 2SO4 0.5 ml ，充分振蕩混勻， 4靜置 1 h ；(4) 10000 rpm/min 離心 20 min ，棄上清；(5) 加 0.5 ml 生理鹽水重懸浮，混勻；(6) 0.25 ml 飽和 (NH4) 2SO4，充分振蕩混勻， 4靜置 1 h ；(7) 10000 rpm/min 離心 20 min ，棄上清

5、；(8) 重復(fù) 58 步驟一次；(9) 加生理鹽水 0.5 ml 重懸浮，混勻；(10) 生理鹽水中透析 12 24 h ；(11)在 0.2 M pH 9.0硼酸緩沖液透析12 24 h ；(12)分裝，即將使用時(shí)4保存，備用 - 20保存。第 3頁(yè)為最大限度保持抗體活性，整個(gè)過(guò)程應(yīng)在4下進(jìn)行。對(duì)于凍干抗血清或長(zhǎng)時(shí)間保存的血清，將生理鹽水透析改為3 M KCNS 透析，促使聚合的多聚體解聚。硫酸銨法純化血清 IgG 粗品 : 取 1 份血清加入 1 份生理鹽水進(jìn)行稀釋 ,邊攪拌邊加入2 倍原血清體積的飽合硫酸銨, 室溫放置 30min, 7 000r /min離心 30min;沉淀溶于原血清

6、體積的生理鹽水中, 加入 1 倍體積的飽合硫酸銨 , 室溫放置 30min, 重復(fù)第二步 , 將沉淀溶于 1/ 10原血清體積的生理鹽水溶液中 , 在 0. 0175 mol/ L pH6. 3 PB4+緩沖液中透析至無(wú) NH 為止。免疫血清效價(jià)的測(cè)定：采用試管凝集法測(cè)定抗血清的效價(jià)。ELISA 檢測(cè)流程：用 pH 9.6 的 0.05 mol/L 碳酸鹽緩沖液稀釋抗原，加入96 孔聚苯乙烯酶標(biāo)反應(yīng)板孔內(nèi)，每孔100 L，60 烘干，用PBST緩沖液（注滿孔）洗滌 3 次；每孔加入 300 L 2 BSA -PBST封閉液， 37 封閉 1 h ， PBST緩沖液洗滌 3次；每孔加入 100

7、L 適當(dāng)稀釋的陽(yáng)性血清和陰性血清，37 反應(yīng) 1 h ， PBST緩沖液洗滌3 次；每孔加入100 L的羊抗兔 IgG-HRP酶標(biāo)抗體， 37 反應(yīng) 1h； PBST 緩沖液洗滌 3 次；加新配制的TMB-H2O2 底物溶液（臨用15 分鐘內(nèi)），每孔 100 L，37 避光反應(yīng)20min；以 50 L2 mol L-1 H 2SO4 終止反應(yīng)； 15 分鐘內(nèi)用酶標(biāo)檢測(cè)儀讀取OD450值，以判定結(jié)果?？乖罴寻粷舛群兔庖哐遄钸m稀釋度的確定：第 4頁(yè)棋盤法：將 1x109 CFU mL的菌體懸液梯度稀釋至lxl0 5 CFUmL，使抗血清做 1:2000 、1：5000、1 10 000 、1

8、15 000 、1 20 000 稀釋。酶標(biāo)抗體做 1： 1000 稀釋，每個(gè)稀釋度包被3 個(gè)孔，進(jìn)行間接ELISA 測(cè)定。以能產(chǎn)生 OD450值為 1.0 左右，且 PN 值最大的為抗原抗體最佳稀釋度。酶標(biāo)二抗最適稀釋倍數(shù)確定：在確定的抗原抗體最佳工作濃度下，將酶標(biāo)二抗稀釋為1：l000 、l ：2000、l ： 5000、 l ： 10000、1： 20000 5個(gè)稀釋比試驗(yàn)，依據(jù)其OD450值在 1.0 左右的選擇為最佳二抗稀釋比，且P N值最大為最佳稀釋度。硼酸緩沖液一般PH6.779.24A 液： 0.2mol/L硼酸 0.05mol/L NaCl配方：硼酸 :1.2368g ， N

9、aCl 0.2925g,加蒸餾水至100mlB 液： 0.05mol/L硼酸鈉配方：硼酸鈉1.907g, 加蒸餾水至100ml不同的 PH值配方如下：PHA(ml)B(ml)PHA(ml) B(ml)6.779.70.38.41 5.54.57.099.40.68.51 5.05.57.369.01.08.60 4.56.07.608.51.58.69 4.06.07.788.02.08.84 3.07.07.947.52.58.982.08.0第 5頁(yè)8.087.03.09.111.09.08.206.53.59.240 10.08.316.04.0透析袋使用前處理：1. 把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)

10、度（ 10-20cm）的小段。2. 在大體積的 2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0) 中將透析袋煮沸 10 分鐘。3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0) 中將之煮沸 10 分鐘。5. 冷卻后，存放于 4 度，必須確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出，將之清洗干凈。透析膜 ( 前處理方法如下 ) ：1.戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長(zhǎng)度，浸在蒸餾水中15 min 泡軟。2.浸入 10 mM 碳酸氫鈉中，并加熱至 80，一邊攪拌至少 30 min 。3. 換到 10 mM N

11、a2EDTA中浸泡 30 min ，以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。4.再用 80 蒸餾水洗30 min ，然后換到20% 酒精中，放在4 冰箱中保存。方法一：1、 把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度（10-20cm）的小段。第 6頁(yè)2、在大體積（ 500mL）的 2%（W/V）的碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA.2Na(pH=8.0)中將透析袋煮沸10min。3、 用蒸餾水徹底清洗透析袋。4、 放在 500mL的 1 mmol/L EDTA.2Na (pH=8.0)中將之煮沸10min。5、 冷卻后，置于30或者 50%的酒精中，放于4冰箱，必須確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋必須戴

12、手套。6、 在使用前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗干凈。說(shuō)明：透析液的配置：10g NaHCO3 + 186.6mg EDTA.2Na + 500mL 蒸餾水1 mmol/L EDTA.2Na ：即 373.2mg/L方法二：可用沸水煮5 至 10 分鐘，再用蒸餾水洗凈，即可使用。方法三：可先用 50乙醇煮沸 1 小時(shí)，再依次用 50乙醇、 0.01 mol/L 碳酸氫鈉和 1 mmol/L EDTA（pH=8.0 ）溶液洗滌，最后用蒸餾水沖洗即可使用。說(shuō)明：1.EDTA煮主要是為了除去生產(chǎn)時(shí)附著在透析袋上的金屬離子。2. 透析袋的截留分子量 3000kd。使用后的透析袋保存方法：1. 用生理

13、鹽水浸泡以去掉蛋白，并用蒸餾水清洗干凈，然后置于 50乙醇第 7頁(yè)中保存即可；2. 用完以后 , 要徹底洗干凈 , 透析袋也可以保存在 0.1%疊氮鈉（可防止微生物生長(zhǎng)）里； 0.05%-0.1%疊氮鈉，或者1mM EDTA，或者 50甘油中 4 度保存，公司的人建議前兩種保存比較好！3. 使用后的透析袋洗凈后可存于 4蒸餾水或者 30%乙醇中，確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。若長(zhǎng)時(shí)間不用，可加少量 NaN2，以防長(zhǎng)菌。從此時(shí)起取用透析袋必須戴手套。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂口，用時(shí)必須仔細(xì)檢查，不漏時(shí)方可重復(fù)使用。實(shí)驗(yàn)操作：1 、取空白酶標(biāo)板，于每孔中加入純化蛋白溶液100L，于振蕩器上震蕩混勻

14、，用封口膜封蓋酶標(biāo)板，室溫包被過(guò)夜。2、取下封口膜，棄去酶標(biāo)板內(nèi)溶液，用洗劑液（1PBST）洗劑酶標(biāo)板5次，最后一次吸干。每孔加入1%BSA封閉液 100L， 37 封閉 1h。3、取下封口膜，棄去酶標(biāo)板內(nèi)溶液，用洗劑液（1PBST）洗劑酶標(biāo)板5次，最后一次吸干。每孔加入一抗血清100L， 37封閉 1h。4、取下封口膜，棄去酶標(biāo)板內(nèi)溶液，用洗劑液（1PBST）洗劑酶標(biāo)板5次，最后一次吸干。每孔加入酶標(biāo)二抗兔抗羊IgG- HRP100L， 37封閉1h。5、取下封口膜，棄去酶標(biāo)板內(nèi)溶液，用洗劑液（1PBST）洗劑酶標(biāo)板5次，最后一次吸干。每孔加底物A 50L和底物 B 50L，震蕩混勻，室溫顯

15、色 10 15min。第 8頁(yè)6、 每孔加入終止液50L，立刻在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)下讀取OD值。加樣孔OD 值檢測(cè)血清其他血清陰性血清或未免血清（只加稀釋液或未免血清、酶標(biāo)二抗，底物顯色液A、B 及終止液）酶空白孔（只加酶標(biāo)二抗，底物顯色液A、B 及終止液）底物空白孔（只加底物顯色液A、B 及終止液）純空白孔（只加終止液）抗血清的純化(Purification of antiserum)抗血清純化的目的是盡量除去抗血清中與目的抗體不相關(guān)的成分，以防止抗體外的其他血清成分對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。因此只能根據(jù)不同目的的要求，從抗血清中除去容易干擾的有關(guān)成分，或提取相應(yīng)的免疫球蛋白?？寡寮兓姆椒ㄖ?/p>

16、要有粗提法和精制法兩個(gè)過(guò)程。粗提法主要常用硫酸銨鹽析法，精制法分非特異性和特異性兩種類型。非特異性方法如葡聚糖凝膠過(guò)濾法、離子交換層析法，其方法均系基于蛋白質(zhì)分子的物理性質(zhì)。特異性方法如免疫吸附法，其方法基于抗原抗體的特異性反應(yīng)。一、鹽析法第 9頁(yè)(Salt fractionation)【實(shí)驗(yàn)原理】蛋白質(zhì)在不同濃度的鹽溶液中相對(duì)溶解度不同，血清 球蛋白在一定濃度鹽溶液中易于沉淀，而白蛋白則不易沉淀，據(jù)此可將二者分離?！局饕噭┡c器材】1. 飽和硫酸銨溶液取 500ml 蒸餾水加熱至7080，將 400g 硫酸銨溶于其中，攪拌20min，冷卻。待硫酸銨結(jié)晶沉于瓶底，其上清即為飽和硫酸銨。在使用前

17、用28%氨水調(diào) pH7.0 。2. 兔血清(含抗體 )。3. 透析袋、離心機(jī)等。【操作方法】1. 用 55%飽和硫酸銨提取血清中 、 球蛋白血清 1 份加生理鹽水1 份混勻 , 然后逐滴加入飽和硫酸銨2 份中 , 邊加邊攪拌 , 防止形成團(tuán)塊降低沉淀物的特異性. 混勻后靜置 30min 或置 4冰箱過(guò)夜。低溫高速10 000/min 離心 10min，將上清液 ( 含白蛋白 ) 棄去，取沉淀物( 含球蛋白 ) 溶于少量生理鹽水中。2. 用 33%飽和硫酸銨提取 球蛋白將上述提取物生理鹽水溶液2 份加 1 份飽和硫酸銨。然后再10 000/min離心，其余操作同上。3. 按同樣方法用 33%飽和

18、硫酸銨再提取 1 次。4. 將提取物裝入透析袋，在生理鹽水中透析，以除去其中所含的硫酸銨。第10 頁(yè)放 - 20冰箱保存?！窘Y(jié)果判斷】用雙向免疫擴(kuò)散法和免疫電泳法檢測(cè)抗體活性、效價(jià)和純度?！咀⒁馐马?xiàng)】1. 用于鹽析的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、硫酸鎂、氯化鈉、磷酸鹽等，最常用的是硫酸銨，因?yàn)榱蛩徜@飽和溶液所含鹽濃度很高，溶解度受溫度影響小，一般不引起蛋白質(zhì)變性，但不純的硫酸銨含重金屬，會(huì)影響蛋白質(zhì)生物活性，故應(yīng)用分析純?cè)噭?. 中性鹽濃度不同濃度硫酸銨，當(dāng)達(dá)到20%飽和度時(shí)，可沉淀血漿中纖維蛋白原，增加飽和度至28%33%，可使優(yōu)球蛋白析出，當(dāng)飽和度大于50%則可析出白蛋白。3.pH當(dāng)溶液 pH

19、調(diào)至蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，使所帶陽(yáng)電荷與陰電荷相等時(shí)，易使蛋白析出。球蛋白等電點(diǎn)為pH58。4. 蛋白質(zhì)濃度如血清蛋白的濃度自0.5%遞增至 3%時(shí)，所需中性鹽飽和度的最低極限度可從29%遞減至 24%，但當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度增高后，蛋白質(zhì)的共沉作用也增加，影響蛋白質(zhì)純化，故當(dāng)溶液內(nèi)蛋白質(zhì)濃度過(guò)高，可做適當(dāng)稀釋，一般認(rèn)為2.5% 3.0%的蛋白濃度較好。5. 溫度鹽析蛋白時(shí)溫度要求并不嚴(yán)格，一般在室溫(25 ) 比在0時(shí)更易析出，除非鹽析對(duì)溫度敏感的蛋白質(zhì)( 如抗體 ) 要求在 4進(jìn)行。6. 透析除鹽透析液內(nèi) NH4+的檢測(cè)可用納氏試劑， 如產(chǎn)生黃色沉淀證明NH4+的存在?！緫?yīng)用與評(píng)價(jià)】第11 頁(yè)經(jīng)鹽析法提

20、取的蛋白質(zhì)為粗提的免疫球蛋白，若要獲得純化的免疫球蛋白，必須經(jīng)凝膠過(guò)濾或離子交換層析提純?！舅伎碱}】1. 鹽析法粗提免疫球蛋白的原理是什么？2. 鹽析法粗提免疫球蛋白有哪些注意事項(xiàng)？二、凝膠過(guò)濾法(Gel filtration)【實(shí)驗(yàn)原理】利用具有分子篩效應(yīng)的多孔網(wǎng)狀凝膠做為介質(zhì)，可分離提純分子量不同的大分子物質(zhì)。在凝膠過(guò)濾過(guò)程中，分子量大的物質(zhì)因不能進(jìn)入凝膠網(wǎng)孔而沿凝膠顆粒間空隙先流出凝膠柱外；分子量小的物質(zhì)因能進(jìn)入凝膠網(wǎng)孔而受阻滯，流速緩慢而最后流出柱外，這樣就能將分子量不同的物質(zhì)分離。【主要試劑與器材】1. 待提純樣品。2.Sephadex G-200 。3.2.5 100mm層析柱。4

21、. 洗脫液0.01mol/L pH7.2 7.4PBS( 含 0.14mol/L NaCl)。5.751 紫外分光光度計(jì)?！静僮鞣椒ā?.處理凝膠將 Sephadex G-200 用蒸餾水竟充分膨脹后進(jìn)行浮選。2.裝柱在層析柱底部鋪加一層尼龍紗，然后將洗脫液和凝膠粒子沿插入柱底的玻璃棒緩緩傾注于層析柱內(nèi)。第12 頁(yè)3. 加樣在凝膠柱表面再加一層尼龍紗，沿管壁緩緩加入樣品，所加樣品體積不超過(guò)凝膠柱的10%。4. 洗脫洗脫液洗脫，流速20ml/h 。待樣品洗脫下來(lái)( 用 20%磺基水楊酸檢測(cè) ) 即用試管分段收集。5. 檢測(cè)在紫外分光光度計(jì)上測(cè)定各管樣品的A280nm值。【結(jié)果判斷】以 A280n

22、m值為縱軸，收集管次序?yàn)闄M軸，繪出各洗脫峰，并分別收集各峰的洗脫液，再分別進(jìn)行蛋白質(zhì)定量與性質(zhì)和純度的鑒定。用已知標(biāo)準(zhǔn)抗體，采用雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫電泳法鑒定蛋白質(zhì)性質(zhì)和純度。【注意事項(xiàng)】1. 膨脹凝膠時(shí)，需將凝膠干粉慢慢加入到盛有10 倍水的燒杯內(nèi)，邊加邊用玻璃棒輕輕攪動(dòng)，待被浸泡膨脹的凝膠粒沉下，傾去上層水份及內(nèi)含的細(xì)顆粒，換蒸餾水?dāng)?shù)次，浸泡過(guò)程攪動(dòng)要溫和輕慢，以免損壞凝膠顆粒，裝柱前一定要達(dá)到充分膨脹并換洗脫緩沖液(PBS) 再平衡，換 PBS2 3 次，待裝柱用。2. 一般常用的洗脫緩沖液 pH和離子強(qiáng)度以能使樣品穩(wěn)定為原則。血清蛋白成分的分離純化，多采用 pH6.9 8.0 之間磷

23、酸鹽緩沖液或 pH8.0 Tris-HCl 緩沖液。3. 樣品洗脫結(jié)束后，凝膠即已再生。依次裝柱可反復(fù)使用多次。凝膠懸液加防腐劑后于 4冰箱內(nèi)可保存數(shù)月?！緫?yīng)用與評(píng)價(jià)】凝膠過(guò)濾法廣泛應(yīng)用于生物高分子的蛋白質(zhì)、酶、核算等的分離和提純；第13 頁(yè)凝膠過(guò)濾法還可用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)分子量，需取已知分子量樣品作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照；血清中存在異常免疫球蛋白，經(jīng)凝膠過(guò)濾得到與正常人不同的峰形?！舅伎碱}】凝膠過(guò)濾法純化抗體的原理是什么？三、離子交換層析法(Ion exchange chromatography)【實(shí)驗(yàn)原理】離子交換層析是從血清包括抗血清中分離純化IgG 的重要方法。它是利用帶電離子的纖維素( 如 DEAE

24、纖維素 ) ，吸附帶相反電荷的蛋白質(zhì)，又因各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不盡相同，在一定pH 條件下，所帶電荷量不等，與纖維素結(jié)合的能力有別。當(dāng)用pH7.4 磷酸緩沖液 (PB) 洗脫時(shí)，人血清蛋白中IgG 所帶電荷最少，與纖維素結(jié)合最差，故最先被洗脫下來(lái)，從而可達(dá)到分離純化目的?！局饕噭┡c器材】1. 蒸餾水、 0.5mol/L NaOH 、0.01mol/L pH7.4 PBS 、20%三氯醋酸。2. 混合正常人血清、 DEAE纖維素。3. 層析柱、燒杯、 pH試紙?！静僮鞣椒ā?. 用蒸餾水浸泡適量 DEAE纖維素過(guò)夜，除去飄浮物，再用 0.5mol/L NaOH浸泡 30min，反復(fù)用蒸餾水洗，

25、可用 2 000r/min 離心或布氏漏斗抽濾分離，直到洗至約 pH7.4，用 0.01mol/L pH7.4 PBS 再洗一次后裝柱。2. 用相同的 PBS平衡至 pH7.4，當(dāng)柱上端的 PB液凹面與纖維素相切時(shí)，加第14 頁(yè)入一定量的血清，待血清滲入柱內(nèi)與柱面相切時(shí)，立即沿管壁加少量洗脫液至形成 1cm液層后，用0.01mol/L PBS洗脫，控制流速為1ml/min 。3. 分管收集 , 每管吸取少量洗脫液，加 20%三氯醋酸測(cè)蛋白，合并、保留蛋白含量較高的洗脫液。4. 將含 IgG 的洗脫液裝入透析袋內(nèi)，用蔗糖或大分子聚乙二醇包埋過(guò)夜，水份析出，袋內(nèi) IgG 被濃縮。 IgG 可短期保

26、存于 4冰箱中備用?！窘Y(jié)果判斷】用單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)測(cè)定濃縮液 IgG 含量，用抗人全血清作免疫電泳測(cè)定純度，如純化成功，應(yīng)只在IgG 部位出現(xiàn)沉淀線?！咀⒁馐马?xiàng)】1. 纖維素裝柱時(shí)，不能出現(xiàn)斷層、氣泡，柱面要平整。2. 緩沖液平衡要充分。3. 加血清量不宜過(guò)多?！緫?yīng)用與評(píng)價(jià)】該方法是目前最廣泛應(yīng)用的高分子物質(zhì)提純方法之一?？?IgG 或特異性 IgG均可用本法純化。純化的IgG 雜蛋白少，可做為免疫原、包被用抗體或用標(biāo)記物標(biāo)記?！舅伎碱}】離子交換層析純化IgG 的原理是什么？附單克隆抗體制備簡(jiǎn)介目前，商品單克隆抗體已有數(shù)百種,常規(guī)使用的單抗試劑盒已廣泛地用于第15 頁(yè)病原體 ( 病毒、細(xì)菌、寄生蟲)、腫瘤標(biāo)志物、激素、自身抗體、細(xì)胞