體內藥物分析課程必做作業(yè)(答案)參考

1、文檔供參考，可復制、編制，期待您的好評與關注！ 體內藥物分析課程作業(yè)一、問答題第X章題目要求1什么是體內藥物分析？與常規(guī)藥物分析相比，體內藥物分析有哪些特點？答：體內藥物分析旨在通過各種分析手段，了解藥物在體內的數(shù)量與質量變化。獲得藥物代謝動力學的各種參數(shù)和信息，從藥品生產、臨床醫(yī)療、實驗研究等方面對所研究藥物作出估計和評價。與常規(guī)藥物分析相比，體內藥物分析具有干擾雜質多、樣品量少且濃度變化大，不能再度獲得完全相同的樣品、有時要求較快提供結果、要有一定的儀器設備、工作量大等特點。必做影響血藥濃度的因素有哪些？答：包括j機體因素：生理（年齡、性別、妊娠）、病理、遺傳；k藥物因素：劑型因素、手性藥

2、物對映體相互作用；l環(huán)境因素：化學物質、合并用藥；m人體晝夜節(jié)律、營養(yǎng)和精神狀態(tài)。必做為什么要進行體內藥物分析？體內藥物分析的主要任務是什么？答：為開展臨床藥學和臨床藥理學研究服務，以指導臨床安全、合理、有效用藥和正確評價新藥。體內藥分的主要任務：分析方法學的研究、治療藥物監(jiān)測、藥代動力學研究、人群代謝分型研究、體內內源性物質的測定及其它方面（藥物濫用、吸毒、興奮劑檢測、法醫(yī)毒物分析等）的應用。必做2藥物進入體內后一般需經歷哪些物理、化學變化？這些變化與藥理作用的關系如何？答：物理變化系指藥物與生物大分子如血漿蛋白的結合反應?；瘜W變化系指藥物的代謝反應，包括一相代謝（氧化、還原、水解反應）和二

3、相代謝反應（各種結合反應）由于藥物的作用強度與血液中游離藥物的濃度密切相關，同時藥物經代謝后活性發(fā)生了變化，故藥物的物理、化學變化與藥理作用密切有關。必做藥物在體內的代謝反應有哪些類型？必做3常用生物樣本有哪些？如何采集、儲存。答：常用生物樣本有：血樣（血漿、血清和全血）、尿樣、唾液。采集與儲存：血漿全血加抗凝劑，離心，取上清液；血清全血離心，取上清液。采血后必須盡快離心分離出血漿或血清，置20以下冷凍保存。尿樣收集服藥后一定時間內尿樣，記錄體積，混合均勻后取一定量,測定尿中藥物濃度，計算一定時間內尿中藥物的累積量。唾液漱口15分鐘后收集口內自然流出或經舌在口內攪動后流出的混合唾液，離心后取上

4、清液。樣本采集后不能及時測定，可置4冷藏，若放置時間較長，則需-20-80冷凍保存。必做生物樣品測定前為什么要除去蛋白質？除去蛋白質的常用方法有哪些？答：除蛋白質的意義：使結合型藥物釋放出來，以測定總濃度。得到較“干凈”的提取液，減少乳化。消除對測定的干擾。常用去蛋白質方法：蛋白質沉淀法生成不溶性鹽或鹽析和脫水作用。包括：加酸類、重金屬鹽、中性鹽和能與水混溶的有機溶劑等，如：三氯乙酸、高氯酸、Cu2+、硫酸銨、甲醇、乙腈等。組織酶消化法蛋白水解酶，如胰蛋白酶、胃蛋白酶等。必做影響液-液提取和液-固提取效率的因素分別有哪些？必做影響液-液提取的因素有:水相pH 提取溶劑 離子強度影響液-固提取的

5、主要因素有:固定相 洗脫液流速 樣品裝載量4評價分析方法的效能指標包括哪些項目？如何求算？必做試述體內藥物分析方法設定的一般步驟。答：首先進行文獻查閱，設計方案，然后通過實驗加以驗證。一般實驗步驟如下：以純品進行測定選擇最佳測定條件（線性，靈敏度、pH、檢測波長等）?？瞻讟悠窚y定按設定的方法進行前處理和測定，考察空白值的大小和干擾程度。以水代替空白樣品，添加標準品后測定，以獲得提取回收率的大致情況，從而對前處理中各步操作條件進行選擇。空白樣品中添加標準后測定求樣品回收率，建立標準曲線等。體內實樣測定根據(jù)實樣測定結果來判斷設定的方法是否合理、可行。以上步驟需要反復試驗以獲得最佳實驗條件。必做闡述

6、定量限與檢測限的定義、區(qū)別及表示方法。答：定量限即定量下限（LLOQ），表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準確度要求，常以標準曲線最低濃度點來確定，或以 S/N=510確定。檢測限（LOD）表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以信噪比（S/N）=23時被測藥物的絕對量表示；兩者的區(qū)別主要在于是否有定量要求：LOD沒有定量要求，而LLOQ則有定量要求。必做體內藥物分析方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？答：體內藥物分析方法可分為三大類：光譜法包括比色法、紫外法和熒光法。方法優(yōu)點是操作簡便、快速，所需設備簡單。其缺點是不具備分離功能，選擇性較差，對前處理要求高；比色法和紫外法靈敏度較低。免疫法包

7、括放射免疫、酶免疫、熒光免疫等。方法優(yōu)點是靈敏、專屬，操作簡便、快速，對樣品預處理要求不高。其缺點是精密度較差，需要試劑盒和專屬儀器。色譜分析法包括HPLC, GC, LC/MS, GC/MS等。方法優(yōu)點是具有分離分析功能，是評價其它方法的參比方法。必做5紫外法消除干擾的方法有哪些？說明原理和應用條件。P82必做 1.差示分光光度法（1） 利用最大吸收波長進行測定（2）利用最小吸收波長處的增色效應進行測定（3）利用最大吸收與最小吸收之差（即振幅）進行測定2.雙波長測定法如何進行激發(fā)光譜和熒光光譜的測定？P91頁必做熒光物質吸收紫外光后被激發(fā)出熒光，如果將激發(fā)熒光的光源用單色器使其分光后，測定在

8、每一波長的激發(fā)光照射下，物質所發(fā)射的熒光，以熒光強度對激光光波長作圖，得到熒光物質的激光光譜，實際上，激發(fā)光譜就是熒光物質的吸收光譜。激發(fā)光譜中最高峰的波長，能使熒光物質發(fā)出最強烈的熒光。如果使激發(fā)光的波長和強度保持不變，而讓物質所發(fā)生的熒光通過單色器色散，依次將不同波長的熒光照射于接收器上，并依次測其熒光強度，然后以熒光強度對相應的熒光波長作圖，得到該物質的熒光發(fā)射光譜，簡稱熒光光譜。6免疫分析的基本原理、基本條件是什么？答：基本原理：即抗原-抗體結合反應。在反應體系中，當抗體（Ab）量一定時，抗原（Ag）與標記抗原（Ag*）就與抗體發(fā)生競爭性結合反應，生成的Ag*-Ab與Ag的量呈負相關，

9、這種特異的競爭性抑制的數(shù)量關系是免疫分析的定量基礎?；緱l件是：特異性抗體、標記抗原、未標記抗原（即標準品）。必做常用免疫分析有哪幾種？相互間區(qū)別在哪些方面？答：常用免疫分析有放射免疫法、酶免疫法、熒光免疫法、化學發(fā)光免疫法等，它們的主要區(qū)別在于標記物不同，由此采用的測定方法也不同。必做在RIA中，結合物與游離標記物的分離方法有哪些？必做7氣相色譜儀最常用檢測器是什么？有何特點？適用范圍？必做GC法定量方法與內標選擇原則？答：對內標物的要求：內標物必須是樣品中不含有的組分，其保留時間應與待測物tR值相近，但R1.5，并具有足夠的純度。內標物選擇原則：內標與被測物相差一個化學元素；或內標與被測物

10、為同系物；或內標與被測物結構相似，或內標與被測物理化性質相似。必做什么是正相色譜？什么是反相色譜？必做說明RP-HPLC法的常用固定相、流動相、適用范圍，及流動相中甲醇等有機溶劑濃度變化對被測組分保留時間的影響。答：常用固定相ODS（C18）柱；流動相甲醇-水、乙腈-水、四氫呋喃-水；適用范圍非極性至中等極性的各類分子型化合物；流動相中甲醇等有機溶劑濃度增大，被測組分保留時間縮短。必做HPLC儀常用檢測器有哪些？指出各種檢測器的適用范圍和適用注意點。答：常用檢測器有：紫外、二極管陣列、熒光、蒸發(fā)光散射、電化學、質譜等。紫外檢測器通用型檢測器，適合具有紫外吸收的各種物質的檢測。二極管陣列檢測器具

11、有光譜、色譜和三維圖譜，可以進行定性和定量分析，以及色譜峰純度檢查。熒光檢測器專屬檢測器，適合具有熒光或潛在熒光物質的檢測，靈敏度高。蒸發(fā)光散射檢測器適合于無紫外吸收物質的檢測，要求流動相必須是揮發(fā)性的，不能含有非揮發(fā)性的緩沖鹽。電化學檢測器適合于具有氧化還原性質的物質，要求流動相必須有一定的電導率，一般為鹽類、有機溶劑和水的混合物。質譜檢測器具有定性定量功能和高的靈敏度。必做8什么是手性藥物？為什么要研究手性藥物？必做常用手性色譜方法有哪些？答：分子結構中含有不對稱碳原子（即手性中心）的藥物稱為手性藥物。因手性藥物兩對映體在體內的生物活性有差異，包括藥效學差異（競爭拮抗等）和藥動學差異（吸收

12、、分布、代謝、排泄）。為正確評價兩對映體的作用和進行對映體藥物的質量控制，所以要研究手性藥物。常用手性HPLC法有：手性衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。必做9毛細管電泳有哪幾種分離模式？毛細管電泳分離模式有 毛細管區(qū)帶電泳，膠束電動色譜，毛細管凝膠色譜，毛細管等電聚焦，毛細管等速電泳，移動界面毛細管電色譜 。必做10常用聯(lián)用技術有哪些？常用聯(lián)用技術有 LC-MS，GC-MS，GC-GC，HPLC-HPLC，GC-HPLC，免疫分析-HPLC 等必做二、名詞解釋第X章題目要求1TDM答：治療藥物監(jiān)測，為英文“therapeutic drug monitoring”的縮寫。必做2一相代

13、謝答：指藥物在體內發(fā)生的氧化反應、還原反應、水解反應。必做二相代謝答：指藥物在體內的結合反應，包括：葡萄糖醛酸結合、硫酸酯化、甲基化、乙酰基化、氨基酸綴合、谷胱甘肽綴合等。必做生物轉化答：主要指體內代謝反應。必做CYP1A2答：細胞色素P450 1族A亞族第2個酶基因。必做3血清答：全血經離心后的上清液。必做血漿答：全血加抗凝劑（肝素等），經離心后的上清液。必做4RSD答：相對標準偏差，即精密度的一種表示方法。必做檢測限答：表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以S/N=23倍時被測藥物的絕對量表示。必做定量限答：表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準確度要求，常以標準曲線最低濃度點來

14、確定，或以 S/N=510確定。必做提取回收率答：指藥物加入到生物樣本中經前處理后測得的量與理論加入量的比值。必做5熒光光譜答：以發(fā)射波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標所作的圖。必做激發(fā)光譜答：以激發(fā)波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標所作的圖必做6酶免疫分析答：酶免疫分析是在放射免疫分析基礎上發(fā)展起來的一種免疫分析方法，以酶代替同位素來標 記藥物，酶與底物、輔酶等反應后引起吸收光譜變化而被檢測。必做7反相HPLC答：即流動相極性大于固定相極性的HPLC。必做ODS答：即十八烷基硅烷鍵合硅膠，為常用反相HPLC的固定相。必做三、填充題第X章題目要求1體內藥物分析的特點 干擾雜質多，樣品量少濃度低，不能再

15、度獲得完全相同的樣品，B要有一定的儀器設備、工作量大 等。必做影響血藥濃度的因素有 機體因素（生理因素、遺傳因素、病理因素）、藥物因素（劑型、手性藥物相互作用）、環(huán)境因素（藥酶誘導劑、抑制劑、大氣污染、飲食） 等。必做2藥物在體內發(fā)生的物理變化和化學變化分別是指 和 。必做3常用生物樣品有 血樣（血漿、血清、全血），尿樣，唾液 等必做常用去蛋白的方法有 蛋白質沉淀法（加蛋白質沉淀劑，如：三氯乙酸，高氯酸，Zn2+，Cu2+ ，硫酸銨，氯化鈉，甲醇，乙腈，丙酮等）和組織酶消化法（加蛋白水解酶如：胃蛋白酶，胰蛋白酶，枯草菌溶素等）必做生物樣品中藥物與代謝物的提取方法有 液-液提取和液-固提取 等必

16、做影響液-液提取的因素有 水相pH 值、提取溶劑和離子強度 等。必做4分析方法認證的主要指標 線性范圍、 準確度、精密度、專屬性、靈敏度、 穩(wěn)定性 等必做體內藥物分析方法包括 光譜法（比色、紫外、熒光），色譜法（HPLC、GC、GC-MS、LC-MS），免疫分析法（放射免疫、酶免疫、熒光免疫） 等。必做5紫外光譜法消除干擾的方法有 差示光譜法、導數(shù)光譜法、雙波長法 等必做6在放射免疫分析中，結合物與游離標記物的分離方法有 沉淀法、吸附法、固相法、差速遷移法、雙抗體法 必做7氣相色譜法中常用的檢測器有 氫焰離子化檢測器、氮磷檢測器、電子捕獲檢測器、MS 等必做液相色譜中常用檢測器有 紫外檢測器（

17、可變波長、二極管陣列）、熒光檢測器、電化學檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、MS 等。必做反相HPLC法常用流動相有 甲醇-水，乙腈-水，四氫呋喃-水 必做8手性HPLC法常用測定方法有 手性試劑衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。必做9在毛細管電泳中，驅動荷電物質前進的兩個重要作用力是 電泳流 和 電滲流 。必做四、單選題第X章題目要求1尿中異煙肼及乙酰異煙肼的比色測定是利用（ B ）專屬反應（KCN氯胺T反應）A異煙肼 B乙酰異煙肼 C異煙肼及乙酰異煙肼 D異煙腙 E 異煙酸必做藥理作用強度與下列哪一項最相關（ C ）A血液濃度 B 攝入量 C 血液中游離藥物的濃度 D 與蛋白結合藥物的濃

18、度 E血藥總濃度必做2引起藥物氧化代謝的主要酶是（ D ）A氧化酶 B 硫酸酯酶 C脫氫酶 D細胞色素P450 E葡醛酸轉移酶必做屬于藥物二相代謝酶的是（ E ）A氧化酶 B 酯酶 C脫氫酶 D細胞色素P450 E葡醛酸轉移酶必做3欲提取尿中某一堿性藥物，其pKa為7.8，要使99.9%的藥物能被有機溶劑提取，尿樣pH應調節(jié)到（ D ）A. 5.8 B.9.8 C. 4.8以下 D.10.8或10.8以上 E. 7.8-9.8必做4表示生物樣品測定方法準確度的是（ E ）A 檢測限 B 定量限 C精密度 D 線性范圍 E回收率必做表示生物介質中藥物最低可測度的是（ A ）A檢測限 B定量限 C

19、線性范圍 D最低檢測濃度 E可信限必做方法的專屬性也稱選擇性，在體內藥物分析中主要考察（ E ）A相關物質 B內標物 C共存雜質 D降解物 E內源性物質必做表示樣品中含有其他共存物質時該法能定量測定被測物的能力的是（ D ）A方法的精密度 B方法的準確性 C方法的相關性D方法的選擇性 E方法的線性范圍必做5以發(fā)射波長對熒光強度所作的圖稱為（ E ） A激發(fā)光譜 B照射光譜 C紫外發(fā)射光譜 D吸收光譜 E熒光光譜（發(fā)射光譜）必做6放射免疫法與熒光免疫法的區(qū)別在于（D ）A抗體不同 B親和力不同 C標準抗原不同 D標記物不同 E原理不同必做7高效液相中流動相極性大于固定相的稱為（ A ）A. RP-HPLC B. HPTLC C. NP-HPLC D. LLPC E. HPCE必做一般鍵合相色譜的使用pH范圍為（ E ）A 39 B 29 C 27 D 38 E 28必做高效液相中流動相極性大于固定相的稱為（ A ）A. RP-HPLC B. HPTLC C. NP-HPLC D. LLPC E. HPCE必做五、多選題第X章題目要求1體內藥物分析的任務包括（ ABCD ）.A分析方法的研究 B血藥濃度監(jiān)測 C藥動學研究D體內內源性物質測定 E新藥質量標準研究必做2藥物二相代謝物綴合物（結合物）的水解方法有（ ACD ）A酸水解 B堿水解 C