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文檔簡介
1、Nucleofector 核酸轉染儀 Amaxa公司簡介Amaxa公司成立于1998年,是德國一只處于快速發(fā)展中的生物技術團隊,他們致力于一種高效率、非病毒基因轉染技術Nucleofector 的開發(fā)。在Nucleofector 技術和成功融資的基礎上,Amaxa公司從最初的兩個人迅速發(fā)展到現(xiàn)在的80多位技術人員的隊伍,并迅速成為非病毒基因轉染技術領域里最主要的公司之一。Nucleofector 核酸轉染儀Nucleofector 核酸轉染儀是將傳統(tǒng)地電穿孔技術和專用地轉染試劑結合起來的產(chǎn)物,針對不同的細胞類型,采用一套最理想的轉染試劑和轉染程序,以達到最理想的轉染效率。Nucleofecto
2、r 核酸轉染儀特別適用于轉染原代細胞和難以轉染的細胞系,如T細胞及PC-12細胞系等。Nucleofector 技術是獨一無二的,因為它可以直接將DNA轉染到細胞核內,因此實現(xiàn)了因受到細胞分裂限制而一直困擾人們的原代細胞的高效率轉染。在Nucleofector 核酸轉染儀的幫助下,您可以在腫瘤研究、免疫學、組織工程學及心血管疾病研究領域中輕而易舉地獲得大于90的高效率基因轉染率。 Nucleofector 技術由兩部分組成Nucleofector Solution轉染溶液轉染過程中,細胞首先懸浮在轉染試劑中,選擇相應地過程,僅需幾秒鐘,轉染結束,將細胞轉移到培養(yǎng)基中培養(yǎng)、觀察。針對不同的轉染細
3、胞都有相應地轉染試劑,配合相應地Amaxa轉染儀過程,使DNA直接轉入細胞核內,轉染效率高,易操作,實驗周期短Nucleofector Device轉染儀Nucleofector 轉染儀的原理使電穿孔技術,但它有一般的電穿孔無法比擬地優(yōu)點,它具有獨特地電子參數(shù),每一套電子參數(shù)是作為一種程序去適應不同的細胞類型。由于電子參數(shù)是預先精心設計好的,因此操作者不用進行電子參數(shù)的優(yōu)化、轉染條件的摸索等繁瑣的工作,您只需按動按鈕選用規(guī)定的程序即可。Nucleofector 核酸轉染儀的整個操作過程只需四步,非常簡單、高效。特點 轉染效率高因為DNA是直接轉入細胞核中,很容易得到高轉染效率。如大多數(shù)細胞系核
4、原代細胞地轉染效率位50-70;某些原代細胞,如人表皮纖維原細胞轉染效率超過90。 轉染速度快由于基因轉染不依賴細胞分裂,在大多數(shù)細胞類型轉染地基因2-4小時就能檢測表達,這大大縮短了傳統(tǒng)轉染方法必須24-48小時才能表達地時間。這樣加快了實驗進程,這個實驗只需一天就能完成。 操作簡單方便Nucleofector 轉染技術操作不到1小時就能完成。應用免疫學/血液學Amaxa公司的細胞轉染儀不僅可以轉染原代T、B細胞,而且對免疫細胞系如,K562,JURKAT或白血病細胞如CLL或AML等細胞都能進行高效率轉染。單核細胞、巨噬細胞或郎格罕氏細胞、單核細胞派生或CD34陽性細胞派生的樹突狀細胞的實
5、驗方案也已開發(fā)出來。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉染試劑盒:Human B Cells、Human T Cells、Human CD34 Cells、K562 CellsDMSZ)、JURKAT Cells。心血管研究過去,繁瑣的優(yōu)化步驟和缺乏重復性嚴重地阻礙了心血管轉染地的研究,現(xiàn)在,借助于Nucleofector 技術,已能成功進行成體干細胞、CD34陽性細胞、CD34陽性細胞派生的干細胞和間葉干細胞(MSC)等的轉染。近來,關于這些干細胞分化成內皮細胞或心肌細胞以及他們在適宜組織的定位的文獻已經(jīng)發(fā)表,這些資料顯示了Nucleofector 技術在干細胞治療心血管病的潛力。Amaxa公司
6、現(xiàn)在可以提供一下轉染試劑盒:HUVECs(Human Umbilical Vein Endothelial Cell)、HCAECs、Human AoSMCs、Human CD34 Cells。皮膚醫(yī)學和組織工程Nucleofector 轉染技術對于人的皮膚纖維原細胞或人的表皮黑色素細胞獲得高轉染效率,為皮膚學在基礎和臨床研究提供了很多新的機會,如研究纖維癥和傷口愈合,軟骨細胞基因的過度表達會加深對骨關節(jié)炎機理的理解??傊?,Nucleofector 轉染技術大大促進了皮膚很軟骨細胞治療操作的進展,在將來的基因治療中充滿前景。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉染試劑盒:Human Dermal F
7、ibroblasts(轉染率>70)、NHEMs。腫瘤研究惡性癌變是基因紊亂導致的不可調控的細胞無限生長。Nucleofector 質粒轉染法主要針對正常的原代細胞和其他惡性細胞系等,因此,它可以用于腫瘤分析中基因突變的分析。并且和其他方法相比,轉染基因的表達僅在2-4小時就能檢測到(如,肝細胞瘤細胞系HepG2的轉染),而其他方法需要等到24-48小花似,所以,Nucleofector 加速了實驗的進程。在惡性疾病的治療中,基因轉染將有助于高效的、有針對性的和安全抗癌的治療方法的產(chǎn)生。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉染試劑盒:HUVECs、NHEms、Human Dendritic C
8、ells、Commonly used cellline(CHO-K1(ATCC)、CHO-K1(DSMZ)、COS-7(DSMZ)、HEK293(ATCC)、293HEK(DSMZ)、HeLa(DSMZ)、HepG2(ATCC)、NIH3T3(DSMZ)。神經(jīng)生物學在大多數(shù)情況下,將基因轉染進入有絲分裂后期的神經(jīng)細胞(如原核腦皮層核海馬趾神經(jīng)細胞)被證實是無效的。其他轉染方法如磷脂鈣/DNA共沉淀法、陽離子脂質體法或顯微注射法等對神經(jīng)細胞都是有毒的,他們通常導致被轉染的細胞存活率不到10。經(jīng)改良后的病毒轉染法,如腺病毒核Semilki forest病毒具有較高的轉染率,單病毒載體的構建是耗時的、并且伴有不安全的擔憂,病毒感染有可能感染蛋白質的合成,更有甚者,由于病毒轉導后蛋白表達的水平太高,可能導致不正常的蛋白定位等錯誤的信息出現(xiàn)。應用Nucleofector 技術,質?;蚬押塑针目梢杂行У剞D移到原代神經(jīng)細胞和細胞系中,轉染后在很短時間內就有蛋白質地表達。更重要的是,蛋白質表達的水平受轉入的DNA量的影響。目前,神經(jīng)干細胞和星細胞等的實驗方案正在開發(fā)中。Nucleofecor 技術高轉染率和高
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