一、設(shè)備名稱、技術(shù)參數(shù)及功能要求

1、一、設(shè)備名稱、技術(shù)參數(shù)及功能要求： 設(shè)備名稱：?jiǎn)渭?xì)胞Western分析系統(tǒng)統(tǒng)英文名稱：Single-Cell Western system1. 工作條件1) 工作溫度： 4°C35°C2) 相對(duì)濕度： 20%-95%,無(wú)冷凝水3) 儀器運(yùn)行的持久性：儀器可連續(xù)正常運(yùn)行。4) 工作條件及安全性要求符合中國(guó)及國(guó)際有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)定。2. 設(shè)備用途及功能1）可做到單細(xì)胞蛋白表達(dá)分析2）腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性、免疫學(xué)、干細(xì)胞異質(zhì)性及其分化發(fā)育、免疫反應(yīng)分化、免疫細(xì)胞極化、精子、卵子、胚胎等蛋白質(zhì)檢測(cè)和CTC研究等。 3. 技術(shù)規(guī)格3.1細(xì)胞大?。褐睆?-25um細(xì)胞 3.2樣本類型: 1000

2、0個(gè)左右的哺乳動(dòng)物浮選細(xì)胞。3.3細(xì)胞類型: 神經(jīng)細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞，紅細(xì)胞等。3.4樣本捕獲數(shù)量：1000-2000個(gè)細(xì)胞3.5檢測(cè)蛋白大小范圍：15-175KD。3.6分子量分辨率：不同熒光10%分子差異，相同熒光30%分子量差異。3.7目標(biāo)蛋白個(gè)數(shù)：?jiǎn)未?-4個(gè)蛋白，可反復(fù)洗脫10次，再雜交。3.8芯片單元: 蛋白分離泳道長(zhǎng)度不大于900 m。3.9泳道寬度: 30m。3.10裂解時(shí)間：10-15s3.11電泳時(shí)間：45-90s3.12UV蛋白捕獲時(shí)間：4mins3.13芯片規(guī)格：3種3.14實(shí)驗(yàn)全程時(shí)間：4-6小時(shí) 。3.15抗體：用于WB的抗體及熒光二抗 。3.16電泳

3、電壓：240v3.17標(biāo)配532nm綠色激光和635nm紅色激光3.18焦深：64m3.19順序掃描，獨(dú)家非共焦設(shè)計(jì)，實(shí)時(shí)PMT增益調(diào)節(jié)，3.208位濾片輪3.21分辨率：5-100m3.22芯片可儲(chǔ)存9個(gè)月，在此期間可以不斷測(cè)試不同靶點(diǎn)3.23配備品牌電腦，主流配置4. 產(chǎn)品基本配置要求：系統(tǒng)主機(jī)一臺(tái)、掃描儀一臺(tái)、配套軟件分析系統(tǒng)一套、裝機(jī)試劑盒一套5. 技術(shù)及售后服務(wù) 1) 保修及維修：設(shè)備驗(yàn)收合格后保修1年，終身維修。 2) 培訓(xùn)：安裝同時(shí)現(xiàn)場(chǎng)培訓(xùn)，掌握基本操作；免費(fèi)兩人次參加每季度舉辦的進(jìn)階培訓(xùn)。6.建設(shè)必要性 單細(xì)胞Western分析系統(tǒng)是當(dāng)前供的供研究人員深入探究腫瘤組織和分選的干

4、細(xì)胞亞群等樣本中腫瘤異質(zhì)性的必備工具平臺(tái)。本平臺(tái)主要的研究方向有:腫瘤學(xué)相關(guān)研究、干細(xì)胞及發(fā)育研究、免疫學(xué)研究和CTC等學(xué)科門類。Western blot技術(shù)自1979年問(wèn)世以來(lái)，一直成為蛋白質(zhì)水平研究的必備工具，其技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用范圍已不言而喻，但經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展，該平臺(tái)的理論技術(shù)創(chuàng)新卻未得到長(zhǎng)足發(fā)展和改進(jìn)，科研人員仍停留在對(duì)總蛋白的樣本進(jìn)行定量分析，無(wú)法實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞的蛋白樣口進(jìn)行檢測(cè)。伴隨著后基因組時(shí)間的不斷發(fā)展和完善，以及精準(zhǔn)醫(yī)療的大力創(chuàng)新與突破，在單細(xì)胞檢測(cè)上成為無(wú)法跨越的鴻溝，諸多的異質(zhì)性的研究給western技術(shù)帶來(lái)新的問(wèn)題和挑戰(zhàn)，當(dāng)前在腫瘤的研究中，無(wú)法回避對(duì)腫瘤異質(zhì)性的研究

5、，同時(shí)，也會(huì)相應(yīng)涉及免疫學(xué)和干細(xì)胞的深入發(fā)掘，相關(guān)研究方向有:1）不同腫瘤干細(xì)胞克隆產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞在基因組及蛋白質(zhì)組存在差異，腫瘤干細(xì)胞具有和正常干細(xì)胞類似的表面標(biāo)志物及使用類似的分化信號(hào)通路以及干細(xì)胞差異分化現(xiàn)象等。2）干細(xì)胞基因和蛋白的表達(dá)差異（尤其轉(zhuǎn)錄因子）對(duì)于干細(xì)胞的自我更新，分化成特定系細(xì)胞具有重要意義。3）在免疫系統(tǒng)研究中，機(jī)體在受到在微生物感染，腫瘤環(huán)境，自身免疫病，及其他炎癥情況下，機(jī)體免疫細(xì)胞受到不同因子刺激（不同細(xì)胞因子，趨化因子，神經(jīng)遞質(zhì)等），分化/極化為不同功能的免疫細(xì)胞，不同免疫細(xì)胞，分泌不同細(xì)胞因子等，具有促進(jìn)炎癥/免疫，或抑制炎癥/免疫的功能，不同免疫細(xì)胞其表達(dá)的

6、基因，蛋白具有非常大的差異。分析不同生理/病理情況下免疫細(xì)胞的異質(zhì)性，極其蛋白表達(dá)，可以有助分析機(jī)體的免疫狀態(tài)，預(yù)測(cè)疾病轉(zhuǎn)歸，設(shè)計(jì)治療方案及開(kāi)展藥物研發(fā)。4）干細(xì)胞能夠無(wú)限增殖且存在很大的異質(zhì)性，也可分化和發(fā)育為機(jī)體數(shù)百種不同的細(xì)胞類型。 干細(xì)胞基因和蛋白的表達(dá)差異（尤其轉(zhuǎn)錄因子）對(duì)于干細(xì)胞的自我更新，分化成特定系細(xì)胞具有重要意義。單細(xì)胞Western分析系統(tǒng)的問(wèn)世完全迎合當(dāng)前精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展需要，可實(shí)現(xiàn)分析腫瘤細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的異質(zhì)性，分析腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性。巔履了傳統(tǒng)Western對(duì)總蛋白的樣測(cè)，無(wú)法細(xì)化到個(gè)體差異的局限，可實(shí)現(xiàn)研究人員深入洞察單個(gè)細(xì)胞的表達(dá)異質(zhì)差異問(wèn)題，針對(duì)特點(diǎn)的靶點(diǎn)，物定藥物等因子處理后觀察靶點(diǎn)的修飾細(xì)微變化，且靈敏度高，自動(dòng)化檢測(cè)，方便快捷，無(wú)論是科研還是臨床以及轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)平臺(tái)都將具有十分重要的意義，可實(shí)現(xiàn)科研與臨床的有效契合。目前國(guó)內(nèi)同類產(chǎn)品只有傳統(tǒng)的總蛋白定量免疫印跡系統(tǒng)，尚無(wú)可實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞的Western的檢測(cè)手段，缺乏對(duì)單個(gè)細(xì)胞的深入認(rèn)識(shí)，在精準(zhǔn)醫(yī)療研究上仍處于起步階段。而國(guó)內(nèi)省內(nèi)高校的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)等相關(guān)