微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用試題AB合卷

1、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用試題1. 以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，不正確的是( )A. 在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線(xiàn)后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng) B. 某同學(xué)用帶蓋的瓶子制備葡萄酒的過(guò)程中，每隔12小時(shí)左右將瓶蓋擰松一次，其目的是向瓶中通氣，以保證微生物的發(fā)酵 C. 將顯色后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量 D. 可以用稀釋涂布平板法來(lái)測(cè)定某土壤溶液活菌數(shù)目2. 在從土壤中分離出分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)中，先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，再進(jìn)行剛果紅染色法分離。先選擇培養(yǎng)的目的是( )A. 濃縮目標(biāo)菌種B. 除去雜菌，獲得能分解纖維素的純菌種C. 殺滅不需要的微生物D

2、. 在微生物的菌落上獲得纖維素分解菌種3. 在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲組實(shí)驗(yàn)用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實(shí)驗(yàn)用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)與觀察，則乙組實(shí)驗(yàn)屬于( )A. 空白對(duì)照 B. 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照 C. 相互對(duì)照 D. 條件對(duì)照4. (2009上海高考T16)在光照下，將等細(xì)胞數(shù)量的衣藻和大腸桿菌分別接種到只含無(wú)機(jī)鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，結(jié)果是(虛線(xiàn)和實(shí)線(xiàn)分別表示大腸桿菌和衣藻的生長(zhǎng)曲線(xiàn))5. (2009廣東高考T15)有關(guān)“探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量動(dòng)態(tài)變化”的實(shí)驗(yàn)，正確的敘述是( )A. 改變培養(yǎng)液的pH值不影響K值(環(huán)境容納量)大小B.

3、 用樣方法調(diào)查玻璃容器中酵母菌數(shù)量的變化C. 取適量培養(yǎng)液滴于普通載玻片后對(duì)酵母菌準(zhǔn)確計(jì)數(shù)D. 營(yíng)養(yǎng)條件并非影響酵母菌種群數(shù)量變化的唯一因素6. 在細(xì)菌的連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中，要以一定速度不斷添加新的培養(yǎng)基，同時(shí)以同樣速度放出老的培養(yǎng)基。下圖表示培養(yǎng)基的稀釋率(培養(yǎng)基的更新速率)與培養(yǎng)容器中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度、細(xì)菌代時(shí)(細(xì)菌數(shù)目增加一倍所需的時(shí)間)、細(xì)菌密度的關(guān)系。下列相關(guān)敘述不正確的是( )A. 在稀釋率很低的情況下，稀釋率的增加會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌密度增加B. 稀釋率從a到b的變化過(guò)程中，細(xì)菌生長(zhǎng)速度不斷提高C. 稀釋率超過(guò)b點(diǎn)后，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)高導(dǎo)致細(xì)菌死亡率增大，細(xì)菌密度降低D. 為持續(xù)高效地獲得發(fā)酵產(chǎn)品，

4、應(yīng)將稀釋率控制在b點(diǎn)附近7能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是( )A稀釋涂布平板法 B直接計(jì)數(shù)法 C重量法 D比濁法8下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是( )A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各01ml，分別涂布于各組平板上C將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，370C恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)D確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)9消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。下列哪些事物適用于消毒

5、處理( )皮膚 飲用水 牛奶 注射器 培養(yǎng)皿接種環(huán) 培養(yǎng)基 果汁 醬油 手術(shù)刀A BC D以上全部10.可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是( )A以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑11下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是( )A利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B接種時(shí)連續(xù)劃線(xiàn)的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的過(guò)程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少12微生物培養(yǎng)過(guò)程中，

6、要十分重視無(wú)菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無(wú)菌操作，防止雜菌污染，請(qǐng)分析下列操作中錯(cuò)誤的是( )煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢 接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行 無(wú)菌繁殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)行消毒 家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌 培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌A BC D12345678910111213. (2010全國(guó)卷T34)下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答：(1)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的

7、細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類(lèi)，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。從同化作用類(lèi)型看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于_。(2)將少量細(xì)菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)，定時(shí)取樣測(cè)定菌體數(shù)目，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，可以得到細(xì)菌的_曲線(xiàn)。該曲線(xiàn)中以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)作為縱坐標(biāo)的原因是_。實(shí)驗(yàn)室中，為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體，一般應(yīng)在_期取材；在生產(chǎn)中，常收集培養(yǎng)至_期的細(xì)菌用于次生代謝產(chǎn)物的提取。14. (2010全國(guó)卷T34)某種細(xì)菌體內(nèi)某氨基酸(X)的生物合成途徑如圖：這種細(xì)菌的野生型能在基本培養(yǎng)基(滿(mǎn)足野生型細(xì)菌生長(zhǎng)的簡(jiǎn)單培養(yǎng)基)上生長(zhǎng)，而

8、由該種細(xì)菌野生型得到的兩種突變型(甲、乙)都不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；在基本培養(yǎng)基上若添加中間產(chǎn)物2，則甲、乙都能生長(zhǎng)；若添加中間產(chǎn)物1，則乙能生長(zhǎng)而甲不能生長(zhǎng)。在基本培養(yǎng)基上添加少量的X，甲能積累中間產(chǎn)物1，而乙不能累。請(qǐng)回答：(1)根據(jù)上述資料推論：甲中酶_的功能喪失；乙中酶_的功能喪失，甲和乙中酶_的功能正常。由野生型產(chǎn)生甲、乙這兩種突變型的原因是野生型的_(同一、不同)菌體中的不同_發(fā)生了突變，從而導(dǎo)致不同酶的功能喪失。如果想在基本培養(yǎng)基上添加少量的X來(lái)生產(chǎn)中間產(chǎn)物1，則應(yīng)選用_(野生型、甲、乙)。(2)將甲、乙混合接種于基本培養(yǎng)基上能長(zhǎng)出少量菌落，再將這些菌落單個(gè)挑出分別接種在基本培養(yǎng)

9、基上都不能生長(zhǎng)。上述混合培養(yǎng)時(shí)乙首先形成菌落，其原因是_。(3)在發(fā)酵過(guò)程中，菌體中X含量過(guò)高時(shí)，其合成速度下降。若要保持其合成速率，可采取的措施是改變菌體細(xì)胞膜的_，使X排出菌體外。15. 某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37 。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還

10、應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱(chēng)為_(kāi)。16富集培養(yǎng)的微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定環(huán)境條件，是僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn)，從物理、化學(xué)、生物及綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇，如溫度、PH、紫外線(xiàn)、高壓、光照、氧

11、氣、營(yíng)養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類(lèi)化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程。利用富集培養(yǎng)技術(shù)從土壤中分離能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物請(qǐng)分析回答：(1)本實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基為碳源為。(2)實(shí)驗(yàn)原理是。(3)重復(fù)培養(yǎng)的目的是。(4)的菌落中大部分是降解微生物。(5)為組，為組，設(shè)置的目的是。(6)采用法，接種到的培養(yǎng)基中，在操作過(guò)程中為防止污染應(yīng)注意的事項(xiàng)是。17下表為牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，據(jù)此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量05g1g05g100mL蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是。要用此材料配制觀察細(xì)菌菌落狀況的培養(yǎng)基，還需添加的成分是。表中各成分含量確定的原則是

12、。培養(yǎng)基配制好后，分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是。從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌感染的方法是。在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面，其目的是。18.（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅，其原因是紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性，還能_。（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，

13、還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。（4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的_。（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_。（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。19氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，原因不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案（圖1）篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培養(yǎng)基配方如表1。（1）配制號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的_。（2）培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)PH的先后順序是_。（3）從用途上來(lái)說(shuō)，號(hào)培養(yǎng)基和號(hào)

14、培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是_。（4）在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體會(huì)變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱(chēng)為_(kāi)。（5）將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線(xiàn)（如圖2）。從圖2可知SP1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，其原因是_。專(zhuān)題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用試題B1A 2D 3A 4A 5A 6D7.答案： （1）選擇培養(yǎng)基 對(duì)羥基苯甲酸 （2）利用以對(duì)羥基苯甲酸為唯一的碳源選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類(lèi)化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物 （3）增大分解對(duì)羥基苯甲酸微生物的比例 （4）對(duì)羥基苯甲酸 （5）對(duì)照 實(shí)驗(yàn) 說(shuō)明通過(guò)富

15、集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物 （6）單細(xì)胞挑取 接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時(shí)打開(kāi)皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物8答案：提供碳源、氮源、生長(zhǎng)因子 瓊脂（凝固劑） 所培養(yǎng)微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需要量調(diào)整pH 高壓蒸汽滅菌、燒灼接種環(huán)、酒精棉擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種 擴(kuò)大接種面積9.答案：（1）溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短（2）滅菌 消毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu)（3）比例合適（4）鑒定(或分類(lèi))（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.（6）滅菌10.答案：（1）瓊脂（2）先調(diào)PH，后滅菌

16、（3）通用 選擇 硝酸銨（4）芽孢（5）20mg/L氯苯 硝酸最早耗盡專(zhuān)題二課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)一、1（1）目的菌珠 抑制 阻止 （2）特定 抑制 阻止(3)自養(yǎng)能固氮的微生物；2(1)有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2).稀釋度 細(xì)菌 30-300 顯微鏡3.非測(cè)試因素 可信度 無(wú)雜菌污染二、1. 土壤，鏟去表層土。2. 培養(yǎng)基 多于 對(duì)照 3.培養(yǎng) 1ml 9ml 0.1mL 4.30-300 平均數(shù)三：思考與討論（1）統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算（2）這是因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量（單位

17、：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn)，放線(xiàn)菌數(shù)約為477萬(wàn)，霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。因此，為獲得不同類(lèi)型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。*（3）提供碳源的是 葡萄糖 ，提供氮源的的是 尿素（4） 具有 只有能夠以尿素作為氮源的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 。（5）第 二 位同學(xué)的結(jié)果接近真實(shí)值改進(jìn)的操作是第一位同學(xué)需設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn)組；第二位同學(xué)統(tǒng)計(jì)的三個(gè)菌落數(shù)相差太大，說(shuō)明操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。（6）方案1：其他同學(xué)用A同學(xué)的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。方案2：A同學(xué)以不接種的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。專(zhuān)題2 課題3 分解

18、纖維素的微生物的分離參考答案：一、1.C H O 多糖 2.棉花 3.復(fù)合酶 C1 Cx 葡萄糖苷 纖維二糖 葡萄糖二 1. 剛果紅 2.紅色復(fù)合物，纖維素分解菌，是否產(chǎn)生透明圈三、（流程參考課本P138） 1. 纖維素 2思考1液體，沒(méi)有添加瓊脂成分.思考2以纖維素粉為唯一碳源，只有纖維素分解菌才能生存。思考3將纖維素粉改為葡萄糖。(1)純度 (3).搖床 混濁(4)參照專(zhuān)題1的稀釋操作， (6).透明圈思考4尿素分解菌的分離實(shí)驗(yàn)流程是將土樣制成的菌懸液直接涂布在選擇培養(yǎng)基上；本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)使細(xì)菌增殖后，再涂布在鑒別培養(yǎng)基上。其它操作基本基本共同。3.一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點(diǎn)是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)題，缺點(diǎn)是由于在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類(lèi)物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)