總氮標(biāo)準(zhǔn)曲線問題

1、空白值問題：國(guó)標(biāo)方法的話，做低濃度水樣時(shí)總氮空白吸光度值要求不超過0.03空白水樣的吸光度是多少? 一般是在0.020左右220nm時(shí)空白在0.2左右，275nm時(shí)空白在0.02左右，多半是過硫酸鉀的原因。我們用國(guó)藥的過硫酸鉀，220nm時(shí)空白在0.03左右，275nm時(shí)空白在0.002左右。過硫酸鉀問題：在50 水浴條件下緩慢溶解過硫酸鉀直到飽和無法再溶后，取出溶解過硫酸鉀的廣口瓶，取清夜放至室溫，移入4 冰箱內(nèi)放置一晚上，用同樣4 冷藏過的蒸餾水沖洗23次，如此重結(jié)晶23次后烘干即可。實(shí)際上要求用無氨水，我用的蒸餾水也可以做的很好，這個(gè)實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵在過硫酸鉀，國(guó)內(nèi)的藥品必須重結(jié)晶。我跟你說，就

2、是藥品的問題，解決了藥品99.99%的問題都解決了。別瞎扯什么水啊之類的，買好的藥品，進(jìn)口的買不起就買上海愛建（德固賽）出品的。30多塊錢。足夠了。我做這個(gè)摸索了很長(zhǎng)時(shí)間，連空氣污染都考慮進(jìn)去了，就差沒在真空室做這個(gè)實(shí)驗(yàn)了。nnd，全是哪些爛雜志的爛文章誤導(dǎo)的，說什么水有問題，這問題，那問題，空氣中有氨氮啊。最后換了藥品，Abs直接掉到0.1以下，即便粗粗的做下來也不會(huì)太高。Ps：不建議重結(jié)晶。我也見過別人重結(jié)晶，太麻煩，過硫酸鉀大于60就分解，我都懷疑重結(jié)晶出來的還是不是過硫酸鉀。 再重申一遍 就是藥品的問題。這個(gè)問題我做實(shí)驗(yàn)不下30次，看文獻(xiàn)不下100篇。結(jié)果呢，很多人跟我說是水，空氣，別

3、的實(shí)驗(yàn)干擾什么什么的。最后都不是，換了合格藥品閉著眼睛做都符合要求總氮測(cè)定的問題：水中總氮項(xiàng)目的測(cè)定常采用堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法。采用這種方法的優(yōu)點(diǎn)是步驟相對(duì)簡(jiǎn)單,所需試劑較少,要求使用的儀器設(shè)備一般實(shí)驗(yàn)室都能具備。但是該方法對(duì)空白值的要求非常嚴(yán)格,其所需試劑中的過硫酸鉀、氫氧化鈉本身都含有一定量的氮,因此空白實(shí)驗(yàn)不易做好。要做好總氮的空白實(shí)驗(yàn),不僅與試劑有關(guān),而且還與實(shí)驗(yàn)用水、器皿、家用壓力鍋或醫(yī)用手提蒸氣滅菌器的壓力、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及方法步驟的掌握等因素關(guān)系密切。以下幾個(gè)測(cè)定總氮過程中應(yīng)注意的問題是筆者長(zhǎng)期工作中的一點(diǎn)心得,現(xiàn)與大家共同探討。1試劑的配制、存放堿性過硫酸鉀的配制過程十分

4、重要,掌握不好,會(huì)影響消解效果,對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。GB1189489中關(guān)于堿性過硫酸鉀的配制,只是簡(jiǎn)單的說將過硫酸鉀和氫氧化鈉溶于水中,并未作其它要求。實(shí)際上,過硫酸鉀的溶解速度非常慢,若要加快溶解,絕對(duì)不能盲目加熱,即使加熱,也最好采用水浴加熱法,且水浴溫度一定要低于60,否則過硫酸鉀會(huì)分解失效。配制該溶液時(shí),可分別稱取過硫酸鉀和氫氧化鈉,兩者分開配制,再混合定容,或者先配制氫氧化鈉溶液,待其溫度降到室溫后再加入過硫酸鉀溶解。若二者在一只燒杯中溶于水,應(yīng)緩慢加水,同時(shí)攪拌,防止氫氧化鈉放熱使溶液溫度過高引起局部過硫酸鉀失效。過硫酸鉀的存放也要注意,應(yīng)避免與還原性物質(zhì)、硫、磷等混合存放

5、,另外,過硫酸鉀易吸潮,放出氧氣,因此,為防止失效,要將其放在干燥的試劑櫥中。2無氨水的制備實(shí)驗(yàn)過程對(duì)水的要求非常嚴(yán)格,普通的蒸餾水往往還達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求。這時(shí)需再做二次加工以得到無氨水。在用蒸餾法制備無氨水時(shí), GB1189489 中指出:“棄去前50ml餾出液,然后將餾出液收集在帶有玻璃塞的玻璃瓶中”。根據(jù)筆者的工作經(jīng)驗(yàn),僅僅棄去前50ml餾出液是不夠的。舉個(gè)例子說,如果蒸出1000ml的無氨水,先前蒸出的200ml餾出液都要棄去,最后蒸出的200ml餾出液也要棄去,只保留中間蒸出的無氨水待用,否則,重蒸無氨水的空白值往往還不如制備之前的普通蒸餾水空白值好。3實(shí)驗(yàn)室環(huán)境總氮的分析應(yīng)在無氨的實(shí)

6、驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行,室內(nèi)不應(yīng)含有揚(yáng)塵、石油類及其它的氮化合物,絕對(duì)不能在分析氨氮等氮類項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室中做總氮項(xiàng)目的分析,所使用的試劑、玻璃器皿等也要單獨(dú)存放,避免交叉污染,影響空白值。4玻璃器皿的洗滌所使用的玻璃器皿應(yīng)先用(1 + 9)鹽酸浸泡后,再用無氨水沖洗數(shù)次才能使用,否則,也會(huì)造成空白值偏高或平行性較差的情況。5消解溫度、壓力的控制對(duì)于使用醫(yī)用手提蒸氣滅菌器的實(shí)驗(yàn)室,因測(cè)定壓力為1. 11. 4kg/ cm2 ,溫度為120124,此時(shí)可以安裝一個(gè)穩(wěn)壓器,將壓力控制在該范圍,這樣就省去了通過人為切斷電源控制的麻煩,穩(wěn)定且省力。消解時(shí), GB1189489中要求達(dá)到規(guī)定溫度壓力后即開始計(jì)時(shí),而

7、筆者的經(jīng)驗(yàn)是,達(dá)到規(guī)定溫度壓力后應(yīng)當(dāng)先放氣使壓力表指針回零,再次達(dá)到規(guī)定溫度壓力后再計(jì)時(shí)?；蛘咧苯哟蜷_放氣閥加熱一段時(shí)間,待蒸氣滅菌器內(nèi)的冷空氣被徹底趕盡、放出熱蒸氣后再關(guān)閉放氣閥消解,并且將消解溫度控制在123,這樣測(cè)定結(jié)果最為理想。6比色時(shí)的注意事項(xiàng)該項(xiàng)目的測(cè)定涉及兩個(gè)波長(zhǎng)(220nm和275nm) ,有條件的實(shí)驗(yàn)室可采用雙光路紫外分光光度計(jì),其優(yōu)點(diǎn)是方便快速、可以避免反復(fù)調(diào)整波長(zhǎng)產(chǎn)生測(cè)量誤差,皿間誤差也能自動(dòng)修正。如果沒有雙光路的光度計(jì),建議在測(cè)定完一組樣品的同一波長(zhǎng)后,再調(diào)整到另一波長(zhǎng),統(tǒng)一測(cè)定,不要測(cè)完一個(gè)樣品的兩個(gè)吸光度后再換另一個(gè)樣品,這樣反復(fù)調(diào)整波長(zhǎng)會(huì)引起一定的測(cè)量誤差。7試劑

8、的選擇堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法測(cè)定總氮的過程中,過硫酸鉀是至關(guān)重要的試劑。首先,試劑的純度關(guān)系到空白值的高低、測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度。一般普通分析純過硫酸鉀的總氮含量最高不超過0. 005% ,但由于試劑質(zhì)量存在差異,有些廠家、批次的試劑含氮量常常達(dá)不到這個(gè)要求,致使空白值偏高。另外,分析純氫氧化鈉的氮化合物含量雖然大大低于過硫酸鉀的含氮量,但也要仔細(xì)選擇。筆者在工作中就曾遇到過將過硫酸鉀溶液與氫氧化鈉溶液混合成堿性過硫酸鉀溶液時(shí),竟散發(fā)出氨水氣味的現(xiàn)象,這說明試劑的純度不夠。因此,有條件的話建議使用優(yōu)級(jí)純或基準(zhǔn)試劑,盡量降低試劑中的含氮量,從而降低實(shí)驗(yàn)空白值。8實(shí)驗(yàn)用水及試劑的質(zhì)量檢驗(yàn)若實(shí)驗(yàn)

9、的空白值不夠理想,則需要對(duì)實(shí)驗(yàn)用水及試劑進(jìn)行檢驗(yàn),以選擇出含氮量最低的水和試劑,獲得理想的空白值。筆者的經(jīng)驗(yàn)是,若每換一種水、每換一個(gè)廠家、一個(gè)批次的過硫酸鉀、氫氧化鈉試劑就全過程做一遍總氮,將是相當(dāng)麻煩的,而且最終還往往難以得出結(jié)論。以下是筆者在工作中總結(jié)出的一點(diǎn)簡(jiǎn)便的方法,僅供參考。8. 1 水的檢驗(yàn)將所有待選的實(shí)驗(yàn)用水分別裝入石英比色皿中,分別在220nm和275nm波長(zhǎng)處測(cè)其吸光度,按A220nm2A275nm對(duì)吸光度進(jìn)行修正,以修正后吸光度值最小的水為實(shí)驗(yàn)用水。8. 2 試劑的檢驗(yàn)將所有待檢的過硫酸鉀、氫氧化鈉按其在實(shí)驗(yàn)時(shí)消解定容后的溶液中的含量分別配成相應(yīng)濃度的溶液,以此溶液作為樣品,分別測(cè)定其氨氮、硝酸鹽氮的吸光度,擇其吸光度最低者而用即可,若有必要,也可進(jìn)一步計(jì)算其氮含量。這里有必要強(qiáng)調(diào)的是硝酸鹽氮的檢驗(yàn)。若采用酚二磺酸分光光度法測(cè)定,步驟稍為繁瑣,建議可以參考水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法第四版中提到的紫外分