傷寒、副傷寒甲二聯(lián)菌苗

1、KKME-專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)搜索引擎?zhèn)?、副傷寒甲二?lián)菌苗 拼音shnghán、fùshnghánjièrliánjnmiáo 傷寒、副傷寒甲二聯(lián)菌苗制造及檢定規(guī)程1本品系用傷寒、副傷寒甲菌培育后取菌苔制成懸液，加甲醛殺菌，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋成每ml含傷寒1.5億菌，副傷寒甲1.5億菌制成。用于預(yù)防傷寒、副傷寒甲。菌種1.1菌種來(lái)源制造傷寒、副傷寒甲二聯(lián)菌苗用的菌種及檢定菌種用的診斷血清，應(yīng)由中國(guó)藥品生物制品檢定所分發(fā)或經(jīng)同意。1.2菌種檢定檢定菌種可用pH7.27.4的肉湯瓊脂、馬丁瓊脂或其他適宜的培養(yǎng)基。1.2.1培養(yǎng)特性制造菌苗的菌

2、株應(yīng)具有的典型的形態(tài)、培養(yǎng)和生化特性。1.2.2血清凝集試驗(yàn)用37培養(yǎng)1820小時(shí)的培養(yǎng)物以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋成含菌6億/ml，與相應(yīng)的傷寒、副傷寒甲菌診斷血清作定量凝集試驗(yàn)，搖勻后37過(guò)夜，以肉眼見(jiàn)到凝集（+）之血清最高稀釋度為凝集反應(yīng)之效價(jià)。凝集價(jià)不應(yīng)低于血清原效價(jià)之半。并用傷寒Vi及O血清做凝集試驗(yàn)，應(yīng)與Vi血清有凝集，與O血清不凝集，或僅有較低凝集。1.2.3毒力試驗(yàn)用37培育1216小時(shí)的瓊脂培養(yǎng)物以生理鹽水稀釋?zhuān)瑐♂尦?億/ml、3億/ml、1.5億/ml及0.75億/ml，副傷寒甲稀釋成15億/ml、7.5億/ml及3.75億/ml等濃度的菌液（根據(jù)菌種毒力情況可作更改也

3、可增加稀釋度）。第一稀釋度菌懸液腹腔注射體重1416g小白鼠至少5只，每只0.5ml，觀察3天，使小白鼠于感染后3天內(nèi)全部死亡的最小劑量為1個(gè)致死量（LD），傷寒菌種1LD應(yīng)不超過(guò)1.5億菌，副傷寒甲菌種不超過(guò)7.5億菌。1.2.4毒性試驗(yàn)用37培育1820小時(shí)瓊脂培養(yǎng)物混懸于磷酸鹽緩沖生理鹽水內(nèi)，56加溫1小時(shí)（或其他方法殺菌），不加防腐劑。殺菌試驗(yàn)合格后稀釋成每ml含菌60、30及15億共3個(gè)濃度，每一濃度的菌懸液以0.5ml腹腔注射體重1518g小白鼠5只，觀察3天，注射7.5億菌之小白鼠應(yīng)全部生存，注射15億菌的5只小白鼠可有3只死亡。1.2.5免疫力試驗(yàn)按傷寒、副傷寒甲、乙三聯(lián)菌苗制

4、造及檢定規(guī)程1.2.5項(xiàng)進(jìn)行。1.2.6抗原性試驗(yàn)選體重2kg左右之健康家兔至少3只，用免疫力試驗(yàn)所用之菌液靜脈注射3次，每次0.5ml，第1次注射7億菌，第2次14億菌，第3次21億菌，每次間隔7天。末次注射后1014天采血做定量凝集試驗(yàn)測(cè)定效價(jià)。傷寒菌免疫的血清對(duì)免疫菌效價(jià)應(yīng)不低于112800，副傷寒甲效價(jià)不低于16400，2/3家兔血清之凝集價(jià)達(dá)上述要求即為合格。1.3菌種保存菌種應(yīng)凍干保存，凍干菌種保存于28。菌種凍干后應(yīng)抽取樣品按1.2.2項(xiàng)進(jìn)行檢查，合格后可使用3年。以后每次生產(chǎn)前必須檢查全部特性一次，合格者可繼續(xù)使用2年。菌苗制造制造傷寒、副傷寒甲二聯(lián)菌苗所用的每一菌種選用2個(gè)菌

5、株。2.1菌種凍干菌種啟開(kāi)后檢查菌形、純度及進(jìn)行玻片凝集試驗(yàn)（傷寒菌加用Vi血清），合格后即可使用。每啟開(kāi)1支凍干菌種用于生產(chǎn)不超過(guò)6代。2.2制造用培養(yǎng)基用pH7.27.4的馬丁瓊脂或其他適宜的培養(yǎng)基。2.3原液制造2.3.1接種采用涂種，接種后置37培育1824小時(shí)。2.3.2采集采集前應(yīng)逐瓶檢查，有雜菌者廢棄。刮取菌苔混懸于磷酸鹽緩沖生理鹽水中。2.3.3純菌試驗(yàn)原液采集后應(yīng)逐瓶取樣接種瓊脂斜面1管，于37培育2天，24261天，有雜菌生長(zhǎng)應(yīng)廢棄。2.3.4殺菌原液用甲醛溶液殺菌，各種原液加入甲醛溶液濃度如下：傷寒菌原液不超過(guò)1.1%±0.1%（ml/ml）。副傷寒甲菌原液不超

6、過(guò)1.4%±0.1%(ml/ml)。加殺菌劑后的原液應(yīng)放在37，不得超過(guò)7天，以后保存于28。2.3.5無(wú)菌試驗(yàn)純菌試驗(yàn)合格的原液，應(yīng)取樣接種不含瓊脂的硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基及普通瓊脂斜面各1管，放37培育5天，有本菌生長(zhǎng)，可加倍量復(fù)試一次；有雜菌生長(zhǎng)應(yīng)廢棄。2.3.6原液合并無(wú)菌試驗(yàn)合格之原液，安不同菌株或不同制造日期分別過(guò)濾合并，合并后應(yīng)加不超過(guò)0.5%(g/ml)的苯酚或其他適宜之防腐劑，保存于28。2.4原液檢定2.4.1鏡檢菌形應(yīng)正常，無(wú)雜菌。2.4.2凝集試驗(yàn)原液與相應(yīng)血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)，其凝集效價(jià)不應(yīng)低于血清原效價(jià)之半。2.4.3無(wú)菌試驗(yàn)按生物制品無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。2.4.4濃

7、度測(cè)定應(yīng)按中國(guó)細(xì)菌濁度標(biāo)準(zhǔn)與質(zhì)量檢定部門(mén)會(huì)同測(cè)定濃度。2.4.5免疫力試驗(yàn)原液于無(wú)菌試驗(yàn)合格后與質(zhì)量檢定部門(mén)會(huì)同進(jìn)行。抽驗(yàn)批數(shù)應(yīng)不少于生產(chǎn)批數(shù)的1/5。方法同1.2.5項(xiàng)，唯所用小白鼠每組至少15只。對(duì)傷寒或副傷寒甲毒菌之攻擊，均應(yīng)保護(hù)60%小白鼠活存為合格。2.5原液保存原液應(yīng)保存于28。原液自采集之日起至用于菌苗稀釋時(shí)不得少于4個(gè)月，保存效期自采集之日起為2年半。2.6菌苗稀釋2.6.1原液配合稀釋前應(yīng)先將不同菌種所制之原液按比例配合。每一種菌所加的菌數(shù)與應(yīng)加菌數(shù)在總菌數(shù)不變的原則下，允許兩種菌之間在20%的范圍內(nèi)互有增減；同一種菌不同菌株之原液按等量混合，但每個(gè)菌株所加的菌數(shù)與應(yīng)加菌數(shù)在

8、總菌數(shù)不變的原則下，允許兩個(gè)菌株之間在40%范圍內(nèi)互有增減。2.6.2菌苗稀釋稀釋菌苗用含0.25%0.5%（g/ml）苯酚或其他適宜的防腐劑之磷酸鹽緩沖生理鹽水。2.6.3菌苗濃度菌苗每ml含傷寒菌1.5億，副傷寒甲菌1.5億。2.7菌苗分批同組配合的原液用同批稀釋液在同一日稀釋的各瓶菌苗為1批。大罐稀釋時(shí)應(yīng)按大罐分批，并按分裝機(jī)分為亞批。2.8檢定稀釋后每批應(yīng)逐瓶抽樣進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)及測(cè)定防腐劑含量（大罐稀釋時(shí)除外）。2.9分裝分裝后應(yīng)每亞批抽樣送質(zhì)量檢定部門(mén)進(jìn)行成品檢定。成品檢定3.1物理化學(xué)檢查菌苗應(yīng)為乳白色懸液，pH值為6.87.4。不應(yīng)有搖不散的菌塊或異物。苯酚含量應(yīng)為0.25%0.5

9、%（g/ml）。3.2菌形及純度染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陰性桿菌。至少觀察10個(gè)視野，平均每個(gè)視野內(nèi)不得有10個(gè)以上非典型菌（線狀、粗大或染色可疑桿菌），并不應(yīng)有雜菌。3.3無(wú)菌試驗(yàn)按生物制品無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。3.4安全試驗(yàn)3.4.1毒性試驗(yàn)用體重1820g之健康小白鼠5只，每只腹腔注射菌苗0.5ml，或用體重350450g之健康豚鼠2只，腹腔注射菌苗1.5ml，觀察7日，應(yīng)無(wú)死亡。3.4.2防腐劑試驗(yàn)用體重1820g之健康小白鼠2只，每只皮下注射菌苗0.5ml，用苯酚作防腐劑的菌苗注射的小白鼠可發(fā)生戰(zhàn)栗癥狀，但不應(yīng)超過(guò)半小時(shí)，觀察7日不得有局部膿腫或死亡。保存與效期應(yīng)保存于28。自稀釋之日起效期

10、為1年半。如原液保存超過(guò)1年稀釋?zhuān)瑧?yīng)相應(yīng)縮短效期（自原液采集之日起總效期不得超過(guò)2年半）。傷寒、副傷寒甲二聯(lián)菌苗使用說(shuō)明書(shū)本品系用傷寒、副傷寒甲菌分別培育，取菌苔制成懸液經(jīng)甲醛殺菌，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋制成。用于預(yù)防傷寒、副傷寒甲。本品為乳白色的混懸液，含苯酚防腐劑，不應(yīng)含有異物或搖不散的凝塊。接種對(duì)象重點(diǎn)使用于部隊(duì)、港口、鐵路沿線工地的工作人員，下水道、糞便、垃圾處理人員，飲食行業(yè)、醫(yī)務(wù)防疫人員及水上居民，或有本病流行地區(qū)的人群。用法1.于上臂外側(cè)三角肌附著處皮膚經(jīng)消毒后皮下注射。2.初次注射本菌苗者，需注射3次，每次間隔710天。注射劑量如下：16周歲：第1針0.2ml，第2針0.3ml，第3針0.3ml。6周歲以上14周歲：第1針0.3ml，第2針0.5ml，第3針0.5ml。14周歲以上：第1針0.5ml，第2針1.0ml，第3針1.0ml。禁忌1.發(fā)熱，嚴(yán)重心臟病，高血壓，肝